红景天苷抗大鼠肝星状细胞氧应激脂质过氧化作用的研究 被引量：25

1

作者 张奕 刘永刚 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期794-796,共3页

目的:探讨红景天苷(Salidroside,SDS)对大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)氧应激所致脂质过氧化的作用。方法:HSC与FeNTA共同培养产生氧应激。以MTT法测定红景天苷对HSC增殖的效应;LDH法测定红景天苷对HSC的毒性作用;以ELISA... 目的:探讨红景天苷(Salidroside,SDS)对大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)氧应激所致脂质过氧化的作用。方法:HSC与FeNTA共同培养产生氧应激。以MTT法测定红景天苷对HSC增殖的效应;LDH法测定红景天苷对HSC的毒性作用;以ELISA法测定细胞培养液中Ⅰ型胶原的水平;以试剂盒分别测定细胞培养液中MDA、GSH、GSH-PX、SOD水平。结果:HSC与FeNTA共同培养后,细胞内MDA、GSH水平明显升高,GSH-PX、SOD活力明显降低,并能明显促进HSC增殖和提高细胞培养上清中Ⅰ型胶原的水平。红景天苷可以逆转上述所有FeNTA所致效应。结论:红景天苷抗肝纤维化作用可能与其抑制脂质过氧化有关。 展开更多

关键词 红景天苷 肝星状细胞 氧应激 肝纤维化 氧应激脂质过氧化作用 大鼠肝星状细胞 GSH-PX 抗肝纤维化作用 细胞培养液 SOD活力

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改良大鼠肝星状细胞分离及性质鉴定 被引量：11

2

作者 王文兵 戴立里 郑元义 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2005年第3期239-242,共4页

目的探索经济、稳定的肝星状细胞提取和培养方法。方法采用胶原酶改良原位循环灌流、18%Nycodenz密度梯度离心法分离大鼠肝星状细胞,胎牛血清DMEM培养星状细胞;desmin、αSMA和ICAM1免疫细胞化学检测进行星状细胞性质鉴定。结果肝星状... 目的探索经济、稳定的肝星状细胞提取和培养方法。方法采用胶原酶改良原位循环灌流、18%Nycodenz密度梯度离心法分离大鼠肝星状细胞,胎牛血清DMEM培养星状细胞;desmin、αSMA和ICAM1免疫细胞化学检测进行星状细胞性质鉴定。结果肝星状细胞的得率稳定在3.5×107/肝以上,纯度为96%～98%左右,存活率为96%～98%。结论建立了经济、稳定的大鼠肝星状细胞提取和培养方法;传代培养可获得较为稳定的细胞系。 展开更多

关键词 性质鉴定 细胞分离 改良 大鼠肝星状细胞 密度梯度离心法 原位循环灌流 DESMIN ICAM-1 培养方法 细胞提取 Α-SMA 胎牛血清 化学检测 免疫细胞 传代培养 胶原酶 存活率 细胞系 经济

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青蒿琥酯对大鼠肝星状细胞Wnt/β-catenin信号通路相关因子表达的影响 被引量：12

3

作者 张洪 齐倩 +2 位作者 熊远果 张英 彭锐 《中国医院药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期506-510,共5页

目的：探讨青蒿琥酯抑制大鼠肝星状细胞增殖并可促进细胞凋亡的作用机制。方法：大鼠肝星状细胞体外培养,分别用含梯度质量浓度（0,1,5,12.5,25,37.5μg·ml-1）青蒿琥酯的培养基培养24 h。采用Western blot方法检测青蒿琥酯对大鼠... 目的：探讨青蒿琥酯抑制大鼠肝星状细胞增殖并可促进细胞凋亡的作用机制。方法：大鼠肝星状细胞体外培养,分别用含梯度质量浓度（0,1,5,12.5,25,37.5μg·ml-1）青蒿琥酯的培养基培养24 h。采用Western blot方法检测青蒿琥酯对大鼠肝星状细胞HSC-T6内Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的影响;采用实时荧光定量PCR方法检测随着药物浓度的变化在RNA水平上的变化。结果：0-37.5μg·ml-1的青蒿琥酯作用大鼠肝星状细胞24 h后蛋白β-catenin和GSK-3β（ser9）逐渐降低（P〈0.05）并且有一定的剂量相关性,而GSK-3β逐渐升高（P〈0.05）。实时定量PCR结果提示,1-37.5μg·ml-1的青蒿琥酯能抑制β-catenin的表达,且呈剂量相关性。但是GSK-3β在低剂量青蒿琥酯（1-12.5μg·ml-1）的时候并无明显变化（P〉0.05）,在高剂量青蒿琥酯（12.5-37.5μg·ml-1）抑制GSK-3β的表达（P〈0.05）。结论：青蒿琥酯抑制大鼠肝星状细胞与Wnt/β-catenin信号通路相关。 展开更多

关键词 青蒿琥酯 大鼠肝星状细胞 WNT/Β-CATENIN

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槲皮黄酮逆转肝纤维化的分子机制 被引量：10

4

作者 冯莉芳 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2017年第11期1052-1055,共4页

目的:探讨槲皮黄酮逆转肝纤维化的分子机制。方法:体外培养大鼠肝星状细胞(HSC-T6)模型,采用CCK8实验测定不同浓度、不同时间点的槲皮黄酮对HSC-T6细胞增殖的影响,流式细胞术检测槲皮黄酮对经过Annexin V和PI双染色的HSC-T6细胞凋亡率... 目的:探讨槲皮黄酮逆转肝纤维化的分子机制。方法:体外培养大鼠肝星状细胞(HSC-T6)模型,采用CCK8实验测定不同浓度、不同时间点的槲皮黄酮对HSC-T6细胞增殖的影响,流式细胞术检测槲皮黄酮对经过Annexin V和PI双染色的HSC-T6细胞凋亡率的影响;利用Western-blot方法检测槲皮黄酮对HSC-T6细胞内Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达的影响。结果:8~128μg·mL^(-1)的槲皮黄酮在0~72 h范围内对HSC-T6细胞的增殖有明显的抑制作用(P<0.05),呈时间-剂量依赖性;凋亡率检测结果显示其随着剂量、时间升高而增加(P<0.05);0~32μg·mL-1槲皮黄酮作用于HSC-T6细胞24h后β-catenin、p-GSK3β(ser9)逐渐降低(P<0.05),并且表现出一定的剂量相关性,而GSK3β逐渐升高(P<0.05)。结论:槲皮黄酮能够抑制HSC-T6细胞的增殖,并促进其凋亡;并且槲皮黄酮逆转肝纤维化与Wnt/β-catenin信号通路相关。 展开更多

关键词 槲皮黄酮 大鼠肝星状细胞 肝纤维化 WNT/Β-CATENIN

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黄芪抑制大鼠肝星状细胞增殖及胶原分泌的研究 被引量：4

5

作者 马红 王宝恩 +1 位作者 马雪梅 贾继东 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2000年第S1期97-98,共2页

黄芪具有健脾、益气、升阳等功效,有研究表明,黄芪可减轻大鼠肝纤维化程度。本研究拟观察黄芪对体外培养大鼠肝星状细胞(Hepatic stellate cell.HSC)增殖及胶原分泌的影响,以阐明黄芪抗肝纤维化的机理。 1 材料与方法 1.1 黄芪提取液的... 黄芪具有健脾、益气、升阳等功效,有研究表明,黄芪可减轻大鼠肝纤维化程度。本研究拟观察黄芪对体外培养大鼠肝星状细胞(Hepatic stellate cell.HSC)增殖及胶原分泌的影响,以阐明黄芪抗肝纤维化的机理。 1 材料与方法 1.1 黄芪提取液的制备 黄芪提取液由北京友谊医院制剂中心制备。经水煎、浓缩,生药含量1g/ml,经0.45μm滤膜过滤后,4℃贮存备用。 展开更多

关键词 肝星状细胞增殖 胶原分泌 抗肝纤维化 黄芪提取液 大鼠肝星状细胞 北京友谊医院 培养液 体外培养 存活率 滤膜过滤

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荔枝核总黄酮及罗格列酮对大鼠肝星状细胞HSC-T6 PPAR-γ和CTGF表达的影响 被引量：9

6

作者 刘瑞 陈桂泓 +1 位作者 徐伶俐 罗伟生 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第3期344-347,共4页

目的:研究中药荔枝核总黄酮(TFL)对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖的影响并以西药罗格列酮作对照,探讨TFL抗肝纤维化的相关作用机制。方法:MTT法检测TFL对HSC-T6增殖的影响;Real-time PCR检测TFL和罗格列酮对HSC-T6过氧化物酶体增殖物激活... 目的:研究中药荔枝核总黄酮(TFL)对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖的影响并以西药罗格列酮作对照,探讨TFL抗肝纤维化的相关作用机制。方法:MTT法检测TFL对HSC-T6增殖的影响;Real-time PCR检测TFL和罗格列酮对HSC-T6过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)和结缔组织生长因子(CTGF)mRNA表达的影响;Western blot检测TFL和罗格列酮对HSC-T6 CTGF蛋白表达的影响。结果:TFL作用48、72 h可以明显抑制HSC-T6增殖,且在一定范围内随时间延长及药物浓度增加,抑制作用更加明显;TFL和罗格列酮处理72 h后均能上调HSC-T6 PPAR-γ mRNA的表达,下调CTGF mRNA和蛋白的表达,TFL作用随浓度增加逐渐增强。结论:TFL能够抑制HSC-T6增殖从而拮抗肝纤维化,且在一定范围内有剂量时间依赖性,此种抑制作用可能是通过上调PPAR-γ,下调CTGF的表达来实现的。 展开更多

关键词 荔枝核总黄酮 罗格列酮 大鼠肝星状细胞 过氧化物酶体增殖物激活受体γ 结缔组织生长因子

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基于微流控芯片的菟丝子黄酮对大鼠HSC-T6细胞凋亡影响研究 被引量：8

7

作者 包永睿 杨欣欣 +2 位作者 王帅 李天娇 孟宪生 《亚太传统医药》 2019年第7期26-30,共5页

目的:构建一种集成有浓度梯度及微阀结构的微流控芯片,并利用该芯片探讨菟丝子黄酮对大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)凋亡坏死的影响。方法:设计和构建一种集成有浓度梯度及微阀结构的微流控芯片,以大鼠HSC-T6细胞活力、形态等特征检验芯片的... 目的:构建一种集成有浓度梯度及微阀结构的微流控芯片,并利用该芯片探讨菟丝子黄酮对大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)凋亡坏死的影响。方法:设计和构建一种集成有浓度梯度及微阀结构的微流控芯片,以大鼠HSC-T6细胞活力、形态等特征检验芯片的适用性;同时利用芯片探讨8种不同浓度菟丝子黄酮作用HSC-T6细胞24、48和72h后的凋亡坏死情况。结果:细胞在芯片中生长状态良好,增殖活力强,存活率达到96%;菟丝子黄酮具有明显促细胞凋亡坏死作用,其作用细胞24h、48h及72h后,细胞凋亡坏死率与空白组比较有显著差异(P<0.05),且在一定浓度下,随着给药浓度的增加及作用时间的延长,呈现量-效和时-效关系。结论:该芯片重复性及适用性良好,可极大简化药效筛选中操作的复杂性,为中药新药药效评价提供一种新方法。 展开更多

关键词 大鼠肝星状细胞 微流控芯片 菟丝子黄酮 细胞凋亡

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微小RNA-195调控转化生长因子-β/Smad信号通路影响肝纤维化机制研究 被引量：7

8

作者 马玉桃 何阳 +3 位作者 孟佩佩 左珊如 郭韧 刘世坤 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第20期2035-2038,共4页

目的研究微小RNA-195(miR-195)调节转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)活化与Smad7表达的关系。方法体外培养HSC-T6,用5 ng·mL^(-1)TGF-β1作为刺激因子,模拟大鼠肝纤维化模型。将细胞分为6组:对照组、模型组(... 目的研究微小RNA-195(miR-195)调节转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)活化与Smad7表达的关系。方法体外培养HSC-T6,用5 ng·mL^(-1)TGF-β1作为刺激因子,模拟大鼠肝纤维化模型。将细胞分为6组:对照组、模型组(TGF-β1组)、miR-195 mimic实验组、miR-195 mimic NC实验组、miR-195 inhibitor实验组及miR-195 inhibitor NC实验组。分别用5 ng·mL^(-1)TGF-β1处理HSC-T6细胞24,48,72 h后,以实时荧光定量PCR法检测miR-195、Smad7及α-SMA mRNA表达,以免疫印迹法检测Smad7蛋白表达。结果在TGF-β1诱导下,miR-195的表达随时间逐渐升高、α-SMA表达逐步上调而Smad7表达呈降低趋势,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.01;P<0.05)。与模型组比较,miR-195 mimic能促进TGF-β1诱导的HSC-T6活化,升高miR-195、α-SMA mRNA表达而降低Smad7mRNA和蛋白表达,差异均有统计学意义(均P<0.01)。同时,miR-195inhibitor可逆转TGF-β1诱导的HSC-T6活化,降低miR-195、α-SMA mRNA表达而升高Smad7 mRNA和蛋白表达,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论 miR-195促进TGF-β1诱导的HSC-T6活化与Smad7表达相关。 展开更多

关键词 微小RNA-195 SMAD7 转化生长因子-Β1 大鼠肝星状细胞 肝纤维化

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藏药波棱瓜子总木脂素对大鼠肝星状细胞增殖与凋亡的影响 被引量：7

9

作者 刘伟 石林琳 +3 位作者 石晏丞 巴珂 李佳川 顾健 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第14期2912-2917,共6页

目的通过研究藏药波棱瓜子总木脂素(TLHPS)对大鼠肝星状HSC-T6细胞的增殖抑制作用及诱导其凋亡的作用,进一步探讨TLHPS抗肝纤维化的作用机制。方法实验分为对照组,TLHPS 10、20、30、40μg/mL组,阳性药秋水仙碱0.1μg/mL组。用加入各组... 目的通过研究藏药波棱瓜子总木脂素(TLHPS)对大鼠肝星状HSC-T6细胞的增殖抑制作用及诱导其凋亡的作用,进一步探讨TLHPS抗肝纤维化的作用机制。方法实验分为对照组,TLHPS 10、20、30、40μg/mL组,阳性药秋水仙碱0.1μg/mL组。用加入各组药物的培养基分别培养HSC-T6细胞24、48、72 h,采用CCK8法检测各组细胞24、48、72 h的增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期,Western blotting法检测凋亡蛋白Bcl-2、Bax、核转录因子-κB(NF-κB)的表达水平。结果与对照组相比,TLHPS 10、20、30、40μg/mL组对HSC-T6细胞24、48、72 h时的增殖抑制率明显增高(P<0.01),且各组HSC-T6细胞早期凋亡率与晚期凋亡率明显升高(P<0.05,0.01),G0/G1期细胞数明显增多(P<0.01),G2/M期细胞数无明显差异(P>0.05),S期细胞数明显减少(P<0.01)。Western blotting结果显示,与对照组相比,TLHPS10、20、30、40μg/mL组Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05,0.01),TLHPS 40μg/mL组Bax蛋白表达明显升高(P<0.01),TLHPS 20、30、40μg/mL组NF-κB表达明显降低(P<0.01)。结论 TLHPS抗肝纤维化的作用机制可能是通过降低Bcl-2、NF-κB的表达抑制肝星状细胞增殖并诱导其凋亡。 展开更多

关键词 波棱瓜子总木脂素 大鼠肝星状细胞 增殖 凋亡 BCL-2 BAX 核转录因子-ΚB

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草苁蓉乙醇提取物对大鼠肝星状细胞体外增殖与凋亡的影响 被引量：6

10

作者 金春丽 朴熙绪 +3 位作者 李春浩 金永日 金海燕 黄媛 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2012年第15期246-250,共5页

目的:探讨草苁蓉乙醇提取物对体外培养的大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)生长抑制及诱导凋亡的影响。方法:选用大鼠HSC-T6进行体外培养,用MTT法测定0.25,0.5,0.75,1.0 g·L-1草苁蓉乙醇提取物作用12,24,36,48 h后对细胞增殖的抑制作用;应... 目的:探讨草苁蓉乙醇提取物对体外培养的大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)生长抑制及诱导凋亡的影响。方法:选用大鼠HSC-T6进行体外培养,用MTT法测定0.25,0.5,0.75,1.0 g·L-1草苁蓉乙醇提取物作用12,24,36,48 h后对细胞增殖的抑制作用;应用Annexin V与碘化丙啶(PI)双染色荧光显微镜及透射电镜技术观察药物作用后细胞形态学改变;应用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率的变化。结果:①MTT实验表明草苁蓉乙醇提取物能抑制HSC-T6细胞增殖,并显出量效和时效关系。0.75 g·L-1草苁蓉刺激12,24,36,48 h对HSC-T6增殖的抑制率分别为(44.58±1.42)%,(51.56±1.34)%,(63.83±0.99)%,(74.77±3.40)%(P<0.05)。②荧光显微镜及透射电镜观察发现草苁蓉乙醇提取物作用于HSC-T6细胞后呈现出典型的细胞凋亡形态学改变,细胞表面微绒毛消失,细胞体积变小,细胞质浓缩,核染色质边集、细胞核固缩、核碎裂、出泡等。③草苁蓉处理后HSC-T6被阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率上升,且表现出明显量效关系。0.75 g·L-1草苁蓉乙醇提取物改变HSC-T6周期分布,使G0/G1期细胞由(50.33±0.80)%增至(61.46±1.07)%,表现出G0/G1期阻滞;同时诱导HSC-T6凋亡,凋亡率由(1.44±0.43)%增至(14.20±0.98)%(P<0.05)。结论:草苁蓉乙醇提取物可明显抑制HSC-T6细胞增殖,其作用可能与诱导细胞凋亡,并使细胞周期阻滞于G0/G1期有关。 展开更多

关键词 草苁蓉乙醇提取物 大鼠肝星状细胞 细胞增殖 细胞凋亡 肝纤维化

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荔枝核总黄酮对大鼠肝星状细胞的增殖抑制作用及对蛋白TGF-β_1和а-SMA表达的影响 被引量：6

11

作者 孙旭锐 覃浩 +2 位作者 靳雅玲 欧士钰 罗伟生 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期2502-2504,共3页

目的研究荔枝核总黄酮(TFL)对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)的增殖抑制作用及其作用机制。方法 MTT法测定TFL对HSC-T6的增殖抑制;吖啶橙染色观察细胞凋亡;流式细胞术检测细胞周期。Western Blot检测细胞中TGF-β1和а-SMA蛋白表达。结果 MTT... 目的研究荔枝核总黄酮(TFL)对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)的增殖抑制作用及其作用机制。方法 MTT法测定TFL对HSC-T6的增殖抑制;吖啶橙染色观察细胞凋亡;流式细胞术检测细胞周期。Western Blot检测细胞中TGF-β1和а-SMA蛋白表达。结果 MTT结果显示,TFL对HSC-T6具有增殖抑制活性(P<0.05),其半数抑制浓度(IC50)为101.98 mg/ml;吖啶橙染色显示,药物组细胞中出现核浓缩、核碎裂及致密浓染亮绿色凋亡小体。流式细胞仪检测结果显示,对照组细胞G1期细胞比例为(47.68±2.92)%,G2期为(19.58±2.93)%,S期为(32.75±2.09)%;TFL药物处理组细胞G1期细胞数量增加,而G2期细胞显著减少,与对照组比较,P<0.05。Western Blot检测结果显示,细胞中TGF-β1和а-SMA蛋白,随药物浓度增加,其表达呈下降趋势,与对照组比较,100 mg/ml及120 mg/ml药物浓度组的TGF-β1和а-SMA蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论 TFL在体外对HSC-T6的增殖具有抑制作用,其作用机制可能通过抑制细胞TGF-β1和а-SMA蛋白表达,达到阻滞细胞增殖周期和诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 荔枝核总黄酮 大鼠肝星状细胞 增殖抑制 TGF-β1a-SMA

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奥曲肽对大鼠肝星状细胞胞质内游离钙及细胞增殖的影响 被引量：3

12

作者 薛秀兰 林菊生 +1 位作者 孙雪梅 周鹤俊 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第16期1974-1977,共4页

目的:探讨在常氧和低氧条件下奥曲肽(octreotide)对大鼠肝星状细胞(HSC)胞内游离钙[Ca2+]i及增殖的调节.方法:采用钙荧光探针(Fura-2/AM)负载培养的大鼠HSC,观察常氧和低氧条件下培养48h后octreotide对HSC[Ca2+]i的调节,同时用四唑盐(M... 目的:探讨在常氧和低氧条件下奥曲肽(octreotide)对大鼠肝星状细胞(HSC)胞内游离钙[Ca2+]i及增殖的调节.方法:采用钙荧光探针(Fura-2/AM)负载培养的大鼠HSC,观察常氧和低氧条件下培养48h后octreotide对HSC[Ca2+]i的调节,同时用四唑盐(MTT)比色法比较不同浓度的octreotide对大鼠HSC增殖的影响.环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)放免分析药盒测cAMP,cGMP浓度.结果:与常氧条件相比,低氧条件下HSC[Ca2+]i显著升高(293.2±12.4nmol/Lvs137.7±7.8nmol/L.P<0.01).500、800和1000μg/Loctreotide在常氧状态下可引起HSCs[Ca2+]i降低(P<0.05),其值分别为92.5±2.5、83.8±2.3和76.6±2.2nmol/L.低氧时500,800和1000gg/Loctreotide可引起HSCs[Ca2+],降低(P<0.01),其值分别为204.3±7.4、174.1±4.8和156.6±6.6nmol/L.常氧对照组A值(0.232±0.016)明显低于低氧对照组(0.533±0.036)(P<0.01);经500、800和1000μg/Loctreotide处理后,无论是常氧还是低氧状态下A值均明显降低(P<0.01).低氧条件下cAMP和cGMP含量不发生改变(P>0.05);无论是常氧还是低氧状态,经过octreotide500μg/L处理后,cAMP和cGMP含量与相应对照组相比增(cAMP:1.69±0.18pmol/mgvs1.10±0.32pmol/mg.1.87±0.30pmol/mgvs1.37±0.25pmol/mg,P<0.05;cGMP:1.08±0.24pmol/mgvs0.86±0.12pmol/mg.1.17±0.53pmol/mgvs0.89±0.20pmol/mg,P<0.05),而Octreotide800,1000μg/L组更高(cAMP:1.99±0.27,2.48±0.37pmol/mgvs1.10±0.32pmol/mg,P<0.01:2.09±0.35.2.24±0.15pmol/mgvs1.37±0.25pmol/mg,P<0.01:cGMp:1.24±0.17,1.31±0.29pmol/mgvs0.86±0.12pmol/mg,P<0.01;1.38±0.29,1.46±0.35pmol/mgvs0.89±0.20pmol/mg,P<0.01).结论:缺氧可通过第二信使系统促进HSC的增生,而Octreotide无论常氧还是低氧条件下剂量依赖性抑制HSCs增殖;cAMP,cGMP参与了对HSC的调节. 展开更多

关键词 奥曲肽 钙 肝 星状细胞 大鼠 CAMP CGMP 大鼠肝星状细胞 胞质内游离钙 细胞增殖

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泡球蚴囊液对大鼠肝脏星状细胞增殖的影响 被引量：5

13

作者 任利 王志鑫 +6 位作者 刘志胜 候立朝 阳丹才让 王海久 周瀛 温浩 樊海宁 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2016年第5期517-520,共4页

目的探讨泡球蚴囊液对大鼠肝脏星状细胞（HSC-T6）增殖的影响及机制。方法采用不同浓度（0.00-0.90 mg/m L）泡球蚴囊液干预HSC-T6细胞24 h后,在倒置显微镜观察HSC-T6细胞形态变化,利用CCK-8法检测并绘制HSC-T6细胞的生长曲线,采用流式... 目的探讨泡球蚴囊液对大鼠肝脏星状细胞（HSC-T6）增殖的影响及机制。方法采用不同浓度（0.00-0.90 mg/m L）泡球蚴囊液干预HSC-T6细胞24 h后,在倒置显微镜观察HSC-T6细胞形态变化,利用CCK-8法检测并绘制HSC-T6细胞的生长曲线,采用流式细胞仪检测并分析HSC-T6细胞在不同浓度的泡球蚴囊液培养条件下细胞周期的改变。结果 1 HSC-T6细胞在不同浓度（0.00-0.90 mg/m L）泡球蚴囊液干预24 h后,部分HSC-T6细胞收缩成长梭形,细胞生出许多细长的伪足。2当泡球蚴囊液浓度〈0.05 mg/m L时,囊液干预对细胞增殖活性无明显影响（P〉0.05）,而当泡球蚴囊液浓度〉0.05 mg/m L时,随着作用浓度的增加,细胞增殖活性显著增强（P〈0.05）。3流式细胞仪检测结果显示,在上述浓度的泡球蚴囊液干预下,处于静止期/DNA合成前期（G0/G1期）的HSC-T6细胞减少（P〈0.05）,处于DNA合成期（S期）的HSC-T6细胞数量增加（P〈0.05）,而处于DNA合成后期、细胞分裂期（G2/M期）的细胞数量显著增多（P〈0.05）。结论泡球蚴囊液对体外培养大鼠肝脏星状细胞增殖具有浓度依赖的促进作用,其具体机制可能涉及细胞周期调控。 展开更多

关键词 泡球蚴囊液 大鼠肝星状细胞 细胞增殖 细胞周期

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白细胞介素-10对实验性肝纤维化大鼠肝星状细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响 被引量：1

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作者 黄嵘峰 郑伟达 +4 位作者 张莉娟 史美娜 陈治新 黄月红 王小众 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2005年第4期221-224,共4页

目的:探讨外源性IL10对实验性肝纤维化大鼠肝星状细胞ColⅠ和ColⅢmRNA表达的影响。方法:60只清洁级SD雄性大鼠,随机分为生理盐水对照组(N组,8只)、CCl4组(C组,28只)和IL10干预组(I组,24只)3组,于造模第7周和第11周分别随机选取一批大鼠... 目的:探讨外源性IL10对实验性肝纤维化大鼠肝星状细胞ColⅠ和ColⅢmRNA表达的影响。方法:60只清洁级SD雄性大鼠,随机分为生理盐水对照组(N组,8只)、CCl4组(C组,28只)和IL10干预组(I组,24只)3组,于造模第7周和第11周分别随机选取一批大鼠,分离肝星状细胞并提取总RNA,以半定量RTPCR方法检测各组ColⅠ和ColⅢmRNA表达的水平。结果:随着肝纤维化的进展,C组ColⅠ和ColⅢmRNA的表达增加并呈增强趋势(与N组比较,P<0.01;与第7周比较,ColⅠP<0.01;ColⅢP<0.05)。造模第7周,Ⅰ组ColⅢmRNA的表达量低于C组(P<0.01);造模第11周,两种胶原Ⅰ组的表达量均进一步下降(与C组比较,P<0.01;与第7周比较,ColⅠP<0.05;ColⅢP<0.01),与正常组差异无显著性意义(P>0.05)。结论:随着肝纤维化进展,肝星状细胞内ColⅠ和ColⅢmRNA的表达增加,外源性IL10能显著降低两者的表达。 展开更多

关键词 肝星状细胞 肝纤维化 大鼠 白细胞介素-10/药效学 Ⅰ、Ⅲ型胶原 逆转录PCR 大鼠肝星状细胞 实验性肝纤维化 白细胞介素-10 胶原表达

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盐霉素抑制大鼠肝星状细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的研究 被引量：5

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作者 罗玉平 黄璐 王正根 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期115-118,共4页

目的研究盐霉素抑制大鼠肝星状细胞胶原蛋白合成的作用机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞(HSC-T6),以酶联免疫吸附(ELISA)法检测HSC-T6上清液中Ⅰ型(ColⅠ)和Ⅲ型(ColⅢ)胶原蛋白的分泌,以实时定量聚合酶链反应(Real time-PCR)和蛋白质... 目的研究盐霉素抑制大鼠肝星状细胞胶原蛋白合成的作用机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞(HSC-T6),以酶联免疫吸附(ELISA)法检测HSC-T6上清液中Ⅰ型(ColⅠ)和Ⅲ型(ColⅢ)胶原蛋白的分泌,以实时定量聚合酶链反应(Real time-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)法检测Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路下游蛋白β-catenin、cyclinD1的表达,以荧光素酶报告基因检测β-catenin/T细胞因子(TCF)的转录活性。结果ELISA结果显示,低、中、高浓度实验组ColⅠ水平分别为6.68±0.57,4.15±0.61,3.02±0.42,ColⅢ水平分别为5.61±0.55,3.19±0.43,2.28±0.36,且呈现浓度依赖性,而对照组ColⅠ和ColⅢ的水平分别为5.42±0.53,4.59±0.49,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Real time-PCR和Western blot检测结果显示,盐霉素能显著下调Wnt/β-catenin通路下游β-catenin、cyclinD1蛋白的表达,且呈浓度依赖性,高浓度盐霉素抑制作用大于秋水仙碱(均P<0.05)。实验组TOPFlash报告基因荧光素酶活性显著下降,且在高浓度实验组下降最为显著(均P<0.05),提示盐霉素能显著下调β-catenin/TCF转录活性,且呈浓度依赖性,而秋水仙碱下调β-catenin/TCF转录活性强度大于高浓度实验组(P<0.05)。结论盐霉素通过下调Wnt/β-catenin通路活性抑制HSC-T6的胶原蛋白合成,从抑制肝纤维化,且抗纤维化效果优于秋水仙碱组。 展开更多

关键词 盐霉素 肝纤维化 大鼠肝星状细胞 Wnt/β-连环蛋白信号通路 胶原蛋白

原文传递

基于计算机辅助药物设计的慈菇消脂方调控HIF-1α信号通路干预HSC-T6细胞活化的作用及机制研究

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作者 任真 尹硕 +3 位作者 王爱娣 王莉 赵秀萍 马燕花 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期3049-3058,共10页

基于网络药理学及计算机辅助药物设计探讨慈菇消脂方(Cigu Xiaozhi Formula)对缺氧微环境下肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)HSC-T6活性的影响,预测并验证其可能作用的靶点及相关信号通路。通过中药系统药理学数据库与分析平台(... 基于网络药理学及计算机辅助药物设计探讨慈菇消脂方(Cigu Xiaozhi Formula)对缺氧微环境下肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)HSC-T6活性的影响,预测并验证其可能作用的靶点及相关信号通路。通过中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)、中医药百科全书在线数据库(Encyclopaedia of Traditional Chinese Medicine,ETCM)及中药分子机制的生物信息学分析工具(Bioinformatics Analysis Tool for Molecular Mechanism of Traditional Chinese Medicine,BATMAN-TCM)数据库检索筛选出慈菇消脂方的潜在活性成分及作用靶点,并借助Gene Cards和Pharm GK数据库检索到的肝纤维化相关靶点进行交集整合,获得慈菇消脂方治疗肝纤维化的潜在作用靶点。在Omic Share平台进行GO(gene ontology)富集分析和KEGG(kyoto encyclopedia of genes and genomes)信号通路富集分析,利用Cytoscape软件构建出“潜在活性成分-关键靶点-通路”网络。利用Auto Dock软件对活性成分和靶点蛋白进行分子对接分析,根据分子动力学模拟和结合自由能计算结果,将degree值排名前5的活性成分进行对接打分,对君药山慈菇活性成分豆甾醇和β-谷甾醇进行分子对接。体外实验应用氯化钴(CoCl_(2))诱导HSC-T6细胞构建缺氧模型,通过CCK-8实验检测细胞活力,确定100μmol·L^(-1)CoCl_(2)作用24 h为构建HSC-T6细胞缺氧模型的最佳作用时间和浓度。细胞划痕愈合实验和免疫荧光检测发现,在缺氧状态下HSC-T6细胞被活化,划痕愈合率显著升高,活化标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)荧光信号显著增强,而6%含药血清能抑制HSC-T6细胞活化,细胞划痕愈合率显著降低,α-SMA荧光信号显著减弱。进一步研究发现,在缺氧状态下HSC-T6细胞中缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、α-SMA和刺猬信号通路(hedgehog,Hh)关键蛋白Pa 展开更多

关键词 计算机辅助药物设计 慈菇消脂方 缺氧诱导因子-1α 大鼠肝星状细胞 刺猬信号通路 肝纤维化

原文传递

葛根素对大鼠肝星状细胞生长及NF-κB p65和TGF-β1表达的影响 被引量：4

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作者 雷凯雄 周清平 +1 位作者 唐武成 杨莉 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2018年第8期1942-1944,共3页

目的探讨葛根素对大鼠肝星状细胞生长及核转录因子κB亚基(NF-κB)p65和转化生长因子(TGF)-β1表达的影响。方法将培养的大鼠肝星状HSC-T6细胞随机分为溶剂组和葛根素组,葛根素组包括0.1、1.0和10.0μmol/L 3个不同浓度组,溶剂组加入二... 目的探讨葛根素对大鼠肝星状细胞生长及核转录因子κB亚基(NF-κB)p65和转化生长因子(TGF)-β1表达的影响。方法将培养的大鼠肝星状HSC-T6细胞随机分为溶剂组和葛根素组,葛根素组包括0.1、1.0和10.0μmol/L 3个不同浓度组,溶剂组加入二甲基亚砜(DMSO)。采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测各组细胞的增殖情况,流式细胞仪检测细胞的周期分布,酶联免疫吸附(ELISA)检测细胞中TGF-β1含量,Western印迹检测细胞NF-κB p65蛋白表达。结果葛根素能够呈浓度-时间效应关系抑制HSC-T6细胞增殖,诱导细胞阻滞于G0/G1期。TGF-β1含量和NF-κB p65蛋白的表达水平均随葛根素浓度的增加而降低。结论葛根素能够抑制HSC-T6细胞生长,其作用机制可能与抑制炎症相关因子TGF-β1和NF-κB信号通路有关。 展开更多

关键词 大鼠肝星状细胞 葛根素 细胞增殖 转化生长因子-Β1 核转录因子-KB P65

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联苯双酯对大鼠肝星状细胞增殖和凋亡及PPARγ表达的影响 被引量：4

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作者 魏丹芸 张洪 +1 位作者 张英 彭锐 《中国药师》 CAS 2016年第3期413-416,共4页

目的:探讨联苯双酯(dimethyl dicarboxylate biphenyl,DDB)对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖和凋亡及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor-gamma,PPARγ)表达的影响。方法:接种HSC-T6细胞于96孔板和6... 目的:探讨联苯双酯(dimethyl dicarboxylate biphenyl,DDB)对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖和凋亡及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor-gamma,PPARγ)表达的影响。方法:接种HSC-T6细胞于96孔板和6孔板中,分别用CCK-8法和流式细胞术测定不同浓度联苯双酯作用于细胞24 h后对细胞增殖和凋亡的影响;实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,Q-PCR)和Western blotting分别检测药物对HSC-T6细胞PPARγm RNA和蛋白的表达的影响。结果:相比于对照组(0μmol·L^(-1)),DDB在实验浓度(8~64μmol·L^(-1))能明显抑制HSC-T6的增殖(P<0.05),促进HSCT6的凋亡(P<0.05);药物处理过的HSC-T6细胞PPARγm RNA及其蛋白表达均有显著提高。结论:DDB可通过上调HSCT6细胞中PPARγ的表达抑制细胞的增殖,促进细胞的凋亡。 展开更多

关键词 联苯双酯 大鼠肝星状细胞 PPARΓ 增殖 凋亡

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黄根提取物对肝星状细胞及相关细胞外基质的影响 被引量：4

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作者 杨增艳 赵湘培 +3 位作者 韦金育 张青青 柏春晖 唐瑾 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期519-521,共3页

目的研究黄根乙酸乙酯部位对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)的增殖抑制作用及其对相关细胞外基质的影响。方法采用MTT法检测黄根乙酸乙酯部位对大鼠肝星状细胞的增殖抑制并运用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞中T... 目的研究黄根乙酸乙酯部位对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)的增殖抑制作用及其对相关细胞外基质的影响。方法采用MTT法检测黄根乙酸乙酯部位对大鼠肝星状细胞的增殖抑制并运用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞中TGF-β1、Co1-I及α-SMA蛋白表达。结果黄根乙酸乙酯部位对肝星状细胞的抑制作用随药物浓度的增长呈梯度增长;可诱导细胞发生早、中、晚期凋亡,各浓度凋亡率分别为2.5%、20.2%、43.9%;细胞中的TGF-β1、Co1-I、α-SMA蛋白,随药物浓度增加,其表达均下降,高剂量组(400 mg/L)与空白组相比具有显著性差异(P<0.05)。结论黄根乙酸乙酯部位在体外能抑制HSC-T6细胞增殖,其机制可能通过抑制细胞中TGF-β1、Co1-I、α-SMA蛋白表达,从而减少细胞外基质的合成与沉积,进而起到抗肝纤维化的作用。 展开更多

关键词 黄根 大鼠肝星状细胞 增殖抑制 Α-SMA TGF-Β1 Co1-I

原文传递

姜黄素对大鼠肝星状细胞中TGF-β调节的NADPH氧化酶4的激活及Smad信号通路的影响 被引量：4

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作者 王雅蕊 李俊 +3 位作者 黄成 李小枫 李晓慧 王欢 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第3期319-323,共5页

目的研究姜黄素潜在的抗纤维化作用,以及转化生长因子β(TGF-β)诱导大鼠肝星状细胞(HSC-T6)激活的机制。方法不同浓度的姜黄素(0、5、10、20、40μmol/L)处理HSC-T6后,用MTT法测定其对HSC-T6增殖作用的影响;用RT-PCR法检测其mRNA水平... 目的研究姜黄素潜在的抗纤维化作用,以及转化生长因子β(TGF-β)诱导大鼠肝星状细胞(HSC-T6)激活的机制。方法不同浓度的姜黄素(0、5、10、20、40μmol/L)处理HSC-T6后,用MTT法测定其对HSC-T6增殖作用的影响;用RT-PCR法检测其mRNA水平的表达;用Westem blot法检测表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、细胞外基质主要成分α1I胶原(Col1α1)、NADPH氧化酶4(NOX 4)、Smad 2、Smad 3及其磷酸化的水平。结果 40μmol/L的姜黄素组刺激HSC-T6 48 h后,其抑制率达到最大,显著低于仅TGF-β1刺激组、5、10及20μmol/L姜黄素组(P<0.05)。姜黄素可显著降低激活型HSC-T6的α-SMA、α1I胶原mRNA与蛋白表达,从而可以降低细胞外基质的沉积;有效降低了NOX 4的蛋白水平,减少了活性氧的水平;还明显降低Smad2、Smad 3的磷酸化程度,呈浓度依赖性。结论姜黄素在体外能够明显地抑制HSC-T6激活,对肝纤维化的发生发展具有一定抑制作用,其机制可能与抑制TGF-β诱导的NOX4的激活及Smad信号通路有关。 展开更多

关键词 姜黄素 大鼠肝星状细胞 转化生长因子Β NADPH氧化酶4 SMAD蛋白

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