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rhG-CSF动员的骨髓和外周血干细胞混合移植物首次采集时供者外周血单核细胞计数反映混合采集物中CD34^+细胞含量 被引量:6
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作者 常英军 赵翔宇 +1 位作者 霍明瑞 黄晓军 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第1期146-150,共5页
本研究探讨人重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员的骨髓和外周血干细胞混合移植健康供者首次干细胞采集时供者外周血单核细胞数量与骨髓/外周血混合采集物中CD34+细胞数量的关系。对70名亲缘健康供者均皮下注射rhG-CSF 5μg/(kg.d),连... 本研究探讨人重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员的骨髓和外周血干细胞混合移植健康供者首次干细胞采集时供者外周血单核细胞数量与骨髓/外周血混合采集物中CD34+细胞数量的关系。对70名亲缘健康供者均皮下注射rhG-CSF 5μg/(kg.d),连续5天。第4天和第5天分别采集骨髓和外周血干细胞。首次干细胞采集时用EX2100血细胞分析仪检测供者外周血细胞计数,同时应用流式细胞仪测定骨髓和外周血混合采集物中的CD34+细胞数量。结果表明:rhG-CSF动员的70例供者首次干细胞采集时外周血单核细胞的数量为(1.15±0.60)×109/L;骨髓和外周血采集物中的CD34+细胞总量分别是(5.85±2.93)×107和(1.33±0.77)×108;骨髓和外周血混合采集物的CD34+细胞总量是(1.92±0.86)×108。Pearson和Spearman分析显示首次干细胞采集时供者外周血单核细胞计数(×109/L)与骨髓采集物中CD34+细胞的总量(相关系数:r=0.265,p=0.027)、外周血采集物中CD34+细胞总量(r=0.340,p=0.004)以及混合移植物中CD34+细胞的总量(r=0.398,p=0.001)均存在显著的相关性;多因素分析表明,首次干细胞采集时供者外周血单核细胞计数与骨髓采集物、外周血采集物以及混合移植物中CD34+细胞的总量均呈正相关关系(p值分别为0.027、0.004和0.001)。首次干细胞采集时供者外周血单核细胞数量对混合移植物中CD34+细胞总量预测的敏感性是71%,特异性是70%(p=0.007)。结论:rhG-CSF动员的骨髓和外周血混合移植健康供者首次干细胞采集时外周血单核细胞计数可有效预测输注给受者的CD34+细胞总量即采集效果。 展开更多
关键词 粒细胞集落刺激因子 骨髓移植 外周血采集 CD34^+细胞 单核细胞
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人重组粒细胞集落刺激因子动员后采集骨髓对健康供者外周血采集物成份的影响 被引量:5
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作者 常英军 赵翔宇 +2 位作者 霍明瑞 罗小华 黄晓军 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第3期610-613,共4页
本研究探讨健康供者体内应用人重组粒细胞集落刺激因子(G-CSF)后采集骨髓对外周血采集物成份的影响。62例健康供者皮下注射rhG-CSF5μg/(kg·d),连用5天,其中31例供者在第4、5天分别采集骨髓和外周血采集物(A组);另31例供者于第4、... 本研究探讨健康供者体内应用人重组粒细胞集落刺激因子(G-CSF)后采集骨髓对外周血采集物成份的影响。62例健康供者皮下注射rhG-CSF5μg/(kg·d),连用5天,其中31例供者在第4、5天分别采集骨髓和外周血采集物(A组);另31例供者于第4、5天均单采集外周血单个核细胞(B组)。应用流式细胞术检测两组供者外周血采集物中的淋巴细胞、CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD14+、CD34+细胞以及CD3+CD4-CD8-T细胞的数量。结果显示,A组供者每微升外周血采集物中单个核细胞中CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD14+、CD34+细胞以及CD3+CD4-CD8-T细胞的中位含量分别1.56×105μl、8.56×104μl、6.12×104μl、3.38×104μl、2.27×104μl、3.83×104μl、744μl及3588μl,与B组的1.40×105μl、7.34×104μl、5.32×104μl、3.06×104μl、1.83×104μl、3.21×104μl、554μl及3120μl的差异无统计学意义(p>0.05);A组外周血采集物中CD4+细胞与CD8+细胞的比值[1.52(0.54-2.87)]、单核细胞与CD3+细胞的比值[0.57(0.15-1.64)]以及CD3+CD4-CD8-T细胞与CD3+细胞[0.064(0.018-0.673)]的比值与B组[1.68(0.31-3.35)]、[0.59(0.18-1.25)]、[0.063(0.021-0.136)]的差异均无统计学意义(p>0.05)。结论:健康供者体内应用rhG-CSF后采集骨髓对外周血采集物成份无影响,对rhG-CSF动员的同一健康供者可单独采集骨髓、外周血采集物或同时采集两种采集物以满足临床移植的需要。 展开更多
关键词 G—CSF G—CSF动员 外周血采集 骨髓采集
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rhG-CSF对供者骨髓和外周血采集物中Th17细胞的影响 被引量:3
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作者 徐玲玲 赵翔宇 黄晓军 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第6期1548-1551,共4页
本研究探讨人重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)供者体内应用对骨髓采集物(GBM)和外周血采集物(GPB)中Th17细胞的影响。对25名亲缘供者皮下注射rhG-CSF5μg/(kg.d),连用5天,于第4、5天分别采集骨髓和外周血,注射前留取部分供者稳态骨髓(s... 本研究探讨人重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)供者体内应用对骨髓采集物(GBM)和外周血采集物(GPB)中Th17细胞的影响。对25名亲缘供者皮下注射rhG-CSF5μg/(kg.d),连用5天,于第4、5天分别采集骨髓和外周血,注射前留取部分供者稳态骨髓(steady state bone mavrow,SSBM)和稳态外周血(steady state peripheral blood,SSPB)。采用流式细胞术测定动员前后供者骨髓和外周血中T细胞分泌IL-17的变化。结果显示:rhG-CSF体内应用后供者骨髓中CD4+T细胞和CD8+T细胞分泌Il-17的能力较稳态骨髓明显下降(GBM vs SSBM Th17/CD4+T,0.74%±0.27%vs1.78%±1.19%,p<0.05;Tc17/CD8+T,0.19%±0.16% vs 0.36%±0.37%,p<0.05),外周血中的变化与骨髓相同(GPBvsSSPBTh17/CD4+ T,1.82%±0.91%vs3.26%±1.89%,p<0.01;Tc17/CD8+T,0.21%±0.17%vs0.44%±0.28%,p<0.01)。25例供者GBM与GPB相比,GPB中Th17/CD4+ T和Tc17/CD8+ T的比值均高于GBM(p<0.05,p<0.01)。结论:体内应用rhG-CSF能够抑制供者骨髓及外周血采集物中Th17细胞的产生,它可能是GPB和/或GBM混合移植对GVHD的发生率没有增加的部分原因。 展开更多
关键词 粒细胞集落刺激因子 外周血采集 骨髓采集 TH17细胞 Tc17细胞 移植抗宿主病
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应用TGF-β_1从rhG-CSF动员的外周血采集物中诱导产生CD4^+ CD25^+调节性T细胞 被引量:1
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作者 上官志敏 王保龙 +5 位作者 梁晓浏 叶书来 陈家萍 应美爱 廖艳秋 完晓菊 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期103-106,共4页
目的探讨在人重组的粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员的外周血单个核细胞中诱导产生CD4+CD25+调节性T细胞可行性及其表型和功能。方法收集本院外周血干细胞移植术供者rhG-CSF动员前外周血(PB组)和动员后的外周血采集物(G-PB组)各10例,... 目的探讨在人重组的粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员的外周血单个核细胞中诱导产生CD4+CD25+调节性T细胞可行性及其表型和功能。方法收集本院外周血干细胞移植术供者rhG-CSF动员前外周血(PB组)和动员后的外周血采集物(G-PB组)各10例,用免疫磁珠法分选出CD4+CD25?T细胞,并用转化生长因子β1(TGF-β1)进行诱导,分别应用流式细胞术、RT-PCR和细胞增殖、抑制试验测定诱导后细胞的CD25、Foxp3表达和免疫抑制功能,比较2组之间CD4+CD25+T细胞转化率、抑制功能的差异。结果1)G-PB和PB来源的CD4+CD25?T细胞在抗-CD3 M cAb和TGF-β1作用下CD25+分子表达不同,分别为:(77.9±2.3)%和(65.7±4.2)%,差异有统计学意义(P<0.05);2)TGF-β1诱导产生的CD4+CD25+T细胞高表达Foxp3;3)PB、G-PB来源的TGF-β1诱导产生的CD4+CD25+T细胞具有免疫抑制功能,cpm值分别为:11 739±352和18 732±437(P<0.05)。结论G-CSF动员的外周血可作为CD4+CD25+调节性T细胞的重要来源。 展开更多
关键词 转化生长因子β1(TGF-β1) 粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF) 外周血采集 CD4^+CD25^+调节性T细胞
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动员后骨髓和外周血采集物中T细胞CCR5表达的对比研究
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作者 王萌 任汉云 +4 位作者 孙慧 谢新生 马杰 甘思林 刘延方 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期821-826,共6页
目的:研究动员后骨髓和外周血采集物中T细胞CCR5表达的异同,分析移植物中T细胞CCR5的表达与移植后急性移植物抗宿主病(GVHD)发生的相关性。方法:选取行亲缘异基因造血干细胞移植的46对供受者为研究对象,应用重组人粒细胞集落刺激因子(rh... 目的:研究动员后骨髓和外周血采集物中T细胞CCR5表达的异同,分析移植物中T细胞CCR5的表达与移植后急性移植物抗宿主病(GVHD)发生的相关性。方法:选取行亲缘异基因造血干细胞移植的46对供受者为研究对象,应用重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员后,测定并比较骨髓(G-BM)和外周血采集物(G-PB)中CCR5^+T细胞的相对比例和绝对数量,然后分析输注的CCR5^+T细胞数量和移植后Ⅱ-Ⅳ度急性GVHD发生的相关性。结果:G-PB中CD3^+CD4^+及CD3^+CD8^+T细胞的CCR5^+细胞所占的比例均明显低于G-BM(P<0.01),但G-PB中CD3^+CD4^+CCR5^+及CD3^+CD8^+CCR5^+T细胞的绝对数均是骨髓中的15-25倍,且输注的CCR5^+T细胞的绝对数量不是受者发生急性GVHD的危险因素(P>0.05)。结论:G-PB和G-BM中CCR5^+T细胞比例和绝对数量存在显著差别,不同来源的干细胞具有不同的免疫特性。此外,移植后急性GVHD的发生与移植物中CCR5^+T细胞的数量无关,而可能受其相对比例影响。 展开更多
关键词 急性移植抗宿主病 CC趋化因子受体5 重组人粒细胞集落刺激因子 外周血采集 骨髓采集
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外周血干细胞采集物来源的巨细胞病毒特异性T细胞的体外培养和扩增 被引量:2
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作者 夏瑜 张在利 +5 位作者 李莎 詹茜 肖青 王利 刘林 罗小华 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期63-73,共11页
目的建立巨细胞病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞(CMV CTL)体外扩增的方法。方法用1μg/mL全长巨细胞病毒pp65(CMV pp65)多肽体外多轮刺激由粒细胞-集落刺激因子(G-CSF)动员的外周血干细胞采集物中分离的单个核细胞(PBMC),同时加入白细胞介... 目的建立巨细胞病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞(CMV CTL)体外扩增的方法。方法用1μg/mL全长巨细胞病毒pp65(CMV pp65)多肽体外多轮刺激由粒细胞-集落刺激因子(G-CSF)动员的外周血干细胞采集物中分离的单个核细胞(PBMC),同时加入白细胞介素2(IL-2)、 IL-15、 IL-21扩增20 d。在培养第7天,加入丝裂霉素处理的负载CMV pp65抗原肽的自体PBMC,第10天补充经γ射线辐照处理并负载CMV pp65抗原肽的PBMC和CD3(OKT3);对照组为未加入抗原肽进行扩增的PBMC组。采用多色流式细胞术分别对扩增前、扩增后的T淋巴细胞表型及细胞内肿瘤坏死因子α(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)的分泌水平进行分析, ELISA检测供者血清中CMV IgM/IgG抗体滴度水平。结果培养后可以收集得到(165.26±6.14)×10~6个细胞,其中CD3^+ T细胞占89.21%, CD8^+ T细胞占CD3^+ T细胞的(43.54±28.03)%, CD4^+ T细胞占CD3^+ T细胞(34.23±26.18)%。获得的CD3^+ T细胞以效应记忆性T细胞(T_(EM))为主,且扩增培养后的CD8^+和CD4^+ T_(EM)比例较培养前显著增高。另外,培养后干细胞样记忆性T细胞(T_(SCM))和组织原位记忆T细胞(T_(RM))的比例均较培养前显著增加。在功能实验中,培养后得到的IFN-γ^+的分泌型CMV特异性CD8^+ T细胞群比例较扩增前明显增加, TNF-α^+ CMV特异性CD8^+ T细胞比例呈增长趋势;能够分别分泌IFN-γ和TNF-α的CMV特异性CD4^+ T细胞群比例与培养前无明显变化。此外,供者体内CMV IgG水平与供者年龄呈现正相关,且在该培养体系下, IFN-γ^+和TNF-α^+ CMV特异性T细胞扩增比例与供者年龄呈负相关。结论本研究成功建立了在体外有效的培养和扩增CMV CTL的方法。 展开更多
关键词 巨细胞病毒特异性T细胞 细胞因子 外周血干细胞采集 体外扩增
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