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含不同Anti-Waxy基因拷贝数的稻米直链淀粉含量分析 被引量：2
1
作者 尹中明 周永国 +1 位作者 徐申中 李建粤 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期2108-2111,共4页
将含单拷贝Anti-Waxy基因的纯合植株分别作为父本或母本进行正反交,获得两组含双拷贝Anti-Waxy基因的杂交后代,分析了未转基因对照、转基因亲本及两组杂交后代糙米直链淀粉含量以揭示不同Anti-Waxy基因拷贝数对降低稻米直链淀粉含量程... 将含单拷贝Anti-Waxy基因的纯合植株分别作为父本或母本进行正反交,获得两组含双拷贝Anti-Waxy基因的杂交后代,分析了未转基因对照、转基因亲本及两组杂交后代糙米直链淀粉含量以揭示不同Anti-Waxy基因拷贝数对降低稻米直链淀粉含量程度的影响.结果显示,2个单拷贝转基因水稻糙米直链淀粉平均含量分别为10.72%和11.13%,比对照分别降低17.98%和14.84%;两组正交和反交杂交后代糙米直链淀粉平均含量分别为8.96%和8.23%,其平均值为8.60%,比2个转基因杂交亲本糙米直链淀粉含量分别降低19.78%和22.73%,比对照降低了34.20%.结果表明,增加转基因水稻基因组中Anti-Waxy基因拷贝数在一定程度上能够进一步降低稻米直链淀粉含量,通过将独立转化获得同品种转基因植株之间杂交可以成为获得高表达转基因植物的途径. 展开更多
关键词 水稻 Anti—Waxy基因 外源基因拷贝数 杂交 糙米直链淀粉含量
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不同外源基因拷贝数背景CHO细胞的宿主细胞蛋白种类的研究 被引量：2
2
作者 高侨 余垚 蔡洁行 《中国医药生物技术》 2020年第2期171-177,共7页
目的研究外源基因拷贝数、生产工艺、细胞多样性对宿主细胞蛋白表达的影响。方法构建空载体CHO K1细胞株,检测其外源基因拷贝数,根据拷贝数的低、中、高对细胞进行分类。使用不同的生产工艺测试低拷贝、中等拷贝和高拷贝的细胞群,观察... 目的研究外源基因拷贝数、生产工艺、细胞多样性对宿主细胞蛋白表达的影响。方法构建空载体CHO K1细胞株,检测其外源基因拷贝数,根据拷贝数的低、中、高对细胞进行分类。使用不同的生产工艺测试低拷贝、中等拷贝和高拷贝的细胞群,观察其宿主细胞蛋白表达之间的差异。最后将三个拷贝数水平的细胞群进行混合,再生产,观察其混合表达的宿主细胞蛋白与单独生产时表达宿主细胞蛋白的差异。结果研究结果显示,不同拷贝数背景的细胞群之间表达宿主细胞蛋白相差6%~13%。相同的细胞进行不同的工艺生产时,也因为基础培养基和补料的不同而使宿主细胞蛋白的种类不同。细胞多样性增加并不能引起宿主细胞蛋白表达的种类增多。结论宿主细胞蛋白的表达与外源基因拷贝数、生产工艺以及细胞群的多样性有关。 展开更多
关键词 CHO细胞 宿主细胞蛋白 外源基因拷贝数 生产工艺 多样性
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杂交法检测重组乙型肝炎疫苗(汉逊酵母)发酵产物HBsAg外源基因拷贝数
3
作者 张海春 李贵兴 +2 位作者 陈广东 张平 范艳云 《大连民族学院学报》 CAS 2012年第1期12-14,共3页
以汉逊酵母宿主基因组DNA和发酵产物基因组DNA的相同MOX启动子的片断为特异性探针,用地高辛标记后,与固定在杂交膜上的宿主基因组DNA和发酵产物基因组DNA进行杂交并显色,根据显色深度来判定发酵产物中外源基因拷贝数的大小。结果表明,... 以汉逊酵母宿主基因组DNA和发酵产物基因组DNA的相同MOX启动子的片断为特异性探针,用地高辛标记后,与固定在杂交膜上的宿主基因组DNA和发酵产物基因组DNA进行杂交并显色,根据显色深度来判定发酵产物中外源基因拷贝数的大小。结果表明,发酵产物中HBsAg外源基因拷贝数不小于30个。该方法检测灵敏度较好,特异性较强,操作较安全,可用于重组汉逊酵母发酵产物中HBsAg外源基因拷贝数定性检测。 展开更多
关键词 宿主菌基因组DNA 发酵产物基因组DNA 外源基因拷贝数
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利用实时荧光定量PCR检测外源基因拷贝数体系的建立
4
作者 李斌 奥斯曼 +3 位作者 张冬杰 巴桑珠扎 赵丽 刘娣 《中国畜牧兽医文摘》 2015年第10期54-55,53,共3页
黑素皮质素受体4(Melanocortin receptor 4,MC4R)基因是影响猪生长肥育性能的主效基因之一,是参与调控体重、采食和能量平衡的关键信号物质。动物转基因技术目前主要应用于生产珍贵蛋白、基因治疗、器官移植、动物品种改良和建立疾病模... 黑素皮质素受体4(Melanocortin receptor 4,MC4R)基因是影响猪生长肥育性能的主效基因之一,是参与调控体重、采食和能量平衡的关键信号物质。动物转基因技术目前主要应用于生产珍贵蛋白、基因治疗、器官移植、动物品种改良和建立疾病模型等方面。目前人们已经获得了如羊、牛、小鼠、猪等多种转基因克隆动物。确定外源基因的拷贝数和整合位点是对后续外源基因功能探讨和表型研究的前提条件。本研究将MC4R基因转入猪PK15细胞中,挑单克隆,通过3对特异性引物对转染细胞做PCR扩增检测出阳性细胞,实时荧光定量PCR检测外源基因拷贝数,初步建立了检测外源基因拷贝数的实验体系。 展开更多
关键词 MC4R基因 PK15细胞 阳性细胞 实时荧光定量PCR 外源基因拷贝数
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