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FLIP干扰性小RNA促进大肠癌细胞的凋亡 被引量：5
1
作者 孙保存 臧凤琳 +3 位作者 牛瑞芳 魏熙胤 赵秀兰 张诗武 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第13期1519-1523,共5页
目的:研究对应FLIP基因的siRNA片段对大肠癌细胞株HT-29凋亡的影响,明确FLIP在Fas介导的凋亡途径中的作用. 方法:体外培养大肠癌细胞HT-29,通过电穿孔技术将特异性siRNA片段转染入细胞,半定量RT-PCR 法判断干扰前后FLIP mRNA水平的变化... 目的:研究对应FLIP基因的siRNA片段对大肠癌细胞株HT-29凋亡的影响,明确FLIP在Fas介导的凋亡途径中的作用. 方法:体外培养大肠癌细胞HT-29,通过电穿孔技术将特异性siRNA片段转染入细胞,半定量RT-PCR 法判断干扰前后FLIP mRNA水平的变化,分析RNA 干扰的特异性、时效性,并比较对应不同位点的两个siRNA片段对FLIP的干扰效果.经凋亡诱导型抗体激活后,以Annexin V染色法及DNA降解片段检测分析干扰前后HT-29细胞对Fas介导的凋亡敏感性的改变. 结果:特异性siRNA片段能有效降低FLIP mRNA水平,最大干扰效率达65.02%,明显高于作为对照的非相关片段;干扰作用于转染后24 h即可出现,48 h达高峰,72 h稍有降低;对应不同位点的两个siRNA片段对FLIP均可产生干扰作用,彼此间差别不大.在诱导型抗体的刺激下,与未转染细胞相比,转染siRNA 的HT-29细胞中凋亡细胞所占比例明显增加. 结论:特异性siRNA片段可显著降低FLIP基因mRNA 的表达水平,并提高HT-29细胞对Fas介导的凋亡敏感性.以FLIP为靶点的RNA干扰技术可望成为大肠癌基因治疗的新方法. 展开更多
关键词 FLIP 干扰性小RNA 大肠癌细胞株ht-29 ht-29细胞 半定量RT-PCR法 RNA片段 mRNA水平 FAS介导 Annexin DNA降解片段 RNA干扰技术 凋亡敏感性 基因mRNA 干扰作用 电穿孔技术 siRNA 癌基因治疗 特异性 体外培养 凋亡途径 抗体激活
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消瘤汤干预大肠癌细胞凋亡相关基因bcl-2 bax表达的实验研究 被引量：4
2
作者 李康 《中华中医药学刊》 CAS 2007年第5期1014-1016,共3页
目的:探讨消瘤汤促进大肠癌细胞株HT-29凋亡的作用机制。方法:采用MTT法测消瘤汤对大肠癌细胞株HT-29作用的有效剂量,运用流式细胞仪测定消瘤汤对人大肠癌细胞株HT-29凋亡相关基因bcl-2、bax表达的影响。结果:消瘤汤可促进大肠癌细胞株H... 目的:探讨消瘤汤促进大肠癌细胞株HT-29凋亡的作用机制。方法:采用MTT法测消瘤汤对大肠癌细胞株HT-29作用的有效剂量,运用流式细胞仪测定消瘤汤对人大肠癌细胞株HT-29凋亡相关基因bcl-2、bax表达的影响。结果:消瘤汤可促进大肠癌细胞株HT-29凋亡;能抑制凋亡相关基因bcl-2、bax的表达,但对凋亡抑制基因bcl-2的抑制更明显。结论:消瘤汤能促进肿瘤细胞凋亡,其作用机制可能是通过抑制凋亡相关基因表达实现的。 展开更多
关键词 消瘤汤 大肠癌细胞株ht-29 细胞凋亡 基因表达
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bax基因对大肠癌细胞株HT-29作用的实验研究 被引量：2
3
作者 何超 徐向明 +1 位作者 胡晓彤 王琦 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第9期535-538,共4页
目的　探索用双重腺病毒载体介导bax基因对大肠癌进行基因治疗。方法　双重腺病毒载体介导bax表达 ,相差显微镜、MTT比色法、流式细胞仪观察bax基因对HT 2 9的作用 ,WesternBlot检测Bax蛋白的表达。结果　Ad/GT bax能有效地引起HT 2 9... 目的　探索用双重腺病毒载体介导bax基因对大肠癌进行基因治疗。方法　双重腺病毒载体介导bax表达 ,相差显微镜、MTT比色法、流式细胞仪观察bax基因对HT 2 9的作用 ,WesternBlot检测Bax蛋白的表达。结果　Ad/GT bax能有效地引起HT 2 9形态学的改变 ,当加入Ad/PGK GV16后 ,该作用更为显著 ,呈典型的凋亡形态学特征 ,其生长抑制率及凋亡诱导率分别为 5 7.4%和 2 8.2 % ,与Ad/GT bax组的 2 9.2 %和 12 .6 %相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。Ad/GT bax与Ad/PGK GV16同时应用能引起Bax蛋白大量表达 ,而单用Ad/GT bax ,则Bax蛋白表达量较低。结论　bax基因具有有效诱导人大肠癌细胞株HT 2 展开更多
关键词 BAX基因 大肠癌细胞株ht-29 基因治疗 细胞凋亡 实验研究 腺病毒
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干扰RNA对HT-29细胞周期和凋亡活性的影响 被引量：1
4
作者 黄丽华 杜雪 +4 位作者 张孝卫 李铁军 王兵 王丽珍 史世娟 《现代肿瘤医学》 CAS 2010年第3期458-461,共4页
目的:研究干扰RNA质粒载体对肿瘤细胞的作用。方法:制备了针对FGF3基因的干扰RNA质粒载体(pRNATU6.1/NeoGFP-FGF3),并选用大肠癌细胞株HT-29为实验对象,流式细胞仪观察干扰RNA质粒载体对HT-29细胞周期和凋亡活性的影响。结果:细胞周期... 目的:研究干扰RNA质粒载体对肿瘤细胞的作用。方法:制备了针对FGF3基因的干扰RNA质粒载体(pRNATU6.1/NeoGFP-FGF3),并选用大肠癌细胞株HT-29为实验对象,流式细胞仪观察干扰RNA质粒载体对HT-29细胞周期和凋亡活性的影响。结果:细胞周期分析发现转染pRNATU6.1/NeoGFP-FGF3后,HT-29细胞增殖能力减弱;细胞凋亡实验表明干扰RNA质粒载体有明显的促进肿瘤细胞凋亡作用。结论:干扰RNA质粒载体能明显抑制HT-29肿瘤细胞的增殖,并且能显著促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 干扰RNA质粒载体 大肠癌细胞株ht-29 细胞周期 凋亡活性
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RNA干扰HT-29细胞FGF3基因表达对其生长和迁移速度的影响 被引量：1
5
作者 张孝卫 黄丽华 +4 位作者 杜雪 李铁军 王兵 王丽珍 史世娟 《现代肿瘤医学》 CAS 2009年第11期2079-2082,共4页
目的:研究RNA干扰FGF3基因表达对肿瘤细胞HT-29的作用。方法:制备针对FGF3基因的RNA干扰质粒(pRNATU6.1/NeoGFP-FGF3),并选用大肠癌细胞株HT-29为实验对象,损伤刮擦实验检测转染细胞的迁移能力,体内抗肿瘤实验观察体内抗肿瘤效果。结果:... 目的:研究RNA干扰FGF3基因表达对肿瘤细胞HT-29的作用。方法:制备针对FGF3基因的RNA干扰质粒(pRNATU6.1/NeoGFP-FGF3),并选用大肠癌细胞株HT-29为实验对象,损伤刮擦实验检测转染细胞的迁移能力,体内抗肿瘤实验观察体内抗肿瘤效果。结果:pRNATU6.1/NeoGFP-FGF3组的HT-29细胞迁移速度与空白对照组(正常培养的肿瘤细胞)和阴性对照组(空载体pRNATU6.1/NeoGFP)相比明显减缓;pRNATU6.1/NeoGFP-FGF3组小鼠肿瘤明显小于空白对照组和阴性对照组,显示了干扰RNA抑制肿瘤生长的明显效果。结论:构建的RNA干扰质粒(pRNATU6.1/NeoGFP-FGF3)对HT-29肿瘤细胞的迁移和生长有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 干扰RNA质粒载体 大肠癌细胞株ht-29 转染
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肠积宁方促进大肠癌细胞株HT-29凋亡及干预相关基因bcl-2及bax表达的实验研究 被引量：11
6
作者 唐广义 殷东风 《现代肿瘤医学》 CAS 2007年第4期491-493,共3页
目的:探讨肠积宁方对人大肠癌细胞株HT-29凋亡及凋亡相关基因bcl-2、bax表达的影响。方法:采用MTT法测定肠积宁方对人大肠癌细胞株HT-29的增殖抑制作用,运用流式细胞仪测定肠积宁方对大肠癌细胞株HT-29凋亡及凋亡相关基因bcl-2、bax表... 目的:探讨肠积宁方对人大肠癌细胞株HT-29凋亡及凋亡相关基因bcl-2、bax表达的影响。方法:采用MTT法测定肠积宁方对人大肠癌细胞株HT-29的增殖抑制作用,运用流式细胞仪测定肠积宁方对大肠癌细胞株HT-29凋亡及凋亡相关基因bcl-2、bax表达的影响。结果:肠积宁方能促进人大肠癌细胞株HT-29凋亡,并抑制凋亡相关基因bcl-2、bax的表达,尤其对bcl-2的作用更显著。结论:肠积宁方具有抗肿瘤作用,其抗肿瘤作用机制可能是促进细胞凋亡并抑制凋亡相关基因的表达。 展开更多
关键词 肠积宁方 人大肠癌细胞株ht-29 细胞凋亡 基因表达
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