期刊文献+
共找到39篇文章
< 1 2 >
每页显示 20 50 100
水胺硫磷对草地贪夜蛾细胞亚显微结构的影响 被引量:3
1
作者 周青春 余泽华 +2 位作者 王家坤 虢华珊 陈曲侯 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1995年第1期90-95,共6页
经电镜观察表明:400ppm水胺硫磷药剂处理草地贪夜蛾细胞30min时,线体内膜上的嵴开始部分离解,细胞内空泡、囊泡明显增多,该药剂处理1h后,细胞核周腔开始部分膨大,核膜部分离解;随着药剂处理时间的延长,线粒体内膜... 经电镜观察表明:400ppm水胺硫磷药剂处理草地贪夜蛾细胞30min时,线体内膜上的嵴开始部分离解,细胞内空泡、囊泡明显增多,该药剂处理1h后,细胞核周腔开始部分膨大,核膜部分离解;随着药剂处理时间的延长,线粒体内膜上的嵴渐渐消失,整个线粒体形成双囊体状结构,最后,有的线粒体解体.该药剂处理9h后,部分细胞的核膜完全溶解,核质散追到细胞质中,上述结果表明,水胺硫磷不仅具有抑制昆虫体内乙酰胆碱酯酶(AchE)的作用,而且还具有破坏昆虫细胞线粒体和核膜的作用. 展开更多
关键词 水胺硫磷 草地 夜蛾细胞 亚显微结构
下载PDF
杆状病毒诱导昆虫细胞凋亡的初步研究 被引量:8
2
作者 姚伦广 杜昌升 +1 位作者 彭建新 洪华珠 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期380-383,T002,共5页
Microscopic examination of Spodoptera litura(SL-1)cell infected with AcMNPV or SfaMNPV revealed progressive cell blebbing starting at 8h~12h postinfection and culminating in total cell destruction at 24h postinfectio... Microscopic examination of Spodoptera litura(SL-1)cell infected with AcMNPV or SfaMNPV revealed progressive cell blebbing starting at 8h~12h postinfection and culminating in total cell destruction at 24h postinfection.The fragmentation of the infected cell nuclei was observed by stained with the specific fluorescent dye DAPI.Agarose gel electrophoresis analysis of the DNA extracted from infected cells show typical DNA ladder. All these supported that both viruses infected SL-1 cells undergo apoptosis.Through lipofectin transinfection,we observed that only the DNA of AcMNPV or SfaMNPV can also induce apopotosis of SL-1 cell.Virus titer analysis revealed that neither viruses can duplicate in SL-1 cells. 展开更多
关键词 杆状病毒 诱导 昆虫细胞凋亡 斜纹夜蛾细胞 梯形带
下载PDF
植物源物质诱导的斜纹夜蛾细胞凋亡 被引量:15
3
作者 钟国华 水克娟 +2 位作者 黄劲飞 贾建文 胡美英 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期449-453,共5页
为了研究植物源物质对斜纹夜蛾Spodoptera litura离体培养细胞系SL-1的凋亡诱导作用,采用倒置相差显微镜观察了印楝素、喜树碱等9种物质各自对SL-1凋亡小体的浓度效应及时序性。结果表明:印楝素0.1~5.0μg/mL和喜树碱0.5~20.0μmol/... 为了研究植物源物质对斜纹夜蛾Spodoptera litura离体培养细胞系SL-1的凋亡诱导作用,采用倒置相差显微镜观察了印楝素、喜树碱等9种物质各自对SL-1凋亡小体的浓度效应及时序性。结果表明:印楝素0.1~5.0μg/mL和喜树碱0.5~20.0μmol/L处理SL-1,24~48h后均产生大量典型的凋亡小体;茶皂素、蓖麻碱、黄樟油、丹皮酚、烟碱、苦参碱和博落回碱0.1~20.0μg/mL处理SL-1后,整个观察期72h内均无明显凋亡小体出现,凋亡诱导作用不明显。印楝素0.75μg/mL诱导SL-1细胞凋亡,从凋亡小体判断,处理后0~36h属细胞凋亡早期,36~60h属细胞凋亡中期,60h后为细胞凋亡晚期。喜树碱5.0μmol/L诱导SL-1细胞凋亡,处理后0~24h属细胞凋亡前期,24~54h属细胞凋亡中期,54h后进入细胞凋亡晚期。初步认为印楝素和喜树碱对SL-1有凋亡诱导作用,并具有一定的浓度依赖性和时序性。 展开更多
关键词 细胞凋亡 植物源物质 凋亡小体 印楝素 喜树碱 斜纹夜蛾细胞系SL-1
下载PDF
斜纹夜蛾核多角体病毒抑制苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒诱导的斜纹夜蛾细胞凋亡 被引量:2
4
作者 张萍 杨凯 +2 位作者 代小江 庞义 苏德明 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第5期702-707,共6页
野生型苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒 (Autographacalifornicamulticapsidnucleopolyhedrovirus,AcMNPV)感染斜纹夜蛾 (Spodopteralitura)细胞系Sl zsu 1,可引起典型的细胞凋亡 ;但可以在草地夜蛾 (Spodopterafrugiperda)细胞Sf 9中复制并... 野生型苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒 (Autographacalifornicamulticapsidnucleopolyhedrovirus,AcMNPV)感染斜纹夜蛾 (Spodopteralitura)细胞系Sl zsu 1,可引起典型的细胞凋亡 ;但可以在草地夜蛾 (Spodopterafrugiperda)细胞Sf 9中复制并形成多角体 .比较了AcMNPV p35基因在病毒感染两种细胞的复制和转录情况 ,认为 p35在非受纳细胞中及时有效的表达能阻止细胞发生凋亡 ;共感染实验结果表明 ,斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodopteralituramulticapsidnucleopolyhedrovirus,SpltMNPV)可以抑制AcMNPV诱导的细胞凋亡并可帮助病毒进行复制 ,推测SpltMNPV基因组中与 p35同源的 p4 展开更多
关键词 斜纹夜蛾核多角体病毒 抑制 苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒 诱导 斜纹夜蛾细胞凋亡 P35基因
下载PDF
杆状病毒反式激活蛋白IE-1诱导昆虫细胞凋亡及几种抑制剂对AcNPV诱导细胞凋亡的影响 被引量:6
5
作者 杜昌升 彭建新 洪华珠 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期69-73,共5页
为了探讨杆状病毒诱导细胞凋亡的机制 ,用含AcNPV - ie- 1基因的重组质粒 pGAM -ie- 1转染斜纹夜蛾细胞SL - 1和粉纹夜蛾细胞Tn - 5B1。转染后 2 4h通过光镜观察、DAPI荧光染料染色、DNA琼脂糖凝胶电泳等发现 ,SL - 1发生了典型的凋亡 ... 为了探讨杆状病毒诱导细胞凋亡的机制 ,用含AcNPV - ie- 1基因的重组质粒 pGAM -ie- 1转染斜纹夜蛾细胞SL - 1和粉纹夜蛾细胞Tn - 5B1。转染后 2 4h通过光镜观察、DAPI荧光染料染色、DNA琼脂糖凝胶电泳等发现 ,SL - 1发生了典型的凋亡 ,而同样的现象并没有在Tn - 5B1细胞中出现。利用放线菌酮 (cycloheximide,CHX)、莫能菌素 (Monensin)及蚜栖菌素 (aphidicolin)处理AcNPV感染的SL - 1细胞 ,发现细胞凋亡被莫能菌素及蚜栖菌素抑制 ,被放线菌酮推迟。此结果为进一步研究杆状病毒诱导昆虫细胞凋亡的机制等奠定了基础。 展开更多
关键词 杆状病毒 斜纹夜蛾细胞 细胞凋亡 梯形带 ie-1基因 转染
下载PDF
海洋微生物杀虫活性筛选方法比较 被引量:7
6
作者 徐守健 张久明 +1 位作者 田黎 罗万春 《华东昆虫学报》 2006年第1期70-74,共5页
采用活体昆虫浸渍法和细胞毒性测定法对海洋微生物发酵液进行了杀虫活性比较,从294株供试菌株中,共筛选出7株活性较好的菌株;对Lv7-1、02AB8 a、T31和BBY-9四株菌株,在不同时间的生物量、发酵液pH值与细胞毒活性等方面的关系进行了研究。
关键词 海洋微生物 细胞 斜纹夜蛾细胞 筛选
下载PDF
斜纹夜蛾核型多角体病毒DNA诱导同源昆虫细胞的凋亡 被引量:1
7
作者 杜昌升 彭建新 洪华珠 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第4期592-596,共5页
发现野生型斜纹夜蛾核型多角体病毒 (Spodopteralituranuclearpolyhedrosisvirus ,SpltNPV)DNA转染SL 1细胞能诱导细胞凋亡 .SpltNPV DNA转染其同源细胞系斜纹夜蛾核SL 1细胞 6h后 ,光镜下即可见细胞膜表面突出或形成小泡 ,细胞碎裂成... 发现野生型斜纹夜蛾核型多角体病毒 (Spodopteralituranuclearpolyhedrosisvirus ,SpltNPV)DNA转染SL 1细胞能诱导细胞凋亡 .SpltNPV DNA转染其同源细胞系斜纹夜蛾核SL 1细胞 6h后 ,光镜下即可见细胞膜表面突出或形成小泡 ,细胞碎裂成凋亡小体 ,18h后 ,细胞 10 0 %碎裂成凋亡小体 .DAPI荧光染色显示感染细胞核渐呈半月形 ,直至碎裂被凋亡小体包裹 .被转染的SL 1细胞DNA琼脂糖凝胶电泳呈典型梯形谱带 .野生型SpltNPV病毒粒子感染的SL 1细胞既无多角体的出现 ,也无凋亡现象的发生 . 展开更多
关键词 斜纹夜蛾核多角体病毒 DNA 诱导 同源昆虫细胞 斜纹夜蛾细胞 细胞凋亡
下载PDF
利用细菌/杆状病毒系统在昆虫细胞中表达人类UGT1A6 被引量:4
8
作者 郑水莲 钱鸣蓉 +2 位作者 李新 陈枢青 曾苏 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期444-448,共5页
目的 获得单一有活性的人类UGT1A6重组酶 ,以进一步研究经该酶催化的底物谱及其在对底物作用的过程中与其他同工酶之间的相互作用。方法 利用细菌 /杆状病毒系统 ,将构建的pFsatBac UGT1A6重组质粒转化E .coliDH 10Bac大肠杆菌 ,通过... 目的 获得单一有活性的人类UGT1A6重组酶 ,以进一步研究经该酶催化的底物谱及其在对底物作用的过程中与其他同工酶之间的相互作用。方法 利用细菌 /杆状病毒系统 ,将构建的pFsatBac UGT1A6重组质粒转化E .coliDH 10Bac大肠杆菌 ,通过转座作用获得重组粘粒Bacmid ,将其转染草地夜蛾细胞 (Sf9)后 ,产生重组杆状病毒。该病毒再感染Sf9细胞 ,即可获得人类UGT1A6重组酶。该酶的活性以 4 硝基酚为底物 ,用高效液相色谱法分析鉴定。结果 利用细菌 /杆状病毒系统 ,人类UGT1A6重组酶得到表达 ,且其对 4 硝基酚的Km 值为(0 .36± 0 .0 5 )mmol·L- 1,Vmax值为 (13.1± 1.0 )mmol·min- 1·g- 1蛋白。结论 利用细菌 /杆状病毒系统可获得对 4 硝基酚有代谢活性的人类UGT1A6重组酶 ,该酶可进一步用于其他底物的Ⅱ相代谢研究。 展开更多
关键词 尿苷二磷酸葡醛酸转移酶 草地夜蛾细胞 杆状病毒
下载PDF
雷帕霉素对二种鳞翅目昆虫细胞自噬和凋亡的影响 被引量:6
9
作者 李佳芮 邓玉杰 +4 位作者 张许平 付涛 马源 郭建军 刘凯于 《昆虫知识》 CSCD 北大核心 2009年第3期383-388,F0002,共7页
以2种鳞翅目昆虫细胞为材料,采用雷帕霉素进行处理,初步研究自噬作用与昆虫细胞凋亡的关系。结果表明:雷帕霉素能够提高家蚕细胞系BMN-e细胞的自噬水平,并能诱导BMN-e细胞发生凋亡;自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤能抑制雷帕霉素诱导的BMN-e细... 以2种鳞翅目昆虫细胞为材料,采用雷帕霉素进行处理,初步研究自噬作用与昆虫细胞凋亡的关系。结果表明:雷帕霉素能够提高家蚕细胞系BMN-e细胞的自噬水平,并能诱导BMN-e细胞发生凋亡;自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤能抑制雷帕霉素诱导的BMN-e细胞凋亡。相反,雷帕霉素虽能诱导斜纹夜蛾细胞系SL-HP细胞的自噬水平提高,但不能诱导斜纹夜蛾Spodoptera litura(Fabricius)细胞发生凋亡;雷帕霉素的预处理能抑制放线菌素D诱导的斜纹夜蛾细胞系SL-HP细胞发生凋亡;自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤对放线菌素D诱导的细胞凋亡没有影响。因此家蚕Bombyx mori细胞自噬水平的提高与细胞凋亡具有正相关性,而斜纹夜蛾细胞自噬水平的提高与细胞凋亡不相关,相反还对细胞凋亡的诱导具有一定的抑制作用。 展开更多
关键词 自噬作用 细胞凋亡 斜纹夜蛾细胞系(Sl-HP) BMN-e细胞
下载PDF
不同杀虫成分对Sf9细胞凋亡的影响 被引量:6
10
作者 贾建文 黄劲飞 +2 位作者 王文祥 胡美英 钟国华 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期29-35,共7页
通过倒置显微形态观察凋亡小体、DNA琼脂糖凝胶电泳确证的模型,研究了8种代表性杀虫成分对草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda离体培养细胞系Sf9的凋亡诱导效果,以探讨不同杀虫成分对昆虫细胞凋亡的影响.结果表明,印楝素0.15-1.50μg/mL... 通过倒置显微形态观察凋亡小体、DNA琼脂糖凝胶电泳确证的模型,研究了8种代表性杀虫成分对草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda离体培养细胞系Sf9的凋亡诱导效果,以探讨不同杀虫成分对昆虫细胞凋亡的影响.结果表明,印楝素0.15-1.50μg/mL处理后72 h内、喜树碱0.35-3.50μg/mL处理后36 h,Sf9细胞产生大量典型凋亡小体,处理时间延长或剂量加大则以造成细胞坏死为主;DNA电泳产生典型的DNA Ladder,表明印楝素和喜树碱对Sf9具有明显的细胞凋亡诱导作用.印楝素1.5μg/mL诱导处理Sf9细胞凋亡高峰期为处理后24-48 h,喜树碱0.35-3.50μg/mL诱导处理Sf9细胞凋亡高峰期为处理后12 h.苦参碱、氟铃脲、毒死蜱、灭多威、氯氰菊酯以0.1-10.0μg/mL及昆虫蜕皮激素20-羟基蜕皮酮(20-hydroxyecdysone)以0.048-4.800μg/mL处理后72 h内对Sf9均无明显的细胞凋亡诱导作用.杀虫剂对昆虫细胞凋亡诱导效应随供试化合物、细胞种类、处理剂量、处理时间而异. 展开更多
关键词 细胞凋亡 草地贪夜蛾细胞系Sf9 印楝素 喜树碱
下载PDF
利用细菌/杆状病毒系统在昆虫细胞中表达人CYP2E1 被引量:4
11
作者 路珂 曾苏 姚彤炜 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2008年第2期118-125,共8页
目的:获得人CYP2E1重组酶,并用该重组酶的特征性探针底物对其进行代谢活性研究。方法:以人肝组织RNA为模板,通过RT-PCR得到CYP2E1 cDNA片断,然后与pFastBac质粒连接,得到pFastBac-CYP2E1重组质粒,将其转化E.coli DH 10Bac大肠杆菌,通过... 目的:获得人CYP2E1重组酶,并用该重组酶的特征性探针底物对其进行代谢活性研究。方法:以人肝组织RNA为模板,通过RT-PCR得到CYP2E1 cDNA片断,然后与pFastBac质粒连接,得到pFastBac-CYP2E1重组质粒,将其转化E.coli DH 10Bac大肠杆菌,通过转座作用,获得重组Bacmid-CYP2E1,将其转染草地夜蛾细胞(Sf9)后,产生重组杆状病毒。将该病毒以及分别含有人CYPOR和人CYPb5的病毒共同感染Sf9细胞,收集共表达蛋白,以氯唑沙宗为底物鉴定重组酶的活性。结果:利用细菌/杆状病毒系统得到重组人CYP2E1的表达,其对氯唑沙宗的Km值为(72.4±8.7)μmol.L-1,Vmax值为(2.41±0.10)μmol.min-1.g-1蛋白。结论:利用杆状病毒系统成功表达了有催化活性的人CYP2E1重组酶,其活性与文献报道值相似。 展开更多
关键词 杆状病毒科 细胞色素P450酶系统 蛾/细胞 大肠杆菌/遗传学 重组 遗传 细胞色素P450 杆状病毒 草地夜蛾细胞 氯唑沙宗
下载PDF
重组人β-防御素-2基因在昆虫细胞的转染表达 被引量:3
12
作者 蔡绍晖 杜军 +1 位作者 黄宁 王伯瑶 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期832-835,共4页
目的 探索杆状病毒表达系统 (BEVS)高效表达人 β-防御素 - 2 (h BD- 2 )的可行性及其技术路线。方法 利用特异性引物经 PCR扩增 ,从重组质粒 rpc DNA3.1/h BD- 2 /myc- His中扩增出完整重组 h BD- 2 /His基因片段。将此片段插入转移... 目的 探索杆状病毒表达系统 (BEVS)高效表达人 β-防御素 - 2 (h BD- 2 )的可行性及其技术路线。方法 利用特异性引物经 PCR扩增 ,从重组质粒 rpc DNA3.1/h BD- 2 /myc- His中扩增出完整重组 h BD- 2 /His基因片段。将此片段插入转移质粒 p Ac GHL T- A的多克隆位点中 ,构建成重组转移载体 rp Ac GHL T- A/h BD- 2 /His。用该重组转移载体和多角体病毒 Ac NPV DNA共转染草地夜蛾细胞 (Sf2 1) ,二者在细胞内经过同源重组形成重组病毒 r Ac NPV/h BD- 2 /His。用终点稀释分析法检测感染上清重组病毒的感染效率。采用 Western印迹法通过特异性抗 - His抗体检测细胞及上清 h BD- 2 /His的表达。结果 目的基因 h BD- 2 /His正确地插入 BEVS系统的转移载体。经 rp Ac GHL T- A/h BD- 2 /His和 Ac NPV DNA共转染的 Sf2 1细胞有较高滴度的重组病毒 r Ac NPVh BD- 2 /his存在。被共转染的 Sf2 1细胞的可溶性蛋白 ,在相对分子质量约 4 7.5× 10 3处有强反应条带显示 ,其大小与根据测序结果所推测的 h BD- 2融合肽相对分子质量接近。培养上清分别在相对分子质量约 4 0× 10 3和 30× 10 3处有强反应条带显示。结论 可利用 BEVS系统作为高效表达重组 h BD- 2的生物反应器。 展开更多
关键词 人类β-防御素-2基因 基因重组 杆状病毒表达系统 草地夜蛾细胞
下载PDF
粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)培养细胞对家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)的吞噬过程观察 被引量:3
13
作者 冯真珍 曹翠平 +2 位作者 邱海洪 吴小锋 鲁兴萌 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期333-338,共6页
观察微孢子虫在非天然宿主细胞系的生物行为过程,有助于探究微孢子虫的侵染特异性机制。选用鳞翅目昆虫粉纹夜蛾(Trichoplusia ni,Tn)细胞系为材料,接种家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,Nb)孢子后观察其吞噬过程。结果发现:经氢氧化钾发... 观察微孢子虫在非天然宿主细胞系的生物行为过程,有助于探究微孢子虫的侵染特异性机制。选用鳞翅目昆虫粉纹夜蛾(Trichoplusia ni,Tn)细胞系为材料,接种家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,Nb)孢子后观察其吞噬过程。结果发现:经氢氧化钾发芽预处理的Nb孢子虽然可以在Tn培养细胞液中发芽,但未见发芽孢子的孢原质进入Tn培养细胞;在接种Nb孢子浓度为2.0×105mL-1以上时,观察到孢子通过内吞作用进入了Tn培养细胞,但未见孢子的增殖;随着时间的延长和进入Tn培养细胞的Nb孢子的增加,可引起Tn培养细胞的超微结构变化,并导致细胞的裂解。以上结果说明,虽未见Nb以发芽形式感染Tn培养细胞,但Nb能够被吞噬进入Tn培养细胞并破坏其结构。 展开更多
关键词 粉纹夜蛾细胞 家蚕微孢子虫 内吞作用 增殖 超微结构 裂解
下载PDF
抗苏云金杆菌毒素Cry1Ac粉纹夜蛾细胞系的特性研究 被引量:3
14
作者 刘凯于 杨红 +2 位作者 蒋才富 彭建新 洪华珠 《实验生物学报》 CSCD 北大核心 2004年第3期205-211,共7页
为了从离体细胞水平探讨昆虫对苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白的部分抗性机制,本文采用活化的Cry1Ac 毒素对粉纹夜蛾BTI-TN-581-4细胞连续筛选86代,获得了高水平抗性细胞,研究了其某些特性。它对Cry1c 产生了低水平的交互抗性,对低渗溶液... 为了从离体细胞水平探讨昆虫对苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白的部分抗性机制,本文采用活化的Cry1Ac 毒素对粉纹夜蛾BTI-TN-581-4细胞连续筛选86代,获得了高水平抗性细胞,研究了其某些特性。它对Cry1c 产生了低水平的交互抗性,对低渗溶液的耐受性显著增强,双向电泳图谱表明抗性细胞膜蛋白组分发生了明显的变化。膜蛋白组分的变化可能导致了筛选细胞的耐低渗透压和抗Cry1C。 展开更多
关键词 粉纹夜蛾细胞 CrylAc毒素 交互抗性 膜蛋白 苏云金芽孢杆菌
下载PDF
用DNA转染法研究小菜蛾颗粒体病毒在草地贪夜蛾细胞内复制 被引量:2
15
作者 孟小林 Suzanne.M.Thiem +1 位作者 Martha.Quentin Chi-juChen 《中国生物防治》 CSCD 1996年第2期66-68,共3页
采用钙一磷沉淀技术将小菜蛾颗粒体病毒DNA转染草地贪夜蛾细胞,经转染120小时后的病变细胞核膨大,核内可见病毒粒子。回收转染5天后的细胞悬液,经破细胞处理,添食感染2龄小菜蛾幼虫,患病幼虫为典型颗粒体病毒病症状,感染率为37.8%。
关键词 小菜蛾 颗粒体病毒 DNA 转染 草地 夜蛾细胞
下载PDF
粉纹夜蛾培养细胞对家蚕微孢子虫的吞噬及与孢壁蛋白的关系 被引量:2
16
作者 吴晓霞 冯真珍 +3 位作者 邱海洪 蔡顺风 李明乾 鲁兴萌 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期447-451,共5页
解明家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,Nb)入侵宿主细胞的相关因素,有助于深入研究Nb对家蚕的侵染机制。利用激光共聚焦显微镜观察Nb孢子接种粉纹夜蛾(Trichoplusiani,Tn)培养细胞48h后孢子的分布状态和培养细胞的生长情况,并对接种Nb孢子... 解明家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,Nb)入侵宿主细胞的相关因素,有助于深入研究Nb对家蚕的侵染机制。利用激光共聚焦显微镜观察Nb孢子接种粉纹夜蛾(Trichoplusiani,Tn)培养细胞48h后孢子的分布状态和培养细胞的生长情况,并对接种Nb孢子后的Tn培养细胞培养物总蛋白进行SDS-PAGE分析,证实经0.2mol/LKOH预处理的Nb孢子可以被Tn培养细胞所吞噬。对Nb孢子孢壁蛋白的SDS-PAGE分析显示,Nb孢子经KOH预处理后,大小为80kD和12kD的孢壁蛋白带缺失或明显减弱,30kD的孢壁蛋白带丰度降低。推测KOH预处理使Nb孢子部分孢壁蛋白被分解(部分或完全)或使蛋白结构发生变化,由此影响了Nb孢子与Tn培养细胞的相互作用关系,有利于Tn培养细胞对Nb孢子的吞噬。 展开更多
关键词 家蚕微孢子虫 粉纹夜蛾细胞 吞噬 孢壁蛋白 激光共聚焦显微镜观察 SDS—PAGE电泳
下载PDF
人细胞色素P450 1A2的异源表达及代谢活性测定 被引量:1
17
作者 阮昊 陈枢青 姚彤炜 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期697-702,共6页
目的获得单一的具有活性的人细胞色素P450 1A2(CYP1A2)重组酶,以进一步进行该酶参与的药物代谢研究。方法以人肝组织提取的总RNA为模板,RT-PCR扩增全长的人类CYP1A2基因片段,插入转座载体pFastBac构建重组转座质粒pFastBac-CYP1A2,转化... 目的获得单一的具有活性的人细胞色素P450 1A2(CYP1A2)重组酶,以进一步进行该酶参与的药物代谢研究。方法以人肝组织提取的总RNA为模板,RT-PCR扩增全长的人类CYP1A2基因片段,插入转座载体pFastBac构建重组转座质粒pFastBac-CYP1A2,转化入DH10Bac大肠杆菌,获得重组杆状病毒穿梭质粒Bacmid-CYP1A2,以之转染草地夜蛾细胞(Sf9),与细胞色素氧化还原酶(CYPOR)进行共表达。利用蛋白质印迹分析鉴定其表达,并以非那西丁为底物,利用HPLC对其进行代谢活性测定。结果蛋白质印迹分析表明人CYP1A2蛋白在Sf9细胞中成功表达,且该重组酶对非那西丁的Km值为(82.04±11.39)μmol·L-1(n=3),Vmax值为(1.78±0.26)nmol·min-1·mg-1蛋白(n=3),表观清除率Clint值为0.02mL·min-1·mg-1蛋白。结论利用杆状病毒/昆虫细胞系统,可获得具代谢活性的人CYP1A2重组酶,该酶可进一步用于其他底物的I相代谢研究。 展开更多
关键词 细胞色素P450 1A2 杆状病毒 草地夜蛾细胞 非那西丁 活性测定
原文传递
斜纹夜蛾细胞的微载体悬浮培养
18
作者 彭建新 陈曲侯 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1996年第2期203-206,共4页
当微载体浓度3mg/mL、细胞接种浓度1.80×105细胞/mL时,细胞培养8d达最大生长密度1.20×106细胞/mL,细胞群体倍增时间56.2h,葡萄糖的浓度随细胞培养时间的延续逐渐减小;氨的浓度随细胞培... 当微载体浓度3mg/mL、细胞接种浓度1.80×105细胞/mL时,细胞培养8d达最大生长密度1.20×106细胞/mL,细胞群体倍增时间56.2h,葡萄糖的浓度随细胞培养时间的延续逐渐减小;氨的浓度随细胞培养时间的延续逐渐递增. 展开更多
关键词 斜纹夜蛾细胞 悬浮培养 微载体培养 昆虫细胞
下载PDF
Bt Cry1Ac抗性粉纹夜蛾离体细胞与敏感细胞mRNA的差异显示 被引量:1
19
作者 刘凯于 蒋才富 +2 位作者 洪华珠 彭建新 余泽华 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第2期55-60,共6页
为了研究昆虫对Bt的抗性机制 ,以苏云金芽孢杆菌Cry1Ac活性毒素对粉纹夜蛾离体细胞连续筛选 80代 ,获得了高抗性细胞。采用DDRT PCR技术比较了该抗性细胞与非选择敏感细胞mRNA的差异 ,经反向RNA斑点印迹杂交确证了 5个片段为两种细胞的... 为了研究昆虫对Bt的抗性机制 ,以苏云金芽孢杆菌Cry1Ac活性毒素对粉纹夜蛾离体细胞连续筛选 80代 ,获得了高抗性细胞。采用DDRT PCR技术比较了该抗性细胞与非选择敏感细胞mRNA的差异 ,经反向RNA斑点印迹杂交确证了 5个片段为两种细胞的显著差异表达序列标签(ESTs)。序列分析结果表明 ,敏感细胞特有的三种ESTs都位于cDNA的非编码区 ,两种ESTs(GenBank注册号 :S1 ,CF32 2 4 1 5 ;S3,CF32 2 4 1 7)与数据库中EST没有显著同源性 ,另一种S2(GenBank注册号 :CF32 2 4 1 6)与已登录的某些昆虫的ESTs具有一定的同源性。从抗性细胞特有的R1 (GenBank注册号 :CF32 2 4 1 3)推导出的氨基酸序列与磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶有 60 %~63%的同源性 ,从抗性细胞特有的R2 (GenBank注册号 :CF32 2 4 1 4)推导出的氨基酸序列与黏蛋白类有约 30 %的同源性。这些差异表达基因可能与抗性的形成相关。 展开更多
关键词 粉纹夜蛾细胞 抗性 敏感 MRNA差异显示 抗性基因 离体细胞 敏感细胞
下载PDF
中华蜜蜂前溶血肽原基因在Tn-5B1-4细胞中的表达
20
作者 施婉君 张传溪 程家安 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2005年第2期117-121,共5页
构建中华蜜蜂前溶血肽原基因的重组供体质粒pBacHT-GFPTAccPPM,将其转化进入穿梭载体Bacmid的受体菌DH10Bac中,得重组穿梭载体Bacmid-GFPTAccPPM,再用Lipofectin介导其DNA转染粉纹夜蛾细胞系Tn-5B1-4,最后观察细胞表达时相动态。经ELIS... 构建中华蜜蜂前溶血肽原基因的重组供体质粒pBacHT-GFPTAccPPM,将其转化进入穿梭载体Bacmid的受体菌DH10Bac中,得重组穿梭载体Bacmid-GFPTAccPPM,再用Lipofectin介导其DNA转染粉纹夜蛾细胞系Tn-5B1-4,最后观察细胞表达时相动态。经ELISA法和荧光显微镜观察证实,胞内表达产物既能发射易于检测的绿色荧光,又具有良好的抗原性,证明重组病毒Bacmid-GFPTAccPPM已在昆虫细胞中得到了表达。 展开更多
关键词 中华蜜蜂 基因 溶血 粉纹夜蛾细胞 ELISA法 DNA转染 显微镜观察 细胞表达 绿色荧光 表达产物 昆虫细胞 重组病毒 抗原性 栽体 穿梭 供体 介导
下载PDF
上一页 1 2 下一页 到第
使用帮助 返回顶部