期刊文献+
共找到31篇文章
< 1 2 >
每页显示 20 50 100
细菌有活力但不可培养状态及其机制研究进展 被引量:13
1
作者 阚玉敏 蒋娜 +2 位作者 白凯红 李健强 罗来鑫 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期880-891,共12页
有活力但不可培养(viable but non-culturable,VBNC)状态是细菌遭遇逆境时进入的一种特殊状态,该状态下的菌体在条件适宜时可复苏并恢复其致病性,被认为是细菌躲避不良环境的一种生存策略。VBNC状态菌体对人类医学和工农业生产具有巨大... 有活力但不可培养(viable but non-culturable,VBNC)状态是细菌遭遇逆境时进入的一种特殊状态,该状态下的菌体在条件适宜时可复苏并恢复其致病性,被认为是细菌躲避不良环境的一种生存策略。VBNC状态菌体对人类医学和工农业生产具有巨大的潜在威胁,开展关于VBNC状态的检测及诱导、复苏及其机制研究可为减少或避免该状态细菌的危害提供理论基础。本文简要综述了细菌VBNC状态在诱导、复苏及致病性等方面的研究进展,并结合本实验室及国内外相关团队近年来在植物病原细菌VBNC状态研究中的结果,详细总结了VBNC状态细菌的形成和复苏机制,对植物病原细菌在环境胁迫下的存活机制、病害田间初侵染来源分析及VBNC状态菌体在病害循环中的作用等相关研究具有重要参考意义。 展开更多
关键词 有活力但不可培养 严紧反应 毒素-抗毒素系统 蛋白酶 调控因子 复苏促进因子 群体感应
原文传递
猫爪草有效成分抗结核治疗进展 被引量:12
2
作者 何柯新 吕世静 《检验医学与临床》 CAS 2008年第6期354-356,共3页
关键词 猫爪草 小毛莨内酯 颗粒裂解肽 γ-酮-δ-戊内酯 复苏促进因子
下载PDF
细菌活的非可培养(VBNC)状态及其机理研究进展 被引量:8
3
作者 邸聪聪 胡平 +1 位作者 胡章立 陈辉蓉 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1124-1131,共8页
细菌活的非可培养(Viable but non-culturable,VBNC)状态是指在一定环境胁迫条件下,一些不形成芽孢的细菌仅保留很低代谢活性但无法分裂,失去在培养基上形成菌落能力的状态.细菌的这一状态也可逆转而恢复生长形成菌落,称为复苏.自1982... 细菌活的非可培养(Viable but non-culturable,VBNC)状态是指在一定环境胁迫条件下,一些不形成芽孢的细菌仅保留很低代谢活性但无法分裂,失去在培养基上形成菌落能力的状态.细菌的这一状态也可逆转而恢复生长形成菌落,称为复苏.自1982年这一状态被发现以来,已有60余种非芽孢菌被报道可进入VBNC状态,其中包括许多常见致病菌,从而给以菌落培养为基础的常规检测手段带来了挑战.目前VBNC菌研究领域仍以现象报道为主,对其形成条件、生物学特性、遗传机制等尚未完全了解.本综述重点介绍了近期关于VBNC状态与群体感应效应及环境应力机制相关的一些发现和假说,并简述了VBNC状态细菌在细胞形态结构、蛋白表达及毒性方面的变化规律,以及在不同细菌中发现的与复苏过程相关的细胞复苏因子类似物等;揭示了VBNC作为适应机制在不同细菌种群中的普遍性存在及其与细胞间信号传导之间可能存在的密切联系;最后列举了用于VBNC细菌检测的新技术,并提出该领域未来的研究范围应从致病菌扩大到所有环境细菌. 展开更多
关键词 诱导 胁迫 复苏促进因子 休眠
原文传递
高盐含酚废水生物处理技术的研究进展及应用前景 被引量:6
4
作者 张云鸽 梅荣武 +2 位作者 张宇 丁林贤 苏晓梅 《环境工程》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期11-15,83,共6页
高盐含酚废水治理是污水处理领域亟待解决的一个难题。目前,以微生物为核心的生物处理高盐含酚废水技术备受关注。迄今为止,耐盐降酚微生物的筛选菌源仅限于基于常规分离培养方法所能获得的仅占0.01%~10%的微生物菌群,大量的潜在功能菌... 高盐含酚废水治理是污水处理领域亟待解决的一个难题。目前,以微生物为核心的生物处理高盐含酚废水技术备受关注。迄今为止,耐盐降酚微生物的筛选菌源仅限于基于常规分离培养方法所能获得的仅占0.01%~10%的微生物菌群,大量的潜在功能菌群因处于有活性但非可培养(viable but non-culturable,VBNC)状态而未被研究。在阐述耐盐降酚微生物研究现状的基础上,结合课题组的研究结果,提出利用复苏促进因子(resuscitation promoting factor,Rpf)探索具有潜在耐盐降酚功能的微生物,为复苏培养高效耐盐降酚菌提供新思路,并为生物强化处理高浓度有机工业废水提供有效的方法途径。 展开更多
关键词 高盐含酚废水 有活性但非可培养状态 复苏促进因子 耐盐降酚菌
原文传递
复苏促进因子Rpf增效处理磺胺二甲嘧啶废水的研究
5
作者 王壮 崔静 +5 位作者 王子通 郑蕾 芦梦瑶 周佳 屈建航 黄峰 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期29-39,共11页
目的:微生物是降解磺胺类抗生素(sulfonamides,SAs)的主要驱动者,但在抗生素胁迫下易处于活的非可培养状态(viable but non-culturable,VBNC)而无法筛选得到;利用藤黄微球菌产生的复苏促进因子(resuscitation-promoting factor,Rpf)改善... 目的:微生物是降解磺胺类抗生素(sulfonamides,SAs)的主要驱动者,但在抗生素胁迫下易处于活的非可培养状态(viable but non-culturable,VBNC)而无法筛选得到;利用藤黄微球菌产生的复苏促进因子(resuscitation-promoting factor,Rpf)改善VBNC降解菌群的生长繁殖特性,提高废水的抗生素去除效果。方法:以磺胺二甲嘧啶(sulfamethazine,SMZ)废水为处理对象,利用Rpf蛋白的复苏作用驯化SMZ废水处理系统内活性污泥中潜在的功能降解菌群。结果:当SMZ质量浓度为0.5 mg/L时,投加Rpf蛋白后,SMZ的去除率提高了9.38%;当SMZ质量浓度增加到20 mg/L时,SMZ的去除率提高了17.10%;高通量测序结果表明,Rpf蛋白的投加主要促进了与SMZ降解相关的归属于变形菌门(Proteobacteria)和拟杆菌门(Bacteroidota)的unclassified_f_Comamonadaceae、OLB8、Shinella和Rhodococcus等在系统内的富集,进而提高了SMZ去除效果。结论:首次利用Rpf强化微生物降解SMZ废水,为Rpf应用于其他磺胺类抗生素的去除提供了理论基础。 展开更多
关键词 复苏促进因子 磺胺二甲嘧啶 生物降解 微生物群落 抗生素废水
原文传递
细菌复苏促进因子 被引量:5
6
作者 李伦 李元 +1 位作者 白婧 许崇波 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第4期103-106,共4页
复苏促进因子(Rpf)是存在于原核生物中的一类因子,该因子能够在皮摩尔水平以自分泌/旁分泌形式促进休眠菌的复苏和生长,其作用机制可能是参与了细胞间的信号转导,类似于真核生物的生长因子。Rpf广泛存在于高GC含量的革兰阳性菌中,最近在... 复苏促进因子(Rpf)是存在于原核生物中的一类因子,该因子能够在皮摩尔水平以自分泌/旁分泌形式促进休眠菌的复苏和生长,其作用机制可能是参与了细胞间的信号转导,类似于真核生物的生长因子。Rpf广泛存在于高GC含量的革兰阳性菌中,最近在低GC含量的革兰阳性菌中也发现了复苏促进因子。国内外研究表明,如果能够揭开该因子的作用方式,有可能破解休眠菌的复苏机制,因此,有必要对该类因子研究进展做系统的总结。 展开更多
关键词 复苏促进因子 革兰阳性菌 RpfB Rpf2
下载PDF
水体消毒过程中活的不可培养细菌的形成与复苏机制研究进展
7
作者 李桂英 刘建莹 安太成 《生态环境学报》 CSCD 北大核心 2023年第7期1333-1343,共11页
在传统水体消毒技术刺激下,细菌会进入活的不可培养(viable but nonculturable,VBNC)状态来提高自身存活率。在撤去外部压力时,未被消毒技术完全去除的VBNC细菌可在水储存和分配期间发生一定程度的复苏,而这些复苏的细菌很可能进入人体... 在传统水体消毒技术刺激下,细菌会进入活的不可培养(viable but nonculturable,VBNC)状态来提高自身存活率。在撤去外部压力时,未被消毒技术完全去除的VBNC细菌可在水储存和分配期间发生一定程度的复苏,而这些复苏的细菌很可能进入人体并导致严重疾病。然而,目前仍不清楚水体消毒过程中活的不可培养细菌的形成与复苏机制。该文通过检索了95篇相关文献并结合课题组在抗生素耐药菌方面的消毒控制和细菌休眠方面的研究进行了系统分析。首先,介绍了在不同水消毒技术下VBNC细菌的形成并阐述了其潜在的形成机制,其主要包括了严谨反应、能量代谢、一般应激反应系统和毒素-抗毒素系统。其次,介绍了VBNC致病菌复苏的风险和总结了13种复苏方法。该文还综述了自然复苏、复苏促进因子(Rpf)与自诱导剂复苏等3种复苏机制的不同。在修复了细胞损伤并恢复氧化还原平衡和代谢活性之后,VBNC细菌才能发生自然复苏。Rpf能够帮助VBNC细菌重塑细胞壁,这有助于VBNC细菌恢复可培养能力。自诱导剂-2能够促进微生物种群中的细胞间通讯并增加katG的表达来降低过氧化氢毒性,从而促进VBNC细菌的复苏。最后,对今后的研究方向进行了展望,介绍了微流控技术、稳定同位素示踪代谢活性分析方法、单细胞重水标记拉曼光谱方法和荧光能量共振转移技术等可以用于研究VBNC细菌复苏机制的前沿技术。该综述能为回答“多大剂量的消毒技术能够灭活VBNC细菌并避免其复苏”和“复苏的VBNC细菌生理特性是否都恢复到正常水平”等问题提供参考,为水处理过程中微生物安全性评估和制定更有效的消毒策略提供理论依据。 展开更多
关键词 抗生素耐药菌 活的不可培养状态 复苏机制 复苏促进因子 群体感应
下载PDF
广西蚕沙细菌组成多样性解析和VBNC菌群的发掘 被引量:4
8
作者 张艳军 陈宝婷 +6 位作者 张玉梅 张逸飞 朱宝琳 苏盼 丁林贤 谢乃钧 张萍华 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期1036-1046,共11页
【目的】解析广西蚕沙中细菌群落组成与多样性,为蚕沙中菌种资源发掘和蚕沙的综合利用提供科学依据。【方法】通过高通量测序技术研究细菌群落组成特征,同时利用常规稀释涂布平板法和基于复苏促进因子(Rpf)的MPN培养系统解析并筛选蚕沙... 【目的】解析广西蚕沙中细菌群落组成与多样性,为蚕沙中菌种资源发掘和蚕沙的综合利用提供科学依据。【方法】通过高通量测序技术研究细菌群落组成特征,同时利用常规稀释涂布平板法和基于复苏促进因子(Rpf)的MPN培养系统解析并筛选蚕沙中可培养和活的非可培养(VBNC)状态的优势菌群,并经16SrRNA基因测序对筛选得到的菌株作初步分类鉴定。【结果】高通量测序表明,广西蚕沙样品中细菌归属于10个门、18个纲、27个目、57个科、96个属,其中4个属的丰度达1%以上,优势菌群为变形菌门(Proteobacteria)肠杆菌属(Enterobacter);通过稀释涂布平板法共获得14个属的33株可培养细菌,其中4个属(Citrobacter、Weissella、Chitinophaga、Pseudoclavibacter)在高通量测序中未被检测到;而在MPN培养系统中,基于复苏促进因子的处理组细菌总数最大检出丰度提高了100倍,并从中共检出21株对Rpf敏感的VBNC菌株,其中6个属(Paenibacillus、Caulobacter、Roseomonas、Pantoea、Erwinia、Acinetobacter)为传统分离法中未能获得的菌属,2个属(Paenibacillus和Caulobacter)在高通量测序中未被检测到。【结论】蚕沙细菌多样性丰富,不同方法解析蚕沙细菌组成多样性存在一定差异,而且通过添加Rpf首次发现了蚕沙中存在大量过去未被认知的VBNC状态细菌,其中从16S rRNA基因序列同源性推测有3个VBNC菌株为潜在新种。此研究结果为深入挖掘蚕沙中微生物资源提供了新的视角与途径,为蚕沙的综合处理提供了研究基础。 展开更多
关键词 复苏促进因子 活的非可培养状态 高通量测序 蚕沙 细菌多样性
原文传递
复苏促进因子辅助单细胞分离筛选青藏高原低温联苯降解潜力菌
9
作者 李欣怡 杨媛媛 +4 位作者 李浩铭 贾洋洋 刘泽钒 史舟 沈超峰 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第4期414-423,共10页
微生物资源的挖掘一直是研究关注的重点.在传统微生物分离培养中,因优势菌群竞争及培养条件限制等原因,存在庞大的不可培养微生物群体,单细胞分离培养可排除种间竞争的影响,添加复苏促进因子蛋白可提高低活性、慢生长微生物的分离效率.... 微生物资源的挖掘一直是研究关注的重点.在传统微生物分离培养中,因优势菌群竞争及培养条件限制等原因,存在庞大的不可培养微生物群体,单细胞分离培养可排除种间竞争的影响,添加复苏促进因子蛋白可提高低活性、慢生长微生物的分离效率.青藏高原拥有着巨大的微生物资源储备量,同时也因为脆弱的生态环境而受到原油、持久性有机污染物等的威胁,在高原长期的低温条件下,挖掘本土微生物资源对冷环境污染修复具有重要意义.本研究利用单细胞分离与复苏促进因子添加培养相结合的方法,从青藏高原不同海拔表层土壤样品中,分离培养低温联苯降解潜力菌,并探究分离菌株对复苏促进因子的响应情况.共获得24株可在低温条件下以联苯为唯一碳源生长的菌株,其中18株来自复苏促进因子添加组,分属于Microbacterium等9个属,多数筛选菌株对复苏促进因子的响应明显.本研究建立了一种新的功能菌分离筛选方法,具有高效率、低成本、易推广的特点,为“微生物暗物质”挖掘提供了一种新方案. 展开更多
关键词 复苏促进因子 单细胞分离 青藏高原 低温 联苯降解
原文传递
结核分枝杆菌Rv0867c基因的生物信息学分析 被引量:3
10
作者 路晓红 付玉荣 伊正君 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第7期590-595,共6页
目的应用生物信息学软件分析结核分枝杆菌Rv0867c及其编码的复苏促进因子A(resuscitation-promoting factor A,Rpf A)的结构功能及抗原表位。方法从NCBI数据库获取Rv0867c的基因信息;应用ProParam预测Rpf A蛋白的理化性质;采用SignalP ... 目的应用生物信息学软件分析结核分枝杆菌Rv0867c及其编码的复苏促进因子A(resuscitation-promoting factor A,Rpf A)的结构功能及抗原表位。方法从NCBI数据库获取Rv0867c的基因信息;应用ProParam预测Rpf A蛋白的理化性质;采用SignalP 4.0及TMHMM分析其信号肽及跨膜区;利用在线分析Expasy工具分析蛋白二级结构,建立蛋白的三级结构模型;利用ABCpred、BepiPred 1.0Server以及SYFPEITHI、NetMHCIIpan 3.1Server分析蛋白的B细胞及T细胞抗原表位。结果 Rpf A蛋白具有407个氨基酸残基,该蛋白N端存在信号肽序列,具有跨膜结构。二级结构中无规卷曲约占63.14%,结构疏松。三级结构同源建模与Rpf B具有高度相似的序列。Rv0867c具有潜在的B细胞抗原表位46-57、61-74、108-123、307-320及85-98等,T细胞抗原表位82-90、337-345、167-175、207-215及263-271等。结论生物信息学预测Rpf A具有良好的抗原表位,是诊断及治疗结核的潜在候选因子。 展开更多
关键词 复苏促进因子A 结核分枝杆菌 结构 功能 生物信息学
原文传递
复苏促进因子结合蛋白A的原核表达及对耻垢分枝杆菌的促生长作用 被引量:2
11
作者 师长宏 赵勇 +3 位作者 毛峰峰 张海 白冰 江鹰 《现代生物医学进展》 CAS 2010年第11期2001-2004,共4页
目的:在大肠埃希氏菌中表达结核分枝杆菌复苏促进因子结合蛋白A(resuscitation-promoting factor-interacting protein A,RipA),观察该蛋白对耻垢分枝杆菌的促生长作用。方法:采用PCR方法,从结核分枝杆菌H37Rv的DNA中扩增出编码RipA蛋白... 目的:在大肠埃希氏菌中表达结核分枝杆菌复苏促进因子结合蛋白A(resuscitation-promoting factor-interacting protein A,RipA),观察该蛋白对耻垢分枝杆菌的促生长作用。方法:采用PCR方法,从结核分枝杆菌H37Rv的DNA中扩增出编码RipA蛋白的Rv1477基因,测序正确后克隆入原核表达载体pProEx HTa,构建重组表达质粒pProEx HTa-RipA。以重组质粒转化大肠杆菌DH5a,筛选阳性重组菌株,经异丙基硫代-β-D半乳糖苷(Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside IPTG)诱导RipA表达,在变性条件下对目的蛋白进行亲和层析纯化。将纯化的RipA蛋白加入到耻垢分枝杆菌中,分光光度法测定细菌的A600,观察RipA蛋白的促生长作用。结果:成功扩增了Rv1477基因,并克隆于表达载体pProEx HTa中,经酶切鉴定获得阳性克隆。经诱导在大肠杆菌中表达出相对分子量为52kDa的目的蛋白,Western-blot结果显示该蛋白与6×His单抗有特异性的反应条带。采用Ni+-NTA柱可获得纯化的目的蛋白。100pM的RipA蛋白可显著促进耻垢分枝杆菌休眠菌的复苏和生长。结论:RipA蛋白在大肠杆菌中成功表达,并能有效促进耻垢分枝杆菌的生长。 展开更多
关键词 复苏促进因子 结核分枝杆菌 表达 休眠
原文传递
复苏促进因子研究进展 被引量:2
12
作者 李伦 许崇波 李元 《生物技术通讯》 CAS 2009年第5期703-705,共3页
复苏促进因子是一类广泛存在于结核分枝杆菌等革兰阳性菌中的蛋白质,能促进休眠菌复苏。复苏促进因子的作用机制目前仍然是未知的,然而对此类蛋白的结构域预测及核磁共振分析显示其保守区具有溶菌酶样折叠。我们简要综述了国外对此类蛋... 复苏促进因子是一类广泛存在于结核分枝杆菌等革兰阳性菌中的蛋白质,能促进休眠菌复苏。复苏促进因子的作用机制目前仍然是未知的,然而对此类蛋白的结构域预测及核磁共振分析显示其保守区具有溶菌酶样折叠。我们简要综述了国外对此类蛋白作用机制的研究进展。 展开更多
关键词 复苏促进因子 结构域 生物学活性 作用机制
下载PDF
结核分枝杆菌RPF样蛋白家族及其功能
13
作者 柳云帆 刘平 谢建平 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期223-226,共4页
上世纪末,Mukamolova等从藤黄微球菌(Micrococcus luteus)发现一种分泌蛋白-复苏促进因子(Rpf)。该因子在皮摩尔浓度下能促进休眠期的藤黄微球菌及其他数种高G+C含量的革兰氏阳性菌复苏和生长。结核分枝杆菌全基因组发现和该因子同源性... 上世纪末,Mukamolova等从藤黄微球菌(Micrococcus luteus)发现一种分泌蛋白-复苏促进因子(Rpf)。该因子在皮摩尔浓度下能促进休眠期的藤黄微球菌及其他数种高G+C含量的革兰氏阳性菌复苏和生长。结核分枝杆菌全基因组发现和该因子同源性较高的5个基因,预测产物都是分泌蛋白,一级结构都含有一个转粮基域。5个基因有一个共同的功能未知的域,3级结构预测该保守结构域和溶菌酶同源。重组表达的Rpf对不同种均有活性。5个rpf在不同生长时期均有表达,但调控有差异。 展开更多
关键词 结核病 结核分枝杆菌 复苏促进因子 细胞因子
下载PDF
结核分枝杆菌中的复苏促进因子 被引量:1
14
作者 邵天舒 余利岩 《国外医药(抗生素分册)》 CAS 2007年第2期61-63,共3页
自然界中的微生物在处于不利环境时可进入休眠状态,也就是常说的“活的非可培养状态”(VBNC)。当给予适合的环境条件后又可恢复其生长活性。研究表明,某些革兰阳性菌可分泌一种蛋白质,即能够有效促进多种处于休眠期细菌复苏的生长因子,... 自然界中的微生物在处于不利环境时可进入休眠状态,也就是常说的“活的非可培养状态”(VBNC)。当给予适合的环境条件后又可恢复其生长活性。研究表明,某些革兰阳性菌可分泌一种蛋白质,即能够有效促进多种处于休眠期细菌复苏的生长因子,称为复苏促进因子(resuscitation-promoting factor,Rpf)。结核分枝杆菌的Rpf是一个蛋白家族,共包含RpfA^E 5个成员,编码这5个蛋白质的基因与藤黄微球菌的rpf基因有显著的同源性。它们执行的生物学功能并不完全相同但又有部分的重叠,推测这5个Rpf蛋白之间可能有某种协同作用。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 复苏促进因子 同源性 休眠期
下载PDF
副溶血弧菌一种糖蛋白酶(复苏促进因子)在大肠杆菌中的表达及性质 被引量:1
15
作者 赵明君 贾俊涛 陈吉祥 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期57-63,共7页
用PCR方法从副溶血弧菌8621.4基因组中扩增出1种细胞复苏促进因子家族的糖蛋白酶(Glycoprotease,Gcp)基因,核酸序列分析表明其含有完整的gcp基因开放阅读框,编码233个氨基酸组成的蛋白质。核酸序列与副溶血弧菌糖蛋白酶家族基因的序列... 用PCR方法从副溶血弧菌8621.4基因组中扩增出1种细胞复苏促进因子家族的糖蛋白酶(Glycoprotease,Gcp)基因,核酸序列分析表明其含有完整的gcp基因开放阅读框,编码233个氨基酸组成的蛋白质。核酸序列与副溶血弧菌糖蛋白酶家族基因的序列相似性为100%。其氨基酸序列与哈维氏弧菌HY01、弧菌Ex25、溶珊瑚弧菌、拟态弧菌和杀鲑弧菌LFI1238等糖蛋白酶的序列相似性为67%~92%。将该基因克隆到表达载体pET28a,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,用Ni琼脂糖亲和柱层析纯化的蛋白为单一条带,利用纯化的Gcp免疫新西兰大白兔制备特异性抗体,Western-Blotting分析发现正常生长及活的非可培养状态(VBNC)诱导过程中的副溶血弧菌细胞内表达的Gcp蛋白为1条带,分子量约为27kDa,而在VBNC状态的菌体中检测到2条蛋白带。研究结果为进一步探索海洋弧菌活VBNC的形成和复苏机制奠定基础。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 复苏促进因子 糖蛋白酶 表达 性质
下载PDF
抗结核分枝杆菌RpfB结构域单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:1
16
作者 樊爱琳 马越云 +2 位作者 郑善銮 杨麦贵 郝晓柯 《生物技术通讯》 CAS 2014年第6期804-808,共5页
目的:制备抗结核分枝杆菌Rpf B结构域单克隆抗体。方法:将p PRO-EXHT-Rpf B domain原核表达载体接种于大肠杆菌DH5中,用IPTG诱导表达Rpf B结构域蛋白,以纯化的Rpf B结构域蛋白作为免疫原,皮下包埋免疫小鼠3次,每次间隔2周;分离小鼠的脾... 目的:制备抗结核分枝杆菌Rpf B结构域单克隆抗体。方法:将p PRO-EXHT-Rpf B domain原核表达载体接种于大肠杆菌DH5中,用IPTG诱导表达Rpf B结构域蛋白,以纯化的Rpf B结构域蛋白作为免疫原,皮下包埋免疫小鼠3次,每次间隔2周;分离小鼠的脾细胞,与Sp2/0细胞融合,克隆化制备抗Rpf B结构域单抗,ELISA检测其效价,鉴定其特异性和相对亲和力,观察制备的抗Rpf B结构域单抗对Rpf家族其他蛋白的识别能力及其对结核分枝杆菌和藤黄微球菌的生长抑制作用。结果:制备了3株抗Rpf B结构域单抗,特异性高,亲和力较强,均能特异性识别Rpf B结构域。经小鼠腹腔注射制备腹水并纯化,获得了较高纯度的单抗,所制备的抗Rpf B结构域多肽的单克隆抗体可以识别多种Rpf样蛋白及其结构域蛋白。在抗体滴度为1∶1000时可有效抑制Rpf B结构域对结核分枝杆菌H37Ra和藤黄微球菌的生长促进作用,提示抗Rpf B结构域单抗可能会抑制进入机体内生长停滞或潜伏感染的结核分枝杆菌的再次激活,可能具有预防隐性感染复发的作用。结论:抗Rpf B结构域单抗的制备为进一步研究Rpf B结构域的生物学和免疫特性提供了实验工具。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 复苏促进因子 RpfB结构域 单克隆抗体
下载PDF
红平红球菌复苏促进因子基因克隆及功能域分析 被引量:1
17
作者 岳靓 陈吉祥 +3 位作者 杨智 李彦林 芮文鸿 王永刚 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期286-295,共10页
复苏促进因子(Rpf)广泛存在于高G+C含量的革兰氏阳性细菌中,与细菌生长及抵抗不良环境有关,不同细菌Rpf种类和数量有一定差异。红平红球菌(Rhodococcus erythropolis)KB1分离自石油污染土壤,具有高效石油降解能力和环境适应性。为... 复苏促进因子(Rpf)广泛存在于高G+C含量的革兰氏阳性细菌中,与细菌生长及抵抗不良环境有关,不同细菌Rpf种类和数量有一定差异。红平红球菌(Rhodococcus erythropolis)KB1分离自石油污染土壤,具有高效石油降解能力和环境适应性。为探索Rpf在红平红球菌KB1适应环境过程中作用,设计了复苏因子基因特异引物,从红平红球菌KB1基因组DNA扩增出4种rpf基因。序列分析发现4种基因分别与藤黄微球菌(Micrococcus luteus)rpf基因,结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)rpfB、rpfC及链霉菌(Streptomyces coelicolor)rpfB相似性较高。4个rpf基因编码蛋白都有一个类似Mt细胞复苏促进因子Rpf域,由大约70个氨基酸组成。其中Rpf-1与结核分枝杆菌、链霉菌RpfC相似,只含1个Rpf结构域;Rpf-2与结核分枝杆菌RpfB相似,含有1个Rpf域、1个G5域和2个DUF348;Rpf-3与链霉菌RpfB相似,含有1个Rpf域、G5域和3个DUF348;Rpf-4与藤黄微球菌Rpf相似,含1个Rpf域和1个LysM域。Rpf-2、Rpf-3含信号肽序列,Rpf-1、Rpf-4不含信号肽。 展开更多
关键词 红平红球菌 复苏促进因子 基因 结构域 非可培养
原文传递
来源于Micrococcus luteus的复苏促进因子异源表达及其对活性污泥中休眠细菌的促生长作用 被引量:1
18
作者 张宇 王慧荣 +5 位作者 梅荣武 李明智 李欲如 丁林贤 苏晓梅 朱瑞芬 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期2364-2375,共12页
【背景】复苏促进因子(Resuscitation promoting factor,RPF)是由某些放线菌分泌的一类活性蛋白质,最初在Micrococcusluteus中被发现。它不但能够复苏休眠细菌恢复生长,而且对正常的细菌也有促生长效果。然而关于RPF对于环境样品中除原... 【背景】复苏促进因子(Resuscitation promoting factor,RPF)是由某些放线菌分泌的一类活性蛋白质,最初在Micrococcusluteus中被发现。它不但能够复苏休眠细菌恢复生长,而且对正常的细菌也有促生长效果。然而关于RPF对于环境样品中除原始宿主以外细菌的复苏促进作用研究还鲜有报道。【目的】以寻找新的菌种资源、开发环境功能菌角度研究了RPF对环境样品中潜在休眠菌群的复苏促进作用。【方法】首先对来源于Micrococcus luteus IAM 14879的RPF(Ml RPF)蛋白序列进行生物信息学分析和同源模建;随后克隆了Ml RPF编码基因并在大肠杆菌中异源表达;最后利用重组Ml RPF对活性污泥样品中潜在的休眠细菌开展了复苏促生长研究。【结果】Ml RPF在进化树上处于单独分支,远离其它RPF家族成员;模建结构分析表明Ml RPF具有与C型溶菌酶相似的催化结构域,这有助于解释RPF家族蛋白具有溶解酶活性;重组Ml RPF在大肠杆菌中获得了可溶性表达,它能够促进休眠态M. luteus IAM 14879生长,保留了其生理活性;利用重组Ml RPF从某污水厂活性污泥样品中分离获得了Dietzia、Paracoccus、Rhodococcus和Brevundimonas菌株。【结论】为环境样品中微生物多样性研究及特殊微生物资源的发掘提供新的方法,也为基于Ml RPF的废水生物强化处理技术研发提供理论依据。 展开更多
关键词 复苏促进因子 藤黄微球菌 异源表达 休眠细菌 活性污泥
原文传递
VBNC菌群中好氧反硝化菌种的复苏培养及其脱氮特性 被引量:1
19
作者 徐璐宁 王宇洋 +4 位作者 薛彬冰 梅荣武 张宇 丁林贤 苏晓梅 《中国科学院大学学报(中英文)》 CSCD 北大核心 2019年第4期545-551,共7页
高氨氮废水的生物处理技术因安全高效而备受关注,但反硝化细菌的分离菌源仅限于常规分离培养法所获得的不到1%的微生物,绝大多数菌株因处于活的但非可培养(“viable but non-culturable”,VBNC)状态而未能被发掘。复苏培养VBNC菌群对强... 高氨氮废水的生物处理技术因安全高效而备受关注,但反硝化细菌的分离菌源仅限于常规分离培养法所获得的不到1%的微生物,绝大多数菌株因处于活的但非可培养(“viable but non-culturable”,VBNC)状态而未能被发掘。复苏培养VBNC菌群对强化高氨氮废水的生物处理具有重要意义。本文利用复苏促进因子复苏培养高氨氮废水中的VBNC菌株,16S rRNA基因测序对其进行同源性分析,初步鉴定复苏培养的菌株归属于Gordonia和Pseudomonas属。通过测定特殊培养基中硝态氮、亚硝态氮和氨氮的浓度,研究VBNC菌株的好氧反硝化性能,其中,菌株ZYR51的好氧反硝化能力较强。本研究为挖掘潜在具有好氧反硝化性能的VBNC菌种提供了新方法,并为筛选高效去除高氨氮废水的菌种资源提供了新思路。 展开更多
关键词 高氨氮废水 VBNC菌种 复苏促进因子 微生物资源 脱氮
下载PDF
Rpf蛋白:一种激活休眠状态放线菌的复苏促进因子 被引量:1
20
作者 张宇帆 刘彤彤 +3 位作者 周鹏 孟子诺 张雨佳 张秀敏 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期3872-3883,共12页
放线菌能产生多样性丰富的小分子化合物,但大多数放线菌因为处于"活的尚未培养"状态而无法分离培养。造成"活的尚未培养"状态的原因之一可能是由于一些环境因素,例如有机物、重金属、抗生素等胁迫使细胞处于休眠保... 放线菌能产生多样性丰富的小分子化合物,但大多数放线菌因为处于"活的尚未培养"状态而无法分离培养。造成"活的尚未培养"状态的原因之一可能是由于一些环境因素,例如有机物、重金属、抗生素等胁迫使细胞处于休眠保护状态,直到遇到适宜的条件才能继续复苏生长。复苏促进因子(Resuscitation-PromotingFactor,Rpf)是由某些放线菌分泌的一类蛋白质,首次在藤黄微球菌(Micrococcus luteus)中发现,之后人们对Rpf蛋白的功能和分布给予了更多的关注。Rpf蛋白能促进一些休眠的革兰氏阳性细菌复苏,这为"活的尚未培养"放线菌的分离培养提供了可能性。同时,针对一些致病放线菌物种,开发Rpf蛋白抑制物为相关疾病的治疗也提供了一条新的途径。基于此,本文对Rpf蛋白的结构组成、特征功能、作用机制及应用前景进行了简要的概述。 展开更多
关键词 放线菌 复苏促进因子 休眠
原文传递
上一页 1 2 下一页 到第
使用帮助 返回顶部