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三油酸甘油酯对大鼠主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响 被引量：3
1
作者 王雅琴 秧茂盛 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1384-1390,共7页
目的：研究三油酸甘油酯对大鼠主动脉血管平滑肌细胞（rat aortic smooth muscle cells,RASMC）增殖的影响。方法：采用体外细胞培养、油红染色观察细胞形态的变化;MTT法、流式细胞术检测三油酸甘油酯对RASMC增殖的影响。结果：油红染... 目的：研究三油酸甘油酯对大鼠主动脉血管平滑肌细胞（rat aortic smooth muscle cells,RASMC）增殖的影响。方法：采用体外细胞培养、油红染色观察细胞形态的变化;MTT法、流式细胞术检测三油酸甘油酯对RASMC增殖的影响。结果：油红染色结果显示三油酸甘油酯使RASMC失去原来长梭形外观,胞体变大;三油酸甘油酯浓度越高变化越明显,2 000 mg/dl已无正常细胞存在。三油酸甘油酯对RASMC增殖的影响与作用时间及三油酸甘油酯的浓度密切相关。在24 h≤125 mg/dl,表现为抑制增殖作用;24 h≥250 mg/dl及48～72 h≤500 mg/dl,表现为促进增殖作用,其中24 h,1 000 mg/dl时增殖率最大约为115.9%,与对照组相比差异有统计学意义（t=-3.74,P=0.002）;48～72 h〉500 mg/dl及96～144 h,62.5～2 000 mg/dl表现为抑制增殖作用,其中,48、72 h这2个时间点在2 000 mg/dl的增殖率分别较对照组下降42.7%（t=13.08,P=0.000）和65%（t=129.53,P=0.000）,与对照组相比差异有统计学意义。流式周期结果表明,三油酸甘油酯组G0/G1期的百分比较对照组降低,而S期百分比增高。流式凋亡结果为,除了24 h和144 h外,其余各时间点的凋亡率较对照组降低,其中72 h及120 h的凋亡率分别为1.1%（F=14.39,P=0.019）,0.7%（F=9.96,P=0.034）,与对照组相比差异有统计学意义。另外,细胞增殖与凋亡的变化方向一致。结论：三油酸甘油酯对RASMC增殖的影响是双向的,即在低浓度短时间及高浓度长时间的抑制增殖作用,在中间合适的浓度及时间表现为促进增殖作用;细胞增殖周期试验结果也支持三油酸甘油酯具有一定的促进或抑制大鼠主动脉血管平滑肌细胞增殖作用;高浓度脂质对细胞的直接毒性作用、诱导细胞的增殖或凋亡作用,可能共同参与调控血管平滑肌细胞的数目及功能。 展开更多
关键词 三油酸甘油酯 大鼠主动脉血管平滑肌细胞 增殖
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抑制S-腺苷同型半胱氨酸水解酶活性促进大鼠主动脉血管平滑肌细胞衰老 被引量：1
2
作者 米佳欣 凌文华 《热带医学杂志》 CAS 2022年第6期741-745,894,共6页
目的探究抑制S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)活性,升高S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)水平,对大鼠主动脉血管平滑肌细胞(RAVSMCs)衰老的影响。方法培养RAVSMCs细胞,随机分为Scrambled组、SAHH siRNA组、Control组、腺苷二醛(ADA)组,Scramble... 目的探究抑制S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)活性,升高S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)水平,对大鼠主动脉血管平滑肌细胞(RAVSMCs)衰老的影响。方法培养RAVSMCs细胞,随机分为Scrambled组、SAHH siRNA组、Control组、腺苷二醛(ADA)组,Scrambled组转染对照RNA(5 nmol/L),SAHH siRNA组转染SAHH siRNA(5 nmol/L),Control组在平滑肌细胞培养基内加入二甲基亚砜(DMSO),ADA组在平滑肌细胞培养基内加入SAHH抑制剂ADA(30μmol/L),干预时间24 h。采用质谱检测RAVSMCs内SAH水平,之后进行相关衰老指标的检测,使用衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色方法检测细胞衰老的情况;通过Western blot检测细胞中p16和p21的蛋白表达水平;采用EdU-488方法检测细胞的增殖能力。结果与Scrambled组比较,SAHH siRNA组SAH水平、SA-β-gal阳性率、p16蛋白、p21蛋白表达水平显著升高,细胞增殖能力显著下降,差异均有统计学意义(t=7.604、16.750、2.906、5.735、4.236,P均<0.05);与Control组比较,ADA组SAH水平、SA-β-gal阳性率、p16蛋白、p21蛋白表达水平显著升高,细胞增殖能力显著下降,差异均有统计学意义(t=27.910、34.080、3.359、4.769、16.670,P均<0.05)。结论抑制SAHH活性,升高SAH水平会诱导RAVSMCs衰老。 展开更多
关键词 S-腺苷同型半胱氨酸水解酶 S-腺苷同型半胱氨酸 大鼠主动脉血管平滑肌细胞 衰老
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突变型Notch 3(R90C)蛋白调控自噬诱导VSMC细胞凋亡的分子机制 被引量：1
3
作者 丁雪冰 王雪晶 +2 位作者 马明明 朱清 邵凤民 《中国实用神经疾病杂志》 2013年第1期23-26,共4页
目的探讨Notch 3(R90C)突变蛋白诱导VSMC细胞凋亡机制。方法采用真核细胞转染技术将Flag-Notch 3(WT)及Flag-Notch 3(R90C)质粒转入大鼠主动脉血管平滑肌细胞A10,通过Western blot检测Beclin 1及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ;单丹磺酰尸胺(monodansylcad... 目的探讨Notch 3(R90C)突变蛋白诱导VSMC细胞凋亡机制。方法采用真核细胞转染技术将Flag-Notch 3(WT)及Flag-Notch 3(R90C)质粒转入大鼠主动脉血管平滑肌细胞A10,通过Western blot检测Beclin 1及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ;单丹磺酰尸胺(monodansylcadaverin,MDC)染色检测细胞自噬空泡的变化;PI/Annexin-V-FITC检测细胞凋亡率。结果与转染Flag-Notch 3(WT)组相比,过表达Flag-Notch 3(R90C)下调细胞内源性Beclin 1蛋白的表达,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值降低。与转染Flag-Notch 3(WT)组相比,过表达Flag-Notch 3(R90C)诱导A10细胞自噬空泡聚集减少。与转染Flag-Notch 3(WT)组相比,过表达Flag-Notch 3(R90C)使A10细胞凋亡率增加。结论 Notch 3(R90C)突变蛋白可通过抑制细胞巨自噬水平诱导血管平滑肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 NOTCH 3(R90C) 大鼠主动脉血管平滑肌细胞 自噬 凋亡
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