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植物根际芽胞杆菌菌种资源采集及其具有过水解催化活性水解酶基因的克隆 被引量：1
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作者 王倩 李欢 +5 位作者 郑琳 贾文敬 黄建忠 李欣 董思圳 舒正玉 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期76-87,共12页
[背景]芽胞杆菌源枯草杆菌蛋白酶(subtilisin carlsberg)、乙酰基木聚糖酯酶(acetyl xylan esterase)和头孢菌素乙酰水解酶(cephalosporin acetyl hydrolase)具有较高的过水解催化活性,有商业开发价值。[目的]挖掘芽胞杆菌菌株中具有过... [背景]芽胞杆菌源枯草杆菌蛋白酶(subtilisin carlsberg)、乙酰基木聚糖酯酶(acetyl xylan esterase)和头孢菌素乙酰水解酶(cephalosporin acetyl hydrolase)具有较高的过水解催化活性,有商业开发价值。[目的]挖掘芽胞杆菌菌株中具有过水解酶催化活性的水解酶蛋白基因,为后续制备过水解酶及酶法合成过氧乙酸奠定基础。[方法]利用定向筛选培养基,从植物根际及纳豆产品中筛选产蛋白酶芽胞杆菌候选菌株,并利用RFLP及16S rRNA基因对其进行鉴定。从蛋白酶高产芽胞杆菌菌株中克隆枯草杆菌蛋白酶、乙酰木聚糖醋酶和头孢菌素乙酰水解酶的全长基因。[结果]从植物根际土壤及纳豆产品中共分离到85个候选菌株,RFLP及16S rRNA基因鉴定结果表明候选菌株均为芽胞杆菌,分别属于Bacillus subtilis、Bacillus cereus、Bacillus pumilus和Bacillus megaterium四个类群。从B.subtilis NSYT-3克隆的枯草杆菌蛋白酶基因编码的多肽链全长381个氨基酸,从B.pumilus OSLJ-3克隆得到的乙酰基木聚糖酯酶基因编码的多肽链全长320个氨基酸,从B.subtilis NSYT-3克隆的头孢菌素乙酰水解酶基因编码的多肽链全长318个氨基酸,3D结构模拟表明这3个酶蛋白均具有α/β水解酶折叠家族蛋白结构特点。[结论]芽胞杆菌源具过水解催化活性水解酶基因的克隆,为后续开发酶法合成过氧乙酸工艺奠定了基础。 展开更多
关键词 根际细菌 芽胞杆菌 过水解催化活性 枯草杆菌蛋白酶 乙酰木聚糖酯酶 头孢菌素乙酰水解酶
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头孢菌素C去乙酰基酶产生菌的筛选、酶学性质及产酶条件优化
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作者 韩云宾 周文瑜 +5 位作者 胡媛 魏东芝 沈亚领 方善综 金雄熊 叶凤起 《工业微生物》 CAS CSCD 2011年第2期1-6,共6页
以7-ACA为底物从土壤中筛选得到一株产头孢菌素C乙酰水解酶的微生物,初步鉴定为红酵母。酶学性质研究表明:静息细胞CAH的最适pH为7.0,最适反应温度为25℃;在温度低于40℃保存静息细胞时CAH的稳定性很好,在pH 5.5～8.0的范围内保存静息... 以7-ACA为底物从土壤中筛选得到一株产头孢菌素C乙酰水解酶的微生物,初步鉴定为红酵母。酶学性质研究表明:静息细胞CAH的最适pH为7.0,最适反应温度为25℃;在温度低于40℃保存静息细胞时CAH的稳定性很好,在pH 5.5～8.0的范围内保存静息细胞时CAH比较稳定。产酶条件优化结果为:葡萄糖30g/L,国产酵母粉20 g/L,KH_2PO_4 5g/L,培养基的最优初始pH为7.0。 展开更多
关键词 7-氨基头孢烷酸 去乙酰基-7-氨基头孢烷酸 头孢菌素C乙酰水解酶
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