期刊文献+
共找到17篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
外源质粒(基因)导入花生根瘤菌的行为分析 被引量:14
1
作者 朱光富 周俊初 陈华癸 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1996年第2期131-141,共11页
利用二亲本或三亲本杂交的方法,将携带有共生固氮基因的外源重组质粒或外源载体质粒导入慢生型花生根瘤菌[Bradyrhzobiumsp.(Arachis)]147-3和快生型花生根瘤菌[Rhizobiumsp.(Arac... 利用二亲本或三亲本杂交的方法,将携带有共生固氮基因的外源重组质粒或外源载体质粒导入慢生型花生根瘤菌[Bradyrhzobiumsp.(Arachis)]147-3和快生型花生根瘤菌[Rhizobiumsp.(Arachis)]85-7中。探讨了转移接合子中外源质粒在人工培养条件下和共生条件下的稳定性,发现外源质粒在花生根瘤菌中的稳定性与质粒的类型、受体菌的特性和环境条件有关。同时还探讨了外源质粒上的共生基因对受体菌147-3共生固氮效率的影响。结果表明,外源共生基因对共生固氮能力的影响是复杂的,既可以产生正效应,也可以产生负效应。 展开更多
关键词 花生 花生根瘤菌 外源质粒 共生固氮效率
下载PDF
一株能通过接合导入外源质粒的水稻黄单胞菌水稻致病变种菌株的获得及鉴定 被引量:5
2
作者 吴神怡 刘书言 +2 位作者 刘君梁 段承杰 冯家勋 《广西农业科学》 CAS CSCD 2010年第9期873-876,共4页
从2008年10月在广西防城港市不同稻区采集的表现水稻白叶枯病症状的叶片中分离、纯化,得到22株水稻黄单胞菌水稻致病变种(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)疑似菌株。在水稻品种日本晴、9311和特优63上剪叶接种,22个菌株都可在这3个... 从2008年10月在广西防城港市不同稻区采集的表现水稻白叶枯病症状的叶片中分离、纯化,得到22株水稻黄单胞菌水稻致病变种(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)疑似菌株。在水稻品种日本晴、9311和特优63上剪叶接种,22个菌株都可在这3个水稻品种上引起典型的水稻白叶枯病症状,证实他们是Xoo菌株。以2007年从该地区采集的患病水稻叶片中分离得到的11个Xoo菌株和该22个菌株作为出发菌株,分离、纯化得到每个菌株的链霉素抗性突变体。通过三亲本接合检测向该33个链霉素抗性突变体导入广谱克隆载体pLAFR6的效率,结果得到2株可导入pLAFR6的突变体K74和K31,K74和K31的导入pLAFR6效率分别为2.9×10-2、9.0×10-6。经16SrRNA基因序列测定证明K74属于Xoo,即菌株K74可作为研究Xoo与水稻相互作用机理的一个菌株。 展开更多
关键词 白叶枯病 水稻黄单胞菌 Xoo菌株 K74 外源质粒
下载PDF
外源质粒pcDNA3s疫苗在小鼠体内组织代谢动力学研究 被引量:2
3
作者 刘建文 乐国伟 施用晖 《生命科学研究》 CAS CSCD 2004年第2期164-168,共5页
为分析外源质粒pcDNA3s肌肉注射后在小鼠体内的组织分布及评价整合到宿主基因组上的可能性.通过PCR方法检测质粒pcDNA3s经肌肉注射在各组织中的分布及随时间变化的情况.检测外源质粒在基因组DNA上的整合情况.注射后3h所有的组织均能检... 为分析外源质粒pcDNA3s肌肉注射后在小鼠体内的组织分布及评价整合到宿主基因组上的可能性.通过PCR方法检测质粒pcDNA3s经肌肉注射在各组织中的分布及随时间变化的情况.检测外源质粒在基因组DNA上的整合情况.注射后3h所有的组织均能检测到质粒,至第3周时只有胸腺和生殖器官能检测到质粒的存在,至第6周后各组织均为阴性.各组织基因组DNA经PCR扩增均为阴性.肌注外源质粒后,外源质粒在小鼠细胞内逐渐被清除,外源质粒不会整合到宿主染色体上. 展开更多
关键词 外源质粒 代谢动力学 整合 染色体
下载PDF
外源质粒电击转入Pseudomonas putida的条件研究 被引量:2
4
作者 邓婷婷 李晖 +2 位作者 刘燕 郑元元 李春 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期81-85,共5页
以自行筛选的恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)(命名为Rs-198,Genbank登录号为FJ788425)为受体菌,将具有卡那霉素抗性标记的大肠杆菌-假单胞菌穿梭质粒PDSK519通过电转化法导入到受体菌中,对细胞生长状态、电转化温度、质粒DNA及感受... 以自行筛选的恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)(命名为Rs-198,Genbank登录号为FJ788425)为受体菌,将具有卡那霉素抗性标记的大肠杆菌-假单胞菌穿梭质粒PDSK519通过电转化法导入到受体菌中,对细胞生长状态、电转化温度、质粒DNA及感受态细胞浓度、电击电压及电转化介质给予转化效率的影响进行研究。结果表明,在细胞生长至OD600为0.5左右时收集菌体,在低温条件下制备浓度为4.6×1012/ml的感受态细胞,以0.3mol/L的蔗糖为电转化介质,在13kV/cm的场强下电击能获得较高的转化效率,最高可达1.3×107个转化子/μg DNA。为构建恶臭假单胞的遗传转化系统,利用基因工程手段为该菌的进一步研究奠定了理论基础。 展开更多
关键词 恶臭假单胞菌 电转化 转化效率 转化条件 外源质粒
原文传递
外源质粒DNA经胃肠道途径对小鼠免疫基因的调控作用 被引量:1
5
作者 刘建文 乐国伟 施用晖 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期548-552,共5页
目的:研究外源质粒DNA经胃肠道途径对小鼠免疫基因表达的调控作用。方法:给BALB/c小鼠灌胃质粒pcDNA3200μg,分别在灌胃后4h和18h分离脾脏,提取脾脏总RNA。利用Affymetrix基因表达谱芯片对灌胃质粒pcD-NA3后的BALB/c小鼠脾脏进行基因表... 目的:研究外源质粒DNA经胃肠道途径对小鼠免疫基因表达的调控作用。方法:给BALB/c小鼠灌胃质粒pcDNA3200μg,分别在灌胃后4h和18h分离脾脏,提取脾脏总RNA。利用Affymetrix基因表达谱芯片对灌胃质粒pcD-NA3后的BALB/c小鼠脾脏进行基因表达谱研究。采用Genmmapp和MAPPFinder软件进行功能聚类分析。结果:灌胃质粒pcDNA3后,大量与免疫应答相关的基因发生上调,这些基因包括转录因子、细胞因子和细胞因子受体、主要组织相容性基因、蛋白酶体基因、补体分子基因和细胞凋亡相关基因;下调的基因主要是免疫球蛋白基因。MAPPFinder分析结果显示大量免疫应答过程发生上调。结论:外源质粒DNA通过胃肠道途径可调控大量免疫基因的表达,对相关基因及免疫应答过程的研究有助于在分子水平上深入了解外源质粒DNA的胃肠道作用机制。 展开更多
关键词 外源质粒 基因芯片 免疫 基因表达
下载PDF
稻瘟菌致病性变异突变体的筛选及共分离分析 被引量:1
6
作者 黄俊丽 王贵学 彭友良 《重庆大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第5期112-115,共4页
通过筛选稻瘟菌(Magnaporthegrisea)P131小种的REMI(RestrictionEnzymeMediated Integration)转化体库获得对水稻品种梅雨明致病性变异的突变体,命名为PX1。与野生型菌株P131相比,该突变体对水稻品种梅雨明致病性丧失,在洋葱表皮上侵染... 通过筛选稻瘟菌(Magnaporthegrisea)P131小种的REMI(RestrictionEnzymeMediated Integration)转化体库获得对水稻品种梅雨明致病性变异的突变体,命名为PX1。与野生型菌株P131相比,该突变体对水稻品种梅雨明致病性丧失,在洋葱表皮上侵染钉形成率显著降低,而孢子萌发率和附着胞形成率差异不显著。遗传分析表明,该突变体的突变表型和潮霉素抗性标记共分离,说明突变是由于外源质粒插入引起的,因此,可以此为标记克隆控制该表型的基因。 展开更多
关键词 致病性变异 突变体 稻瘟菌 分离分析 筛选 水稻品种 孢子萌发率 抗性标记 外源质粒 形成率 转化体 PXI 野生型 附着胞 分析表 共分离 潮霉素 梅雨 表型 小种 侵染 洋葱 遗传
下载PDF
细菌hok/sok解离后致死系统研究进展
7
作者 蒋志伟 康小燕 +1 位作者 郁磊 朱国强 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期166-168,共3页
由于编码特定基因的重组质粒增加了细胞本身的代谢负担,因此,含有质粒的重组菌通常不稳定。质粒不稳定性(Plasnid instability),包括分离不稳定性(Segregational instability)和结构不稳定性(Structural instability)两个方面,其... 由于编码特定基因的重组质粒增加了细胞本身的代谢负担,因此,含有质粒的重组菌通常不稳定。质粒不稳定性(Plasnid instability),包括分离不稳定性(Segregational instability)和结构不稳定性(Structural instability)两个方面,其中质粒的分离不稳定性是质粒不稳定性的主要因素。一旦丢失外源质粒,细胞将迅速增长, 展开更多
关键词 结构不稳定性 重组质粒 系统 解离 细菌 外源质粒 重组菌 细胞
下载PDF
Plectonema boryanum作为外源质粒受体的筛选及其原生质球的制备与再生
8
作者 孙立春 潘炜华 楼士林 《厦门大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 1995年第2期261-266,共6页
对三种丝状蓝藻株系(PhormidiumLuridum,Phormidiumfaveolarum和Plectonemabo-ryamum)的研究结果表明:P,boryanum因无明显限制性内切核酸酶活性可作为受体进一... 对三种丝状蓝藻株系(PhormidiumLuridum,Phormidiumfaveolarum和Plectonemabo-ryamum)的研究结果表明:P,boryanum因无明显限制性内切核酸酶活性可作为受体进一步研究,对其原生质球的释出和新细胞再生的最适条件分析表明:0.1%溶菌酶作用的最适时间为2h温度为35℃,pH为7.0~7.5(0.8mol/L的甘露醇为最适渗透稳定剂)。这些条件适合于在BG-11液体中释放原生质球及固体培养基上新细胞的再生。 展开更多
关键词 质生质球 丝状蓝藻 内切核酸酶 外源质粒
下载PDF
用电脉冲法将外源质粒DNA导入花生根瘤菌的研究
9
作者 魏东 周俊初 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期30-33,共4页
利用基因电转移仪(GenePulserTM),对快、慢生型花生根瘤菌85-7和147-3的电转化条件进行了系统的研究。结果表明:在对数中期(ABC600为0.6-0.7)收获的细胞在最高场强(12.5kV/cm)和短脉冲时间(2.5-5.0msec)时达到最高... 利用基因电转移仪(GenePulserTM),对快、慢生型花生根瘤菌85-7和147-3的电转化条件进行了系统的研究。结果表明:在对数中期(ABC600为0.6-0.7)收获的细胞在最高场强(12.5kV/cm)和短脉冲时间(2.5-5.0msec)时达到最高转化效率(105转化子/μgDNA).转化子数随DNA终浓度在一定范围(26.24Pg-1.5μg/ml)内呈线性增加,随即表现出“饱和效应”。增加受体菌细胞浓度,能提高电转化效率;而质粒分子量的增加(11.9-166kb)却使电转化效率降低。来自受体菌自身的同源质粒,因克服了宿主的限制一修饰性,可以极显著地提高电转化效率。电脉冲处理对受体菌自发突变没有影响。 展开更多
关键词 根瘤菌 花生根瘤菌 电泳冲法 外源质粒 DNA
下载PDF
利用花粉管通道法将外源质粒DNA注入棉花的改良方法 被引量:6
10
作者 王长海 蓝海燕 《棉花学报》 CSCD 北大核心 1999年第4期220-221,共2页
我国从1978年即开始应用花粉管道法将外源DNA导入植物,目前已在棉花、水稻、油菜、甜瓜等作物中取得成功[1]。由于棉花组织再生较困难,一些转化法(如农杆菌介导法)在棉花上不易成功,而花粉管通道法避开了再生的障碍且容... 我国从1978年即开始应用花粉管道法将外源DNA导入植物,目前已在棉花、水稻、油菜、甜瓜等作物中取得成功[1]。由于棉花组织再生较困难,一些转化法(如农杆菌介导法)在棉花上不易成功,而花粉管通道法避开了再生的障碍且容易操作,因而近几年利用花粉通道法将... 展开更多
关键词 棉花 花粉管道法 外源质粒DNA 改良方法
下载PDF
外源质粒DNA经小鼠胃肠道的吸收代谢动力学 被引量:9
11
作者 刘建文 施用晖 +1 位作者 乐国伟 方希修 《世界华人消化杂志》 CAS 2004年第5期1108-1113,共6页
目的:分析外源质粒pcDNA3s经胃肠道吸收后在组织中的动态变化,评价外源质粒整合到宿主基因组上的可能性. 方法:分别于灌胃200μg质粒pcDNA3s后1,3,6,24, 48 h及3,6 wk,提取小鼠肺、肾、脾、肠系膜淋巴结、胸腺、生殖器官、粪便、十二指... 目的:分析外源质粒pcDNA3s经胃肠道吸收后在组织中的动态变化,评价外源质粒整合到宿主基因组上的可能性. 方法:分别于灌胃200μg质粒pcDNA3s后1,3,6,24, 48 h及3,6 wk,提取小鼠肺、肾、脾、肠系膜淋巴结、胸腺、生殖器官、粪便、十二指肠、大肠、血液及肝脏的总DNA,通过PCR方法检测质粒pcDNA3s在各组织中的分布及随时间变化的情况.琼脂糖凝胶分离高分子量基因组DNA与游离质粒,PCR方法检测外源质粒在基因组DNA上的整合情况. 结果:灌胃给药后1h所有的组织均能检测到质粒的存在, 质粒在组织中的拷贝数水平随时间的推移呈动态变化,至6 wk仅在肾脏和血液中检测到外源质粒,质粒在体内主要以碎片的形式存在. 结论:外源质粒能被胃肠道吸收,迅速分布全身各个器官并以碎片的形式在体内存留较长的时间.外源质粒DNA经胃肠道途径有可能整合到宿主染色体基因组上. 展开更多
关键词 外源质粒DNA 小鼠 胃肠道 吸收代谢动力学 免疫系统
下载PDF
外源质粒DNA经胃肠道途径对小鼠免疫功能的影响 被引量:7
12
作者 刘建文 施用晖 乐国伟 《世界华人消化杂志》 CAS 2004年第11期2614-2617,共4页
目的:研究外源质粒DNA经胃肠道吸收后对小鼠免疫功能的影响. 方法:观察外源质粒pcDNA3对小鼠胸腺、脾脏指数,脾脏淋巴细胞转化率,脾脏抗体细胞生成含量,血清溶血素水平,巨噬细胞吞噬指数及吞噬率的影响,并考察了外源质粒pcDNA3对免疫低... 目的:研究外源质粒DNA经胃肠道吸收后对小鼠免疫功能的影响. 方法:观察外源质粒pcDNA3对小鼠胸腺、脾脏指数,脾脏淋巴细胞转化率,脾脏抗体细胞生成含量,血清溶血素水平,巨噬细胞吞噬指数及吞噬率的影响,并考察了外源质粒pcDNA3对免疫低下小鼠血清IgA、IgG及IgM的影响. 结果:外源质粒pcDNA3经胃肠道摄入后能够提高胸腺指数(3.53±0.80 vs 5.10±0.47 mg/g,P<0.05)、脾脏指数(5.69±0.92 vs 7.49±1.18mg/g,P<0.05)、脾脏淋巴细胞转化率(1.047±0.012 vs 1.154±0.016,P<0.05)、脾脏抗体细胞生成含量(0.403±0.008 vs 0.47 1±0.007, P<0.05)、血清溶血素水平(6.46±0.12 vs 8.18±0.29, P<0.05)、巨噬细胞吞噬指数(0.53±0.017 vs 0.72±0.029, P<0.01)及吞噬率(32.30±1.098 vs 60.53±2.022,P<0.01), 并且能够恢复免疫低下小鼠血清IgA、IgG及IgM的水平. 结论:外源质粒DNA经胃肠道途径摄入后能够诱导小鼠广泛的体液免疫和细胞免疫应答. 展开更多
关键词 外源质粒DNA 胃肠道途径 小鼠 免疫功能 巨噬细胞吞噬指数 体液免疫 细胞免疫应答
下载PDF
沈抚灌区广宿主石油烃代谢质粒的分离及鉴定 被引量:1
13
作者 王亚菲 李慧 李小彬 《应用生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期3289-3299,共11页
本研究采用"三亲配对外源分离法",从沈抚灌区土壤、底泥和水样中共计分离得到8个广宿主(BHR)石油烃代谢质粒,并通过对其进行抗生素抗性检测和抗性遗传标记,将其转移至大肠杆菌(Escherichia coli)EC100宿主中进行操作.不相容... 本研究采用"三亲配对外源分离法",从沈抚灌区土壤、底泥和水样中共计分离得到8个广宿主(BHR)石油烃代谢质粒,并通过对其进行抗生素抗性检测和抗性遗传标记,将其转移至大肠杆菌(Escherichia coli)EC100宿主中进行操作.不相容性群分析结果表明:pS3-2C、pS4-6G为Inc P质粒;pS3-2G、pW22-3G、pA15-7G为Inc N质粒;pS7-2G为Inc W质粒;pA23-1G和pA10-1C为Inc Q质粒.采用PCR扩增已报道的石油烃污染物降解基因的方法初步分析其石油烃代谢功能,质粒pS3-2G、pS7-2G、pA23-1G、pW22-3G和pA10-1C上含有编码芳香环羟化双加氧酶基因(phdA)和甲苯单加氧酶基因(touA)的片段;pA15-7G含有编码甲苯双加氧酶和甲苯单加氧酶基因片段;pS3-2C含有编码芳香环羟化双加氧酶、苯双加氧酶和甲苯双加氧酶基因片段;pS4-6G仅含有编码芳香环羟化双加氧酶基因片段.通过宿主范围检测,除质粒pS3-2C外,其余7个质粒均可在变形菌纲(Proteobacteria)α-、β-、γ-亚纲的代表性菌株根瘤农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)C58、钩虫贪铜菌(Cupriavidus necator)JMP228、大肠杆菌EC100间进行转移并稳定传代. 展开更多
关键词 水平基因转移 三亲配对外源质粒分离 广宿主质粒 石油烃降解 生物修复
原文传递
外源质粒DNA对小鼠脾脏物质能量代谢的影响
14
作者 刘建文 施用晖 乐国伟 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期74-78,共5页
研究外源质粒DNA经胃肠道途径对免疫激活状态下小鼠脾脏代谢的影响。给Balb/c小鼠灌喂质粒pcDNA3200μg,分别在灌喂后4h和18h分离脾脏,提取脾脏总RNA。利用Affymetrix基因表达谱芯片对灌喂质粒pcDNA3后的Balb/c小鼠脾脏进行基因表达谱... 研究外源质粒DNA经胃肠道途径对免疫激活状态下小鼠脾脏代谢的影响。给Balb/c小鼠灌喂质粒pcDNA3200μg,分别在灌喂后4h和18h分离脾脏,提取脾脏总RNA。利用Affymetrix基因表达谱芯片对灌喂质粒pcDNA3后的Balb/c小鼠脾脏进行基因表达谱研究。采用Genmmapp和MAPPFinder软件进行功能聚类分析。对上调倍数两倍及两倍以上的基因进行功能聚类发现,灌喂后4h,外源质粒刺激小鼠脾脏产生免疫应答的同时,脾脏中嘌呤代谢及蛋白质合成,胆固醇合成、脂肪酸合成、糖酵解、三羧酸循环及线粒体氧化磷酸化途径等大量代谢过程受到诱导。在灌喂后18h也得到类似的结果。结果表明外源质粒DNA可通过胃肠道途径吸收影响小鼠脾脏物质能量代谢过程。结果有助于在分子水平上深入了解外源质粒DNA经胃肠道吸收后的作用机制。 展开更多
关键词 外源质粒DNA 脾脏 代谢 基因芯片
下载PDF
外源质粒DNA对小鼠肝脏基因表达谱的影响
15
作者 刘建文 施用晖 乐国伟 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期10-14,34,共6页
研究了外源质粒DNA经胃肠道吸收可能对肝脏产生的作用机制。给Balb/c小鼠灌胃质粒pcDNA3 200μg,在灌胃后4 h分离肝脏,提取肝脏的总RNA。利用寡核苷酸芯片对灌胃质粒pcDNA3后的Balb/c小鼠肝脏进行基因表达谱研究。结果发现17 664个基因... 研究了外源质粒DNA经胃肠道吸收可能对肝脏产生的作用机制。给Balb/c小鼠灌胃质粒pcDNA3 200μg,在灌胃后4 h分离肝脏,提取肝脏的总RNA。利用寡核苷酸芯片对灌胃质粒pcDNA3后的Balb/c小鼠肝脏进行基因表达谱研究。结果发现17 664个基因中,表达上调100条,表达下调41条。按基因功能分类,表达上调的基因可分为免疫应答基因、转录因子基因、信号转导基因、转运相关基因及代谢相关基因等;表达下调的基因主要为脂质代谢基因。灌胃外源质粒DNA后,肝脏组织主要表现为急性时相反应的加强、免疫反应的活化、细胞信号通路的活化以及脂质代谢途径的抑制。表明外源质粒DNA通过胃肠道途径可广泛调控肝脏的基因表达。 展开更多
关键词 外源质粒DNA 寡核苷酸芯片 肝脏 基因表达
下载PDF
外源质粒DNA对小鼠肠道基因表达谱的影响
16
作者 刘建文 乐国伟 施用晖 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2006年第31期3002-3007,共6页
目的:研究外源质粒通过胃肠道途径吸收对小鼠肠道基因表达谱的影响.方法:给Balb/c小鼠灌胃质粒pcDNA3200μg,在灌胃后4h后分离空肠一段,提取肠组织的总RNA.利用寡核苷酸芯片对灌胃质粒pcDNA3后的Balb/c小鼠肠道进行基因表达谱研究.结果... 目的:研究外源质粒通过胃肠道途径吸收对小鼠肠道基因表达谱的影响.方法:给Balb/c小鼠灌胃质粒pcDNA3200μg,在灌胃后4h后分离空肠一段,提取肠组织的总RNA.利用寡核苷酸芯片对灌胃质粒pcDNA3后的Balb/c小鼠肠道进行基因表达谱研究.结果:灌胃外源质粒DNA后,所检测的17667基因中有61条基因产生差异表达,其中36条基因表达上调,25条基因表达下调.这些差异表达的基因主要涉及免疫应答、抗氧化及解毒功能、脂质代谢、阴离子转运蛋白、细胞凋亡及信号转导等过程.结论:外源质粒DNA通过胃肠道途径可广泛调控肠道多种基因表达. 展开更多
关键词 外源质粒DNA 肠道 基因表达 寡核苷酸芯片
下载PDF
电转化方法将外源性质粒导入干酪乳杆菌的研究 被引量:17
17
作者 格日勒图 王艳霞 +2 位作者 包秋华 代兄 张和平 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2009年第2期9-13,共5页
以pMG36e,pMG36c和已消除内源性质粒的干酪乳杆菌(L.casei Zhang)为材料,在不同参数下进行电转化实验并建立最佳实验条件。结果表明:最佳电转化电压为1.5 kV,时间为2.0 ms。pMG36c转化不同对数生长期L.casei Zhang时,发现转化对数生长... 以pMG36e,pMG36c和已消除内源性质粒的干酪乳杆菌(L.casei Zhang)为材料,在不同参数下进行电转化实验并建立最佳实验条件。结果表明:最佳电转化电压为1.5 kV,时间为2.0 ms。pMG36c转化不同对数生长期L.casei Zhang时,发现转化对数生长中期菌体获得的转化子数最高,而转化效率不是最高;转化生长初期获得的转化子数为4.04×106 mL-1,电转化效率为89.78%;后期则为1.6×107 mL-1和4.0%。磷酸钠作电击缓冲液获得的转化子数高于体积分数为10%甘油获得的转化子数。复苏培养基甘氨酸质量分数为0.5%时得到的转化子数最高,转化效率为35.56%;当甘氨酸质量分数增加到1%时得到的转化子数和转化效率分别下降到5.6×106 mL-1和6.22%,甘氨酸质量分数为2%时得到的转化子数和转化效率更低;不同质粒转化L.casei Zhang时,pMG36c转化获得的转化子数高于pMG36e转化子数。选择pMG36e转化L.casei Zhang的转化子为模板,通过PCR反应已证实转化试验的可靠性。本研究为外源基因电转化干酪乳酸菌提供了可靠的参考依据。 展开更多
关键词 干酪乳杆菌 电转化 外源质粒 pMG36e(表达载体 红霉素抗性) pMG36c(克隆载体 氯霉素抗性)
下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部