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牛溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆菌A型、B型的比较鉴定研究
被引量:
17
1
作者
谢倩茹
姜鹏
+7 位作者
彭清洁
赖金伦
刘玉辉
童胜涛
邵咏旋
陈颖钰
胡长敏
郭爱珍
《中国奶牛》
2015年第14期48-54,共7页
本研究旨在比较牛溶血性曼氏杆菌(M.haemolytica)和牛多杀性巴氏杆菌(P.multocida)A型、B型生理生化特性和PCR鉴定方法,为临床上述三种细菌的分离鉴定提供指导。培养牛溶血性曼氏杆菌、牛多杀性巴氏杆菌A型、B型菌,分别开展革兰氏...
本研究旨在比较牛溶血性曼氏杆菌(M.haemolytica)和牛多杀性巴氏杆菌(P.multocida)A型、B型生理生化特性和PCR鉴定方法,为临床上述三种细菌的分离鉴定提供指导。培养牛溶血性曼氏杆菌、牛多杀性巴氏杆菌A型、B型菌,分别开展革兰氏染色镜检、生化鉴定、生长曲线测定、致病性检测和PCR鉴定。P.multocida A型、B型血平板培养基上P.multocida不溶血、M.haemolytica溶血,在麦康凯培养基上P.multocida不生长、M.haemolytica生长良好;三株细菌在生化特性方面基本相同,但P.multocida能形成靛基质、不发酵肝糖和肌醇,M.haemolytica不能形成靛基质、可分解肝糖和肌醇。三株细菌生长趋势大致相同,均于2~4h进入稳定期,18~20h开始衰退。小鼠感染低至5个P.multocida A型、B型菌可致死,M.haemolytica原液仍不能致死小鼠。所设计各菌株PCR引物能快速鉴定P.multocida A型、B型和M.haemolytica。P.multocida A型、B型和M.haemolytica在部分培养特性、生理生化特征、致病力及PCR鉴定方面存在显著差异。
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关键词
牛
溶血
性
曼
氏杆菌
多
杀
性
巴
氏杆菌
A
型
多
杀
性
巴
氏杆菌
B
型
比较鉴定
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职称材料
牛支原体、巴氏杆菌A型和化脓隐秘杆菌多重PCR快速检测方法的建立
被引量:
8
2
作者
肖淦文
陈颖钰
+5 位作者
彭清洁
胡长敏
崔朋
巴晓亮
陈焕春
郭爱珍
《中国奶牛》
2012年第21期4-9,共6页
本试验旨在建立一种可同时鉴别牛支原体、巴氏杆菌A型和化脓隐秘杆菌的多重PCR方法。分别针对多杀性巴氏杆菌A型特异的hyaC—hyaD基因区段、化脓隐秘杆菌的16S rRNA基因上保守区段和牛支原体的UvrC基因设计特异性引物,多重PCR的最佳扩...
本试验旨在建立一种可同时鉴别牛支原体、巴氏杆菌A型和化脓隐秘杆菌的多重PCR方法。分别针对多杀性巴氏杆菌A型特异的hyaC—hyaD基因区段、化脓隐秘杆菌的16S rRNA基因上保守区段和牛支原体的UvrC基因设计特异性引物,多重PCR的最佳扩增条件确定为:95℃10min预变性;95℃1min,56℃50s,72℃1min,循环30次;72℃10min延伸。结果表明,该多重PCR方法可同时扩增出以上三种致病菌的特异性片段,不能扩增出其他病原菌的相关片段;对多杀性巴氏杆菌A型、化脓隐秘杆菌和牛支原体的最低检测浓度分别为8×105CFU/mL、8×105CFU/mL和4×106CFU/mL。同时用该方法检测了牛支原体肺炎患牛的鼻拭子与肺组织,发现12h预增菌后,肺组织检测与牛支原体培养的阳性符合率为92%。对临床样本进行牛支原体分离培养需要3~4d时间,而采用多重PCR方法检测12h预增菌则能在24h内出结果。该多重PCR方法显著加快了临床诊断速度,具有推广应用价值。
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关键词
多
重PCR
牛支原体
多
杀
性
巴
氏杆菌
A
型
化脓隐秘
杆菌
牛呼吸疾病综合征
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职称材料
题名
牛溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆菌A型、B型的比较鉴定研究
被引量:
17
1
作者
谢倩茹
姜鹏
彭清洁
赖金伦
刘玉辉
童胜涛
邵咏旋
陈颖钰
胡长敏
郭爱珍
机构
华中农业大学动物医学院
出处
《中国奶牛》
2015年第14期48-54,共7页
基金
国家肉牛/牦牛产业技术体系(nycytx-38)
宁夏肉牛呼吸疾病综合症及皮肤病防控技术研究与示范(2012ZDN0903)
+1 种基金
中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(2662015PY054)
湖北省自然科学基金项目(2015CFB435)
文摘
本研究旨在比较牛溶血性曼氏杆菌(M.haemolytica)和牛多杀性巴氏杆菌(P.multocida)A型、B型生理生化特性和PCR鉴定方法,为临床上述三种细菌的分离鉴定提供指导。培养牛溶血性曼氏杆菌、牛多杀性巴氏杆菌A型、B型菌,分别开展革兰氏染色镜检、生化鉴定、生长曲线测定、致病性检测和PCR鉴定。P.multocida A型、B型血平板培养基上P.multocida不溶血、M.haemolytica溶血,在麦康凯培养基上P.multocida不生长、M.haemolytica生长良好;三株细菌在生化特性方面基本相同,但P.multocida能形成靛基质、不发酵肝糖和肌醇,M.haemolytica不能形成靛基质、可分解肝糖和肌醇。三株细菌生长趋势大致相同,均于2~4h进入稳定期,18~20h开始衰退。小鼠感染低至5个P.multocida A型、B型菌可致死,M.haemolytica原液仍不能致死小鼠。所设计各菌株PCR引物能快速鉴定P.multocida A型、B型和M.haemolytica。P.multocida A型、B型和M.haemolytica在部分培养特性、生理生化特征、致病力及PCR鉴定方面存在显著差异。
关键词
牛
溶血
性
曼
氏杆菌
多
杀
性
巴
氏杆菌
A
型
多
杀
性
巴
氏杆菌
B
型
比较鉴定
Keywords
Cattle
Mannheimia haemolytica
Pasteurella multocida type A
Pasteurella multocida type B
Comparative identification
分类号
S858.23 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
牛支原体、巴氏杆菌A型和化脓隐秘杆菌多重PCR快速检测方法的建立
被引量:
8
2
作者
肖淦文
陈颖钰
彭清洁
胡长敏
崔朋
巴晓亮
陈焕春
郭爱珍
机构
华中农业大学农业微生物学国家重点实验室
华中农业大学动物医学院
华中农业大学动物科技学院
武汉科前动物生物制品有限公司
出处
《中国奶牛》
2012年第21期4-9,共6页
基金
农业公益性行业科研专项(201003060)
现代农业(肉牛牦牛)产业技术体系(CARS-38)专项资金
文摘
本试验旨在建立一种可同时鉴别牛支原体、巴氏杆菌A型和化脓隐秘杆菌的多重PCR方法。分别针对多杀性巴氏杆菌A型特异的hyaC—hyaD基因区段、化脓隐秘杆菌的16S rRNA基因上保守区段和牛支原体的UvrC基因设计特异性引物,多重PCR的最佳扩增条件确定为:95℃10min预变性;95℃1min,56℃50s,72℃1min,循环30次;72℃10min延伸。结果表明,该多重PCR方法可同时扩增出以上三种致病菌的特异性片段,不能扩增出其他病原菌的相关片段;对多杀性巴氏杆菌A型、化脓隐秘杆菌和牛支原体的最低检测浓度分别为8×105CFU/mL、8×105CFU/mL和4×106CFU/mL。同时用该方法检测了牛支原体肺炎患牛的鼻拭子与肺组织,发现12h预增菌后,肺组织检测与牛支原体培养的阳性符合率为92%。对临床样本进行牛支原体分离培养需要3~4d时间,而采用多重PCR方法检测12h预增菌则能在24h内出结果。该多重PCR方法显著加快了临床诊断速度,具有推广应用价值。
关键词
多
重PCR
牛支原体
多
杀
性
巴
氏杆菌
A
型
化脓隐秘
杆菌
牛呼吸疾病综合征
Keywords
Multiple PCR
Mycoplasma bovis
Pasteurella multocida type A
Arcanobacterium pyogenes
Bovinerespiratory disease complex
分类号
S858.23 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
牛溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆菌A型、B型的比较鉴定研究
谢倩茹
姜鹏
彭清洁
赖金伦
刘玉辉
童胜涛
邵咏旋
陈颖钰
胡长敏
郭爱珍
《中国奶牛》
2015
17
下载PDF
职称材料
2
牛支原体、巴氏杆菌A型和化脓隐秘杆菌多重PCR快速检测方法的建立
肖淦文
陈颖钰
彭清洁
胡长敏
崔朋
巴晓亮
陈焕春
郭爱珍
《中国奶牛》
2012
8
下载PDF
职称材料
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