福氏2a志贺氏菌301株基因组水平的缺失基因分析 被引量：4

1

作者 张笑冰 刘红 +8 位作者 杨帆 杨剑 薛颖 董杰 孙立连 杨国威 朱俊萍 楚雍烈 金奇 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第6期587-592,共6页

在完成福氏2a志贺氏菌 301株全基因组序列测定工作的基础上, 以非致病性大肠杆菌K12 MG1655株的全基因组序列为参比对象, 进行比较基因组学分析. 结果显示, 与大肠杆菌基因组相比, 福氏2a志贺氏菌 301株基因组中共有136个长度大于1000 b... 在完成福氏2a志贺氏菌 301株全基因组序列测定工作的基础上, 以非致病性大肠杆菌K12 MG1655株的全基因组序列为参比对象, 进行比较基因组学分析. 结果显示, 与大肠杆菌基因组相比, 福氏2a志贺氏菌 301株基因组中共有136个长度大于1000 bp的片段缺失, 总长为717253 bp. 这些缺失片段中共包含670个可读框(ORF). 通过对ORFs编码产物的功能预测和分析, 发现这些缺失的ORFs主要编码与细菌代谢相关的酶类、结构蛋白、基因转录调控因子以及与细菌遗传物质水平转移相关的元件. 这不仅从全基因组水平揭示了两种具有不同生物学特性和表型的重要肠道细菌的分子差异, 而且为进一步探索其生理活动过程、致病机制以及肠道细菌间的进化等诸方面的问题提供了有价值的线索. 展开更多

关键词 福氏2a志贺氏菌 301株 基因组水平 大肠杆菌k12 比较基因组学 缺失基因 细菌性痢疾

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大肠杆菌中dctA基因敲除及其苹果酸摄取功能鉴定 被引量：4

2

作者 姜巨全 张正来 +1 位作者 徐桐 孟琳 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期45-52,共8页

大肠杆菌(Escherichia coli)K12基因组中,仅dctA基因编码1个在有氧条件下负责摄取四碳-二羧酸的转运蛋白。为鉴定Dct A能否摄取四碳-2-羟基羧酸(如苹果酸),首先以p KD3为模版PCR扩增含有氯霉素抗性dctA基因同源臂,电转入E.coli K12/p K... 大肠杆菌(Escherichia coli)K12基因组中,仅dctA基因编码1个在有氧条件下负责摄取四碳-二羧酸的转运蛋白。为鉴定Dct A能否摄取四碳-2-羟基羧酸(如苹果酸),首先以p KD3为模版PCR扩增含有氯霉素抗性dctA基因同源臂,电转入E.coli K12/p KD46感受态细胞,筛选具有氯霉素抗性的基因敲除突变株E.coliΔdctA/p KD46。通过消除质粒p KD46构建大肠杆菌dctA基因敲除突变株E.coliΔdctA。构建dctA基因表达载体p Easy T3-dctA。通过苹果酸摄取功能互补试验,证实基因敲除菌株E.coliΔdctA丧失摄取苹果酸功能,四碳-二羧酸摄取蛋白Dct A具有摄取苹果酸功能。研究首次报道Dct A具有摄取苹果酸功能,该基因敲除突变株的构建可为其他菌株来源2-HCT转运蛋白的基因克隆与功能分析奠定基础。 展开更多

关键词 大肠杆菌k12 dctA λRed重组 基因敲除 四碳-2-羟基羧酸

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L-赖氨酸脱羧酶的表达、纯化及其酶学性质研究

3

作者 何世霞 谢文鹏 +4 位作者 郭欣欣 吕育财 张文 杨潇 龚大春 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第21期39-44,共6页

戊二胺可由赖氨酸经过赖氨酸脱羧酶脱羧生成,是生物基聚酰胺PA56的关键单体。该研究以pET-28a(+)质粒为载体,将来源于大肠杆菌K12 MG1655的赖氨酸脱羧酶Ldc基因,经过密码子优化后克隆到大肠杆菌BL21(DE3)中,构建重组菌E.coli BL21(DE3)/... 戊二胺可由赖氨酸经过赖氨酸脱羧酶脱羧生成,是生物基聚酰胺PA56的关键单体。该研究以pET-28a(+)质粒为载体,将来源于大肠杆菌K12 MG1655的赖氨酸脱羧酶Ldc基因,经过密码子优化后克隆到大肠杆菌BL21(DE3)中,构建重组菌E.coli BL21(DE3)/pET-28a(+)-Ldc,用Ni-Agarose柱分离纯化出带有His标签的目的蛋白,进行酶学性质研究。重组酶Ldc分子质量在81.2 kDa左右,比酶活力为0.56 U/mg,在pH 5.7~8.0稳定性较好,相对酶活力保持80%上;该酶在20~60℃稳定性很好,T_(50)值为72℃;金属离子对酶活力有一定的影响,在终浓度为5 mmol/L条件下,Cu^(2+)抑制作用最明显,其次是Ni^(2+),而Mg^(2+)和Ca^(2+)有微弱的激活作用;对赖氨酸脱羧酶的动力学参数进行了表征,该酶对赖氨酸具有较好的亲和力和催化效率,其K_(m)为0.011 mol/L,V_(max)值为0.643 mmol/(L·min),k_(cat)值为0.23 s-1。研究结果为赖氨酸脱羧酶Ldc分子改造和工业化生产应用提供了科学依据。 展开更多

关键词 戊二胺 赖氨酸脱羧酶 大肠杆菌k12 MG1655 重组表达 酶学性质

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大肠杆菌外膜蛋白OmpW的克隆及在外膜上高表达 被引量：4

4

作者 邹海杰 吴贤斌 +1 位作者 潘建义 赵辅昆 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期46-50,共5页

目的:利用表达载体pLLP-OmpA实现大肠杆菌K12外膜蛋白OmpW在外膜上高表达。方法:PCR扩增ompW基因,构建重组表达载体pLLP-OmpA-ompW,然后转化大肠杆菌K12,得到在外膜上高表达的菌株。提取该菌外膜蛋白,利用免疫小鼠制备得到的抗血清进行W... 目的:利用表达载体pLLP-OmpA实现大肠杆菌K12外膜蛋白OmpW在外膜上高表达。方法:PCR扩增ompW基因,构建重组表达载体pLLP-OmpA-ompW,然后转化大肠杆菌K12,得到在外膜上高表达的菌株。提取该菌外膜蛋白,利用免疫小鼠制备得到的抗血清进行Western blot分析验证高表达的OmpW是否定位于外膜。结果:成功构建了重组表达载体,经转化后成功筛选到高表达菌株,并经Western blot证实高表达的OmpW定位在外膜上。结论:首次成功获得OmpW在外膜上的高表达,该高表达菌株可为深入研究OmpW在细菌致病机制中的作用及其它功能提供研究基础。 展开更多

关键词 大肠杆菌k12 OmpW 重组载体 抗血清制备

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噬菌体Bp7耐受株K12-R生物学特性分析

5

作者 陈培培 齐心 +3 位作者 王薇 任慧英 刘文华 张灿 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期396-400,共5页

宿主菌E.coli K12的突变株K12-R不能被噬菌体Bp7裂解,为了明确其产生耐受的原因以及突变对其生物学性能的影响,对K12-R进行全基因组测序,分析其产生耐受的原因,浊度测定K12-R的生长曲线和自凝能力,革兰染色检测K12-R生物膜的形成能力,比... 宿主菌E.coli K12的突变株K12-R不能被噬菌体Bp7裂解,为了明确其产生耐受的原因以及突变对其生物学性能的影响,对K12-R进行全基因组测序,分析其产生耐受的原因,浊度测定K12-R的生长曲线和自凝能力,革兰染色检测K12-R生物膜的形成能力,比较K12-R和E.coli K12之间生物学性能的变化。结果表明,突变株K12-R脂多糖合成相关基因hldE发生了突变,突变株K12-R细胞膜通透性增加,生长繁殖能力降低,自凝能力增强,生物膜形成能力增强。E.coli K12的脂多糖合成基因hldE突变能够改变K12-R脂多糖的结构,从而抑制噬菌体Bp7的吸附。这为明确K12-R突变株对噬菌体Bp7的耐受机制研究提供了理论依据。 展开更多

关键词 大肠杆菌k12 k12-R 生物性能 自凝能力 生物膜

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大肠杆菌K12碱性磷酸酶基因的克隆表达 被引量：1

6

作者 南海波 《沈阳师范大学学报（自然科学版）》 CAS 2006年第2期228-230,共3页

大肠杆菌碱性磷酸酶是同二聚体金属酶,被phoA基因编码.采用PCR方法从大肠杆菌K12中扩增到碱性磷酸酶基因(phoA).用限制性内切酶BamHI和HindⅢ将片段插入克隆载体pETBlue-2.该基因被重组、转化后在大肠杆菌中经IPTG诱导表达,而后进行SDS-... 大肠杆菌碱性磷酸酶是同二聚体金属酶,被phoA基因编码.采用PCR方法从大肠杆菌K12中扩增到碱性磷酸酶基因(phoA).用限制性内切酶BamHI和HindⅢ将片段插入克隆载体pETBlue-2.该基因被重组、转化后在大肠杆菌中经IPTG诱导表达,而后进行SDS-PAGE检测及紫外吸收分析测OD410.克隆得到了phoA基因并实现了蛋白表达,碱性磷酸酶的活性提高了18.3倍,为进行组织化学、免疫印迹、突变分析等工作打下了坚实的基础. 展开更多

关键词 碱性磷酸酶 大肠杆菌k12 克隆 表达

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Ⅱ型成簇恒间隔短回文序列及相关蛋白系统（CRISPR／Cas）研究近况

7

作者 王蕾 马丽俐 +3 位作者 孙桂芹 李蒙 策力木格 陈力 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期798-802,共5页

1987年在大肠杆菌K12的碱性磷酸酶（ iap）基因的3′侧翼区首先发现了一类具有短回文特质的DNA重复序列［1］。2002年，这类结构被正式命名为成簇恒间隔短回文重复序列（CRISPR），CRISPR关联蛋白也同时得以命名［2］。2005年，3个研究... 1987年在大肠杆菌K12的碱性磷酸酶（ iap）基因的3′侧翼区首先发现了一类具有短回文特质的DNA重复序列［1］。2002年，这类结构被正式命名为成簇恒间隔短回文重复序列（CRISPR），CRISPR关联蛋白也同时得以命名［2］。2005年，3个研究课题组同时发现间隔序列可能源自于细菌染色体外的其他遗传物质，如噬菌体和接合质粒，并推论CRISPR／Cas系统可以抵制入侵的外源 DNA［3-5］。2007年，来源于侵染噬菌体的新的整合间隔序列得到实验验证；研究同时建立了新获得的间隔序列与细菌抵抗该噬菌体侵袭的直接关联关系，证明了CRISPR／Cas系统是抵抗噬菌体的获得性免疫系统［6］。 Marraffini和Sontheimer［7］证实CRISPR／Cas系统对于接合现象和质粒转化的干扰作用。最近基于CRISPR／Cas作用机制的研究，发现了其在细菌毒力、致病性以及如何逃避宿主免疫系统等方面的相关作用［8］。 展开更多

关键词 Cas系统 回文序列 蛋白系统 成簇 DNA重复序列 大肠杆菌k12 Ⅱ型 细菌染色

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不同条件对大肠杆菌K12转化质粒pKD46效率研究 被引量：6

8

作者 李伟星 张力 +3 位作者 王扬 张君胜 杨晓志 张铎 《湖北农业科学》 北大核心 2010年第8期1803-1806,共4页

研究了不同处理方法、不同生长时期以及热激时间等因素对Escherichia coli K12转化质粒pKD46效率的影响。结果表明,在OD600为0.43时,利用RbCl法制备的新鲜感受态细胞,在42℃热激90s时,对质粒pKD46的转化效率最高,可达到5.4×106。同... 研究了不同处理方法、不同生长时期以及热激时间等因素对Escherichia coli K12转化质粒pKD46效率的影响。结果表明,在OD600为0.43时,利用RbCl法制备的新鲜感受态细胞,在42℃热激90s时,对质粒pKD46的转化效率最高,可达到5.4×106。同时,优化了其他影响转化效率的因素。 展开更多

关键词 大肠杆菌k12菌株 质粒pkD46 RbCl法

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基于数据挖掘探究兰艾双香方诱导大肠杆菌K12菌株铁死亡机制研究

9

作者 张振华 宋健 +8 位作者 孟凯强 胥冰 王斌 沈舒文 张瑞凡 王紫慧 苏辉 王卓 冯天照 《中国医药科学》 2022年第15期71-74,共4页

目的 本研究旨在通过数据挖掘探究兰艾双香方在发挥抑菌作用过程中,常见致病菌—大肠杆菌诱使铁死亡发生的过程,为后续开展常见致病菌发生铁死亡的研究提供基础研究方向和理论基础。方法以兰艾双香方中的各种中药在中国知网、万方数据... 目的 本研究旨在通过数据挖掘探究兰艾双香方在发挥抑菌作用过程中,常见致病菌—大肠杆菌诱使铁死亡发生的过程,为后续开展常见致病菌发生铁死亡的研究提供基础研究方向和理论基础。方法以兰艾双香方中的各种中药在中国知网、万方数据、维普以及中药系统药理学数据库等检索有效成分及对应蛋白。建立中药数据的Excel表格,对有效成分、分子蛋白等进行分析,并分析药物蛋白在大肠杆菌K12菌株不同样本起作用蛋白,最后对在大肠杆菌K12菌株中铁死亡蛋白进行分析。结果 兰艾双香方中共138个活性化学成分,共获得兰艾双香方蛋白265个,其中“MG1655”样品中共有17个作用蛋白,“W3110”样本中共有5个作用蛋白,fhuA是在大肠杆菌K12抑菌过程中诱导大肠杆菌发生铁死亡的关键蛋白。结论 通过数据发掘的方式,发现兰艾双香方中存在的铁色素外膜转运蛋白在大肠杆菌铁死亡进程中发挥作用,为后续开展诱导常见大肠杆菌等常见致病菌发生铁死亡从而发挥抑菌作用提供了基础。 展开更多

关键词 兰艾双香方 铁死亡 大肠杆菌k12菌株 FHUA

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产Shiga毒素噬菌体φ297在大肠杆菌K12染色体上整合位点的定位研究

10

作者 曹奇志 翟静 常维山 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期605-608,共4页

鉴定大肠杆菌O15 7产生Shiga毒素 (Stx)的噬菌体 φ2 97在大肠杆菌K12染色体上的插入位点。采用加接头PCR方法从与噬菌体 933W的整合酶基因int同源的核苷酸开始向未知区域进行步移测序 ,寻找目的基因。将获得的DNA序列与核苷酸数据库进... 鉴定大肠杆菌O15 7产生Shiga毒素 (Stx)的噬菌体 φ2 97在大肠杆菌K12染色体上的插入位点。采用加接头PCR方法从与噬菌体 933W的整合酶基因int同源的核苷酸开始向未知区域进行步移测序 ,寻找目的基因。将获得的DNA序列与核苷酸数据库进行比较 ,确定了细菌性噬菌体 φ2 97的attL、attR和中心序列位于大肠杆菌K12的yecE基因内。噬菌体 φ2 97在宿主细胞E .coliK12染色体上的整合位点是yecE基因。 展开更多

关键词 噬菌体φ297 埃希氏大肠杆菌k12 特殊位点重组 Shiga毒素

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产志贺样毒素的噬菌体φ297在大肠杆菌K514染色体上插入位点的定位研究

11

作者 翟静 张媛英 +3 位作者 王涛 柏素云 孙凌云 蒋汉明 《泰山医学院学报》 CAS 2005年第1期8-12,共5页

目的　鉴定噬菌体φ2 97在大肠杆菌K5 1 4染色体上的插入位点。方法　采用加接头PCR、分子克隆、亚克隆等分子生物学方法从与噬菌体933W的整合酶基因int同源的核苷酸序列开始向未知区域进行步移测序,寻找目的基因。将获得的DNA序列与核... 目的　鉴定噬菌体φ2 97在大肠杆菌K5 1 4染色体上的插入位点。方法　采用加接头PCR、分子克隆、亚克隆等分子生物学方法从与噬菌体933W的整合酶基因int同源的核苷酸序列开始向未知区域进行步移测序,寻找目的基因。将获得的DNA序列与核苷酸数据库进行比较。结果　确定了细菌性噬菌体φ2 97的attL、attR和中心序列位于大肠杆菌K5 1 4的yecE 基因内。结论　噬菌体φ2 97在宿主细胞E coliK5 1 4染色体上的整合位点是yecE基因。 展开更多

关键词 噬菌体φ297 埃希氏大肠杆菌k12 Shiga毒素 附加位点 染色体 插入位点

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志贺氏菌属各亚群菌株基因组“共有骨架”组成的分析 被引量：6

12

作者 刘红 彭俊平 +3 位作者 杨剑 孙立连 陈淑霞 金奇 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第23期2451-2456,共6页

不同原核生物在基因组组成上的差异是其生物学性状差异的基础,然而,进化中亲缘关系较近的菌群,其基因组除了含有群或株特异的基因外,还含有反映它们起源和进化痕迹的“共有骨架”结构,而这些“共有骨架”恰恰是它们基本生存能力和共有... 不同原核生物在基因组组成上的差异是其生物学性状差异的基础,然而,进化中亲缘关系较近的菌群,其基因组除了含有群或株特异的基因外,还含有反映它们起源和进化痕迹的“共有骨架”结构,而这些“共有骨架”恰恰是它们基本生存能力和共有生物学性状的基础.志贺氏菌在起源和进化上与大肠杆菌极为密切,目前倾向于将二者划为同一个种.利用大肠杆菌K～12全基因组及Sf301特异性ORFs的芯片研究了志贺氏菌4个群间的基因组组成.结果显示,分别有16％～22％K-12的ORFs序列没有在志贺氏菌的基因组中被检测出,而志贺氏菌的基因组中包含至少2800个保守的ORFs,组成了其共有的“共有骨架”.进一步分析提示,这些“共有骨架”是维持肠道细菌正常生命生理活动所必需的基本组成此外,只有20％的Sf301特异性ORFs同时存在于其他3个菌株中,揭示了各菌株间基因组的异质性和菌属内的遗传多样性. 展开更多

关键词 志贺氏菌属 大肠杆菌k-12 全基因组微阵列 骨架序列

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甲壳素复合石墨相氮化碳的制备及光催化杀菌性能 被引量：6

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作者 余致汐 贺南南 +1 位作者 陈欢 江芳 《环境化学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期1271-1278,共8页

本文采用水热法制备了甲壳素(Chitin)和石墨相氮化碳(g-C3N4)复合材料Chitin-CN,并采用XRD、SEM、XPS、光电流及阻抗分析等手段对其进行物化特性分析.与g-C3N4相比,Chitin-CN复合材料的光生电子-空穴对的分离效率较高,甲壳素(Chitin)含... 本文采用水热法制备了甲壳素(Chitin)和石墨相氮化碳(g-C3N4)复合材料Chitin-CN,并采用XRD、SEM、XPS、光电流及阻抗分析等手段对其进行物化特性分析.与g-C3N4相比,Chitin-CN复合材料的光生电子-空穴对的分离效率较高,甲壳素(Chitin)含量为0.2 g的Chitin-CN材料在模拟太阳光照射下对大肠杆菌K-12表现出最佳的光催化杀菌效率,在2 h内可完全杀死6.5 lg cfu·mL-1的大肠杆菌K-12.Chitin-CN的破碎结构暴露了更多的活性位点,甲壳素的加入提高了光生载流子的分离率,从而促进了复合材料光催化杀菌的性能.捕获实验表明超氧自由基(·O-2)和空穴(h+)是Chitin-CN作用于大肠杆菌K-12的主要活性物种. 展开更多

关键词 光催化 甲壳素 大肠杆菌k-12 杀菌

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大肠杆菌外膜蛋白改变与四环素耐药的关系 被引量：3

14

作者 杜婷婷 赵刚 刘耀川 《现代畜牧兽医》 2012年第5期74-76,共3页

大肠杆菌K-12外膜蛋白改变对四环素耐药起着重要作用,但其机制尚不明确。本文采用2-DE、Western-blotting方法研究发现,大肠杆菌对四环素耐药时,其FimD、Tsx、OmpW、OmpC、TolC表达量上调,LamB表达量下调。利用转基因技术构建大肠杆菌... 大肠杆菌K-12外膜蛋白改变对四环素耐药起着重要作用,但其机制尚不明确。本文采用2-DE、Western-blotting方法研究发现,大肠杆菌对四环素耐药时,其FimD、Tsx、OmpW、OmpC、TolC表达量上调,LamB表达量下调。利用转基因技术构建大肠杆菌突变株(基因敲除或补救),探究6种外膜蛋白的功能,发现tolC、ompC的表达可以降低MIC,而lamB的表达可以升高MIC。通过基因补救的方法可使基因敲除株恢复正常。基因敲除株通过增加ΔlamB或减少tolC、ompC、ompW、tsx使细菌活性增强,且tolC、ompC减少比ompW和tsx减少更为明显,可在基因修补株上检测到相同结果。因此,LamB、OmpC、TolC三种外膜蛋白在大肠杆菌对四环素耐药中起重要作用。此外,细菌外膜蛋白的改变是否影响细菌的血清型有待进一步研究。 展开更多

关键词 大肠杆菌k-12 蛋白组学 四环素 耐药性

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基于序列柔性参数的大肠杆菌启动子的预测 被引量：1

15

作者 谢亚茹 董志飞 +2 位作者 杨佳赫 周小军 李前忠 《内蒙古大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2018年第6期620-628,共9页

以大肠杆菌K-12的启动子(Promoter)序列作为正集,编码区(Coding区)和基因间汇聚区(CON区)的序列作为两组对照负集建立数据库,分别对实验上确定的165条σ38、94条σ54及600条σ70启动子序列进行二联体位点的保守性分析,得到保守性参数随... 以大肠杆菌K-12的启动子(Promoter)序列作为正集,编码区(Coding区)和基因间汇聚区(CON区)的序列作为两组对照负集建立数据库,分别对实验上确定的165条σ38、94条σ54及600条σ70启动子序列进行二联体位点的保守性分析,得到保守性参数随位点的涨落.用单种柔性结构参数分别和各集的二联体位置关联权重矩阵构成对序列的打分函数,分别对三类数据集进行了检验.研究发现,在自洽检验中,算法对σ38、σ54启动子的预测准确性都达到98%,对σ70启动子的预测准确性也达到了88%.通过绘制ROC曲线,确定了三类数据集的十交叉检验的最佳阈值,该算法在最佳阈值下对σ38、σ70两类启动子的预测准确度(Ac)都达到了80%以上,其中算法对以σ70启动子序列为正集、编码区序列为负集的数据集(记为Prom-Coding数据集)的Ac为88%,而对以σ54启动子序列为正集、基因间汇聚区序列为负集的数据集(记为Prom-CON数据集)的Ac为76%、Prom-Coding数据集的Ac为87%.使用Jackknife法对σ38、σ54两类数据集进行检验,Ac都达到了80%以上. 展开更多

关键词 大肠杆菌k-12 二联体位置关联权重矩阵 保守性参数 柔性参数 ROC曲线

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耐利福定大肠杆菌K—12包膜组分的生化分析

16

作者 李显志 王浴生 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第3期193-198,共6页

通过提取大肠杆菌K-12敏感株及其耐利福定株的包膜,并对其组分作了初步的生化分析。结果表明:十二烷基磺酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳发现耐药株包膜蛋白质中一条分子量为52KD的蛋白带较相应敏感株包膜蛋白有明显减少;超薄膜层聚丙烯酰胺... 通过提取大肠杆菌K-12敏感株及其耐利福定株的包膜,并对其组分作了初步的生化分析。结果表明:十二烷基磺酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳发现耐药株包膜蛋白质中一条分子量为52KD的蛋白带较相应敏感株包膜蛋白有明显减少;超薄膜层聚丙烯酰胺等电聚焦电泳分析提示敏感株与耐药株包膜蛋白的等电点无明显区别,均为4.5～6.7;氨基酸组成分析提示敏感株与耐药株包膜的各种氨基酸及其含量无明显区别;薄层色谱分析提示耐药菌膜脂较敏感菌膜脂多分离出1种组分,前者7种组分,后者仅6种组分;敏感株与耐药株包膜总含量分别为每毫克干重包膜含糖186.7±15.3和150.0±17.0微克。提示大肠杆菌K-12耐利福定后包膜屏障通透性的改变可能系蛋白质和脂类改变的结果。进一步的研究工作仍在继续之中。 展开更多

关键词 利福定 大肠杆菌k-12 抗药性

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定量监控大肠杆菌主代谢目标蛋白质及中间代谢物

17

作者 程永波 邓子新 刘天罡 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1458-1467,共10页

【目的】监控大肠杆菌(Escherichia coli)主代谢通路上蛋白表达状况及中间代谢物变化,为代谢工程改造提供基础性数据及检测方法。【方法】利用Skyline软件靶向设计主代谢(糖酵解途径、磷酸戊糖途径、三羧酸循环、混合酸发酵途径及脂肪... 【目的】监控大肠杆菌(Escherichia coli)主代谢通路上蛋白表达状况及中间代谢物变化,为代谢工程改造提供基础性数据及检测方法。【方法】利用Skyline软件靶向设计主代谢(糖酵解途径、磷酸戊糖途径、三羧酸循环、混合酸发酵途径及脂肪酸合成途径)目标蛋白质label-free(MRM)方法对其相对定量监控;在相同质谱平台(Triple Quad 4500)上利用LC-MS/MS(MRM)方法对目标中间代谢物绝对定量监控。【结果】实验表明不同生长时期内(对数生长期、稳定期及衰亡期)大肠杆菌主代谢蛋白质表达表现出4种不同的变化现象,某一代谢通路上的单一蛋白不能反映该通路的表达状态;磷酸戊糖途径、混合酸发酵途径以及三羧酸循环途径中较多的蛋白质在衰亡期表达量最高,但几种目标中间代谢产物(ATP、ADP、AMP、NAD+、NADH、NADP+、NADPH、Co A、acetyl-Co A)的积累量与对数生长期相比,稳定期及衰亡期都相应减少(除了acetylCo A以外)。【结论】该文中使用的检测方法可以有效地反映大肠杆菌体内代谢的基本状况。 展开更多

关键词 大肠杆菌(k12 MGl655) 液质联用 代谢物 靶向蛋白组

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致病性大肠杆菌O157:H7的基本特性与基因组研究进展 被引量：5

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作者 王冰 修志龙 唐焕文 《自然杂志》 北大核心 2003年第3期164-166,共3页

大肠杆菌 (Escherichiacoli)是条件致病菌 ,在正常情况下一般不致病 .致病性菌株EscherichiacoliO1 5 7:H7能够引起出血性肠炎 ,给人类带来严重危害 .本文简要介绍致病性大肠杆菌O1 5 7:H7的基本特性 ,着重从基因水平上对致病性大肠杆菌... 大肠杆菌 (Escherichiacoli)是条件致病菌 ,在正常情况下一般不致病 .致病性菌株EscherichiacoliO1 5 7:H7能够引起出血性肠炎 ,给人类带来严重危害 .本文简要介绍致病性大肠杆菌O1 5 7:H7的基本特性 ,着重从基因水平上对致病性大肠杆菌EscherichiacoliO1 5 7:H7和非致病性大肠杆菌EscherichiacoliK -1 2的核酸序列比较后得到的有关大肠杆菌O1 5 7:H7致病性和毒力功能方面的结果作了简要的综述 . 展开更多

关键词 致病性大肠杆菌O157:H7 埃希氏大肠杆菌k—12 开放阅读框架 基因组 核酸序列

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