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多重位点特异性PCR鉴别人参、三七、西洋参掺杂 被引量:44
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作者 蒋超 罗宇琴 +3 位作者 袁媛 黄璐琦 金艳 赵玉洋 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1319-1323,共5页
为建立一种能同时鉴别人参、三七、西洋参及其掺杂品的方法。通过分析人参属ITS,18S和matK序列,寻找特异性SNP位点设计引物,建立多重位点特异性PCR法,并对不同来源的人参、三七、西洋参样品进行扩增,根据特异性条带大小进行鉴别。在退... 为建立一种能同时鉴别人参、三七、西洋参及其掺杂品的方法。通过分析人参属ITS,18S和matK序列,寻找特异性SNP位点设计引物,建立多重位点特异性PCR法,并对不同来源的人参、三七、西洋参样品进行扩增,根据特异性条带大小进行鉴别。在退火温度为60℃,循环数为35时,人参、三七和西洋参分别出现约250,500,1000 bp的特异性条带。该方法对于人参、三七、西洋参相互掺杂的混合样品,人参中掺杂三七或西洋参以及三七中掺杂西洋参或人参的检出限均为0.5%,对西洋参中掺杂人参的检出限为0.5%,掺杂三七的检出限为1%。表明建立的多重位点特异性PCR可用于人参、西洋参、三七的掺杂鉴定。 展开更多
关键词 人参 西洋参 三七 多重位点特异性pcr 掺伪 分子鉴定
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多重位点特异性PCR鉴别霍山石斛、铁皮石斛与齿瓣石斛药材 被引量:17
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作者 罗宇琴 蒋超 +4 位作者 袁媛 肖苏萍 赵润怀 李戈 赵玉洋 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期998-1006,共9页
为建立同时鉴别霍山石斛、铁皮石斛及齿瓣石斛的多重位点特异性PCR法,解决上述石斛属药材真伪掺杂的难题。通过比对石斛药材ITS及trn L-trn F序列,设计引物,建立多重PCR鉴别法,并对不同来源的霍山石斛、铁皮石斛及齿瓣石斛样品进行特异... 为建立同时鉴别霍山石斛、铁皮石斛及齿瓣石斛的多重位点特异性PCR法,解决上述石斛属药材真伪掺杂的难题。通过比对石斛药材ITS及trn L-trn F序列,设计引物,建立多重PCR鉴别法,并对不同来源的霍山石斛、铁皮石斛及齿瓣石斛样品进行特异性扩增,根据特异性条带大小进行鉴别。结果在退火温度为61℃、循环数为35时,齿瓣石斛、铁皮石斛和霍山石斛分别可扩出584、397和211 bp的特异性条带。本文所建立的方法对齿瓣石斛和霍山石斛的最低检测限为1.2 ng,铁皮石斛低于0.24 ng,其对铁皮石斛、齿瓣石斛和霍山石斛的混伪检出限分别为1%、1%和5%。表明多重位点特异性PCR法能特异性鉴别霍山石斛、铁皮石斛及齿瓣石斛。 展开更多
关键词 霍山石斛 铁皮石斛 齿瓣石斛 多重位点特异性pcr 掺伪鉴别
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多重位点特异性PCR法同时鉴别牛膝和川牛膝配方颗粒 被引量:5
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作者 黄上书 罗宇琴 +4 位作者 宋叶 范耀耀 雷欣荷 李国卫 陈向东 《广东药科大学学报》 CAS 2023年第3期73-79,共7页
目的建立一种同时鉴别牛膝和川牛膝药材及配方颗粒的多重位点特异性PCR鉴别方法。方法通过比较牛膝属相近物种核基因ITS序列,设计牛膝和川牛膝的特异性引物,经过优化PCR反应体系及PCR反应条件,建立了牛膝和川牛膝配方颗粒的多重位点特异... 目的建立一种同时鉴别牛膝和川牛膝药材及配方颗粒的多重位点特异性PCR鉴别方法。方法通过比较牛膝属相近物种核基因ITS序列,设计牛膝和川牛膝的特异性引物,经过优化PCR反应体系及PCR反应条件,建立了牛膝和川牛膝配方颗粒的多重位点特异性PCR鉴别方法。结果在退火温度为58℃、循环次数为31时,牛膝和川牛膝配方颗粒分别可扩增出187 bp和164 bp的特异性条带。该方法对牛膝和川牛膝药材的掺伪检出限分别为1%、5%,对两者配方颗粒的掺伪检出限分别为10%、50%。结论所建立的多重位点特异性PCR鉴别可有效鉴别牛膝和川牛膝配方颗粒及其掺伪体系。 展开更多
关键词 牛膝 川牛膝 配方颗粒 多重位点特异性pcr 掺伪 鉴定
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基于SNP的多重位点特异性PCR鉴别不同居群竹节参 被引量:3
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作者 蒋鹏 张瑞 +3 位作者 张祚 张小海 左天 张绍鹏 《武汉轻工大学学报》 2020年第4期15-19,31,共6页
竹节参,五加科人参属,是具有极高药用价值的珍稀濒危药用植物。但竹节参的居群混杂亟需建立一种能准备鉴别竹节参不同居群来源的方法。基于前期比较转录组数据筛选竹节参SNP位点,并基于这些SNP位点设计特异性引物,并对来自不同居群的竹... 竹节参,五加科人参属,是具有极高药用价值的珍稀濒危药用植物。但竹节参的居群混杂亟需建立一种能准备鉴别竹节参不同居群来源的方法。基于前期比较转录组数据筛选竹节参SNP位点,并基于这些SNP位点设计特异性引物,并对来自不同居群的竹节参(云南鲁甸、湖北华中药用植物园、四川乐山、陕西平利县、湖北七姊妹山)进行PCR鉴定和优化。结果筛选得到磷酸甲羟戊酸激酶1(PMK1)基因上的A/G点突变是可鉴别不同居群竹节参遗传变异的有效SNP位点。本实验室初步建立了基于竹节参的单核苷酸多态性(SNP)位点的PCR体系,进一步鉴别了不同居群的竹节参,为实现竹节参及其近缘种的分子鉴别奠定基础。 展开更多
关键词 多重位点特异性pcr 竹节参 分子鉴定 SNP位点
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