基于线粒体cox1和Cyt b基因对四川地区多头带绦虫的种群遗传多样性研究 被引量：20

1

作者 郝桂英 杨应东 +1 位作者 周英姿 杨光友 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期631-638,共8页

为研究四川地区多头带绦虫的种群遗传多样性和系统发生关系,用线粒体cox1基因和Cyt b基因全序列分析了20株四川山羊源多头蚴(11株寄生于脑,9株寄生于肌间)的遗传变异,并构建了系统发育树。结果显示:20株多头蚴cox1和Cyt b基因全序列长... 为研究四川地区多头带绦虫的种群遗传多样性和系统发生关系,用线粒体cox1基因和Cyt b基因全序列分析了20株四川山羊源多头蚴(11株寄生于脑,9株寄生于肌间)的遗传变异,并构建了系统发育树。结果显示:20株多头蚴cox1和Cyt b基因全序列长度分别为1 623和1 068bp,分别有59个和9个变异位点,其碱基变异率分别为0.1%~2.5%和0.1%~0.7%;分别检测到17个和6个单倍型,总的单倍型多样性分别为0.968±0.033和0.737±0.068,核苷酸多样性分别为0.005 98±0.001 33和0.003 06±0.000 79,平均遗传距离分别为0.006和0.003。构建的系统进化树均显示来源于脑部和肌间的20株四川山羊源多头蚴与多头带绦虫同在一个支系,均为多头带绦虫,且多头带绦虫四川分离株与伊朗、土耳其分离株亲缘关系较近,而与中国甘肃、中国广州、意大利分离株亲缘关系较远。研究结果表明线粒体cox1和Cyt b基因均可作为检测多头带绦虫种群遗传多样性的有效分子标记,且Cyt b基因的多样性水平低于cox1基因。 展开更多

关键词 多头带绦虫 cox1基因 CYT B基因 遗传多样性 四川

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脑多头蚴病研究进展 被引量：16

2

作者 李文卉 付宝权 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第10期87-91,共5页

脑多头蚴病是由多头带绦虫的中绦期幼虫脑多头蚴寄生于绵羊、山羊、黄牛、牦牛等有蹄动物的脑及脊髓中引起的一种人兽共患寄生虫病,人可因误食虫卵而感染此病。该病在宿主出现典型临床症状后如果得不到治疗,多以死亡为转归,给畜牧业生... 脑多头蚴病是由多头带绦虫的中绦期幼虫脑多头蚴寄生于绵羊、山羊、黄牛、牦牛等有蹄动物的脑及脊髓中引起的一种人兽共患寄生虫病,人可因误食虫卵而感染此病。该病在宿主出现典型临床症状后如果得不到治疗,多以死亡为转归,给畜牧业生产造成了巨大的经济损失。论文就脑多头蚴病的病原学、生活史、流行病学、临床症状、诊断、治疗及免疫预防等方面的研究进展进行了综述。 展开更多

关键词 脑多头蚴病 多头带绦虫 脑多头蚴

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多头带绦虫四川株的生物学特性 被引量：6

3

作者 牟静 杨应东 +6 位作者 杨光友 王颖旺 安晓雪 古小彬 边尧 付彦 王淑贤 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期895-899,共5页

通过对2只试验犬在人工感染脑多头蚴后节片排出情况和对随机选取的50个孕卵节片内虫卵数量与大小的观察,以及用终浓度为10g/L次氯酸钠溶液,在显微镜下对虫卵孵化过程的观察,期望能为动物脑包虫病预防措施的制定以及进一步开展该虫的相... 通过对2只试验犬在人工感染脑多头蚴后节片排出情况和对随机选取的50个孕卵节片内虫卵数量与大小的观察,以及用终浓度为10g/L次氯酸钠溶液,在显微镜下对虫卵孵化过程的观察,期望能为动物脑包虫病预防措施的制定以及进一步开展该虫的相关研究奠定基础。结果显示,2只试验犬分别在感染后的第45、50d开始排出节片且试验犬体内孕卵节片排出的持续时间分别为142d和54d,每日排节片数最高可达64片;孕卵节片内虫卵数最少约为780枚,最多约为16 035枚,平均为5 278.800±3 696.769枚,虫卵数量主要集中在2 000～6 000范围内,共占总节片数的52%;虫卵大小为(33.74±2.71)μm×(32.33±2.09)μm;虫卵的整个孵化过程大致需要4～5min,且随着孵化时间的延长虫卵原有的外形和整个胚膜结构消失,可见透明的六钩蚴。 展开更多

关键词 多头带绦虫 脑多头蚴 孕节 孵化

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多头带绦虫甘肃分离株分子COⅠ基因部分序列比较分析 被引量：6

4

作者 李文卉 盖文燕 +5 位作者 姚菊霞 曲自刚 贾万忠 罗建勋 R. Blaga 付宝权 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2010年第3期129-134,共6页

应用线粒体DNA中的细胞色素c氧化酶亚基I（COI）基因作为分子标记,对我国甘肃省景泰和平凉地区10个绵羊源脑多头蚴进行分析,与已知带属绦虫种的相应序列进行相似性比较,下载GenBank数据库的带属绦虫COI基因片段序列构建系统进化树,分析... 应用线粒体DNA中的细胞色素c氧化酶亚基I（COI）基因作为分子标记,对我国甘肃省景泰和平凉地区10个绵羊源脑多头蚴进行分析,与已知带属绦虫种的相应序列进行相似性比较,下载GenBank数据库的带属绦虫COI基因片段序列构建系统进化树,分析其分类及亲缘关系.结果表明,所有多头带绦虫分离株均成功扩增出444 bp的COI基因片段,去除引物序列后多头带绦虫分离株的COI基因片段为396 bp,可以分为4类,共有5个核苷酸变异位点,变异率为0.25%～1.26%.基于COI核苷酸序列的系统进化树表明所有T.multiceps分离株构成一个分支,可分为2个亚群.T.multiceps与T.krabbei 的亲缘关系最近,其次为T.serialis,T.asiatica,T.saginata,与T.ovis等其他带属绦虫关系较远,与T.mustelae关系最远.COI基因序列在种内相对保守,又存在一定的种间差异,可作为带属绦虫分类鉴定研究的分子标记. 展开更多

关键词 多头带绦虫 脑多头蚴 COI 序列分析 系统进化

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湖南省山羊脑多头蚴的线粒体nad1和nad4基因的序列测定及种系发育分析 被引量：6

5

作者 何德肆 徐平源 彭运潮 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1763-1767,共5页

本研究旨在阐明脑多头蚴湖南分离株线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位1基因(nad1)部分序列(pnad1)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位4基因(nad4)部分序列(pnad4)的遗传变异情况,并用pnad1和pnad4序列重构脑多头蚴... 本研究旨在阐明脑多头蚴湖南分离株线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位1基因(nad1)部分序列(pnad1)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位4基因(nad4)部分序列(pnad4)的遗传变异情况,并用pnad1和pnad4序列重构脑多头蚴与其它带科绦虫的种群遗传关系。利用聚合酶链反应(PCR)扩增脑多头蚴的pnad1和pnad4,应用ClustalX 1.81程序对序列进行比对,再用Phylip3.67程序MP法和Mage4.0程序NJ法绘制种系发育树,并用Puzzle5.2程序构建最大似然树,同时利用DNAstar5.0中的Megalign程序进行同源性分析。结果显示所获得的pnad1和pnad4序列长度分别均为666和887bp,湖南分离株与已知多头带绦虫位于同一分枝。由于脑多头蚴pnad1和pnad4序列种内相对保守,种间差异较大,故均可作为种间遗传变异研究的标记,从而为脑多头蚴的分子流行病学和其相关疾病的诊断奠定基础。 展开更多

关键词 多头带绦虫 线粒体DNA nad1基因 nad4基因 种系发育关系

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青海西宁地区不同宿主棘球蚴和多头蚴感染情况调查 被引量：1

6

作者 高明艳 葛生虎 +2 位作者 文生萍 游潇倩 钱俊栋 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期404-408,共5页

目的调查西宁市不同宿主(牛、羊和犬)棘球蚴和多头蚴感染情况。方法于2020—2021年检查西宁市部分地区牛羊屠宰点1024头份内脏(肺脏和肝脏)和胴体是否存在囊肿,并统计囊肿阳性率;对屠宰点附近46只家犬药物驱虫,统计细粒棘球绦虫和多头... 目的调查西宁市不同宿主(牛、羊和犬)棘球蚴和多头蚴感染情况。方法于2020—2021年检查西宁市部分地区牛羊屠宰点1024头份内脏(肺脏和肝脏)和胴体是否存在囊肿,并统计囊肿阳性率;对屠宰点附近46只家犬药物驱虫,统计细粒棘球绦虫和多头带绦虫感染情况。应用PCR法对57个绦虫(蚴)分离株线粒体细胞色素I基因序列(cox1)进行扩增、测序与分析。结果52份牛羊内脏或胴体存在囊肿,平均检出率为5.08%(95%CI:3.94%~7.00%),其中牛和羊检出率分别为3.38%(95%CI:0.89%~5.86%)和5.51%(95%CI:3.94%~7.08%);共5只犬粪便中存在绦虫或节片,平均检出率为10.87%(95%CI:1.52%~20.21%)。57个虫株cox1序列长度基本一致,为420~426 bp,其中,序列分析发现51个虫株为细粒棘球绦虫,均为G1基因型,其序列相似性为99.94%~100.00%,与已知细粒棘球绦虫分离株(AB271235和KX527915)序列相似性为99.93%~100.00%;6个虫株为多头带绦虫,序列相似性为99.40%~100.00%,与已知多头带绦虫分离株(MZ348363)序列相似性为99.20%~99.80%。结论西宁地区牛羊细粒棘球绦虫和多头带绦虫的流行情况较严重,应引起足够的重视。 展开更多

关键词 不同宿主 细粒棘球绦虫 多头带绦虫 感染情况 分子鉴定

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多头带绦虫TPx基因片段的克隆及原核表达 被引量：4

7

作者 李永光 李文卉 +8 位作者 李航 盖文燕 王鸿盛 姚菊霞 王艳华 张德林 贾万忠 Radu Blaga 付宝权 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期251-256,共6页

从自然感染的病羊脑内采集多头蚴原头节,提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶(TmTPx)基因片段,PCR产物连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5α后测序,发现克隆到的TmTPx基因片段开放阅读框为453 bp,编码150个... 从自然感染的病羊脑内采集多头蚴原头节,提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶(TmTPx)基因片段,PCR产物连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5α后测序,发现克隆到的TmTPx基因片段开放阅读框为453 bp,编码150个氨基酸。对TmTPx基因片段进行限制性酶切后连接到表达载体pGEX-4T-1,构建重组表达质粒pGEX-4T-TmTPx,转化大肠杆菌DH5α后筛选阳性克隆,经限制性酶切分析、PCR及测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21,以IPTG进行诱导表达,用SDS-PAGE分析表达产物。结果显示,成功表达了大小约为43 ku的融合蛋白。对表达产物纯化后免疫家兔,采集血清用ELISA测定抗体效价,发现兔抗TmTPx重组蛋白的抗体能够与多头蚴原头节抗原发生特异性反应,说明该重组蛋白具有较好的免疫原性。 展开更多

关键词 多头带绦虫 多头蚴 硫氧还蛋白过氧化物酶 重组蛋白 免疫原性

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应用TmAdh3重组蛋白建立绵羊脑多头蚴病间接ELISA诊断方法的研究

8

作者 刘垠鞠 李文卉 +6 位作者 岳龙 张念章 金启旺 秦洪涛 贾万忠 姚强 付宝权 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1082-1088,共7页

为评价多头带绦虫TmAdh3重组蛋白作为脑多头蚴病诊断抗原的潜力,根据多头带绦虫TmAdh3基因组序列,人工优化合成TmAdh3基因ORF序列并连接至表达载体pGEX-4T-1,转化至大肠杆菌BL21中诱导表达,利用Western-blot分析纯化的重组蛋白的反应原... 为评价多头带绦虫TmAdh3重组蛋白作为脑多头蚴病诊断抗原的潜力,根据多头带绦虫TmAdh3基因组序列,人工优化合成TmAdh3基因ORF序列并连接至表达载体pGEX-4T-1,转化至大肠杆菌BL21中诱导表达,利用Western-blot分析纯化的重组蛋白的反应原性,优化检测条件,建立脑多头蚴病间接ELISA诊断方法并进行评价。结果显示,成功表达了分子质量大小为39.0 ku的重组蛋白rTmAdh3。间接ELISA检测的最适反应条件为:5.00μg/m L重组蛋白rTmAdh3在4℃包被过夜;1∶100稀释血清在37℃孵育30min;1∶10 000稀释的HRP标记的酶标二抗在37℃孵育45 min,底物避光显色10 min。应用建立的方法可检测到人工感染脑多头蚴后第3~8周的绵羊血清;对40份自然感染脑多头蚴的绵羊(剖检确认脑部有包囊)血清的阳性检出率为22.5%(9/40)。与细粒棘球蚴感染绵羊血清和细粒棘球蚴Eg95免疫绵羊血清交叉反应率为5%(4/80)。结果表明,本研究建立的以TmAdh3重组蛋白作为检测抗原的间接ELISA诊断方法可用于绵羊脑多头蚴感染早期的筛选。 展开更多

关键词 多头带绦虫 脑多头蚴病 TmAdh3 间接ELISA

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多头带绦虫的分类研究进展 被引量：1

9

作者 李文卉 付宝权 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1450-1454,共5页

对于寄生在中枢神经系统外的多头蚴,有人将其命名为格氏多头蚴,并且认为是区别于脑多头蚴的一个新的株或基因型;也有人将其命名为斯氏多头蚴或认为是脑多头蚴的同种异名。现就目前报道的寄生在绵羊中枢神经系统及山羊中枢神经系统外的... 对于寄生在中枢神经系统外的多头蚴,有人将其命名为格氏多头蚴,并且认为是区别于脑多头蚴的一个新的株或基因型;也有人将其命名为斯氏多头蚴或认为是脑多头蚴的同种异名。现就目前报道的寄生在绵羊中枢神经系统及山羊中枢神经系统外的多头带绦虫的分类现状进行简要综述,主要依据流行病学从传统形态学及现代分子生物学两方面进行阐述,为多头带绦虫的分类工作提供科学依据。 展开更多

关键词 多头带绦虫 格氏多头蚴 斯氏多头带绦虫 脑多头蚴

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多头带绦虫甘肃分离株线粒体NADH脱氢酶亚基Ⅰ基因片段差异分析 被引量：3

10

作者 李文卉 盖文燕 +5 位作者 姚菊霞 曲自刚 贾万忠 罗建勋 R.Blaga 付宝权 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期663-667,673,共6页

应用线粒体DNA中的NADH脱氢酶亚基Ⅰ（ND1）基因作为分子标记,对我国甘肃省景泰和平凉地区10个绵羊源脑多头蚴进行分析,构建系统进化树,分析其种内变异。结果表明,所有多头带绦虫（T.multiceps）分离株均成功扩增出约0.5 kb的ND1基因片... 应用线粒体DNA中的NADH脱氢酶亚基Ⅰ（ND1）基因作为分子标记,对我国甘肃省景泰和平凉地区10个绵羊源脑多头蚴进行分析,构建系统进化树,分析其种内变异。结果表明,所有多头带绦虫（T.multiceps）分离株均成功扩增出约0.5 kb的ND1基因片段。序列分析显示,去除引物序列后多头带绦虫的ND1基因片段长为488bp,可以分为9类,共有22个核苷酸变异位点,变异率为0.20%~2.66%。基于ND1序列的系统进化树表明所有T.multiceps分离株构成1个分支,可分为3个亚群,国内分离株分别处在不同的亚群中。国内分离株中除了与已知的遗传变异型Tm1（AY669089/Tm-JT081204/Tm-JT090331）和Tm3（DQ077820/Tm-JT080526）相同外,还存在新的遗传变异型（Tm-JT081008/Tm-JT090603/Tm-JT090115-2）,独立为一支,与其他分离株亲缘关系较远;表明ND1基因片段适合作为研究T.multiceps分离株种内变异的分子标记。 展开更多

关键词 多头带绦虫 脑多头蚴 NADH脱氢酶亚基I基因 种内变异

原文传递

多头带绦虫湖南分离株核糖体18S基因系统进化分析 被引量：3

11

作者 谭磊 王先坤 +2 位作者 周湘 孙悦 刘伟 《经济动物学报》 CAS 2016年第2期89-93,共5页

为阐明多头带绦虫湖南分离株核糖体小亚基(18S rRNA)基因序列的遗传变异情况,并用18S序列构建多头带绦虫与其他带科绦虫的种群遗传关系。利用PCR技术扩增多头带绦虫的18S基因,应用Clustal X1.81程序对序列进行比对,再利用Mega4.0程序进... 为阐明多头带绦虫湖南分离株核糖体小亚基(18S rRNA)基因序列的遗传变异情况,并用18S序列构建多头带绦虫与其他带科绦虫的种群遗传关系。利用PCR技术扩增多头带绦虫的18S基因,应用Clustal X1.81程序对序列进行比对,再利用Mega4.0程序进行NJ法绘制种系发育树。结果显示:所获得的18S基因序列长度一致,均为1 080 bp,基因序列存在一定的遗传差异。种系发育分析结果显示,所有的多头带绦虫分离株与已知多头带绦虫位于同一分支。多头带绦虫18S基因序列种内相对保守,种间差异较大,可以作为种间遗传变异研究的标记,从而为多头带绦虫的群体遗传研究奠定基础。 展开更多

关键词 多头带绦虫 核糖体rDNA 18S基因 种系发育关系

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多头带绦虫脑多头蚴cDNA表达文库的构建及初步分析 被引量：2

12

作者 李文卉 王建魁 +6 位作者 盖文燕 姚菊霞 曲自刚 贾万忠 罗建勋 RaduBlaga 付宝权 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2011年第3期139-146,共8页

从甘肃景泰羊源脑多头蚴原头节提取总RNA，以Oligo（dT）纤维素柱纯化mRNA，利用LambdaZAPIIXR文库构建试剂盒构建了脑多头蚴eDNA表达文库。从构建的原始文库随机挑选单个噬菌斑进行PCR，确定文库重组率和插入外源基因片段大小，鉴定文... 从甘肃景泰羊源脑多头蚴原头节提取总RNA，以Oligo（dT）纤维素柱纯化mRNA，利用LambdaZAPIIXR文库构建试剂盒构建了脑多头蚴eDNA表达文库。从构建的原始文库随机挑选单个噬菌斑进行PCR，确定文库重组率和插入外源基因片段大小，鉴定文库质量。结果表明脑多头蚴eDNA表达文库的原始库容量为1．0×10。pfu，扩增后文库滴度为1．6×10^9pfu／mL。随机挑选的165个噬菌斑克隆中，0．25kb以上的克隆155个，重组率为93．9％，对其中0．5kb以上的115个克隆测序共获得104个表达序列标签（EST），分析后得到96个单一EST序列（UniqueEST），其中20个EST与绦虫基因有同源性，38个EST与吸虫基因有同源性，4个EST与线虫基因有同源性，17个EST与其他物种有同源性，其余17个EST没有同源基因。这些EST编码的氨基酸序列有多头带绦虫六钩蚴Tml6抗原、猪带绦虫副肌球蛋白、猪带绦虫免疫原蛋白Ts76等绦虫抗原的同源蛋白以及烯醇化酶等一些酶类、热休克蛋白、肌动蛋白、核糖体蛋白等同源蛋白。 展开更多

关键词 多头带绦虫 脑多头蚴 CDNA表达文库 表达序列标签

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羊脑多头蚴病的防治 被引量：1

13

作者 杨东 杨勇 《山东畜牧兽医》 2015年第7期76-77,共2页

羊脑多头蚴又称脑共尾蚴或脑包虫,是由多头带绦虫的幼虫寄生于牛、羊的脑内而发病。患病羊民间俗称脑晕羊。笔者在基层诊疗中时有遇到。1病原脑多头蚴为乳白色、半透明的囊泡,呈圆形或卵圆形,直径约5cm或更大,其大小取决于寄生的部位、... 羊脑多头蚴又称脑共尾蚴或脑包虫,是由多头带绦虫的幼虫寄生于牛、羊的脑内而发病。患病羊民间俗称脑晕羊。笔者在基层诊疗中时有遇到。1病原脑多头蚴为乳白色、半透明的囊泡,呈圆形或卵圆形,直径约5cm或更大,其大小取决于寄生的部位、发育程度和动物种类。囊壁由两层膜组成,外膜为角质层,内膜为生发层,其上有许多原头蚴,直径为2-3mm,数量约有100-250个,囊内充满液体。 展开更多

关键词 多头蚴 脑多头蚴病 多头带绦虫 生发层 羊脑 原脑 动物种类 包虫 囊壁 生活史

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一例羊脑多头蚴病的诊断和治疗

14

作者 寸金全 王芸 《云南畜牧兽医》 2022年第3期23-24,共2页

羊脑多头蚴病是由多头带绦虫或称多头绦虫的中期绦虫寄生在羊脑内引起的一种寄生虫病,又称脑包虫病,该病对羊群健康危害性极高,给养羊业造成极大的经济损失[1]。多头蚴主要寄生在大脑,偶尔也会寄生在骨髓和肋间筋膜[2],对幼畜危害最严... 羊脑多头蚴病是由多头带绦虫或称多头绦虫的中期绦虫寄生在羊脑内引起的一种寄生虫病,又称脑包虫病,该病对羊群健康危害性极高,给养羊业造成极大的经济损失[1]。多头蚴主要寄生在大脑,偶尔也会寄生在骨髓和肋间筋膜[2],对幼畜危害最严重,2岁以下的最易感,临床上,多表现为神经症状。该病是一种人兽共患病。现将一例羊脑多头蚴病手术治疗情况报告如下。 展开更多

关键词 人兽共患病 多头绦虫 神经症状 脑包虫病 多头蚴 多头带绦虫 羊脑 寄生

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多头带绦虫Tm18抗原基因的克隆、表达与免疫原性分析 被引量：2

15

作者 王颖旺 杨应东 +6 位作者 杨光友 牟静 安晓雪 阳爱国 古小彬 王淑贤 边尧 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期320-324,共5页

目的为分析多头带绦虫Tm18重组蛋白的免疫原性。方法利用RT-PCR技术从激活的多头带绦虫六钩蚴中扩增Tm18基因,将扩增产物亚克隆入pGEX-4T-1载体中,构建pGEX-4T-rTm18表达载体,转化至大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导表达融合蛋白;表达产物进行... 目的为分析多头带绦虫Tm18重组蛋白的免疫原性。方法利用RT-PCR技术从激活的多头带绦虫六钩蚴中扩增Tm18基因,将扩增产物亚克隆入pGEX-4T-1载体中,构建pGEX-4T-rTm18表达载体,转化至大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导表达融合蛋白;表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析后,将纯化的Tm18重组蛋白免疫小鼠,用ELISA检测其血清抗体。结果多头带绦虫Tm18基因序列长为552 bp,包括1个396 bp的开放性阅读框。表达的重组蛋白大小约为39.4 kDa,与脑包虫患羊血清的免疫印迹分析呈阳性反应;小鼠免疫1周后血清中即可检测到抗Tm18蛋白的特异性抗体,并于免疫后第5周达到高峰。结论 Tm18重组蛋白具有较好的免疫原性,可作为脑包虫疫苗的候选抗原。 展开更多

关键词 多头带绦虫 Tm18基因 克隆 原核表达

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多头带绦虫Tm16基因的克隆表达与免疫原性分析 被引量：2

16

作者 王颖旺 杨应东 +5 位作者 杨光友 牟静 安晓雪 古小彬 王淑贤 边尧 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期934-939,共6页

为分析多头带绦虫Tm16重组蛋白的免疫原性,利用RT-PCR技术从激活的多头带绦虫六钩蚴中扩增Tm16基因,将扩增产物亚克隆入pET32a(+)载体中,构建pET32a-Tm16表达载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达融合蛋白;表达产物进行SDS-P... 为分析多头带绦虫Tm16重组蛋白的免疫原性,利用RT-PCR技术从激活的多头带绦虫六钩蚴中扩增Tm16基因,将扩增产物亚克隆入pET32a(+)载体中,构建pET32a-Tm16表达载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达融合蛋白;表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析后,将纯化的Tm16重组蛋白免疫小鼠,用ELISA检测其血清抗体。结果显示,多头带绦虫Tm16基因序列长569bp,包括1个399bp的开放阅读框,与已报道的Tm16基因(序列号:EF672036)的序列同源性为99.8%。表达的重组蛋白大小约为30.69ku,与脑多头蚴病羊血清的免疫印迹分析呈阳性反应;小鼠免疫1周后血清中即可检测到抗Tm16蛋白的特异性抗体,并于免疫后第5周达到高峰。结果表明Tm16重组蛋白具有较好的免疫原性,可作为脑多头蚴病疫苗的候选抗原。 展开更多

关键词 多头带绦虫 Tm16基因 克隆 表达 免疫原性

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多头带绦虫黏着蛋白TmAdh1基因的克隆及原核表达 被引量：2

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作者 岳龙 李文卉 +4 位作者 张念章 曲自刚 贾万忠 殷宏 付宝权 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期126-131,共6页

为研究多头带绦虫黏着蛋白TmAdh1的功能,利用PCR分别以多头带绦虫基因组DNA和cDNA为模板扩增TmAdh1的基因组序列和cDNA序列,并利用生物信息学软件对该基因进行预测分析。将TmAdh1基因片段连接至原核表达载体pGEX4T-1进行原核表达,并利用... 为研究多头带绦虫黏着蛋白TmAdh1的功能,利用PCR分别以多头带绦虫基因组DNA和cDNA为模板扩增TmAdh1的基因组序列和cDNA序列,并利用生物信息学软件对该基因进行预测分析。将TmAdh1基因片段连接至原核表达载体pGEX4T-1进行原核表达,并利用Western-blot分析该蛋白的抗原性。结果显示,TmAdh1的基因组序列长1 848bp,由2个内含子和3个外显子组成,其开放阅读框的长度为402bp,编码133个氨基酸残基。预测分析表明,TmAdh1蛋白含有1个N端信号肽序列、1个纤连蛋白三型(FnⅢ)结构域、1个糖基化位点和8个线性B细胞抗原表位。在原核系统成功表达了约40ku的重组蛋白TmAdh1,用其免疫小鼠制备超免疫血清。Western-blot试验表明,重组蛋白TmAdh1可以与免疫小鼠血清反应。以上研究结果表明,多头带绦虫TmAdh1基因是带科绦虫宿主保护性抗原的同源基因,可作为脑多头蚴病疫苗的候选分子。 展开更多

关键词 多头带绦虫 TmAdh1 纤连蛋白三型(FnⅢ)结构域 原核表达

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基于线粒体nad1和nad4基因对四川省多头带绦虫种群遗传多样性的分析 被引量：2

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作者 郝桂英 杨应东 +1 位作者 周英姿 杨光友 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期251-257,共7页

为探讨多头带绦虫的种群遗传多样性，应用PCR方法扩增20株分离自四川省攀枝花市、雅安市、成都市的山羊脑部和肌间的多头蚴的线粒体nadl基因和nad4基因的部分序列，并进行分析。序列分析结果显示，20株多头蚴的pnadl基因和pnad4基因序... 为探讨多头带绦虫的种群遗传多样性，应用PCR方法扩增20株分离自四川省攀枝花市、雅安市、成都市的山羊脑部和肌间的多头蚴的线粒体nadl基因和nad4基因的部分序列，并进行分析。序列分析结果显示，20株多头蚴的pnadl基因和pnad4基因序列分别有2个和8个变异位点，长度分别为753bp和801bp，变异率分别为0～0．3％和0～0．8％，检测出3个和6个单倍型，总的单倍型多样性分别为0．574±0．055和0．742±0．074，核苷酸多样性分别为0．00082±0．00053和0．00288±0．001，平均遗传距离分别为0．002和0．003。构建的种系发育树显示，四川分离株与已知多头带绦虫位于同一分支，且与分布的地理区域、寄生部位没有直接的相关性。结果表明，四川多头带绦虫的遗传多样性水平低，其中nadl基因的遗传多样性水平低于nad4基因的遗传多样性。 展开更多

关键词 多头带绦虫 nad1基因 nad4基因 遗传多样性 四川省

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多头带绦虫蛋白激酶A催化亚基基因的克隆及原核表达 被引量：2

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作者 杨洋 李文卉 +5 位作者 张念章 李婷婷 李立 闫鸿斌 贾万忠 付宝权 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第10期2858-2864,共7页

为鉴定多头带绦虫蛋白激酶A催化亚基(Tm PKA-C)基因作为诊断抗原的潜能,本试验以多头带绦虫成虫RNA为模板,利用RT-PCR扩增Tm PKA-C基因。将Tm PKA-C基因片段连接至p ET-30a原核表达载体进行原核表达,然后利用Western blotting和间接ELIS... 为鉴定多头带绦虫蛋白激酶A催化亚基(Tm PKA-C)基因作为诊断抗原的潜能,本试验以多头带绦虫成虫RNA为模板,利用RT-PCR扩增Tm PKA-C基因。将Tm PKA-C基因片段连接至p ET-30a原核表达载体进行原核表达,然后利用Western blotting和间接ELISA分析该蛋白的反应原性。结果表明,Tm PKA-C基因开放阅读框的长度为1 032 bp,可编码343个氨基酸。Tm PKA-C基因的表达产物主要以包涵体的形式存在,重组蛋白的分子质量大小约42 ku。Western blotting结果表明,该重组蛋白既能与自然感染脑多头蚴的绵羊血清发生特异性反应,又能与人工感染脑多头蚴不同时间段的绵羊血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的反应原性。间接ELISA分析结果表明,脑多头蚴绵羊血清能与重组蛋白发生特异性反应,进一步证明该重组蛋白的反应原性良好。本研究为筛选脑多头蚴病诊断新抗原奠定了基础。 展开更多

关键词 多头带绦虫 TmPKA-C 原核表达 反应原性

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多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶基因的克隆及序列分析 被引量：1

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作者 李永光 李文卉 +5 位作者 盖文燕 姚菊霞 曲自刚 贾万忠 Radu Blaga 付宝权 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期67-70,共4页

从自然感染的羊脑内采集脑多头蚴原头节,提取总RNA。根据亚洲牛带绦虫的TaHc2-D11 mRNA序列设计特异引物,采用RT-PCR技术扩增多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶(TmTPx)基因。PCR产物连接到pMD18-T载体构建重组质粒pMD-TmTPx,转化大肠埃希... 从自然感染的羊脑内采集脑多头蚴原头节,提取总RNA。根据亚洲牛带绦虫的TaHc2-D11 mRNA序列设计特异引物,采用RT-PCR技术扩增多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶(TmTPx)基因。PCR产物连接到pMD18-T载体构建重组质粒pMD-TmTPx,转化大肠埃希菌DH5α后筛选阳性克隆,经限制性酶切及测序鉴定后进行序列分析。扩增获得大小为614bp的TmTPx基因cDNA,该基因的完整开放阅读框架(ORF,591bp)编码196个氨基酸,编码蛋白的相对分子质量为Mr 21690,等电点为7.61。生物信息学分析结果表明TmTPx具有一个典型的2-Cys Prx保守功能结构域。绦虫已知TPx的分子进化分析发现,多头带绦虫与亚洲牛带绦虫的亲缘关系最近,与猪带绦虫和肥头绦虫的亲缘关系次之,与细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫的亲缘关系最远。 展开更多

关键词 多头带绦虫 脑多头蚴 硫氧还蛋白过氧化物酶 克隆 序列分析

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