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武汉地区禽大肠杆菌的分离、鉴定与耐药模式探讨 被引量:9
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作者 邵志勇 陈夏冰 +7 位作者 杨文海 何斌 吴利军 聂文豪 金尔光 陈洁 李佳琳 张翠丽 《湖北农业科学》 2019年第22期141-144,共4页
为了解武汉地区禽大肠杆菌(Escherichia coli)对常用抗生素的耐药情况,采集疑似患病病鸡进行大肠杆菌分离与鉴定,并对分离菌株进行药物药敏性分析。结果表明,从武汉地区11个养殖场115份样品中分离到55株大肠杆菌,对青霉素(P)、氨苄西林(... 为了解武汉地区禽大肠杆菌(Escherichia coli)对常用抗生素的耐药情况,采集疑似患病病鸡进行大肠杆菌分离与鉴定,并对分离菌株进行药物药敏性分析。结果表明,从武汉地区11个养殖场115份样品中分离到55株大肠杆菌,对青霉素(P)、氨苄西林(AMP)的耐药率达到100%;对头孢拉定(CED)、链霉素(STR)、氯霉素(C)、氟苯尼考(FFC)、四环素(TET)的耐药率超过80%;对头孢吡肟(FEP)、庆大霉素(GEN)、左氧氟沙星(LEV)最为敏感,耐药率低于10%。55株大肠杆菌有12种耐药谱,多重耐药率高达94.55%,3重耐药菌株占比为50.91%。 展开更多
关键词 大肠杆菌(escherichia coli) 分离鉴定 耐药模式
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仔猪腹泻大肠杆菌分离鉴定及血清型与耐药性分析 被引量:9
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作者 吴利军 周丹娜 +10 位作者 邵志勇 金尔光 姚艳丰 王富国 陈夏冰 何斌 杨文海 刘武 童伟文 夏瑜 陈洁 《湖北农业科学》 2018年第6期94-97,共4页
为明确湖北省一规模化猪场暴发新生仔猪腹泻疫情的病因及病原特点,对采集的仔猪腹泻样品进行了大肠杆菌(Escherichia coli)的分离培养、生化试验、血清型鉴定和耐药性分析。结果表明,从仔猪腹泻样品中分离鉴定出22株大肠杆菌。对分离株... 为明确湖北省一规模化猪场暴发新生仔猪腹泻疫情的病因及病原特点,对采集的仔猪腹泻样品进行了大肠杆菌(Escherichia coli)的分离培养、生化试验、血清型鉴定和耐药性分析。结果表明,从仔猪腹泻样品中分离鉴定出22株大肠杆菌。对分离株进行血清型鉴定,共出现19株定型,分属于O_4、O_(38)、O_(55)、O_(76)、O_(119)5个血清型,其中O_4、O_(55)、O_(119)为优势血清型;药敏测试结果显示,分离菌株均为多重耐药株,最少对6种药物耐受,最高达19种。分离株对20种抗生素的耐药率为13.6%~95.5%。敏感性最高的抗菌药物为磷霉素,敏感率为77.3%;检测获得的猪场仔猪腹泻大肠杆菌的血清型和耐药谱基本数据,为制定有针对性地治疗和防控方案提供了依据。 展开更多
关键词 新生仔猪 腹泻 大肠杆菌(escherichia coli) 血清型鉴定 耐药性
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甲砜霉素可溶性粉对人工感染鸡大肠杆菌病的药效学研究 被引量:8
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作者 孟志敏 牛小飞 +2 位作者 李连缺 米同国 黄占欣 《湖北农业科学》 北大核心 2012年第1期120-122,共3页
用试管肉汤两倍稀释法测得甲砜霉素及氧氟沙星对鸡大肠杆菌(Escherichia coli)的最小抑菌浓度分别为2.0和0.1μg/mL。按25、50和75 mg/L的甲砜霉素及10 mg/kg的氧氟沙星分别给试验性鸡大肠杆菌病患鸡内服,甲砜霉素采用全天自由饮水,氧... 用试管肉汤两倍稀释法测得甲砜霉素及氧氟沙星对鸡大肠杆菌(Escherichia coli)的最小抑菌浓度分别为2.0和0.1μg/mL。按25、50和75 mg/L的甲砜霉素及10 mg/kg的氧氟沙星分别给试验性鸡大肠杆菌病患鸡内服,甲砜霉素采用全天自由饮水,氧氟沙星每天分2次内服,共用药4 d。结果药物对鸡大肠杆菌病的治愈率分别为83.3%、96.7%、100%和93.3%,而感染对照组鸡的死亡率为70.0%。甲砜霉素和氧氟沙星组的增重效果极显著高于感染对照组(P<0.01)。结果表明,甲砜霉素中、高剂量组对鸡大肠杆菌病有较好疗效。用5倍中剂量甲砜霉素作安全试验与健康对照组鸡相比未见不良反应,表明用甲砜霉素可溶性粉给鸡混饮治疗鸡大肠杆菌病安全有效。 展开更多
关键词 大肠杆菌(escherichia coli) 甲砜霉素可溶性粉 疗效
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紫外线和次氯酸钠对Escherichia coli和Poliovirus的消毒作用 被引量:9
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作者 徐丽梅 张崇淼 +2 位作者 王晓昌 吉铮 周进宏 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第5期1928-1935,共8页
本研究选用大肠杆菌(Escherichia coli)和脊髓灰质炎病毒(poliovirus)分别作为典型的细菌和病毒,利用培养和定量PCR的检测技术,对比研究紫外线消毒和次氯酸钠消毒对细菌和病毒的作用特点.结果表明:脊髓灰质炎病毒比大肠杆菌更难被灭活,... 本研究选用大肠杆菌(Escherichia coli)和脊髓灰质炎病毒(poliovirus)分别作为典型的细菌和病毒,利用培养和定量PCR的检测技术,对比研究紫外线消毒和次氯酸钠消毒对细菌和病毒的作用特点.结果表明:脊髓灰质炎病毒比大肠杆菌更难被灭活,达到1-log所需的氯剂量分别为19.2 mg·L^(-1)·min和10.14 mg·L^(-1)·min;所需的紫外线剂量分别为6.37 m J·cm^(-2)和1.81 m J·cm^(-2).定量PCR方法检测大肠杆菌和脊髓灰质炎病毒达到1-log的核酸损伤所需的紫外线剂量和氯剂量要比培养法高出1~2数量级,紫外线消毒对脊髓灰质炎病毒的RNA损伤量明显大于对大肠杆菌的DNA损伤,病毒的单链RNA对紫外线的敏感性更强,该结果与培养法正好相反.达到1-log核酸损伤脊髓灰质炎病毒所需的紫外线剂量为135 m J·cm^(-2),大肠杆菌所需的剂量为270.3 m J·cm^(-2),核酸损伤需要更多的消毒剂量,可能由于消毒过程微生物进入活性但处于非可培养状态(VBNC),以及灭活对微生物其他分子的损伤和微生物死后核酸的持续性. 展开更多
关键词 紫外线 氯消毒 灭活 核酸损伤 定量PCR 大肠杆菌(escherichia coli) 脊髓灰质炎病毒(poliovirus)
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艾草水提取物对大肠杆菌的抑制机理初步研究 被引量:8
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作者 张赟 张涛 +1 位作者 罗婷 唐红枫 《湖北农业科学》 2019年第18期45-48,54,共5页
以革兰氏阴性菌大肠杆菌((Escherichia coli)作为试验菌,通过测定艾草(Artemisia argyi Lévl.et Van.)水提物与大肠杆菌作用前后细菌培养液的电导率、总糖和总蛋白的变化,阐明艾草水提物对大肠杆菌的抑菌机理。结果表明,艾草水提物... 以革兰氏阴性菌大肠杆菌((Escherichia coli)作为试验菌,通过测定艾草(Artemisia argyi Lévl.et Van.)水提物与大肠杆菌作用前后细菌培养液的电导率、总糖和总蛋白的变化,阐明艾草水提物对大肠杆菌的抑菌机理。结果表明,艾草水提物(3g/mL)对大肠杆菌有较强的抑菌作用,其最低抑制浓度(MIC)为浓缩液的32倍稀释物。经艾草水提物处理后,大肠杆菌培养液电导率、总糖浓度、蛋白质浓度均增大,表明艾草水提物可破坏大肠杆菌细胞膜,导致细胞内容物流出,对培养液中相关生理生化指标造成影响。 展开更多
关键词 艾草(Artemisia argyi Lévl.et Van.)水提物 大肠杆菌(escherichia coli) 电导率 抑菌机理
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舍饲条件下藏仔猪腹泻源大肠杆菌毒力和粘附因子基因检测与耐药性分析
6
作者 李龙 谭占坤 +1 位作者 李文凤 刘锁珠 《湖北农业科学》 2024年第6期156-160,共5页
为有效预防和治疗藏仔猪腹泻,采用PCR和Kirby-Bauer纸片扩散法对西藏林芝市舍饲藏仔猪分离的102株腹泻源大肠杆菌(Escherichia coli)毒力基因、粘附因子基因和耐药性进行检测。大肠杆菌毒力基因和菌毛粘附因子基因检测结果表明,检出率... 为有效预防和治疗藏仔猪腹泻,采用PCR和Kirby-Bauer纸片扩散法对西藏林芝市舍饲藏仔猪分离的102株腹泻源大肠杆菌(Escherichia coli)毒力基因、粘附因子基因和耐药性进行检测。大肠杆菌毒力基因和菌毛粘附因子基因检测结果表明,检出率最高的菌毛粘附因子基因是F18(45.10%),其次是F4(15.69%),所有菌株均未检出F41基因;102株菌株中有37株菌株未检出菌毛粘附因子基因。毒力基因中检出率最高的是Stx2e基因(25.49%),其次为STb:EAST-1基因(21.57%)和STa:STb基因(17.65%)。大肠杆菌菌毛粘附因子基因和非菌毛粘附因子基因检测结果表明,在检出AIDA-1基因的菌株中菌毛粘附因子基因(F18、F4)的菌株占比为44.73%,在检出paa基因的菌株中菌毛粘附因子基因(F18、F4)的菌株占比为54.17%;在检出eae基因的菌株中没有检测到F4基因。大肠杆菌对氯霉素、四环素、氨苄西林和链霉素表现出高的耐药性,对3种及以上抗生素产生耐药性的大肠杆菌菌株数占总菌株数的86.27%。 展开更多
关键词 藏仔猪 腹泻源 大肠杆菌(escherichia coli) 毒力基因 耐药性 菌毛粘附因子基因 非菌毛粘附因子基因
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30种植物提取物对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌抑制作用研究 被引量:6
7
作者 谢春香 张忠镇 +1 位作者 彭向永 侯元同 《井冈山大学学报(自然科学版)》 2011年第5期55-59,65,共6页
利用索氏抽提乙醇回流法获得30种植物的乙醇提取物,用滤纸圆片法分析各种植物提取物对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌两种细菌的抑制活性。结果表明,在30种植物提取物中,有14种对大肠杆菌的生长有抑制作用,有21种植物提取物对枯草芽孢杆菌的生... 利用索氏抽提乙醇回流法获得30种植物的乙醇提取物,用滤纸圆片法分析各种植物提取物对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌两种细菌的抑制活性。结果表明,在30种植物提取物中,有14种对大肠杆菌的生长有抑制作用,有21种植物提取物对枯草芽孢杆菌的生长有抑制作用。其中,泽漆提取物对大肠杆菌的抑制作用最强,黄花蒿次之,且提取物抑制作用随浓度的升高而增强;野老鹳草提取物对枯草芽孢杆菌的抑制作用最强,其次是黄花蒿。而鼠麯草、泥胡菜、蒲公英、夏至草等9种植物提取物对两种细菌生长都没有抑制作用。 展开更多
关键词 抑菌作用 植物提取物 大肠杆菌(escherichia coli) 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)
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生鲜蔬菜消毒方法的比较 被引量:5
8
作者 吴思 程妍 +4 位作者 石健春 冯秋实 周颖 王小红 李锦铨 《湖北农业科学》 2016年第7期1795-1799,共5页
利用大肠杆菌(Escherichia coli)构建生鲜蔬菜消毒过程中水污染模型和蔬菜污染模型,使用传统消毒方法单独处理被污染的水或蔬菜,分别比较其灭菌效率,并探究在传统消毒方法的基础上加入噬菌体进行辅助处理,分析其灭菌效率。结果表明,水... 利用大肠杆菌(Escherichia coli)构建生鲜蔬菜消毒过程中水污染模型和蔬菜污染模型,使用传统消毒方法单独处理被污染的水或蔬菜,分别比较其灭菌效率,并探究在传统消毒方法的基础上加入噬菌体进行辅助处理,分析其灭菌效率。结果表明,水污染模型中,0.004%硝酸银的消毒效果最理想,灭菌率超过90%;6种不同杀菌方式对菠菜的杀菌效果最好,其次是生菜、香菜。蔬菜污染模型中,0.10%硝酸银的消毒效果最理想,灭菌率超过85%,对生菜的杀菌效果最好,其次是香菜、菠菜。两种不同的模型中,加入噬菌体M13KO7辅助作用,均可以提高硝酸银、次氯酸钠和紫外照射单独作用的灭菌率。 展开更多
关键词 生鲜蔬菜 消毒 大肠杆菌(escherichia coli) 噬菌体
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肠道免疫的安全靶向载体:大肠杆菌Nissle1917 被引量:5
9
作者 夏芃芃 朱军 朱国强 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期538-544,共7页
长期以来,如何激发高效的肠道黏膜免疫应答来预防肠道感染始终是较为棘手的问题。本文旨在对大肠杆菌(Escherichia coli)Nissle 1917作为肠道黏膜免疫的安全靶向载体,调理胃肠道菌群紊乱、缓解溃疡性结肠炎以及利用益生菌固有特性或优... 长期以来,如何激发高效的肠道黏膜免疫应答来预防肠道感染始终是较为棘手的问题。本文旨在对大肠杆菌(Escherichia coli)Nissle 1917作为肠道黏膜免疫的安全靶向载体,调理胃肠道菌群紊乱、缓解溃疡性结肠炎以及利用益生菌固有特性或优化特性进行治疗的可能性等相关研究进展作一综述。大肠杆菌Nissle1917(EcN)是一株可口服的优良益生菌,也可作为生物载体活苗候选株,兼有较强的肠道局部定殖能力和无免疫原性的特性。该菌株还可以作为载体靶向递呈TAT—凋亡素融合蛋白治疗结肠直肠癌,并在研发靶向递呈防御素治疗溃疡性结肠炎和克罗恩病上具有重要的功能。其基因修饰株能够原位递呈特定的抗原分子,有效激发特异性的黏膜免疫应答。重组大肠杆菌Nissle-HA110-120具有体外表达特异性抗原的能力,但EcN菌体本身不会引起黏膜免疫应答,也不影响对自身抗原的外周免疫耐受。同时,EcN具有很好的安全性,尤其是因炎症导致肠道防御屏障破坏的时候,重组大肠杆菌Nissle-HA110-120在健康或患有急性结肠炎的小鼠体内都没有迁移、克隆扩增和激活特异性CD4+T淋巴细胞的作用。 展开更多
关键词 大肠杆菌(escherichia coli)Nissle1917 靶向分子递呈 T细胞应答 免疫调节
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一新中温碱性蛋白酶基因的克隆及原核表达(英文) 被引量:5
10
作者 李丹 黄非 +2 位作者 夏梦芸 蒋彦 杨毅 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1240-1250,共11页
【目的】从环境中分离筛选产蛋白酶、降解蛋白质的菌株,寻找使用价值较高的碱性蛋白酶。【方法】通过酪蛋白平板法分离筛选产蛋白酶菌株,经生理生化方法及16S rDNA基因序列鉴定菌株;利用简并引物及基因组步移克隆蛋白酶完整开放阅读框;... 【目的】从环境中分离筛选产蛋白酶、降解蛋白质的菌株,寻找使用价值较高的碱性蛋白酶。【方法】通过酪蛋白平板法分离筛选产蛋白酶菌株,经生理生化方法及16S rDNA基因序列鉴定菌株;利用简并引物及基因组步移克隆蛋白酶完整开放阅读框;蛋白酶前体蛋白及成熟肽序列在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中进行重组表达;纯化活性蛋白酶后,利用化学合成多肽底物(succinyl-Ala-Ala-Pro-Phe-p-nitroanilide)检测酶活性质及其催化活力。【结果】分离到的菌株L010被鉴定命名为芽胞杆菌(Bacillus sp.)L010;蛋白酶开放阅读框包含了1149个碱基,编码382个氨基酸,氨基酸序列按其功能分为N端的30个氨基酸残基组成的信号肽,77个氨基酸残基构成的前导肽,C端275个氨基酸残基组成的成熟肽;此蛋白属于丝氨酸蛋白酶家族中枯草杆菌蛋白酶类(Subtilisins)成员,并命名为SprD;SprD的前体蛋白在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中重组表达时,在前导肽辅助下自加工为活性蛋白酶;SprD呈现出较高的催化活力,其反应最适条件为温度70℃,pH 9-10。【结论】SprD在碱性(pH 7.0-10.0)、中高温(25℃-60℃)条件下的稳定性及较高的催化能力使其具有一定的研究和潜在利用价值。 展开更多
关键词 自加工 芽胞杆菌(Bacillus sp.)L010 大肠杆菌(escherichia coli)BL21(DE3) 表达 聚合酶链式反应 蛋白酶SprD
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三种模式微生物基因组中GC含量的比较 被引量:4
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作者 王芳平 王志坚 李永香 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期2215-2220,共6页
GC含量是核酸序列组成的重要特征,其含量可作为反映进化的一种指标。为了探索GC含量作用于基因组的进化压力,本研究研究了大肠杆菌(Escherichia coli)和枯草杆菌(Bacillus subtilis)、真核生物酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)三种... GC含量是核酸序列组成的重要特征,其含量可作为反映进化的一种指标。为了探索GC含量作用于基因组的进化压力,本研究研究了大肠杆菌(Escherichia coli)和枯草杆菌(Bacillus subtilis)、真核生物酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)三种模式微生物基因组编码序列的GC含量,分析了其基因组中蛋白质编码序列的GC含量与编码序列长度的关联,结果发现编码序列的GC含量与序列相对频数有一定的相关性,且编码序列的GC含量随序列相对频数的分布具有一定的规律。根据分布曲线我们推测这种规律应该符合某种分布,并用各种分布函数进行拟合,研究结果发现基因组中编码序列的GC含量随序列频数的分布与高斯分布相符合,且这种分布在真核生物和原核生物间有显著区别。另外,不同长度的编码序列GC含量的分析结果表明,编码序列的GC含量与序列长度有一定的相关性。 展开更多
关键词 大肠杆菌(escherichia coli) 枯草杆菌(Bacillus subtilis) 真核生物酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)GC含量 高斯分布
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臭氧对矿泉水中致病菌的杀灭效果 被引量:4
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作者 张永清 吴清平 +3 位作者 张菊梅 郭伟鹏 彭飞艇 杨秀华 《湖北农业科学》 北大核心 2014年第7期1543-1545,1550,共4页
采用悬液定量杀菌和流动杀菌的方法,对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、粪链球菌(Strep-tococcus faecium)和大肠杆菌(Escherichia coli)的臭氧消毒效果进行了研究。结果表明,悬液定量杀菌试验中,臭氧浓度0.36 mg/L,作... 采用悬液定量杀菌和流动杀菌的方法,对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、粪链球菌(Strep-tococcus faecium)和大肠杆菌(Escherichia coli)的臭氧消毒效果进行了研究。结果表明,悬液定量杀菌试验中,臭氧浓度0.36 mg/L,作用10 min后,铜绿假单胞菌存活率小于1.0%;臭氧浓度0.31 mg/L,作用3 min后,粪链球菌存活率小于0.1%;臭氧浓度在0.45 mg/L及以上,作用10 min后,大肠杆菌存活率在2.0%以下。流动杀菌试验中,臭氧浓度0.20~0.60 mg/L,作用3 min后,大肠杆菌、铜绿假单胞菌和粪链球菌的存活率在0.01%以下,即杀灭率在99.99%以上。 展开更多
关键词 臭氧 消毒 铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) 粪链球菌(Streptococcus faecium) 大肠杆菌(escherichia coli)
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大肠杆菌翻译起始因子IF1的生物信息学分析、表达载体构建及蛋白纯化 被引量:4
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作者 徐本锦 刘玲 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期5606-5616,共11页
为了解大肠杆菌IF1在pET22b载体上的表达特性,优化蛋白表达条件并建立纯化策略,进一步揭示其在细胞生命活动中的功能机制。本研究构建了大肠杆菌infA基因的原核表达载体pET22b-infA,优化表达条件并纯化出IF1蛋白,通过生物信息学手段对IF... 为了解大肠杆菌IF1在pET22b载体上的表达特性,优化蛋白表达条件并建立纯化策略,进一步揭示其在细胞生命活动中的功能机制。本研究构建了大肠杆菌infA基因的原核表达载体pET22b-infA,优化表达条件并纯化出IF1蛋白,通过生物信息学手段对IF1进行了系统分析。结果表明,过表达载体构建正确,IF1主要在裂解后的上清液中表达,镍柱初步纯化后IF1主要分布于50 mmol/L、100 mmol/L和200 mmol/L的咪唑洗脱液中。分子筛二次纯化后发现,IF1蛋白纯度高,无降解。IF1是一个由72个氨基酸组成的碱性蛋白,等电点为9.22,不稳定指数为37.35,半衰期大于10 h,含有一个S1样RNA结合结构域,13个rRNA结合位点,6个可能的磷酸化位点,是一种无跨膜螺旋的亲水性蛋白。多序列比对和进化分析显示,沙门氏菌与大肠杆菌IF1的序列一致性最高,并且亲缘关系最近;其次是假结核耶尔森菌。本研究为细菌翻译起始因子的表达和纯化摸清了条件,为后续的翻译相关功能实验和三维结构分析提供了材料准备,同时有助于揭示IF1的确切功能及翻译起始机制。 展开更多
关键词 大肠杆菌(escherichia coli) IFI 蛋白表达 生物信息学分析
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腺嘌呤对大肠杆菌DH5α及其耐乙酸突变株DA19生长和代谢的影响 被引量:3
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作者 张晓云 张艳军 +2 位作者 李志敏 夏月兰 叶勤 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期430-434,共5页
大肠杆菌DH5α和DA19在碳源限制的基本培养基中进行分批培养和氮源限制的基本培养基中进行连续培养,发现添加腺嘌呤会使DH5α生长改善,乙酸产生减少;对DA19的生长和代谢影响不明显。连续培养细胞的蛋白质组分析结果显示:添加腺嘌呤后DA1... 大肠杆菌DH5α和DA19在碳源限制的基本培养基中进行分批培养和氮源限制的基本培养基中进行连续培养,发现添加腺嘌呤会使DH5α生长改善,乙酸产生减少;对DA19的生长和代谢影响不明显。连续培养细胞的蛋白质组分析结果显示:添加腺嘌呤后DA19 purH表达水平降低,而DH5α purH表达水平不变,表明DH5α嘌呤核苷酸从头合成能力差;DH5α yddS表达上调,gnd表达水平稍有提高,细胞生长改善。 展开更多
关键词 大肠杆菌(escherichia coli) 腺嘌呤 乙酸 双向电泳
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注射白斑综合征病毒对克氏原螯虾酚氧化酶活力的影响 被引量:2
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作者 李贺水 曾勇 栾青 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2017年第2期30-35,共6页
将白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)、大肠杆菌(Escherichia coli)(DH5α)用注射法接种克氏原螯虾(Procambarus clarkii),在0~72 h之间定时检测克氏原螯虾血细胞和肝胰脏中酚氧... 将白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)、大肠杆菌(Escherichia coli)(DH5α)用注射法接种克氏原螯虾(Procambarus clarkii),在0~72 h之间定时检测克氏原螯虾血细胞和肝胰脏中酚氧化酶(Phenoloxidase,PO)活力变化。结果显示:(1)0.1 mg/m L和1 mg/m L胰蛋白酶处理样品后,样品间差异不显著。(2)加胰蛋白酶处理与未加胰蛋白酶相比,供试克氏原螯虾PO活力均升高。(3)未加胰蛋白酶与加胰蛋白酶表现出相似的特征,WSSV和Ah注射组与对照组相比均表现为,12~48 h PO活力显著高于对照组,并且在48 h达到最大值,72 h时基本恢复正常;注射DH5α组与对照组相比没有显著性变化。可见感染WSSV后,克氏原螯虾体内酚氧化酶活力发生了变化,由此推测,PO参与了螯虾体内抵御病毒的免疫反应。 展开更多
关键词 白斑综合征病毒 嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila) 大肠杆菌(escherichia coli) 克氏原螯虾(Procambarus clarkii) 酚氧化酶活力
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重组胶原蛋白多肽在大肠杆菌中的表达优化 被引量:2
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作者 吴铭 郭立泉 陈光 《湖北农业科学》 北大核心 2014年第10期2443-2447,共5页
以Ⅵ型人胶原蛋白A2链基因为模板,PCR扩增得到目的基因CP6,构建了重组胶原蛋白表达载体,然后筛选高效表达的宿主菌,检测重组质粒的不稳定性以及对重组菌培养条件进行优化。结果表明,重组胶原蛋白在Rosetta(DE3)中表达量相对最高,重组质... 以Ⅵ型人胶原蛋白A2链基因为模板,PCR扩增得到目的基因CP6,构建了重组胶原蛋白表达载体,然后筛选高效表达的宿主菌,检测重组质粒的不稳定性以及对重组菌培养条件进行优化。结果表明,重组胶原蛋白在Rosetta(DE3)中表达量相对最高,重组质粒稳定性也较高。较佳的表达条件为接种量4%或5%,37℃、200 r/min培养至OD600 nm为0.7时,加入0.5 mol/L IPTG,培养5 h,并且纯化的重组蛋白与小鼠抗人COL6A2的单克隆抗体有特异性反应。 展开更多
关键词 胶原蛋白多肽 大肠杆菌(escherichia coli) 表达 优化
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饲料沸石抗菌剂体外抑菌活性的测定 被引量:2
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作者 单展展 王秀丽 +3 位作者 张小虎 陈南春 杨正坤 刘芳 《湖北农业科学》 北大核心 2012年第15期3240-3242,共3页
以广西产天然红辉沸石为原料制备A型分子筛,采用离子交换法制备二甲酸钾沸石抗菌剂。用X射线衍射仪(XRD)和扫描电镜对其进行表征分析,结果表明,A型沸石分子筛成功接枝吸附了二甲酸钾。采用菌落计数法对A型沸石抗菌剂的抑菌性能进行检测... 以广西产天然红辉沸石为原料制备A型分子筛,采用离子交换法制备二甲酸钾沸石抗菌剂。用X射线衍射仪(XRD)和扫描电镜对其进行表征分析,结果表明,A型沸石分子筛成功接枝吸附了二甲酸钾。采用菌落计数法对A型沸石抗菌剂的抑菌性能进行检测,表明最佳大肠杆菌(Escherichia coli)菌落计数吸光度值的范围为0.500~0.700,沸石抗菌剂对大肠杆菌的抑菌率达89.5%。 展开更多
关键词 沸石抗菌剂 菌落计数法 大肠杆菌(escherichia coli)
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嗜碱单胞菌的新型羧基转移酶α亚基基因Aa-accA及其抗盐碱性能 被引量:2
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作者 羡明杰 翟磊 +3 位作者 仲乃琴 马祎玮 薛燕芬 马延和 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期809-816,共8页
【目的】探讨解淀粉嗜碱单胞菌(Alkalimonas amylolytica)N10来源的羧基转移酶α亚基(Acetyl-coenzyme A carboxylase subunit alpha,AccA)基因Aa-accA对细菌及植物细胞耐盐碱性的作用。【方法】通过PCR方法从嗜碱菌N10基因组中扩增基因... 【目的】探讨解淀粉嗜碱单胞菌(Alkalimonas amylolytica)N10来源的羧基转移酶α亚基(Acetyl-coenzyme A carboxylase subunit alpha,AccA)基因Aa-accA对细菌及植物细胞耐盐碱性的作用。【方法】通过PCR方法从嗜碱菌N10基因组中扩增基因Aa-accA,并在大肠杆菌(Escherichia coli)K12中表达,通过测定工程菌及对照菌在不同盐浓度[0%,2%,4%,6%(W/V)NaCl]及不同碱性pH(8.0,8.5,9.0,9.5)的LB中生长12 h后的OD600值,以及二者在分别含6%(W/V)NaCl及pH 9的LB中的生长曲线,评价Aa-accA对大肠杆菌耐盐碱性的影响。同时以pPZP111为载体,构建了植物细胞重组表达载体,通过农杆菌介导方法将该基因转入烟草BY-2悬浮细胞表达,利用FDA染色方法测定经盐碱溶液处理后残存的活细胞数量评价该基因对植物细胞耐盐碱性的影响。【结果】PCR扩增得到基因Aa-accA,其ORF含957 bp,编码318个氨基酸的多肽,BLAST比对显示该基因为羧基转移酶α亚基(AccA)家族中的成员,其氨基酸序列与E.coli的AccA具有76%同源性;含有Aa-accA的E.coli K12相较于对照组在不同NaCl浓度及不同碱性pH的LB中表现出了明显的生长优势,特别是在6%(W/V)NaCl及pH 9的LB中培养12 h后,终OD600分别是对照菌的2.6倍和3.5倍;缺失体实验结果显示基因缺失的突变体E.coli K12ΔaccA在6%(W/V)NaCl及pH 9的LB中不能正常生长,而含有Aa-accA基因的重组质粒使得E.coli K12ΔaccA在同样条件下OD600值达到0.5和0.2;转入此基因的烟草BY-2细胞,经盐碱溶液处理后,其存活细胞比例高于野生型。【结论】本研究首次发现了Aa-accA基因与盐碱性的相关性,可提高大肠杆菌及烟草BY-2细胞的耐盐碱能力。 展开更多
关键词 嗜碱菌 Aa-accA基因 大肠杆菌(escherichia coli)K12 烟草BY-2细胞 耐盐碱
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鹅源大肠杆菌的分离鉴定及致病性研究 被引量:1
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作者 江丹莉 邢燕 +2 位作者 许丹宁 田允波 黄运茂 《仲恺农业工程学院学报》 CAS 2018年第2期29-32,41,共5页
针对当前南方养鹅生产中大肠杆菌(Escherichia coli)病频发的问题,从省内规模化养鹅场收集病料,通过分离培养、生化鉴定、血清型鉴定分离不同血清型大肠杆菌,并在小鼠和雏鹅上开展攻毒试验.结果显示:成功分离得到O_(114)、O_(26)、O_(1... 针对当前南方养鹅生产中大肠杆菌(Escherichia coli)病频发的问题,从省内规模化养鹅场收集病料,通过分离培养、生化鉴定、血清型鉴定分离不同血清型大肠杆菌,并在小鼠和雏鹅上开展攻毒试验.结果显示:成功分离得到O_(114)、O_(26)、O_(119)、O_(126)和O_(124)5个血清型大肠杆菌,且对小鼠和雏鹅均有不同程度致病性,其中O_(26)对小鼠致病性最强,死亡率达100%;O_(119)对小鹅致病性最强,达50%;O_(124)致病性最弱,均未使动物致死. 展开更多
关键词 分离鉴定 大肠杆菌(escherichia coli) 致病性
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一种快速脱盐制备大肠杆菌电转化感受态细胞的方法 被引量:1
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作者 蔡松 杨东成 +3 位作者 唐梅 熊圆圆 王金华 王永泽 《湖北农业科学》 2020年第17期170-174,177,共6页
为了建立一种高效快捷的大肠杆菌(Escherichia coli)电转化方案,采用类似密度梯度离心的方法,使用角转子离心机达到快速除盐的目的。研究发现,以20%甘油(V/V)/1.5%甘露醇(m/V)溶液作为梯度介质,采用菌悬液与梯度介质比例为1∶5(V/V)时... 为了建立一种高效快捷的大肠杆菌(Escherichia coli)电转化方案,采用类似密度梯度离心的方法,使用角转子离心机达到快速除盐的目的。研究发现,以20%甘油(V/V)/1.5%甘露醇(m/V)溶液作为梯度介质,采用菌悬液与梯度介质比例为1∶5(V/V)时形成的密度梯度可有效地进行离心除盐,离心后的细胞以20%甘油(V/V)/1.5%甘露醇(m/V)溶液重悬,随后在电场强度为15 kV/cm的条件下进行电转化能得到较高的转化效率,而在室温条件下进行电转化试验不能提高转化效率。本研究仅通过2次离心,电转化效率可达到4.2×109 CFU/μg DNA,大大简化了试验流程。 展开更多
关键词 电转化 感受态细胞 脱盐 大肠杆菌(escherichia coli)
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