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肺腺癌多药耐药细胞特异表达基因的克隆与鉴定 被引量：11
1
作者 陈杰 钱桂生 +2 位作者 黄桂君 熊玮 李靖 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第4期348-353,共6页
目的：克隆和筛选肺腺癌多药耐药细胞特异表达基因。方法：将肺腺癌多药耐药细胞（ SPC- A- 1/CDDP）作为实验方，肺腺癌细胞（ SPC- A- 1）作为对照方，应用抑制消减杂交技术，构建实验方特异表达 cDNA消减文库；用斑点杂交法初步筛选 ... 目的：克隆和筛选肺腺癌多药耐药细胞特异表达基因。方法：将肺腺癌多药耐药细胞（ SPC- A- 1/CDDP）作为实验方，肺腺癌细胞（ SPC- A- 1）作为对照方，应用抑制消减杂交技术，构建实验方特异表达 cDNA消减文库；用斑点杂交法初步筛选 cDNA消减文库后，将获得的阳性克隆进行测序和同源性分析（ Genbank），对新的 cDNA序列进行 Northern blot杂交验证。结果：建立了一个肺腺癌多药耐药细胞（ SPC- A- 1/CDDP）特异表达 cDNA消减文库，斑点杂交法初步筛选显示 23个克隆中有 SPC- A- 1/CDDP特异表达 cDNA片断，测序和同源性分析表明 2个 cDNA片断为新序列，其余 cDNA片断与已知基因有 93％～ 100％的同源性， Northern blot杂交结果表明 2个新的 cDNA片断来自 SPC- A- 1/CDDP细胞。结论： 2个新的 cDNA序列可能为未知肺腺癌多药耐药相关基因序列；抑制消减杂交法是克隆特异表达基因的有效方法。 展开更多
关键词 人肺腺癌细胞 多药耐药相关基因 抑制消减杂交 克隆
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应用抑制消减杂交(SSH)克隆肺腺癌多药耐药细胞特异表达基因 被引量：8
2
作者 陈杰 钱桂生 +3 位作者 黄桂君 熊玮 李靖 LI Jing 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期131-134,共4页
目的　克隆和筛选肺腺癌多药耐药细胞特异表达基因。方法　将肺腺癌多药耐药细胞 (SPC A 1/CDDP)作为实验组 ,肺腺癌细胞 (SPC A 1)作为对照组 ,应用抑制消减杂交技术 ,构建实验组特异表达cDNA消减文库 ;用斑点杂交初步筛选cDNA消减文库... 目的　克隆和筛选肺腺癌多药耐药细胞特异表达基因。方法　将肺腺癌多药耐药细胞 (SPC A 1/CDDP)作为实验组 ,肺腺癌细胞 (SPC A 1)作为对照组 ,应用抑制消减杂交技术 ,构建实验组特异表达cDNA消减文库 ;用斑点杂交初步筛选cDNA消减文库后 ,将获得的阳性克隆进行测序和同源性分析 (Genebank)。结果　建立了一个肺腺癌多药耐药细胞 (SPC A 1/CDDP)特异表达cDNA消减文库 ,斑点杂交初步筛选显示 2 3个克隆中有SPC A 1/CDDP特异表达cDNA片断 ,测序和同源性分析表明 2个cDNA片断为新序列 ,其余cDNA片断与已知基因有 96%～ 10 0 %的同源性。结论　 2个新的cDNA序列可能为未知肺腺癌多药耐药相关基因序列 ;抑制消减杂交是克隆特异表达基因的有效方法。 展开更多
关键词 人肺腺癌细胞 多药耐药相关基因 抑制消减杂交 SSH
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多药耐药相关基因HV126的电子克隆及在化疗前后白血病细胞中的表达 被引量：6
3
作者 付劲蓉 刘文励 +3 位作者 周剑锋 周玉峰 徐酉华 金先庆 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期158-163,共6页
目的　探讨白血病细胞多药耐药发生的分子机理,寻找新的多药耐药相关基因。方法　以HL- 6 0细胞为“驱动方”,以多药耐药细胞系HL- 6 0 / VCR为“实验方”,建立人白血病多药耐药细胞系HL-6 0 / VCR抑制消减杂交文库,利用基因芯片技术从... 目的　探讨白血病细胞多药耐药发生的分子机理,寻找新的多药耐药相关基因。方法　以HL- 6 0细胞为“驱动方”,以多药耐药细胞系HL- 6 0 / VCR为“实验方”,建立人白血病多药耐药细胞系HL-6 0 / VCR抑制消减杂交文库,利用基因芯片技术从中筛选出一条在野生型HL - 6 0细胞中基本不表达,而在HL - 6 0 / VCR耐药细胞中呈低丰度差异表达的新表达序列标记序列。用表达序列标记拼接的同源基因克隆法得到人类新基因HV12 6序列,再利用生物信息学数据库和软件对其进行功能的预测和分析。最后针对推导序列开放阅读框设计引物,逆转录-聚合酶链反应检测推导HV12 6基因序列在临床白血病患者化疗前后白血病细胞中的表达。结果　HV12 6的c DNA序列长1991bp,编码36 5个氨基酸,其编码蛋白序列局部与新近发现的在细胞凋亡与炎症反应中起重要作用的蛋白基序“PYRIN”存在约4 3%的相似性。逆转录-聚合酶链反应结果提示该基因与白血病细胞受化疗药物的作用和耐药存在联系。结论　HV12 6可能是与白血病细胞耐药相关的一条新基因,有必要对该基因进行进一步的实验室克隆与功能研究。 展开更多
关键词 多药耐药相关基因 化疗前后 HL-60/VCR 电子克隆 逆转录-聚合酶链反应 HL-60细胞 多药耐药细胞系 白血病细胞多药耐药 聚合酶链反应检测 表达序列标记 白血病细胞耐药 抑制消减杂交 基因芯片技术 cDNA序列 生物信息学
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X线照射对人鼻咽癌细胞株MRP基因和MRP表达的影响 被引量：5
4
作者 王若雨 隋晓梅 +1 位作者 杨兆禄 朱勤伟 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期56-57,70,共3页
化疗药物可以诱导肿瘤细胞多药耐药相关基因（MRP基因）及其蛋白（MRP）的过度表达，从而产生多药耐药，导致化疗疗效降低。放疗也能引起肿瘤细胞的MRP基因和MRP表达增强，但照射后肿瘤细胞MRP基因和MRP表达随时间的变化情况，目前少见... 化疗药物可以诱导肿瘤细胞多药耐药相关基因（MRP基因）及其蛋白（MRP）的过度表达，从而产生多药耐药，导致化疗疗效降低。放疗也能引起肿瘤细胞的MRP基因和MRP表达增强，但照射后肿瘤细胞MRP基因和MRP表达随时间的变化情况，目前少见报道。本研究采用体外培养的鼻咽癌CNE-1细胞株，检测照射前、后细胞MRP基因和MRP的表达随时间变化情况以及细胞对顺铂（DDP）敏感性的变化，从而探讨照射与鼻咽癌多药耐药性的关系。 展开更多
关键词 人鼻咽癌细胞株 MRP基因 X线照射 多药耐药相关基因 CNE-1细胞株 肿瘤细胞 多药耐药性 过度表达
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肺癌多药耐药相关基因的研究 被引量：2
5
作者 左翠云 刘超 《临床肺科杂志》 2009年第9期1207-1209,共3页
关键词 多药耐药相关基因 肺癌细胞 化疗失败 多药耐药现象 多药耐药机制 drug 交叉耐药性 抗肿瘤药物
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人肺癌细胞株化疗敏感性与基因表达的关系 被引量：3
6
作者 宋现让 魏玲 +1 位作者 王兴武 刘贤锡 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期1-4,共4页
目的探讨人肺癌细胞株对化疗药物的敏感性与多药耐药相关基因和凋亡调控基因表达的关系。方法采用MTT法检测5株肺癌细胞SPCA1、NCI-H446、SH-77、95C和95D对阿霉素(ADM)、顺铂(DDP)、丝裂霉素(MMC)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)、卡氮芥(BCNU)的... 目的探讨人肺癌细胞株对化疗药物的敏感性与多药耐药相关基因和凋亡调控基因表达的关系。方法采用MTT法检测5株肺癌细胞SPCA1、NCI-H446、SH-77、95C和95D对阿霉素(ADM)、顺铂(DDP)、丝裂霉素(MMC)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)、卡氮芥(BCNU)的敏感性。流式细胞术检测多药耐药基因P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽-S-转移酶-π(GST-π)、肺耐药蛋白(LRP)、多药耐药相关蛋白(MRP)和甲基鸟嘌呤甲基转移酶(MGMT)等耐药相关基因和Fas、bcl-2、p53和p16等凋亡调控基因的表达。结果不同肺癌细胞株对同一药物敏感性有较大差异。相关分析显示,肺癌细胞株对MMC的敏感性与GST-π和bcl-2的表达呈负相关,P值分别为0.040和0.030,GST-π和bcl-2的表达水平较高者,MMC的IC50较高,敏感性较低;对DDP的敏感性与p53蛋白表达水平呈负相关(P=0.036);对其余药物的敏感性与所检基因的表达水平无关(P>0.05)。结论人肺癌细胞株对不同化疗药物敏感与否有不同的机制,对MMC的敏感性与GST-π和bcl-2的表达有关,对DDP的敏感性与p53的表达有关。 展开更多
关键词 肺癌细胞株 流式细胞术 化疗敏感性 多药耐药相关基因 凋亡调控基因
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宫颈癌中耐药相关基因的表达及临床研究 被引量：2
7
作者 朱惠君 黄剑飞 《南通大学学报（医学版）》 2005年第2期89-91,共3页
目的:探讨宫颈癌组织中,多项耐药相关基因(P- gp、GST- π,TOPO )的表达水平及其临床意义。方法:免疫组化链霉菌素-生物素(S- P)法对术前未使用过化疗、放疗及免疫治疗的5 6例宫颈癌及癌旁组织,30例正常宫颈组织行P- gp,GST- π,TOPO ... 目的:探讨宫颈癌组织中,多项耐药相关基因(P- gp、GST- π,TOPO )的表达水平及其临床意义。方法:免疫组化链霉菌素-生物素(S- P)法对术前未使用过化疗、放疗及免疫治疗的5 6例宫颈癌及癌旁组织,30例正常宫颈组织行P- gp,GST- π,TOPO 检测。结果:宫颈鳞癌与腺癌中各耐药基因的表达差异无显著性(P>0 .0 5 ) ,在不同分化程度及有无转移的宫颈癌中表达差异有显著性(P<0 .0 5 ) ,在癌组织、癌旁组织及正常宫颈组织中表达差异有显著性(P<0 .0 1) ,其中P- gp与GST- π在宫颈癌中的表达差异有极显著性(P<0 .0 1)。结论:宫颈癌中多药耐药相关基因的表达是癌的发生、分化程度及转移行为的生物学表现。临床上对3种以上耐药相关因子的综合检测意义重大,有助于指导临床对宫颈癌的化疗。 展开更多
关键词 临床研究 表达及 多药耐药相关基因 GST-Π 表达差异 耐药相关因子 癌旁组织 分化程度 宫颈癌组织 TOPOⅡ 生物学表现 显著性 临床意义 免疫组化 免疫治疗 宫颈组织 耐药基因 宫颈鳞癌 检测意义 gP 生物素 霉菌素 化疗
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热疗对胃癌细胞株化疗敏感性的影响 被引量：3
8
作者 李芳 孔凡志 +5 位作者 李旭忠 周联明 张光军 黄忠明 何以丰 张学利 《中国临床医学》 2014年第3期254-258,共5页
目的:探讨热疗时胃癌细胞株对紫杉醇(paclitaxel,TAX)敏感性的变化。方法:用对TAX敏感的胃癌细胞株MKN-45经浓度梯度递增法建立胃癌TAX耐药细胞株,命名为MKN-45/TAX。采用免疫细胞化学染色法检测MKN-45/TAX和MKN-45细胞中多药耐药相关基... 目的:探讨热疗时胃癌细胞株对紫杉醇(paclitaxel,TAX)敏感性的变化。方法:用对TAX敏感的胃癌细胞株MKN-45经浓度梯度递增法建立胃癌TAX耐药细胞株,命名为MKN-45/TAX。采用免疫细胞化学染色法检测MKN-45/TAX和MKN-45细胞中多药耐药相关基因(multi-drug resistance gene,MDR1)的表达;采用CCK-8法检测不同温度和不同TAX浓度作用下2种细胞的增殖抑制率;采用实时荧光定量–聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)法、蛋白质印迹(Western blotting)法检测经靶向siRNA处理前后MDR1 mRNA和P糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达。结果:成功建立MKN-45/TAX。MDR1在MKN-45/TAX中高表达而在MKN-45中低表达。随着紫杉醇浓度的增加,其对MKN-45及MKN-45/TAX的增殖抑制率增加;42℃时紫杉醇对MKN-45/TAX的增殖抑制率降低,而对MKN-45的增殖抑制率则升高。转染MDR1 siRNA后MDR1 mRNA和P-gp的表达水平均下降。结论:热疗联合化疗可增强耐药胃癌细胞株对TAX的耐药性,而增强敏感胃癌细胞株对TAX的敏感性,其机制可能与MDR1表达有关。 展开更多
关键词 胃癌 MKN-45细胞株 多药耐药相关基因 热疗
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人乳腺癌细胞化疗敏感性与相关基因表达的关系
9
作者 魏玲 宋现让 +1 位作者 王兴武 柳永蕾 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2006年第8期851-855,共5页
目的探讨人乳腺癌细胞化疗敏感性与多药耐药相关基因和凋亡调控基因表达的关系。方法MTT法检测5株人乳腺癌细胞株Bcap37、MCF-7、T47D、MDA-MB-231和MDA-MB-435对阿霉素(ADM)、顺铂(DDP)、丝裂霉素(MMC)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)、卡氮芥(BCNU... 目的探讨人乳腺癌细胞化疗敏感性与多药耐药相关基因和凋亡调控基因表达的关系。方法MTT法检测5株人乳腺癌细胞株Bcap37、MCF-7、T47D、MDA-MB-231和MDA-MB-435对阿霉素(ADM)、顺铂(DDP)、丝裂霉素(MMC)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)、卡氮芥(BCNU)的敏感性。流式细胞术检测多药耐药基因P-糖蛋白(P-GP)、谷胱甘肽-S-转移酶-π(GST-π)、肺耐药蛋白(LRP)、多药耐药相关蛋白(MRP)和甲基鸟嘌呤甲基转移酶(MGMT)等耐药相关基因和凋亡调控基因FAS、BCL-2、P53和P16的表达。结果不同人乳腺癌细胞株对同一药物敏感性差异较大。相关分析表明,细胞株对5-Fu的敏感性与P16表达呈正相关(P<0.01),对其余药物的敏感性与所检基因的表达水平无关。结论人乳腺癌细胞株对5-Fu的敏感性与P16表达有关。 展开更多
关键词 乳腺癌细胞株 流式细胞术 化疗敏感性 多药耐药相关基因 凋亡调控基因
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耐异烟肼结核分枝杆菌临床分离株耐药相关基因突变研究 被引量：44
10
作者 陈曦 马玙 +3 位作者 金奇 姜广路 李传友 王庆 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期250-253,共4页
目的阐明结核分枝杆菌耐异烟肼临床分离株katG、inhA、ahpC、kasA及oxyR基因突变特点。方法对144株结核分枝杆菌临床分离株(耐异烟肼菌株101株;异烟肼敏感株43株)的katG、inhA、kasA、ahpC及oxyR基因进行DNA片断扩增及DNA序列分析,与Gen... 目的阐明结核分枝杆菌耐异烟肼临床分离株katG、inhA、ahpC、kasA及oxyR基因突变特点。方法对144株结核分枝杆菌临床分离株(耐异烟肼菌株101株;异烟肼敏感株43株)的katG、inhA、kasA、ahpC及oxyR基因进行DNA片断扩增及DNA序列分析,与GeneBank中结核分枝杆菌标准序列进行比较。结果(1)耐异烟肼菌株中未发现katG完全缺失,81株耐药株(80.2%)katG存在点突变、缺失或插入,其中16个突变位点未见报道;39株(38.6%)耐药株第315位点突变,低耐药菌株(1μg/ml)第315位点突变率显著高于高耐药菌株(10μg/ml;χ2=9.31,P<0.05);58株(57.4%)耐药株第463位点突变。23株(53.3%)敏感株第463位点突变。(2)5株(4.9%)耐药株inhA发生突变。敏感株inhA无突变。(3)3株(2.9%)耐药株ahpC发生突变。敏感株ahpC无突变。(4)17株(16.8%)耐药株kasA发生突变。敏感株中3株菌株Gly312Ser突变。(5)在全部菌株中未发现oxyR基因突变。(6)综合本项研究中各基因的突变情况,共有91株耐异烟肼菌株发生与异烟肼耐药相关的突变。结论本项研究进一步证实了结核分枝杆菌耐异烟肼与katG、inhA、ahpC及kasA基因突变之间的关系,并且提示还有其他机制参与异烟肼耐药。 展开更多
关键词 临床分离株 耐异烟肼结核分枝杆菌 耐药相关基因 突变研究 DNA序列分析 INHA AHPC katG 基因突变 oxyR基因 位点突变 耐药菌株 耐药株 敏感株 DNA片断 突变位点 未发现 突变率 缺失
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铜绿假单胞菌亚胺培南及消毒剂耐药相关基因研究 被引量：14
11
作者 黄支密 糜祖煌 +5 位作者 诸葛青云 秦玲 邹玉秀 熊春林 沈娟 王春新 《江西医学检验》 2005年第2期97-100,共4页
目的了解临床分离的对亚胺培南耐药铜绿假单胞菌中金属β内酰胺酶基因(blaIMP和blaVIM)、外膜孔蛋白D2(OprD2)基因(oprD)、消毒剂-磺胺耐药相关基因(qacE△1-sulⅠ)存在状况。方法采用ATBPSE5药敏试验条板微量肉汤法测定28株铜绿假单胞... 目的了解临床分离的对亚胺培南耐药铜绿假单胞菌中金属β内酰胺酶基因(blaIMP和blaVIM)、外膜孔蛋白D2(OprD2)基因(oprD)、消毒剂-磺胺耐药相关基因(qacE△1-sulⅠ)存在状况。方法采用ATBPSE5药敏试验条板微量肉汤法测定28株铜绿假单胞菌对14种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应(PCR)技术及序列分析的方法检测耐药基因。结果该28株铜绿假单胞菌对亚胺培南、氨苄西林/舒巴坦、庆大霉素、妥布霉素和复方新诺明均完全耐药,对哌拉西林/他唑巴坦的敏感率最高为64.3%,其余的耐药率在57.1%～92.9%之间。28株Pa中blaIMP和blaVIM基因均阴性,25株(89.3%)oprD基因缺失,24株(85.7%)qacE△1-sulI基因阳性。结论浙江湖州解放军第98医院临床分离的对亚胺培南耐药铜绿假单胞菌多重耐药严重,oprD基因缺失是其对亚胺培南耐药的重要原因,qacE△1-sulⅠ基因携带率很高。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 亚胺培南 相关基因研究 消毒剂 聚合酶链反应(PCR) 金属β内酰胺酶基因 哌拉西林/他唑巴坦 氨苄西林/舒巴坦 耐药相关基因 blaIMP 临床分离 基因缺失 外膜孔蛋白 复方新诺明 基因携带率 耐药基因 序列分析
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铜绿假单胞菌耐药性的基因学研究进展 被引量：15
12
作者 郑璇儿 杨杰 《中华实验和临床感染病杂志（电子版）》 CAS 2014年第1期111-113,共3页
铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa，PA）又称绿脓杆菌，是引起急性或慢性感染的最常见的条件致病菌之一，由其引起的院内感染往往治疗难度极大，几乎具有目前已知的细菌主要耐药机制，已成为引起院内获得性肺炎多重耐药革兰阴性菌... 铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa，PA）又称绿脓杆菌，是引起急性或慢性感染的最常见的条件致病菌之一，由其引起的院内感染往往治疗难度极大，几乎具有目前已知的细菌主要耐药机制，已成为引起院内获得性肺炎多重耐药革兰阴性菌的代表[1-2]。PA感染是治疗的难题，归其原因，在于其广泛而多重的耐药性。因此，了解铜绿假单胞菌的耐药相关基因的情况，有助于临床研发更有效的治疗铜绿假单胞菌感染性疾病的抗菌药物。PA的耐药机制概括起来主要有以下几个方面：各种外排泵系统的过度表达、外膜通透性的降低、药物作用靶位的改变、氨基糖苷类修饰酶的产生、细菌生物被膜形成以及产生抗菌药物灭活酶等。由于这些机制可以共存，故PA往往具有多重耐药性。本文主要对上述几种耐药机制的相关耐药基因的进展作一综述。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 多重耐药性 PSEUDOMONAS 基因学 氨基糖苷类修饰酶 院内获得性肺炎 耐药机制 耐药相关基因
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铜绿假单胞菌亚胺培南耐药相关基因的研究 被引量：14
13
作者 王春新 糜祖煌 +1 位作者 谢国强 秦玲 《现代实用医学》 2003年第9期543-544,550,共3页
目的 研究铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的遗传学机制。方法 建立检测铜绿假单胞菌编码IMP型金属酶基因和外膜蛋白OprD_2基因的PCR法,探讨临床分离的16株纸片协同法产金属酶的铜绿假单胞菌中产金属酶和外膜蛋白OprD_2的缺失与亚胺培南耐... 目的 研究铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的遗传学机制。方法 建立检测铜绿假单胞菌编码IMP型金属酶基因和外膜蛋白OprD_2基因的PCR法,探讨临床分离的16株纸片协同法产金属酶的铜绿假单胞菌中产金属酶和外膜蛋白OprD_2的缺失与亚胺培南耐药的关系。结果 16株产金属酶铜绿假单胞菌IMP基因扩增7株呈阳性,9株阴性;OprD_2基因扩增11株呈阴性,5株呈阳性;11株菌既产金属酶,又存在外膜蛋白OprD_2基因突变。结论 产金属酶和外膜蛋白OprD_2的缺失是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的重要机制,并可同时并存。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 亚胺培南 耐药相关基因 研究
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肺癌耐药相关基因及逆转耐药策略的研究进展 被引量：9
14
作者 周承志 徐军 《国外医学（呼吸系统分册）》 2002年第1期30-32,34,共4页
肿瘤的耐药性,特别是在肺癌,一直是影响化疗效果的一大难题。随着现代分子生物学技术的发展,发现耐药性的产生主要与肿瘤细胞表达各种耐药相关基因有关,本文拟就目前肺癌耐药相关基因及其逆转耐药的方法的研究进展作一综述。
关键词 肺癌 耐药相关基因 耐药逆转 基因表达 治疗策略
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卵巢癌细胞IL-6、IL-8分泌与其化疗敏感性及耐药相关基因和凋亡抑制基因表达关系的初步探讨 被引量：11
15
作者 王越 牛秀珑 +5 位作者 郭小芹 吴健 朱雅琴 毛立群 屈野 李覃 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期436-441,共6页
目的分析比较4种常见的人上皮性卵巢癌细胞系IL-6、IL-8分泌与其化疗敏感性及部分耐药相关基因和凋亡抑制基因表达的关系,为今后研究IL-6、IL-8诱导卵巢癌细胞对化疗药物产生耐药的机制奠定基础。方法IL-6、IL-8及其受体的表达采用RT-PC... 目的分析比较4种常见的人上皮性卵巢癌细胞系IL-6、IL-8分泌与其化疗敏感性及部分耐药相关基因和凋亡抑制基因表达的关系,为今后研究IL-6、IL-8诱导卵巢癌细胞对化疗药物产生耐药的机制奠定基础。方法IL-6、IL-8及其受体的表达采用RT-PCR、ELISA及免疫印迹技术进行检测,卵巢癌细胞对顺铂和紫杉醇的敏感性采用MTT试验进行分析,耐药相关基因和凋亡抑制基因的表达则采用RT-PCR进行测定。结果1)4种卵巢癌细胞除A2780细胞外均组成性分泌IL-6和IL-8,二者转录水平与其蛋白水平基本一致。2)4种卵巢癌细胞均表达IL-6受体和IL-8受体。3)4种卵巢癌细胞对顺铂和紫杉醇的敏感性不同,其中A2780细胞最敏感,ES-2细胞次之,CAOV-3和SKOV-3细胞则有不同程度的耐药性。4)部分耐药相关基因和凋亡抑制基因在A2780和ES-2细胞中的表达水平均较低,而在CAOV-3和SKOV-3细胞中的表达水平均较高。结论卵巢癌细胞IL-6、IL-8的自分泌水平(尤其是IL-6的水平)与其对顺铂和紫杉醇的敏感性基本呈负相关趋势,与其部分耐药相关基因和凋亡抑制基因的表达水平相一致。 展开更多
关键词 IL-6 IL-8 卵巢癌细胞 化疗敏感性 耐药相关基因 凋亡抑制基因
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天津市耐异烟肼或利福平的结核分枝杆菌相关基因突变特征 被引量：10
16
作者 李桂莲 谢彤 +4 位作者 巨韩芳 穆成 赵慧 赵德福 王撷秀 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期460-461,共2页
目前已知多个基因突变与MTB对异烟肼和利福平的耐药有关,但是不同的基因密码子突变率存在地区差异.为此,我们检测了天津市结核病患者异烟肼耐药株katG和inhA启动子以及利福平耐药株rpoB的突变情况,探讨其耐药相关基因的突变特征及基因... 目前已知多个基因突变与MTB对异烟肼和利福平的耐药有关,但是不同的基因密码子突变率存在地区差异.为此,我们检测了天津市结核病患者异烟肼耐药株katG和inhA启动子以及利福平耐药株rpoB的突变情况,探讨其耐药相关基因的突变特征及基因突变与耐药表型的相关性. 展开更多
关键词 耐药相关基因 突变特征 耐异烟肼 结核分枝杆菌 利福平 天津市 基因突变 结核病患者
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国内2003～2007年铜绿假单胞菌耐药相关基因研究进展 被引量：7
17
作者 糜祖煌 秦玲 《现代实用医学》 2008年第6期413-415,共3页
铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa,PA）广泛分布于自然界及健康人的皮肤、肠道和呼吸道。PA菌是条件致病菌,已是医院感染病原菌最常见菌种之一。国内首篇PA菌抗菌药物耐药相关基因报道已有6年，近5年来PA菌耐药相关基因研究有了不... 铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa,PA）广泛分布于自然界及健康人的皮肤、肠道和呼吸道。PA菌是条件致病菌,已是医院感染病原菌最常见菌种之一。国内首篇PA菌抗菌药物耐药相关基因报道已有6年，近5年来PA菌耐药相关基因研究有了不少进展。现综述如下。 展开更多
关键词 耐药相关基因 铜绿假单胞菌 基因研究进展 国内 医院感染病原菌 条件致病菌 常见菌种 抗菌药物
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应用基因芯片技术筛选卵巢癌紫杉醇耐药差异表达基因 被引量：5
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作者 张文晶 李红霞 +1 位作者 宋磊 张素梅 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期32-35,共4页
目的应用基因芯片技术研究人卵巢癌紫杉醇耐药细胞株OC3/Tax300与其亲本细胞OC3(敏感株)之间的基因表达谱差异,筛选耐药相关基因,探讨基因表达谱差异与卵巢癌肿瘤耐药之间相关性。方法分别提取C3/Tax300与OC3细胞的总RNA并纯化mRNA;将... 目的应用基因芯片技术研究人卵巢癌紫杉醇耐药细胞株OC3/Tax300与其亲本细胞OC3(敏感株)之间的基因表达谱差异,筛选耐药相关基因,探讨基因表达谱差异与卵巢癌肿瘤耐药之间相关性。方法分别提取C3/Tax300与OC3细胞的总RNA并纯化mRNA;将等量的mRNA逆转录,以Cy5和Cy3标记的cDNA做探针,在Biostar H140S基因表达谱芯片上进行杂交。扫描芯片荧光信号图像,用基因图像分析软件对扫描图像进行数字化处理和分析。结果共筛选出显著表达差异基因134条,其中117种基因表达水平下调,17种基因表达上调,主要涉及细胞信号蛋白和传递蛋白,蛋白翻译合成类以及细胞骨架和运动、离子通道和运输蛋白、代谢、发育等14大类相关基因。下调基因主要为EBNA-3、COP9、StIP1,上调的基因主要是JAK2、HSPS、NADH等。结论这些基因表达差异与卵巢癌化疗耐药有关。 展开更多
关键词 基因芯片 卵巢癌 耐药相关基因
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肺癌耐药相关基因在肺癌组织和肺癌细胞株中的表达 被引量：7
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作者 刘凌志 钱桂生 周向东 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第2期171-174,共4页
背景与目的:我们已经通过抑制消减杂交技术发现了一条新的长494bp的肺癌耐药相关基因片段,并克隆了它的全长cDNA序列。本研究旨在研究该肺癌耐药相关基因(lungcancerdrugresistance-relatedgene,LCDRG)在肺癌组织、癌旁组织及5种肺癌细... 背景与目的:我们已经通过抑制消减杂交技术发现了一条新的长494bp的肺癌耐药相关基因片段,并克隆了它的全长cDNA序列。本研究旨在研究该肺癌耐药相关基因(lungcancerdrugresistance-relatedgene,LCDRG)在肺癌组织、癌旁组织及5种肺癌细胞株中的表达。方法:应用半定量RT-PCR检测38例肺癌组织、12例癌旁组织和5种肺癌细胞株中该基因的表达。结果:肺癌组织中LCDRGmRNA的表达明显高于癌旁组织(P<0.001),但在肺腺癌和鳞癌之间差异无统计学意义。该基因在肺腺癌细胞株SPC-A-1和A549、大细胞肺癌细胞株H460、小细胞肺癌细胞株H446和SH77中的表达依次递减。结论:LCDRG是一条肺癌相关基因,该基因可能与肺癌的发生、发展密切相关。 展开更多
关键词 肺癌 耐药相关基因 半定量RT-PCR 基因表达
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去甲斑蝥酸钠对耐顺铂肺腺癌A549/DDP细胞耐药相关基因表达的影响 被引量：8
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作者 蒋亦燕 尹丽慧 +1 位作者 费正华 陈素秀 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期37-40,共4页
目的:研究去甲斑蝥酸钠(SNCTD)对耐顺铂人肺腺癌细胞系A549/DDP的逆转作用及其对耐顺铂细胞耐药相关基因表达的影响。方法:采用CCK法筛选出SNCTD对A549/DDP的无毒浓度,并检测出顺铂及与无毒浓度SNCTD联合对耐药细胞株的IC50;采用逆转录... 目的:研究去甲斑蝥酸钠(SNCTD)对耐顺铂人肺腺癌细胞系A549/DDP的逆转作用及其对耐顺铂细胞耐药相关基因表达的影响。方法:采用CCK法筛选出SNCTD对A549/DDP的无毒浓度,并检测出顺铂及与无毒浓度SNCTD联合对耐药细胞株的IC50;采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测1、2倍无毒浓度SNCTD处理细胞48h、72h后耐药相关基因mdr1mRNA,MRP1mRNA,GST-PimRNA,ERCC1mRNA表达。结果:SNCTD对A549/DDP的无毒浓度为5μg/ml,与顺铂联合用药降低A549/DDP的耐药性,逆转倍数为1.97;1、2倍无毒浓度SNCTD处理耐药细胞后mdr1,MRP1mRNA表达明显减低(P(0.05),并具有浓度依赖性,而GST-Pi,ERCC1mRNA表达无明显浓度和时间依赖性(P>0.05)。结论:SNCTD对A549/DDP具有耐药逆转作用,其作用机制可能与下调耐药相关基因mdr1,MRP1的表达,影响膜蛋白外排泵功能有关。 展开更多
关键词 去甲斑蝥酸钠 A549/DDP细胞 逆转 耐药相关基因
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