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加味不忘散对AD模型大鼠海马区NLRP3炎症通路中相关因子表达的影响 被引量：7
1
作者 何玲玲 李晓琼 +2 位作者 刘晓蕾 侯苗苗 李新毅 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期35-41,共7页
目的:通过观察加味不忘散对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆能力及海马区NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)炎症通路中相关分子NLRP3,天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)和白细胞介素-1β(IL^-1β)表达的影响,探讨其作用机制。方法:通过Morris... 目的:通过观察加味不忘散对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆能力及海马区NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)炎症通路中相关分子NLRP3,天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)和白细胞介素-1β(IL^-1β)表达的影响,探讨其作用机制。方法:通过Morris水迷宫筛选出合格SD大鼠52只,随机均分为假手术组,AD模型组,加味不忘散低剂量组(1.5 g·kg^-1),加味不忘散高剂量组(3 g·kg^-1)。采用双侧海马注射β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)5μL(2 g·L^-1)建立AD模型大鼠。造模后分别予低、高剂量加味不忘散灌胃,每日1次,连续4周。灌胃结束后通过Morris水迷宫法检测大鼠学习记忆能力,判断造模是否成功;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠海马组织中NLRP3,Caspase-1,IL^-1βmRNA和蛋白的表达水平。结果:与假手术组比较,AD模型组大鼠学习记忆能力明显下降(P<0.05);与AD模型组比较,加味不忘散低剂量组大鼠学习记忆能力无改善,NLRP3,Caspase-1,IL^-1βmRNA和蛋白的表达水平均无统计学差异,加味不忘散高剂量组大鼠学习记忆能力明显改善,NLRP3,Caspase-1,IL^-1βmRNA和蛋白的表达均明显下降(P<0.05)。结论:高剂量加味不忘散可改善大鼠学习记忆能力,其机制可能与下调NLRP3炎症通路中NLRP3及下游Caspase-1,IL^-1β的表达,抑制海马组织内的炎症反应有关。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 加味不忘散 NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)炎症小体 天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1) 白细胞介素-1β(IL^-1β)
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葶苈大枣泻肺汤通过Caspase-1诱导A549细胞焦亡与凋亡的机制 被引量：11
2
作者 焦建玮 白玉杰 +2 位作者 白玉莲 张艳景 焦平 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期54-61,共8页
目的:探讨葶苈大枣泻肺汤诱导A549细胞焦亡和凋亡的机制。方法:将A549细胞随机分为空白组、葶苈大枣泻肺汤低、中、高质量浓度组(中药低、中、高质量浓度组),中药低、中、高质量浓度组分别以葶苈大枣泻肺汤20、40、60 mg·L^(-1)处... 目的:探讨葶苈大枣泻肺汤诱导A549细胞焦亡和凋亡的机制。方法:将A549细胞随机分为空白组、葶苈大枣泻肺汤低、中、高质量浓度组(中药低、中、高质量浓度组),中药低、中、高质量浓度组分别以葶苈大枣泻肺汤20、40、60 mg·L^(-1)处理,空白组以等体积培养液处理。药物作用48 h后,划痕实验检测细胞迁移能力,流式细胞仪检测细胞凋亡,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)、细胞凋亡抑制因子(Survivin)蛋白及核转录因子-κB(NF-κB)通路蛋白相对表达量,DCFH-DA荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞上清液肿瘤坏死因子-β(TNF-β)和白细胞介素-1β(IL-1β)含量。结果:与空白组比较,中药低、中、高质量浓度组细胞划痕愈合率明显降低,细胞凋亡率明显增加,Survivin蛋白相对表达量明显降低,Caspase-1、GSDMD、NLRP3相对表达量明显增加,ROS和NF-κB磷酸化水平明显上升,细胞上清液TNF-β和IL-1β含量明显增加(P<0.05);与中药低质量浓度组比较,中药中、高质量浓度组细胞划痕愈合率明显降低,细胞凋亡率明显增加,Survivin蛋白相对表达量明显降低,Caspase-1、GSDMD、NLRP3相对表达量明显增加,ROS和NF-κB磷酸化水平明显上升,细胞上清液TNF-β和IL-1β含量明显增加(P<0.05);与中药中质量浓度组比较,中药高质量浓度组细胞划痕愈合率明显降低,细胞凋亡率明显增加,Survivin蛋白相对表达量明显降低,Caspase-1、GSDMD、NLRP3相对表达量明显增加,ROS和NF-κB磷酸化水平明显上升,细胞上清液TNF-β和IL-1β含量明显增加(P<0.05)。结论:葶苈大枣泻肺汤可提高NLRP3蛋白表达,抑制Survivin蛋白表达,促进A549细胞凋亡;同时,可激活NF-κB通路和ROS系统,上调细胞焦亡因子Caspase-1,GSDMD的表达,介导A549细胞焦亡。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 葶苈大枣泻肺汤 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1) 细胞焦亡 细胞凋亡
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寿胎丸通过调控Caspase-1/GSDMD通路发挥干预复发性流产的作用 被引量：9
3
作者 乔宗惠 申思楠 +2 位作者 邓敦 张舒清 雷磊 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期2122-2125,共4页
目的基于蜕膜组织半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1)/消皮素D(gasdermin D,GSDMD)通路,探讨寿胎丸对复发性流产(Recurrent Spontaneous Abortion,RSA)小鼠的安胎机制。方法采用CBA/J×... 目的基于蜕膜组织半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1)/消皮素D(gasdermin D,GSDMD)通路,探讨寿胎丸对复发性流产(Recurrent Spontaneous Abortion,RSA)小鼠的安胎机制。方法采用CBA/J×BALB/c小鼠复制正常妊娠模型,作为空白组;CBA/J×DBA/2小鼠复制RSA模型,随机分为模型组,寿胎丸低、中、高剂量组。实验小鼠分别给予等体积蒸馏水和不同剂量寿胎丸药液(低剂量:3 g·kg^(-1)·d^(-1);中剂量:6 g·kg^(-1)·d^(-1);高剂量:12 g·kg^(-1)·d^(-1))治疗,连续灌胃14天,计算小鼠流产率;苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠蜕膜组织病理形态;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清中Caspase-1、白介素-1β(IL-1β)、白介素-18(IL-18)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠子宫蜕膜组织中Caspase-1、GSDMD、IL-1β蛋白和mRNA表达情况。结果与空白组比较,模型组小鼠流产率明显增加,血清中Caspase-1、IL-1β、IL-18含量和子宫蜕膜组织中Caspase-1、GSDMD、IL-1β蛋白和mRNA表达水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,寿胎丸中、高剂量均可有效降低小鼠流产率;降低小鼠血清中Caspase-1、IL-1β、IL-18含量以及子宫蜕膜组织中Caspase-1、GSDMD、IL-1β蛋白和mRNA表达(P<0.01)。结论寿胎丸可能是通过抑制Caspase-1/GSDMD信号通路介导的子宫蜕膜细胞焦亡而发挥防治流产的作用。 展开更多
关键词 寿胎丸 复发性流产 子宫蜕膜 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1)/消皮素D(GSDMD) 细胞焦亡
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抵挡汤对糖尿病大血管病变小鼠主动脉NLRP3炎症小体活化炎症级联反应的作用机制 被引量：15
4
作者 傅红敏 任秋月 常柏 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1-8,共8页
目的:观察糖尿病大血管病变进程,探讨不同剂量抵挡汤对糖尿病大血管病变的影响。方法:选取4周龄雄性载脂蛋白E敲除(ApoE-/-)小鼠,采用高脂喂养联合链脲佐菌素(STZ)诱导制备糖尿病大血管病变模型,并随机分为模型组、抵挡汤高、中、低剂... 目的:观察糖尿病大血管病变进程,探讨不同剂量抵挡汤对糖尿病大血管病变的影响。方法:选取4周龄雄性载脂蛋白E敲除(ApoE-/-)小鼠,采用高脂喂养联合链脲佐菌素(STZ)诱导制备糖尿病大血管病变模型,并随机分为模型组、抵挡汤高、中、低剂量组和辛伐他汀组;并以同批次同周龄ApoE-/-小鼠仅高脂喂养,作为ApoE-/-组;取相同遗传背景的C57BL/6小鼠常规喂养作为正常组。分别于实验第8,20周取材。观察不同时期各组小鼠主动脉病理特点及斑块面积占比,比较各组小鼠血糖、血脂、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测主动脉NOD样受体3(NLRP3),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)蛋白表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中白细胞介素-1β(IL^(-1)β),白细胞介素-18(IL^(-1)8),白细胞介素-1α(IL^(-1)α),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)炎症因子。结果:与正常组比较,ApoE-/-组、模型组内斑块占比显著增高(P<0.01),与模型组比较,各给药组能明显降低血管内斑块占比(P<0.05);与正常组比较,ApoE-/-组、模型组主动脉NLRP3,Caspase-1蛋白表达水平显著升高(P<0.01),血清中IL^(-1)β,IL^(-1)8,IL^(-1)α,TNF-α显著升高(P<0.01),与模型组比较,各给药组能够明显抑制主动脉NLRP3,Caspase-1蛋白的表达,降低血清中IL^(-1)β,IL^(-1)8,IL^(-1)α,TNF-α等炎症因子水平(P<0.05),且以中剂量组抑制作用最强(P<0.05)。结论:抵挡汤能独立于降糖、降脂之外改善糖尿病大血管病变,这可能与下调NLRP3,Caspase-1蛋白表达,减轻炎症级联反应相关。 展开更多
关键词 糖尿病 大血管病变 NOD样受体(3NLRP3)炎症小体 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-(1caspase-1)
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清肺通络方调控Caspase-1对肺炎支原体诱导人正常肺上皮细胞BEAS-2B焦亡的干预作用 被引量：4
5
作者 姜永红 陈一柳 +1 位作者 樊秋月 刘旭华 《广州中医药大学学报》 CAS 2023年第2期450-460,共11页
【目的】探讨清肺通络方(桑白皮、地骨皮等)对肺炎支原体(MP)诱导人正常肺上皮细胞BEAS-2B由半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)通路介导的细胞焦亡的干预作用。【方法】建立MP感染的BEAS-2B细胞模型,分别给予清肺通络... 【目的】探讨清肺通络方(桑白皮、地骨皮等)对肺炎支原体(MP)诱导人正常肺上皮细胞BEAS-2B由半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)通路介导的细胞焦亡的干预作用。【方法】建立MP感染的BEAS-2B细胞模型,分别给予清肺通络方、Caspase-1抑制剂干预。制备过表达Caspase-1质粒,转染MP感染的BEAS-2B细胞,给予清肺通络方干预。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞增殖活性,Western Blot法检测细胞焦亡关键蛋白pro-Caspase-1、Caspase-1、消皮素D(GSDMD)、消皮素D-N端片段(GSDMD-N)的表达水平,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测细胞因子白细胞介素(IL)-1β和IL-18水平,生化法检测乳酸脱氢酶(LDH)和Na+-K+-ATP酶活性,流式细胞术检测细胞焦亡。【结果】MP感染BEAS-2B细胞增殖活性明显降低,细胞焦亡关键蛋白pro-Caspase-1、Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N表达水平均明显升高,下游细胞因子IL-1β和IL-18水平也显著升高,LDH活性明显升高,Na+-K+-ATP酶活性明显下降,细胞焦亡率显著上升。应用清肺通络方、Caspase-1抑制剂干预MP感染BEAS-2B细胞,及应用清肺通络方干预过表达Caspase-1质粒转染的MP感染BEAS-2B细胞后,细胞增殖活性均升高,细胞焦亡关键蛋白pro-Caspase-1、Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N表达水平降低,下游细胞因子IL-1β和IL-18水平均显著降低,LDH活性明显降低、Na+-K+-ATP酶活性明显上升,细胞焦亡率明显下降。【结论】MP感染BEAS-2B细胞后,激活Caspase-1/GSDMD通路,促进炎症因子释放,使细胞结构受损,最终导致细胞焦亡。清肺通络方可以抑制Caspase-1/GSDMD通路的激活,减轻炎症反应,减轻细胞损伤,抑制细胞焦亡。 展开更多
关键词 清肺通络方 肺炎支原体 细胞焦亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1) BEAS-2B细胞
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四磨汤口服液对肠粘连大鼠盲肠NLRP3炎症复合体相关蛋白表达的影响 被引量：1
6
作者 范雪莲 张露 +3 位作者 黄小亭 刘加伟 张乔轩 林海标 《国际医药卫生导报》 2018年第11期1610-1612,共3页
目的探讨四磨汤口服液对肠粘连模型大鼠盲肠核苷酸结合寡聚化结构域样受体3炎症性复合体（以下简称NLRP3炎症体）表达的影响。方法选择健康雄性sD大鼠45只，随机分配为对照组、模型组和治疗组各15只。模型组和治疗组按Ellis法制备成肠... 目的探讨四磨汤口服液对肠粘连模型大鼠盲肠核苷酸结合寡聚化结构域样受体3炎症性复合体（以下简称NLRP3炎症体）表达的影响。方法选择健康雄性sD大鼠45只，随机分配为对照组、模型组和治疗组各15只。模型组和治疗组按Ellis法制备成肠粘连模型。造模成功后，治疗组给予四磨汤口服液lml／100g灌胃，对照组和模型组给予等量生理盐水灌胃，均干预7天。参照Nair法对肠粘连程度进行评级；采用Western blot法检测盲肠组织NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1（Caspase-1）、白细胞介素1β（IL—1β）的蛋白表达量。结果模型组的粘连程度明显升高，且NLRP3、Caspase-1、IL-1β在盲肠组织均有表达，明显高于对照组（P〈0．05）。与模型组相比，四磨汤口服液治疗组粘连程度明显减轻，差异有统计学意义（P〈0．05）；四磨汤口服液治疗组三个检测项目蛋白表达水平明显降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论肠粘连的形成可能与NLRP3炎症复合体相关蛋白的表达相关。四磨汤口服液减少大鼠盲肠组织NLRP3、Caspase-1、IL-1β表达量，从而降低肠粘连程度。 展开更多
关键词 四磨汤口服液 肠粘连 核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1) 白细胞介素1β(IL-1β)
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大肠杆菌EscI蛋白C-末端多肽诱导巨噬细胞炎性体应答
7
作者 胡茂志 李文华 +4 位作者 严秋香 耿士忠 潘志明 崔桂友 焦新安 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1350-1355,共6页
【目的】分析E.coli的Esc I蛋白C-末端多肽诱导巨噬细胞NLRC4炎性体应答情况。【方法】以含有E.coli的Esc I蛋白C-末端氨基酸序列的多肽为材料,通过体外导入小鼠腹腔巨噬细胞,分析细胞的应答情况。【结果】利用脂多糖预先刺激后,含有Es... 【目的】分析E.coli的Esc I蛋白C-末端多肽诱导巨噬细胞NLRC4炎性体应答情况。【方法】以含有E.coli的Esc I蛋白C-末端氨基酸序列的多肽为材料,通过体外导入小鼠腹腔巨噬细胞,分析细胞的应答情况。【结果】利用脂多糖预先刺激后,含有Esc I蛋白C-末端15个氨基酸的多肽能够明显地激活细胞内NLRC4炎性体应答,细胞内半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1被激活,细胞发生pyroptosis,细胞培养上清中IL-1β和IL-18的含量增加(P<0.05)。通过优化刺激条件发现,以多肽/脂质体为70μg/μL的比例导入细胞并孵育4 h时,IL-1β的分泌量最高。【结论】含有E.coli的Esc I蛋白C-末端15个氨基酸的多肽能够明显地诱导巨噬细胞NLRC4炎性体应答。 展开更多
关键词 巨噬细胞 NLRC4炎性体 EscI蛋白 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1) IL-1β
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NLRP3炎症小体与相关炎症信号通路在肾缺血-再灌注损伤中的作用 被引量：4
8
作者 袁强 申开文 +1 位作者 张瑞波 沈俊 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期177-183,共7页
肾缺血-再灌注损伤(IRI)常见于肾移植术中,是引起急性肾衰竭的重要病理生理过程,严重影响受者预后。炎症反应在IRI的发病机制及病理过程中占据着重要地位。活化的NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体可通过介导多种促炎因子的成熟与释放,调... 肾缺血-再灌注损伤(IRI)常见于肾移植术中,是引起急性肾衰竭的重要病理生理过程,严重影响受者预后。炎症反应在IRI的发病机制及病理过程中占据着重要地位。活化的NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体可通过介导多种促炎因子的成熟与释放,调节机体炎症反应及相关细胞功能。本文对肾IRI中的NLRP3炎症小体及其相关炎症信号通路的作用机制进行了总结,旨在为临床肾IRI的防治提供新思路。 展开更多
关键词 缺血-再灌注损伤(IRI) 肾移植 NOD样受体蛋白3(NLRP3) Toll样受体(TLR) 模式识别受体(PRR) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-1 线粒体DNA(mtDNA)
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磷酸甘油酸变位酶5调控细胞焦亡在肝脏缺血-再灌注损伤中的作用 被引量：1
9
作者 乔兵兵 李世朋 +2 位作者 宋浩森 季敏 赵龙栓 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期412-420,共9页
目的研究磷酸甘油酸变位酶5(PGAM5)调控细胞焦亡在肝脏缺血-再灌注损伤(IRI)中的作用及分子机制。方法建立C57小鼠肝脏IRI模型,随机分别予再灌注6 h(6 h组)与12 h(12 h组),并设立假手术组(Sham组),每组10只。分析IRI对小鼠肝组织及血清... 目的研究磷酸甘油酸变位酶5(PGAM5)调控细胞焦亡在肝脏缺血-再灌注损伤(IRI)中的作用及分子机制。方法建立C57小鼠肝脏IRI模型,随机分别予再灌注6 h(6 h组)与12 h(12 h组),并设立假手术组(Sham组),每组10只。分析IRI对小鼠肝组织及血清学指标的影响;分析小鼠肝脏IRI过程中PGAM5、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1的表达情况。建立肝细胞IRI模型(IRI组),采用Caspase-1抑制剂Z-YVAD-FMK预处理后再建立肝细胞IRI模型(抑制剂组),将未处理的AML12细胞作为对照组,分析抑制Caspase-1活性对细胞焦亡的影响。采用脂质体3000将PGAM5小干扰核糖核酸(siRNA)(siRNA组)和siRNA阴性对照(siRNA-NC)(siRNA-NC组)转染至AML12细胞,再建立肝细胞IRI模型,将未处理的AML12细胞作为对照组,分析PGAM5调控细胞焦亡对肝细胞IRI的影响。结果 6 h组和12 h组小鼠肝组织中部分肝细胞水肿,肝窦区变窄,中央静脉充血,偶见点灶状坏死等,且12 h组较6 h组病变加重。与Sham组小鼠比较,6 h组和12 h组小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平升高,且12 h组高于6 h组;6 h组和12 h组肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β水平升高,12 h组低于6 h组;6 h组和12 h组小鼠肝组织IL-1β信使核糖核酸(mRNA)相对表达量升高,12 h组低于6 h组;6 h组和12 h组肝组织细胞凋亡率升高,12 h组低于6 h组(P<0.01~0.05)。与Sham组小鼠比较,6 h组和12 h组小鼠肝组织PGAM5 mRNA相对表达量和蛋白相对表达量均升高,且12 h组高于6 h组(P<0.01~0.05);6 h组和12 h组肝组织PGAM5、Caspase-1蛋白表达增多。IRI组细胞NOD样受体蛋白3(NLRP3)、裂解Caspase(cleaved Caspase)-1及Gasdermin D(GSDMD)蛋白相对表达量较对照组升高,GSDMD荧光强度较对照组增强;抑制剂组NLRP3、cleaved Caspase-1及GSDMD蛋白相对表达量较IRI组下降,GSDMD荧光强度较IRI组减弱(P<0.01~0.05)。与对照组比较,siRNA-NC组细胞存活率下降,PGAM5、NLRP3 展开更多
关键词 细胞焦亡 肝移植 缺血-再灌注损伤(IRI) 磷酸甘油酸变位酶5(PGAM5) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-1 NOD样受体蛋白3(NLRP3) 肿瘤坏死因子(TNF)-α 白细胞介素(IL)-1β
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