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一种通用高效的复杂载体构建的新方法
被引量：
15
1
作者
陆云华
马立新
蒋思婧
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期212-218,共7页
文章报道了一种简便、通用、高效的复杂载体构建方法。此法是在PCR引物设计时,在目的片段5′端加上随机设计的接头,利用PCR克隆目的片段,再用T4DNA聚合酶3′→5′外切酶活性处理PCR克隆目的片段,产生多个首尾相匹配的黏性末端,进行多片...
文章报道了一种简便、通用、高效的复杂载体构建方法。此法是在PCR引物设计时,在目的片段5′端加上随机设计的接头,利用PCR克隆目的片段,再用T4DNA聚合酶3′→5′外切酶活性处理PCR克隆目的片段,产生多个首尾相匹配的黏性末端,进行多片段定向连接、转化、重组子鉴定。以7片段拼接的水稻单交换质体定点整合表达载体pRSMGA的构建为例,应用上述方法构建只需做两次连接、转化,且其重组、转化效率高。数10次实验证明:这是一种简便、通用、高效的复杂构建载体的方法,该法至今尚未见报道。
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关键词
复杂
载体
构建
新方法
T4
DNA聚合酶
水稻
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职称材料
题名
一种通用高效的复杂载体构建的新方法
被引量：
15
1
作者
陆云华
马立新
蒋思婧
机构
湖北大学生命科学院分子微生物与基因工程实验室
出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期212-218,共7页
基金
国家863计划(国家高技术研究发展计划项目)(编号:2002AA227011)
湖北省自然科学基金(编号:2003ABA118)资助项目~~
文摘
文章报道了一种简便、通用、高效的复杂载体构建方法。此法是在PCR引物设计时,在目的片段5′端加上随机设计的接头,利用PCR克隆目的片段,再用T4DNA聚合酶3′→5′外切酶活性处理PCR克隆目的片段,产生多个首尾相匹配的黏性末端,进行多片段定向连接、转化、重组子鉴定。以7片段拼接的水稻单交换质体定点整合表达载体pRSMGA的构建为例,应用上述方法构建只需做两次连接、转化,且其重组、转化效率高。数10次实验证明:这是一种简便、通用、高效的复杂构建载体的方法,该法至今尚未见报道。
关键词
复杂
载体
构建
新方法
T4
DNA聚合酶
水稻
Keywords
constructing the complicated vectors
novel method
T4 DNA polymerase
Oryza sativa L.
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一种通用高效的复杂载体构建的新方法
陆云华
马立新
蒋思婧
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2006
15
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参考文献
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