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辣椒脉斑驳病毒的多基因联合检测与鉴定 被引量：4
1
作者 杨宏凯 杨晶文 +2 位作者 沈建国 蔡伟 高芳銮 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第16期3412-3420,共9页
【目的】辣椒脉斑驳病毒(Chilli veinal mottle virus,ChiVMV)是辣椒生产上危害严重的病毒,也是口岸检疫的重要病毒之一。本文旨在建立一种快速检测ChiVMV的多基因联合检测方法,实现ChiVMV的快速、准确鉴定。【方法】利用DAS-ELISA、RT-... 【目的】辣椒脉斑驳病毒(Chilli veinal mottle virus,ChiVMV)是辣椒生产上危害严重的病毒,也是口岸检疫的重要病毒之一。本文旨在建立一种快速检测ChiVMV的多基因联合检测方法,实现ChiVMV的快速、准确鉴定。【方法】利用DAS-ELISA、RT-PCR方法对印度进境辣椒进行检测以确定是否携带有ChiVMV。根据ChiVMV外壳蛋白(coat protein,CP)和圆柱状内含体蛋白(cytoplasmic inclusion protein,CI)保守区域分别设计引物,筛选两个基因(CP和CI)的特异性引物组合,通过设定不同的引物用量组合以及对退火温度等条件进行优化,探索最佳的反应条件,建立多基因联合检测方法。利用建立的多基因联合检测体系对包含ChiVMV在内的辣椒病毒进行检测,以验证该体系特异性。同时对ChiVMV阳性样品的不同浓度cDNA进行扩增,测定其检测灵敏度。此外,对田间辣椒样本进行检测,以验证体系的实际应用效果。【结果】通过对印度进境辣椒的DAS-ELISA检测,发现样品提取液与ChiVMV呈阳性反应;利用CP861-F/CP861-R特异性引物对进行RT-PCR,扩增出与预期大小相一致的特异性片段,确认该批辣椒样品携带有ChiVMV。多基因联合检测体系中,应用引物对CP337-F/CP337-R、CI655-F/CI655-R分别扩增出长度为337、655 bp的特异性目的片段。经优化后的反应体系和程序为cDNA 2μL、CP337-F/CP337-R各0.625μL(10μmol·L-1)、CI655-F/CI655-R各1.375μL(10μmol·L-1)、2×PCR Master Mix12.5μL、ddH2O 6.5μL,退火温度50℃,共35个循环。建立的多基因联合检测方法具有良好的特异性和灵敏度,两个基因检测灵敏度均为10-4数量级。实际应用检测结果表明,该方法可从感染ChiVMV的样品中同时扩增出CP和CI的特异性目的片段。【结论】建立的多基因联合检测方法具有特异性强、灵敏度高、重复性好的特点,可为辣椒脉斑驳病毒的快速检测提供可靠的技术支持。 展开更多
关键词 辣椒脉斑驳病毒 外壳蛋白基因 圆柱状内含体蛋白基因 多基因联合检测
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联合检测粪便中多基因突变进行大肠癌二级筛查的研究 被引量：4
2
作者 秦高平 王小强 +1 位作者 闫立昆 宋勇 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2007年第6期639-643,共5页
目的通过研究p53、K-ras及APC在大肠癌组织及粪便中的突变情况,探讨粪便多基因联合检测进行大肠癌二级筛查的可行性。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析及硝酸银染色法,检测40例大肠癌患者的肿瘤组织与粪便及40例正常... 目的通过研究p53、K-ras及APC在大肠癌组织及粪便中的突变情况,探讨粪便多基因联合检测进行大肠癌二级筛查的可行性。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析及硝酸银染色法,检测40例大肠癌患者的肿瘤组织与粪便及40例正常人肠黏膜组织与粪便中p53、K-ras及APC3种基因的突变情况,并比较多个基因联合检测与单基因检测基因突变率的灵敏性之间的差异。结果①40例大肠癌组织中p53、K-ras及APC基因突变率分别为57.50%、50.00%及60.00%,粪便中相应的基因突变率分别为42.86%、40.00%及51.43%,粪便基因突变与组织中相应基因突变的符合率分别为65.22%、70.00%及75.00%。40例正常肠黏膜组织及粪便中3种基因均未检出突变;②3种基因联合检测的突变率明显高于单基因检测(P<0.05);③粪便基因联合检测与粪便隐血试验比较,灵敏性之间差异无统计学意义,但前者的特异性明显高于后者(P<0.05)。结论粪便基因联合检测诊断大肠癌的灵敏性及特异性均较高,有望作为一种无创、特异、有效的筛查手段,与粪便隐血试验结合序贯进行大肠癌的筛查。 展开更多
关键词 大肠癌 粪便 多基因联合检测
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川西北地区148例非小细胞肺癌基因突变状态和临床病理特征分析
3
作者 邹黎黎 王安群 《医药前沿》 2023年第33期15-17,21,共4页
目的:对川西北地区非小细胞肺癌(NSCLC)患者的常见10种驱动基因EGFR、KRAS、ALK、HER2、BRAF、MET、ROS1、PIK3CA、RET和NRAS的突变特点及与临床病理特征的关系进行研究分析,探索多基因突变联合检测的临床应用价值。方法:采用ARMS-PCR... 目的:对川西北地区非小细胞肺癌(NSCLC)患者的常见10种驱动基因EGFR、KRAS、ALK、HER2、BRAF、MET、ROS1、PIK3CA、RET和NRAS的突变特点及与临床病理特征的关系进行研究分析,探索多基因突变联合检测的临床应用价值。方法:采用ARMS-PCR法检测绵阳市中心医院148例经病理确诊的NSCLC患者肿瘤组织中10种基因的突变状态,分析10种基因的突变率、EGFR基因的突变特点及与临床病理特征的关系。结果:川西北地区148例NSCLC中总突变率为77.03%(114/148),其中EGFR基因突变率53.38%(79/148),KRAS基因突变率为8.11%(12/148),ALK融合基因突变率为6.76%(10/148),HER2基因突变率为2.70%(4/148),BRAF基因突变率为2.03%(3/148),MET基因突变率为1.35%(2/148),ROS1融合基因突变率为1.35%(2/148),PIK3CA基因突变率为0.68%(1/148),RET基因突变率为0.68%(1/148)。本研究中NSCLC驱动基因突变状态与性别、是否吸烟和病理类型有关(P<0.05),而与组织分化程度无关(P>0.05)。最常见的EGFR基因突变率在女性、不吸烟、腺癌患者中较高,且肿瘤组织中高分化程度突变率高于低分化程度者(P<0.05),其中基因位点19号外显子19-DEL和21号外显子L858 R突变率占所有病例EGFR突变的89.87%(71/79)。EGFR更常见于女性、无吸烟史及分化程度较好的肺腺癌患者,且与年龄无相关性。结论:川西北地区NSCLC患者的常见驱动基因中,突变率位于前3位的基因依次为EGFR、KRAS和ALK融合。本地区NSCLC驱动基因突变状态与性别、是否吸烟和病理类型有关(P<0.05),而与组织分化程度无关(P>0.05)。EGFR突变多见于女性、无吸烟史及分化程度较好的腺癌患者,主要以19号外显子19-del和21号外显子L858R位点突变为主。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 驱动基因 EGFR 临床病理特征 多基因联合检测
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多基因联合检测在晚期胃癌个体化化疗中的临床应用效果研究 被引量：3
4
作者 苏哲 《智慧健康》 2019年第23期132-133,共2页
目的本文主要对多基因联合检测在晚期胃癌个体化化疗中的临床应用效果进行实验研究。方法研究对象选择为到我院进行晚期胃癌治疗的患者80例进行对比研究,研究对象的选取时间控制为2016年1月到2019年7月,采用随机数字表法进行分组,对照... 目的本文主要对多基因联合检测在晚期胃癌个体化化疗中的临床应用效果进行实验研究。方法研究对象选择为到我院进行晚期胃癌治疗的患者80例进行对比研究,研究对象的选取时间控制为2016年1月到2019年7月,采用随机数字表法进行分组,对照组患者采用个体化治疗,实验组患者采用多基因联合检测在晚期胃癌个体化化疗治疗,对比两组患者的治疗效果和不良反应发生率。结果对比两组患者的治疗有效率,实验组患者治疗有效率显著较高,统计学意义存在(P<0.05);与对照组患者的不良反应发生率对比,实验组患者的恶心、呕吐、骨髓抑制的发生发生率显著较低,存在统计学意义(P<0.05)。结论多基因联合检测在晚期胃癌个体化化疗中的临床应用效果显著,可提高患者的治疗效果,保证患者的治疗安全性,该种治疗方式值得在临床中推广。 展开更多
关键词 多基因联合检测 晚期胃癌 个体化化疗 临床 应用效果
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多基因联合检测在晚期胃癌个体化化疗中的有效应用 被引量：2
5
作者 皇婷 刘晓栋 廖和和 《贵州医药》 CAS 2021年第10期1547-1548,共2页
目的探讨多基因联合检测在晚期胃癌个体化化疗中的应用效果。方法选取在我院肿瘤科进行治疗的晚期胃癌患者98例,按照入组顺序编号,单号为对照组,双号为观察组,各49例。对照组行常规化疗,观察组行多基因联合检测个体化化疗。两组患者均... 目的探讨多基因联合检测在晚期胃癌个体化化疗中的应用效果。方法选取在我院肿瘤科进行治疗的晚期胃癌患者98例,按照入组顺序编号,单号为对照组,双号为观察组,各49例。对照组行常规化疗,观察组行多基因联合检测个体化化疗。两组患者均连续治疗干预6个月。观察比较两组患者临床治疗总有效率;比较两组患者治疗期间发生的药物不良反应率。结果对照组临床总有效率明显低于观察组(P<0.05);对照组发生骨髓抑制明显高于观察组(P<0.05);观察组发生消化道反应明显低于对照组(P<0.05);对照组发生神经毒性明显高于观察组(P<0.05);两组患者不良反应肝功能损害、肾功能损害及心脏毒性比较无统计学意义(P>0.05)。结论多基因联合检测在晚期胃癌个体化化疗中具有一定的指导意义,提高了患者治疗有效率,患者治疗期间药物不良反应发生率明显降低,提高了患者生存几率。 展开更多
关键词 多基因联合检测 晚期胃癌 个体化化疗 降糖效果 药物不良反应
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科学选择结肠病变的检查
6
作者 李增烈 本刊专家团成员 《健康生活》 2018年第4期14-15,共2页
结直肠病变虽有多种,但对健康威胁最大的莫过于结直肠癌（CRC）。随着人们生活水平的提高与饮食习惯的改变,近年来CRC呈明显上升趋势,年轻化的情况尤为引人注意。CRC的疗效取决于病变的早晚,两者5年存活率之比可谓天壤之别。早期病变的... 结直肠病变虽有多种,但对健康威胁最大的莫过于结直肠癌（CRC）。随着人们生活水平的提高与饮食习惯的改变,近年来CRC呈明显上升趋势,年轻化的情况尤为引人注意。CRC的疗效取决于病变的早晚,两者5年存活率之比可谓天壤之别。早期病变的发现取决于早期诊断, 展开更多
关键词 结肠病变 结直肠癌 饮食习惯 早期病变 存活率 早期诊断 生活水平 直肠 乙状结肠镜 多基因联合检测
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