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糖尿病肾病发病机制研究进展 被引量:127
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作者 李嘉欣 马婷婷 +1 位作者 南一 袁玲 《临床肾脏病杂志》 2019年第11期860-864,共5页
糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)是危害极大的糖尿病并发症,其患病率一直居高不下。对DKD的发病机制进行研究,有助于寻找有效治疗DKD的方法。现已明确DKD发病机制与糖代谢异常、炎性反应、氧化应激、内质网应激、自噬、外泌体... 糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)是危害极大的糖尿病并发症,其患病率一直居高不下。对DKD的发病机制进行研究,有助于寻找有效治疗DKD的方法。现已明确DKD发病机制与糖代谢异常、炎性反应、氧化应激、内质网应激、自噬、外泌体相关。其中自噬是一种应激反应的细胞内系统,通过激活mTOR和减少AMPK及Sirt1可以减弱自噬活动,以此为研究方向可能引出新的DKD治疗靶点。外泌体包含来源于细胞内的蛋白质、DNA及RNA,可以反映来源细胞的生理状态,有望作为DKD的诊断标志物。本文对DKD发病机制进行综述。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 发病机制 自噬
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肿瘤来源外泌体通过激活肺上皮细胞TLR3促进肺转移前微环境形成 被引量:43
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作者 刘艳芳 顾炎 +7 位作者 韩岩梅 张迁 蒋正平 张相 黄波 许小青 郑建明 曹雪涛 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期I0013-I0015,共3页
肿瘤转移是肿瘤患者死亡的主要原因。肿瘤转移前微环境是指原发灶肿瘤能通过肿瘤来源物质动员和募集骨髓来源细胞到转移靶器官,与靶器官中基质细胞的协同作用,创造利于肿瘤细胞定居的“土壤”。多种骨髓来源细胞(如中性粒细胞等)被... 肿瘤转移是肿瘤患者死亡的主要原因。肿瘤转移前微环境是指原发灶肿瘤能通过肿瘤来源物质动员和募集骨髓来源细胞到转移靶器官,与靶器官中基质细胞的协同作用,创造利于肿瘤细胞定居的“土壤”。多种骨髓来源细胞(如中性粒细胞等)被证实参与了转移前微环境的形成。 展开更多
关键词 肿瘤患者 微环境 肺转移 肺上皮细胞 激活 肿瘤转移 来源细胞
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外泌体及其在肿瘤诊疗中的意义 被引量:37
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作者 张敏 张晨光 丁卫 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期372-378,共7页
外泌体(exosome)是由多种活细胞分泌的囊泡小体,其中含有蛋白质和RNA等多种组分。这种机体内普遍存在的纳米级被膜结构能够参与细胞间的物质交换和信息交流,在多种生理和病理过程中发挥重要作用。外泌体在外周血、尿液、唾液、腹水、羊... 外泌体(exosome)是由多种活细胞分泌的囊泡小体,其中含有蛋白质和RNA等多种组分。这种机体内普遍存在的纳米级被膜结构能够参与细胞间的物质交换和信息交流,在多种生理和病理过程中发挥重要作用。外泌体在外周血、尿液、唾液、腹水、羊水等体液中具有很高的丰度,而不同组织来源的外泌体在组成和功能方面存在差异,同时这种差异受到细胞外基质和微环境的动态调控。肿瘤来源或肿瘤相关的外泌体是调控肿瘤发生发展的重要机制,对肿瘤外泌体的分析和检测可以辅助肿瘤的早期诊断、疗效评价和预后分析。此外,外泌体及其修饰加工产物还可以作为基因或药物的有效载体,用于肿瘤治疗。关于外泌体的研究是肿瘤学的一个新兴领域,在转化医学的研究模式下,将极大推动肿瘤学研究进展,为肿瘤临床诊断和治疗带来新的契机。 展开更多
关键词 肿瘤 生物标志物 小RNA 转化医学
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结构中药学:中药药效物质基础研究的新领域 被引量:36
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作者 乔宏志 狄留庆 +1 位作者 平其能 胡立宏 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期2443-2448,共6页
中药药效物质基础研究是中药继承和发展的关键科学问题。目前,对中药化学成分的研究已取得大量瞩目成果,但对其另一重要方面,即中药多组分形成的物理结构及其作用模式的解析,则尚未有清晰的认识和深入的研究。该文从制约物质基础研究的... 中药药效物质基础研究是中药继承和发展的关键科学问题。目前,对中药化学成分的研究已取得大量瞩目成果,但对其另一重要方面,即中药多组分形成的物理结构及其作用模式的解析,则尚未有清晰的认识和深入的研究。该文从制约物质基础研究的瓶颈入手,客观分析了导致现有问题的共性因素,并从近年来涌现的中药活性物质新发现、新进展中提炼总结出结构中药学概念,阐述了其基本思想、主要特征和研究模式,希望为中药药效物质基础及中药学其他研究领域提供理论和实践参考。 展开更多
关键词 结构中药学 药效物质 相态 炭药 汤剂 超分子 纳米技术 药辅合一 质量控制 中药制剂
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阿尔茨海默病及其治疗药物研究进展 被引量:34
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作者 朱杰 张钊 +1 位作者 董一筱 陈乃宏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1629-1634,共6页
阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)是导致全球老年人死亡的神经类重大疾病之一,AD患者生活往往不能自理,给患者及其家属带来严重负担。AD的发病机制目前尚未研究清楚,β淀粉样蛋白级联假说是当前公认的AD发病机制。在该假说基础上... 阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)是导致全球老年人死亡的神经类重大疾病之一,AD患者生活往往不能自理,给患者及其家属带来严重负担。AD的发病机制目前尚未研究清楚,β淀粉样蛋白级联假说是当前公认的AD发病机制。在该假说基础上,一些新的AD发病机制,如Tau异常磷酸化、昼夜节律、易感基因、炎症学说等都会对AD进程产生影响。免疫疗法、外泌体的研究、光刺激等新的治疗AD的方法也逐渐出现。该文主要以AD研究进展为依据,阐述AD可能的发病机制及其药物研发的新方向。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 研究进展 Β淀粉样蛋白 易感基因 药物研发
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外泌体的研究进展 被引量:33
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作者 卢婉 杨人强 王伶 《生命的化学》 CAS CSCD 2013年第4期438-442,共5页
外泌体(exosome)是细胞主动向胞外分泌的大小均一的囊泡样小体,具有抗肿瘤免疫、促血管新生等生理功能。不同类型的细胞可以释放出外泌体,正常生理状态下血液、尿液、乳汁和支气管灌洗液中也能分离到外泌体。本文主要对外泌体的结构、... 外泌体(exosome)是细胞主动向胞外分泌的大小均一的囊泡样小体,具有抗肿瘤免疫、促血管新生等生理功能。不同类型的细胞可以释放出外泌体,正常生理状态下血液、尿液、乳汁和支气管灌洗液中也能分离到外泌体。本文主要对外泌体的结构、功能和提取方法、外泌体与靶细胞的作用方式进行综述。 展开更多
关键词 MICRORNA 提取方法
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我国动脉粥样硬化基础研究几个热点领域的新进展 被引量:31
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作者 赵战芝 姜志胜 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2019年第8期645-654,共10页
动脉粥样硬化(As)是一种好发于大、中等动脉的由多因素导致的复杂的血管壁慢性病变。其病理特征包括脂质蓄积、平滑肌细胞迁移入内膜并增殖、炎性细胞浸润、胶原沉积、斑块形成等。越来越多的证据表明,NLRP3炎症小体、细胞焦亡、外泌体... 动脉粥样硬化(As)是一种好发于大、中等动脉的由多因素导致的复杂的血管壁慢性病变。其病理特征包括脂质蓄积、平滑肌细胞迁移入内膜并增殖、炎性细胞浸润、胶原沉积、斑块形成等。越来越多的证据表明,NLRP3炎症小体、细胞焦亡、外泌体、肠道菌群、外周血管脂肪组织、非编码RNA等与As的发生发展紧密联系在一起,并成为目前的研究热点。对上述因素在As发生发展中的作用的深入研究将有助于进一步理解As的发生机制及寻找新的有效治疗途径和生物标记物。文章对近两年来中国学者围绕上述方面进行的As基础研究进展作一综述。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 NLRP3炎症小 焦亡 肠道菌群 周血管脂肪组织 MIRNA lncRNA circRNA
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外泌体:为高效药物投递策略提供天然的内源性纳米载体 被引量:31
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作者 李思迪 侯信 +2 位作者 亓洪昭 赵瑾 原续波 《化学进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2016年第2期353-362,共10页
在细胞通讯过程中,细胞分泌的大小在40~100 nm之间的外泌体具有负载"货物"并将其传递给靶细胞的能力。外泌体是细胞通讯重要的调节者,当疾病发生时,外泌体的组成会发生变化,在诊断和治疗方面均具有重要作用。外泌体作为药物的天然内... 在细胞通讯过程中,细胞分泌的大小在40~100 nm之间的外泌体具有负载"货物"并将其传递给靶细胞的能力。外泌体是细胞通讯重要的调节者,当疾病发生时,外泌体的组成会发生变化,在诊断和治疗方面均具有重要作用。外泌体作为药物的天然内源性载体具有独特优势,如其免疫原性低,在血液中的稳定性高,向细胞运输药物的效率高,和更强的增强渗透滞留效应(EPR)。目前,外泌体已经成功运载基因类药物、抗癌药物和抗炎症药物等其他类型药物。作为基因类药物载体,外泌体有助于同时提高转染效率和降低副作用。作为抗癌类和抗炎症类药物载体,外泌体可较好地保护药物免遭人体清除。本文按照外泌体负载"货物"的种类综述外泌体作为药物载体的最新进展,并简要讨论构建外泌体药物运输系统所需考虑的外泌体的来源、提纯方法、载药种类、载药方式以及载药系统的使用方式等关键因素对外泌体药物运输系统的影响,展望外泌体药物运输系统临床应用所面临的挑战和可能的解决途径。 展开更多
关键词 药物运输 基因载 抗肿瘤药物 抗炎症药物
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子宫内膜异位症发病机制研究进展 被引量:29
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作者 王国云 袁明 姬苗苗 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2019年第6期33-39,共7页
子宫内膜异位症(EMs)是妇科常见疾病,在育龄期妇女中发病率为10%,EMs的主要症状包括疼痛与不孕,严重影响患者生活质量。但是目前缺乏EMs特异性无创诊断方法,EMs的治疗方式主要限于手术治疗和激素治疗,且均存在不良反应较多、复发率较高... 子宫内膜异位症(EMs)是妇科常见疾病,在育龄期妇女中发病率为10%,EMs的主要症状包括疼痛与不孕,严重影响患者生活质量。但是目前缺乏EMs特异性无创诊断方法,EMs的治疗方式主要限于手术治疗和激素治疗,且均存在不良反应较多、复发率较高的问题。EMs发病机制的不明确导致EMs诊疗尚无突破性进展。目前经血逆流学说为EMs发病主流学说,但最新研究表明EMs是一个复杂的慢性疾病,经血逆流很可能只是EMs的诱因,后续复杂的基因、免疫与环境因素之间的相互作用在EMs进程中发挥重要作用。归纳目前EMs主要发病机制学说,凝练EMs各分支领域的最新进展,着重总结EMs研究的新方向,并进一步提出EMs机制研究中面临的难题。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 基因 免疫 肠道微生物
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脂肪干细胞来源外泌体对人脐静脉血管内皮细胞增殖、迁移及管样分化的影响 被引量:27
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作者 张静 易阳艳 +2 位作者 阳水发 朱元正 胡玄 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1351-1357,共7页
目的探讨脂肪干细胞来源外泌体(adipose-derived stem cell released exosomes,ADSC-Exos)对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖、迁移及管样分化的影响。方法取吸脂患者自愿捐赠的脂肪组织,采... 目的探讨脂肪干细胞来源外泌体(adipose-derived stem cell released exosomes,ADSC-Exos)对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖、迁移及管样分化的影响。方法取吸脂患者自愿捐赠的脂肪组织,采用酶消化法分离培养获得ADSCs,并行流式细胞检测及成脂诱导鉴定。收集第3代ADSCs上清液提取外泌体,透射电镜观察其形态,Western blot检测其膜表面标志性蛋白Alix和CD63,用纳米颗粒跟踪分析仪NanoSight分析外泌体粒径分布范围。用PKH26荧光标记的ADSC-Exos与HUVECs共培养后,共聚焦显微镜观察ADSC-Exos能否进入HUVECs。将ADSC-Exos与HUVECs共培养1、2、3、4、5 d,CCK-8法检测ADSC-Exos对HUVECs增殖影响;共培养12 h时ELISA法检测细胞上清液VEGF蛋白表达量。采用Transwell迁移实验检测ADSC-Exos对HUVECs迁移能力的影响。通过体外Matrigel基质胶实验,观察ADSCExos对HUVECs管状结构形成的影响;将HUVECs与Matrigel基质胶混合后联合ADSC-Exos注射在BALB/c雄性裸鼠皮下,2周后检测基质胶中新生血管情况,计算平均血管密度(mean blood vessel density,MVD)。上述实验均以等量PBS作为对照。结果经鉴定所培养细胞符合ADSCs的特征。ADSC-Exos为形态一致的圆形或椭圆形膜性囊泡,表达标志性蛋白Alix和CD63,粒径范围30~200 nm。共聚焦显微镜观察示ADSC-Exos可被HUVECs摄取。CCK-8法检测示,各时间点实验组细胞增殖均优于对照组(P<0.05)。Transwell实验结果显示,实验组跨膜迁移细胞数较对照组显著增多(t=9.534,P=0.000)。在体外Matrigel胶成管实验中,实验组管样结构数明显多于对照组(t=15.910,P=0.000);在体内实验中,实验组MVD亦显著高于对照组(t=16.710,P=0.000)。ELISA检测示,实验组细胞上清液VEGF蛋白表达量明显高于对照组(t=21.470,P=0.000)。结论 ADSC-Exos可促进HUVECs增殖、迁移及管样结构形成,提示ADSC-Exos可促进血管新生。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 血管新生 人脐静脉血管内皮细胞
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外泌体提取方法及鉴定分析研究进展 被引量:24
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作者 贺娇 许泼实 《中华实用诊断与治疗杂志》 2018年第7期718-721,共4页
外泌体是活细胞分泌的纳米级胞外囊泡,广泛存在于生物体体液中。外泌体携带蛋白质、脂质、核酸等,可反映来源细胞的生理、病理情况,在细胞间物质交换和信息传递中发挥重要作用。外泌体作为肿瘤标志物,可用于肿瘤的诊断,进展及预后评估,... 外泌体是活细胞分泌的纳米级胞外囊泡,广泛存在于生物体体液中。外泌体携带蛋白质、脂质、核酸等,可反映来源细胞的生理、病理情况,在细胞间物质交换和信息传递中发挥重要作用。外泌体作为肿瘤标志物,可用于肿瘤的诊断,进展及预后评估,还可作为纳米载体装载基因或药物到达靶器官,在临床治疗中有较好的应用前景。因此,外泌体分离提取、鉴定分析成为目前研究的热点。本研究就外泌体提取方法及鉴定分析的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 提取方法 鉴定分析
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外泌体在类风湿性关节炎发病机制中的研究进展 被引量:23
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作者 邓雷弘 龚芸 +1 位作者 黄晓林 巢海潮 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期556-561,共6页
外泌体是细胞主动分泌的一种直径30~100 nm的囊泡状小体,其内容物含有蛋白质、脂质及RNA等多种成分。外泌体参与介导细胞间的通讯,参与炎症反应、细胞增殖与分化、组织修复、免疫信号通路转导及应激反应等体内多种生理及病理进程。大量... 外泌体是细胞主动分泌的一种直径30~100 nm的囊泡状小体,其内容物含有蛋白质、脂质及RNA等多种成分。外泌体参与介导细胞间的通讯,参与炎症反应、细胞增殖与分化、组织修复、免疫信号通路转导及应激反应等体内多种生理及病理进程。大量研究显示外泌体可以调节、维持自身免疫性疾病,尤其是类风湿性关节炎的发生与进展,其可能是类风湿性关节炎新的诊断标志物及潜在的治疗载体。 展开更多
关键词 自身免疫性疾病 类风湿性关节炎
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间充质干细胞来源外泌体促进损伤组织修复与再生的应用与进展 被引量:23
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作者 李超然 黄桂林 王帅 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第1期133-139,共7页
背景:近年来许多研究表明间充质干细胞所发挥的组织修复与再生功能在很大程度上是由其旁分泌作用而实现的,而外泌体是其中一种重要的旁分泌因子,已成为研究者们关注的重点。目的:阐明外泌体的组成、来源及生物学特性,总结近年来间充质... 背景:近年来许多研究表明间充质干细胞所发挥的组织修复与再生功能在很大程度上是由其旁分泌作用而实现的,而外泌体是其中一种重要的旁分泌因子,已成为研究者们关注的重点。目的:阐明外泌体的组成、来源及生物学特性,总结近年来间充质干细胞来源外泌体在组织修复与再生方面的最新研究成果,并展望其在口腔领域的应用前景。方法:用计算机检索1983至2017年PubMed数据库和中国知网(CNKI)期刊全文数据库收录的相关文献。英文检索词为"exosome,MSC-exosomes,tissue repair and regeneration,oral diseases",中文检索词为"外泌体,间充质干细胞来源外泌体,组织修复与再生,口腔疾病",共纳入61篇文献。结果与结论:外泌体是细胞分泌的内含多种蛋白质及RNA等成分的小囊泡,在细胞间通讯中起重要作用,具有抑制细胞凋亡、刺激增殖、免疫调节等功能。间充质干细胞来源外泌体在骨损伤修复、皮肤损伤修复、神经损伤修复、肝损伤修复中都起到重要作用,但其作用机制还不明确,在口腔领域应用相对较少,值得深入研究和探索。 展开更多
关键词 间质干细胞 组织工程
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循环外泌体miRNAs在结直肠癌中的标志作用和临床转化中的挑战 被引量:22
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作者 刘学娟 甘海宁 +1 位作者 张丽妹 徐学虎 《分子诊断与治疗杂志》 2019年第3期157-163,共7页
循环miRNAs是“液体活检”的重要组成部分,包括游离和囊泡中miRNAs,囊泡中miRNAs能够稳定存在,是循环miRNAs的主要来源。外泌体是30~150nm的囊泡,外泌体来源的miRNAs是肿瘤细胞微环境中信号交流的重要媒介,几乎参与肿瘤发生发展的全部... 循环miRNAs是“液体活检”的重要组成部分,包括游离和囊泡中miRNAs,囊泡中miRNAs能够稳定存在,是循环miRNAs的主要来源。外泌体是30~150nm的囊泡,外泌体来源的miRNAs是肿瘤细胞微环境中信号交流的重要媒介,几乎参与肿瘤发生发展的全部生物过程。本文从循环外泌体miRNAs相关生物学特性、在结直肠癌中的生物标志物作用、血液样本收集及预处理相关注意事项、临床转化的挑战和研究局限、未来展望等方面展开论述,以期能够为结直肠癌循环外泌体miRNAs研究领域的研究者们提供参考。 展开更多
关键词 循环miRNAs 结直肠癌
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外泌体研究、转化和临床应用专家共识 被引量:22
15
作者 张灏 +1 位作者 赵立波 叶国栋 《转化医学杂志》 2018年第6期321-325,共5页
由于外泌体在肿瘤等疾病的基础研究、转化应用和诊断治疗中展现出的巨大潜力而备受瞩目。在发展精准医疗产业的背景下,如何建立相关领域的标准与规范,促进产学研结合,理性引导技术转化,需要来自于基础科研、临床、检验等领域的专家,以... 由于外泌体在肿瘤等疾病的基础研究、转化应用和诊断治疗中展现出的巨大潜力而备受瞩目。在发展精准医疗产业的背景下,如何建立相关领域的标准与规范,促进产学研结合,理性引导技术转化,需要来自于基础科研、临床、检验等领域的专家,以及监管部门的多方参与合作。为推动和促进国内外泌体特别是外泌体肿瘤标志物的研究和转化应用的有序开展,中国抗癌协会肿瘤标志专业委员会外泌体技术专家委员会组织专家撰写了外泌体研究、转化和临床应用专家共识。在本共识中,就外泌体研究领域的发展历程与现状阐述了观点及立场,并对外泌体研究的未来方向进行了展望。 展开更多
关键词 转化研究 活检 精准医学
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血清中胎盘来源外泌体的分离与鉴定 被引量:21
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作者 李玉静 刁振宇 +4 位作者 薛平平 沈莉 龚萍 颜桂军 胡娅莉 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第6期632-636,共5页
目的妊娠期间,胎盘可释放外泌体到母体循环,在正常妊娠或胎盘相关妊娠并发症中发挥重要作用。文中旨在建立简便、高效、低耗的母血清胎盘来源外泌体的分离纯化方法,为妊娠疾病研究奠定基础。方法蔗糖梯度离心联合2次8%PEG6000沉淀,分离... 目的妊娠期间,胎盘可释放外泌体到母体循环,在正常妊娠或胎盘相关妊娠并发症中发挥重要作用。文中旨在建立简便、高效、低耗的母血清胎盘来源外泌体的分离纯化方法,为妊娠疾病研究奠定基础。方法蔗糖梯度离心联合2次8%PEG6000沉淀,分离纯化正常孕妇血清中胎盘来源外泌体,Western blot检测胎盘来源外泌体标记蛋白分子(CD63、CD81、PLAP),银染法分析各密度层中所有蛋白质条带,透射电镜鉴定胎盘来源外泌体形态,动态光散射测定外泌体粒径及分布。结果通过蔗糖密度梯度离心后得到的各分层液经蛋白质SDS-PAGE胶电泳,银染后可见各蛋白分子条带清晰可见,Western blot结果显示CD63、CD81和PLAP同时表达于21%~34%蔗糖密度层,证明血清胎盘外泌体主要存在于1.09~1.16g/m L蔗糖密度层。透射电镜鉴定获得的胎盘来源外泌体形态符合一般外泌体特征,且特异表达PLAP。动态光散射测定获得的胎盘外泌体直径分布于28~91 nm,且大小均一。结论成功建立了一种简便、快捷、高效分离血清中胎盘来源外泌体的改良方法,为研究胎盘外泌体在正常妊娠及胎盘相关并发症中的作用奠定实验基础。 展开更多
关键词 胎盘 分离 胎盘碱性磷酸酶
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外泌体在体外对乳腺癌细胞耐药信息传递的作用 被引量:21
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作者 许乘凤 杨振林 +5 位作者 花义同 程凯 滕晓飞 张英哲 刘健 王晓红 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期193-198,220,共7页
目的探讨外泌体(exosomes,EXOs)在乳腺癌细胞间耐药信息的传递作用。方法选用乳腺癌敏感细胞株(MCF-7)及其阿霉素耐药株(MCF-7/ADR)为模型,用超速离心法提取MCF-7/ADR外泌体(ADR/EXO);用透射电子显微镜观察鉴定细胞外泌体形态;运用倒置... 目的探讨外泌体(exosomes,EXOs)在乳腺癌细胞间耐药信息的传递作用。方法选用乳腺癌敏感细胞株(MCF-7)及其阿霉素耐药株(MCF-7/ADR)为模型,用超速离心法提取MCF-7/ADR外泌体(ADR/EXO);用透射电子显微镜观察鉴定细胞外泌体形态;运用倒置荧光显微镜观察ADR/EXO与MCF-7细胞的相互作用过程;运用激光共聚焦显微镜观察MCF-7与MCF-7/ADR在Transwell小室共培养60h后细胞内阿霉素药物浓度变化;运用CCK-8法检测ADR/EXO与MCF-7细胞共培养后对阿霉素的IC50的影响;运用RT-PCR检测MCF-7与ADR/EXO共培养后MDR1基因表达水平的变化;运用Western blot法检测MCF-7与ADR/EXO共培养12h和72h后P-gp表达水平的变化。结果透射电子显微镜下,外泌体呈现典型的圆形或椭圆形杯口状结构,直径为40~100nm;用PKH67标记ADR/EXO显示,ADR/EXO是可以被MCF-7细胞摄取;与ADR/EXO共培养后敏感细胞株MCF-7对阿霉素的IC50耐药性升高2.62倍,差异有统计学意义(P<0.05);经过与MCF-7/ADR在Transwell小室中共培养60h后的MCF-7细胞,胞内可见阿霉素聚集减少,核区分布减少,荧光强度减弱;MCF-7+ADR/EXO组MDR1的mRNA表达量明显增加,是MCF-7组的8.69倍,差异有统计学意义(P<0.05);与MCF-7组相比,共培养12h的MCF-7+ADR/EXO组P-gp相对表达量升高4.64倍,差异有统计学意义(P<0.05);与MCF-7组相比,共培养72h的MCF-7+ADR/EXO组P-gp相对表达量升高3.37倍,差异有统计学意义(P<0.05)。结论乳腺癌外泌体可能具有传递耐药信息的作用,耐药细胞外泌体能够使敏感细胞获得一定的耐药性,耐药细胞外泌体向敏感细胞传递P-gp,不仅可以通过蛋白形式进行传递,而且可以通过mRNA的形式进行传递。 展开更多
关键词 乳腺癌 耐药P-gp
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2型糖尿病肾病患者尿液外泌体中miRNA的表达谱分析研究 被引量:21
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作者 罗艳 胡桂英 《检验医学与临床》 CAS 2017年第9期1271-1274,共4页
目的研究2型糖尿病肾病(DN)患者尿液外泌体中miRNA的表达谱。方法采用miRNA芯片技术,分别检测8例健康受试者(对照组)、8例2型糖尿病(T2D)患者(T2D组)、8例2型DN患者(DN组)的尿液来分析期内外泌体的miRNA的表达谱。并用实时定量荧光PCR... 目的研究2型糖尿病肾病(DN)患者尿液外泌体中miRNA的表达谱。方法采用miRNA芯片技术,分别检测8例健康受试者(对照组)、8例2型糖尿病(T2D)患者(T2D组)、8例2型DN患者(DN组)的尿液来分析期内外泌体的miRNA的表达谱。并用实时定量荧光PCR进行验证;挑选表达差异最大的miRNA与微量蛋白尿进行相关分析。结果 DN组与对照组、T2D患者比较,存在16个miRNA表达异常(大于2倍),其中14个miRNA(miR-320c、miR-6068、miR-1234-5p、miR-6133、miR-4270、miR-4739、miR-371b-5p、miR-638、miR-572、miR-1227-5p、miR-6126、miR-1915-5p、miR-4778-5P和miR-2861)表达上调,而2个miRNA(miR-30d-5p和miR-30e-5p)表达下调。miRNA miR-320c和miR-6068在DN组尿液外泌体中表达最多。尿液外泌体miR-320c表达上调与肾小球滤过率预计值的增加呈负相关(筛选序列:R^2=0.23,P=0.11;确认序列:R^2=0.61,P=0.004)。DN组尿液外泌体miR-320c的水平与肾小球滤过率预计值在筛选队列和确认队列中都没有显著相关性(筛选队列:R^2=0.08,P=0.55;确认队列:R^2=0.01,P=0.87),但与尿清蛋白肌酐比值成显著正相关(R^2筛选队列:R^2=0.69,P=0.02;确认队列:R^2=0.94,P=0.005)。结论 DN组与T2D组尿液外泌体中miRNA水平有差异,表达异常的miR-320c可能通过靶蛋白血小板反应蛋白1(TSP-1)对转化生长因子(TGF)-β信号转导通路产生影响,miR-320c有望作为DN的一种新候选标志物,用于在今后研究中评估疾病进展。 展开更多
关键词 2型糖尿病 糖尿病肾病 基因芯片
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脂肪间充质干细胞来源外泌体对脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡及炎症因子影响 被引量:21
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作者 郝海珍 郭铁 余丹 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第17期1656-1665,共10页
目的探讨脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADMSCs)来源外泌体对脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡及炎症因子影响。方法取10只健康雄性8周龄SD大鼠附睾旁脂肪组织,提取ADMSCs进行细胞培养,取第3代ADMSCs分别在常氧(2... 目的探讨脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADMSCs)来源外泌体对脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡及炎症因子影响。方法取10只健康雄性8周龄SD大鼠附睾旁脂肪组织,提取ADMSCs进行细胞培养,取第3代ADMSCs分别在常氧(21%)和低氧(1%)条件培养,24 h后取培养皿上清液,试剂盒提取法分离外泌体。60只健康雄性8周龄SD大鼠按随机数字表法等分为5组:假手术组、缺血再灌注组、PBS组、低氧外泌体组、常氧外泌体组(n=12),后4组采用Longa改良线栓法建立脑缺血再灌注模型,其中缺血再灌注组仅进行造模,不进行干预,PBS组经尾静脉注射PBS 2 mL,低氧外泌体组和常氧外泌体组分别同时给予等量低氧外泌体和常氧外泌体100μg。在大鼠脑缺血再灌注损伤后24 h,采用Longa法测定各组大鼠神经功能缺损评分,TTC染色测量脑梗死体积,TUNEL法检测神经元凋亡情况,HE染色观察组织病理学变化,免疫组化检测细胞色素C(CytC)和白细胞介素-1β(IL-1β)的表达。结果与PBS组相比,低氧外泌体组和常氧外泌体组病理学改变减轻,神经功能缺损评分、脑梗死体积百分比、细胞色素C和IL-1β的表达及神经元凋亡指数均明显降低(P<0.05),低氧外泌体组较常氧外泌体组降低更为明显(P<0.05)。结论 ADMSCs来源外泌体能减少脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡和炎症因子IL-1β的表达,有神经保护作用,其机制可能是外泌体抑制了线粒体介导的细胞凋亡和IL-1β参与的炎症级联反应。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 神经元凋亡 细胞色素C 白细胞介素-1Β 脑缺血再灌注损伤
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流式细胞术的发展、应用及前景 被引量:21
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作者 杭海英 刘春春 任丹丹 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期68-83,共16页
以流动中的细胞或颗粒为测量对象的流式细胞术能够在短时间内提供具有统计意义的大量单细胞、颗粒或集聚体的测量数据。经过70多年的发展,它已经成为生物学、医学、环境检测等多领域不可或缺的技术。这一技术于20世纪40年代被提出,于70... 以流动中的细胞或颗粒为测量对象的流式细胞术能够在短时间内提供具有统计意义的大量单细胞、颗粒或集聚体的测量数据。经过70多年的发展,它已经成为生物学、医学、环境检测等多领域不可或缺的技术。这一技术于20世纪40年代被提出,于70年代成型,并在此后40多年里,检测性能、多参数测量能力和分选能力得到显著发展,而它的应用领域更是飞速扩展到从细菌、环境微生物检测、常规细胞功能检测,到许多临床疾病诊断和监测,再到最前沿的肿瘤免疫机理研究、免疫疗法和生物制药等广泛领域。当前,一系列新技术和相应的新型流式细胞仪被开发出来,虽然工作原理有别于传统方式,但获取大规模单细胞多参数测量的理念从未变化。流式细胞术领域正处于技术大发展和大变革的前夜。 展开更多
关键词 流式细胞术 分化簇 大肠杆菌 高维数据自动分析技术
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