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马铃薯X病毒CP基因的原核表达及特异性抗血清的制备
被引量：
17
1
作者
吴兴泉
陈士华
+2 位作者
吴祖建
林奇英
谢联辉
《郑州工程学院学报》
CAS
北大核心
2003年第2期25-28,共4页
依据马铃薯X病毒(PotatovirusX,PVX)外壳蛋白(CP)基因序列(711bp)设计合成了两对引物,通过RT-PCR扩增得到长0.7bp的目的片段.将目的片段转入大肠杆菌,酶切鉴定证明得到了含有目的片段的重组子,测定序列结果与其他PVX分离物CP基因序列比...
依据马铃薯X病毒(PotatovirusX,PVX)外壳蛋白(CP)基因序列(711bp)设计合成了两对引物,通过RT-PCR扩增得到长0.7bp的目的片段.将目的片段转入大肠杆菌,酶切鉴定证明得到了含有目的片段的重组子,测定序列结果与其他PVX分离物CP基因序列比较,发现其核苷酸同源性最高可达99%左右,证明此病毒为PVX.构建了含PVXCP基因的融合蛋白原核表达载体,并在大肠杆菌中得到表达,SDS-PAGE测定该融合蛋白GST-XCP的相对分子质量为52000.Westemblot分析结果显示,GST-XCP与PVX抗血清有很强的免疫反应,表明GST-XCP有天然状态下病毒核衣壳蛋白的抗原性.制备了GST-XCP抗血清,并利用此抗血清建立了PVX的间接ELISA检测方法,检测灵敏度为1mg鲜重的病株叶片.
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关键词
马铃薯
X病毒
外壳
蛋白
基因序列
抗血清
原核表达
病毒病
病毒检测
下载PDF
职称材料
烟草坏死病毒A大豆分离物的分子鉴定
被引量：
6
2
作者
席德慧
李江
+4 位作者
曹淳
韩成贵
李大伟
于嘉林
周雪平
《植物病理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期595-603,共9页
对曹琦和濮祖芹早期分离到的烟草坏死病毒大豆分离物的生物学、血清学和外壳蛋白的序列进行了进一步研究。该分离物能侵染8科29种植物,除系统侵染大豆和本生烟外,其余寄主均为局部侵染。电镜下病毒粒子呈球状,直径约28nm。基因组为单组...
对曹琦和濮祖芹早期分离到的烟草坏死病毒大豆分离物的生物学、血清学和外壳蛋白的序列进行了进一步研究。该分离物能侵染8科29种植物,除系统侵染大豆和本生烟外,其余寄主均为局部侵染。电镜下病毒粒子呈球状,直径约28nm。基因组为单组分RNA,大小约为3.7 kb,具有2条亚基因组,分别约为1.6 kb和1.3 kb。外壳蛋白亚基的分子量约为30 kDa。血清学试验表明,该分离物与TNV柳树分离物的抗血清呈特异反应,与同属坏死病毒属(Necrovirus)的烟草坏死病毒D(TNV-D)和甜菜黑色焦枯病毒(BBSV)无血清学关系。利用简并引物通过RT-PCR克隆了该分离物的外壳蛋白基因。序列分析表明,该分离物与烟草坏死病毒A(TNV-A)、TNV-D和TNV-DH的外壳蛋白分别具有88.77%、45.13%和45.49%的氨基酸序列一致性。因此,该大豆分离物属于TNV-A的一个新株系,命名为TNV-AC。
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关键词
烟草坏死病毒A
大豆分离物
生物学性质
血清学
外壳
蛋白
基因序列
下载PDF
职称材料
题名
马铃薯X病毒CP基因的原核表达及特异性抗血清的制备
被引量：
17
1
作者
吴兴泉
陈士华
吴祖建
林奇英
谢联辉
机构
福建农林大学植物病毒研究所
出处
《郑州工程学院学报》
CAS
北大核心
2003年第2期25-28,共4页
基金
福建省农业厅和国家教育部资助项目(00183)
文摘
依据马铃薯X病毒(PotatovirusX,PVX)外壳蛋白(CP)基因序列(711bp)设计合成了两对引物,通过RT-PCR扩增得到长0.7bp的目的片段.将目的片段转入大肠杆菌,酶切鉴定证明得到了含有目的片段的重组子,测定序列结果与其他PVX分离物CP基因序列比较,发现其核苷酸同源性最高可达99%左右,证明此病毒为PVX.构建了含PVXCP基因的融合蛋白原核表达载体,并在大肠杆菌中得到表达,SDS-PAGE测定该融合蛋白GST-XCP的相对分子质量为52000.Westemblot分析结果显示,GST-XCP与PVX抗血清有很强的免疫反应,表明GST-XCP有天然状态下病毒核衣壳蛋白的抗原性.制备了GST-XCP抗血清,并利用此抗血清建立了PVX的间接ELISA检测方法,检测灵敏度为1mg鲜重的病株叶片.
关键词
马铃薯
X病毒
外壳
蛋白
基因序列
抗血清
原核表达
病毒病
病毒检测
Keywords
potato virus X
coat protein gene
expression
antiserum
分类号
S432 [农业科学—植物病理学]
S435.32 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
烟草坏死病毒A大豆分离物的分子鉴定
被引量：
6
2
作者
席德慧
李江
曹淳
韩成贵
李大伟
于嘉林
周雪平
机构
中国农业大学农业生物技术国家重点实验室
浙江大学生物技术研究所
出处
《植物病理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期595-603,共9页
基金
国家自然科学基金资助项目(3032500130470077)
文摘
对曹琦和濮祖芹早期分离到的烟草坏死病毒大豆分离物的生物学、血清学和外壳蛋白的序列进行了进一步研究。该分离物能侵染8科29种植物,除系统侵染大豆和本生烟外,其余寄主均为局部侵染。电镜下病毒粒子呈球状,直径约28nm。基因组为单组分RNA,大小约为3.7 kb,具有2条亚基因组,分别约为1.6 kb和1.3 kb。外壳蛋白亚基的分子量约为30 kDa。血清学试验表明,该分离物与TNV柳树分离物的抗血清呈特异反应,与同属坏死病毒属(Necrovirus)的烟草坏死病毒D(TNV-D)和甜菜黑色焦枯病毒(BBSV)无血清学关系。利用简并引物通过RT-PCR克隆了该分离物的外壳蛋白基因。序列分析表明,该分离物与烟草坏死病毒A(TNV-A)、TNV-D和TNV-DH的外壳蛋白分别具有88.77%、45.13%和45.49%的氨基酸序列一致性。因此,该大豆分离物属于TNV-A的一个新株系,命名为TNV-AC。
关键词
烟草坏死病毒A
大豆分离物
生物学性质
血清学
外壳
蛋白
基因序列
Keywords
Tobacco necrosis virus A
soybean isolate
biological properties
serology
coat protein gene sequence
分类号
S432.41 [农业科学—植物病理学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
马铃薯X病毒CP基因的原核表达及特异性抗血清的制备
吴兴泉
陈士华
吴祖建
林奇英
谢联辉
《郑州工程学院学报》
CAS
北大核心
2003
17
下载PDF
职称材料
2
烟草坏死病毒A大豆分离物的分子鉴定
席德慧
李江
曹淳
韩成贵
李大伟
于嘉林
周雪平
《植物病理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
6
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
统计分析
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