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滇山茶基因组DNA不同提取方法效果比较 被引量：9
1
作者 刘婵 王博 +1 位作者 段青 黄海泉 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2010年第6期49-50,共2页
选取3个滇山茶品种("早桃红"、"柳叶银红"及"菊瓣")采用4种方法(CTAB法、改良的CTAB法、SDS法及改良的SDS法)进行基因组DNA提取,并对提取效果进行了比较分析。结果表明,CTAB法提取效果最佳,其次为改良的C... 选取3个滇山茶品种("早桃红"、"柳叶银红"及"菊瓣")采用4种方法(CTAB法、改良的CTAB法、SDS法及改良的SDS法)进行基因组DNA提取,并对提取效果进行了比较分析。结果表明,CTAB法提取效果最佳,其次为改良的CTAB法,而SDS法不能有效地提取DNA。同时发现,不同品种之间DNA提取效果也存在差异,柳叶银红DNA提取浓度及纯度最高(D260 nm/D280 nm=1.976 2),其次为菊瓣,最差为早桃红。本研究为下一步进行滇山茶分子标记研究与应用奠定了基础。 展开更多
关键词 滇山茶 基因dna 提取方法 效果比较
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胶原基因单核苷酸多态性与脑梗死的相关性研究
2
作者 胡泊 孙文萍 刘惠民 《当代医药论丛》 2014年第5期34-35,共2页
目的:探讨胶原基因(COL3A1、COLA2)单核苷酸多态性与脑梗死的相关性。方法:收集2012年12月至2013年12月在我院神经内科进行治疗的287例脑梗死患者的血样标本及同期102例健康体检者的血样样本进行相关性研究。采用基因DNA提取及聚合酶链... 目的:探讨胶原基因(COL3A1、COLA2)单核苷酸多态性与脑梗死的相关性。方法:收集2012年12月至2013年12月在我院神经内科进行治疗的287例脑梗死患者的血样标本及同期102例健康体检者的血样样本进行相关性研究。采用基因DNA提取及聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法,对所有研究对象的COL3A1基因rs1800255位点、COLA2基因rs42524位点多态性进行检测。结果:①脑梗死患者和健康体检者COL3A1基因rs1800255位点上的各基因型频率分布存在显著性差异(p<0.05)。②脑梗死患者和健康体检者携带A等位基因(AA+AG)与G等位基因的频率分布虽存在显著性差异(p<0.05),但A、G等位基因的频率分布无显著性差异(p>0.05)。③脑梗死患者和健康体检者COLA2基因rs42524位点上的各基因型和等位基因的频率分布无显著性差异(p>0.05)。结论:COL3A1基因rs1800255多态性与脑梗死的发病有相关性。脑梗死的发病可能与rs1800255位点基因型AA/AG有一定的关系。COLA2基因rs42524多态性与脑梗死的发病无相关性。基因COL3A1多态性分布与年龄、性别无明显差异性。 展开更多
关键词 基因dna 单核苷酸多态性 COL3A1 COLA2 脑梗死
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树鼩进化分类地位的分子证据 被引量：55
3
作者 许凌 范宇 +1 位作者 蒋学龙 姚永刚 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期70-76,共7页
树鼩隶属攀鼩目,广泛分布于东南亚、南亚和中国南部等地区。由于其独特的特点,如体型小、脑-体重比例高、生殖周期短、寿命短和饲养成本低等,在生物医学研究中被认为是可望替代灵长类动物的新型实验动物。然而,关于树鼩与灵长类动物的... 树鼩隶属攀鼩目,广泛分布于东南亚、南亚和中国南部等地区。由于其独特的特点,如体型小、脑-体重比例高、生殖周期短、寿命短和饲养成本低等,在生物医学研究中被认为是可望替代灵长类动物的新型实验动物。然而,关于树鼩与灵长类动物的亲缘关系一直存在争议。明确树鼩的分类地位是创建实验动物的重要研究基础。该文介绍了近年来关于树鼩分类地位探讨的分子证据。在现有的研究中,大部分核DNA序列研究,包括近期树鼩全基因组序列分析,都支持树鼩是灵长动物的近缘旁系群,然而绝大部分基于线粒体DNA序列的研究却显示树鼩与啮齿动物的亲缘关系更为接近。这样的分歧主要是由于线粒体序列和核基因数据的差异以及不同的算法导致。综合现有不同DNA数据的研究结果,作者认为树鼩作为灵长类的近亲这一结论应该成为共识。 展开更多
关键词 树鼩 系统分类 核基因dna 线粒体dna
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小肠结肠炎耶尔森菌耐热性肠毒素B基因(ystB)初步研究 被引量：15
4
作者 王鑫 邱海燕 +11 位作者 肖玉春 许彦梅 金东 崔志刚 郑翰 罗霞 顾玲 汪华 朱凤才 史智扬 景怀琦 徐建国 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第6期449-453,共5页
目的研究小肠结肠炎耶尔森菌的耐热性肠毒素B基因(ystB)的分布特征。方法通过聚合酶链反应(PCR)、DNA探针杂交方法与序列分析检测致病性和非致病性小肠结肠炎耶尔森菌携带ystB基因的情况。结果98株非致病性小肠结肠炎耶尔森菌中52株携带... 目的研究小肠结肠炎耶尔森菌的耐热性肠毒素B基因(ystB)的分布特征。方法通过聚合酶链反应(PCR)、DNA探针杂交方法与序列分析检测致病性和非致病性小肠结肠炎耶尔森菌携带ystB基因的情况。结果98株非致病性小肠结肠炎耶尔森菌中52株携带ystB基因,占53.06%。全部48株致病性小肠结肠炎耶尔森菌均不携带该基因。结论ystB基因仅存在于部分生物1A型非致病性小肠结肠炎耶尔森菌,而不存在于致病性菌株中。 展开更多
关键词 小肠结肠炎耶尔森菌 耐热性肠毒素B基因dna序列
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中国部分地区结核分支杆菌耐利福平、异烟肼和链酶素耐药基因的检测 被引量：8
5
作者 包洪 于庭 +2 位作者 印璞 刘爱忠 张吉平 《中国实验诊断学》 2007年第2期232-234,共3页
目的研究我国部分地区耐利福平(RFP)、异烟肼(INH)和链酶素(SM)结核分支杆菌临床分离株rpoB基因、KatGr、psL基因突变情况,评价其耐药分子机制。方法采用PCR和聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)对373株结核分支杆菌临床分离株(其... 目的研究我国部分地区耐利福平(RFP)、异烟肼(INH)和链酶素(SM)结核分支杆菌临床分离株rpoB基因、KatGr、psL基因突变情况,评价其耐药分子机制。方法采用PCR和聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)对373株结核分支杆菌临床分离株(其中敏感株148株,耐RFPI、NH、SM株共225株)rpoB基因、KatG和rpsL基因进行检测。并对其中19株SSCP阴性的耐RFP株用双脱氧末端终止法进行测序分析。结果安徽省、北京市、上海市、河北省、河南省、辽宁省、吉林省结核分支杆菌耐RFP临床分离株rpoB基因突变率分别为90%、91%、90%、91%、90%、93%、91%;KatG基因突变率分别为69%、63%、71%、68%、67%、68%、65%,rpsL基因突变率71%、69%、74%、68%、70%、61%、76%,分别为经统计学处理不同地区间无显著性差异(χ2=0.46,P>0.05)。同时rpoB基因敏感株均无突变,特异性为100%;KatG基因有3株发生突变,特异性为98%。19株SSCP阴性耐药株中经测序6株在531位密码子TCG→TTG,1株526位密码子CAC→TAC,7株发生在516位密码子GAC→GTC,5株未改变。结论我国不同地区耐利福平、异烟肼和链霉素的rpoB、KatGr、psL耐药基因突变率大致相同,rpoB基因、KatG和rpsL基因突变分别是耐RFP、INH和SM结核分支杆菌耐药性产生的主要分子机制,PCR-SSCP可快速检测结核分支杆菌RFPI、NH和SM耐药性。 展开更多
关键词 结核分支杆菌 药物耐受性 RPOB基因 KATG基因 rpsL基因dna序列分析
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多基因DNA条形码鉴定6个鳗鱼物种 被引量：6
6
作者 陈文炳 邵碧英 +4 位作者 缪婷玉 彭娟 陈彬 张志灯 江树勋 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第2期163-169,共7页
建立6种鳗鱼的物种多基因DNA条形码精准鉴定方法。以鳗鱼DNA为模板,采用3对通用引物对6种鳗鱼的3个基因(16S rRNA、Cyt b、COⅠ)部分DNA片段进行聚合酶链式反应扩增、测序,结果6种鳗鱼各获得3条16S r DNA(638~643 bp)、Cyt b(464~466 bp... 建立6种鳗鱼的物种多基因DNA条形码精准鉴定方法。以鳗鱼DNA为模板,采用3对通用引物对6种鳗鱼的3个基因(16S rRNA、Cyt b、COⅠ)部分DNA片段进行聚合酶链式反应扩增、测序,结果6种鳗鱼各获得3条16S r DNA(638~643 bp)、Cyt b(464~466 bp)、COⅠ(705~707 bp)基因部分DNA序列,从中选取各物种序列同源的片段设计3对新引物对6种鳗鱼的16S rRNA、Cyt b、COⅠ基因部分DNA片段进行PCR扩增,其产物大小分别为504~507、400、609 bp,再从各片段中筛选出具有6种鳗鱼物种特异性强的、碱基数分别为262、280、300 bp的3条DNA片段序列,作为6种鳗鱼物种的3个基因的标准DNA条形码,应用DNAMAN V6软件进行同源性分析,并通过Gen Bank数据库的比对验证,制定了供检测实践用的同源率判别指标,建立鳗鱼物种的多基因条形码检测方法。应用该方法对30个待检鳗鱼样品进行检测,结果表明,各样品基于3个基因DNA条形码的比对,符合同源率指标,物种判别结果互相吻合,从而精准判别样品的所属物种。该方法稳定、精准、易于操作,可应用于6种鳗鱼的物种鉴定,值得推广。 展开更多
关键词 16S RRNA基因 CYT B基因 COⅠ基因 多基因dna条形码 鳗鱼物种鉴定
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氯化两面针碱对MCF-7细胞增殖的抑制及对P125表达的影响 被引量：7
7
作者 廖柳凤 欧贤红 +1 位作者 刘华钢 吴琼 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第19期85-89,共5页
目的:研究氯化两面针碱(NC)对体外培养的乳腺癌细胞(MCF-7)中DNA聚合酶δ催化亚基P125(P125)表达的影响,探讨氯化两面针碱对乳腺癌细胞增殖抑制作用的机制。方法:设定NC(0.075,0.15,0.30,0.60,1.20,2.40,4.80 mg·L^(-1))组及空白组... 目的:研究氯化两面针碱(NC)对体外培养的乳腺癌细胞(MCF-7)中DNA聚合酶δ催化亚基P125(P125)表达的影响,探讨氯化两面针碱对乳腺癌细胞增殖抑制作用的机制。方法:设定NC(0.075,0.15,0.30,0.60,1.20,2.40,4.80 mg·L^(-1))组及空白组,应用噻唑蓝(MTT)比色法测定不同质量浓度NC对MCF-7细胞的生长抑制率;通过细胞克隆集落形成实验进一步验证NC对MCF-7细胞的生长抑制作用;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测低、中、高质量浓度NC(0.5,1.0,2.0mg·L^(-1))对P125编码基因DNA聚合酶δ催化亚基基因(POLD1),p53基因(p53),细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子p21(p21)mRNA表达水平的影响;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测3种质量浓度NC对P125蛋白表达的影响,使用酶联免疫吸附法(ELISA)测定p53,p21蛋白表达变化。结果:NC对MCF-7细胞有明显的抑制作用,呈浓度依赖性,不同质量浓度NC(0.075,0.15,0.30,0.60,1.20,2.40,4.80 mg·L^(-1))对细胞的抑制率分别是0.16%,6.29%,19.56%,32.17%,44.46%,73.46%,83.21%。与空白组比较,NC对细胞克隆集落形成有显著抑制作用(P<0.01),不同质量浓度NC组对POLD1 mRNA表达有明显的抑制作用,同时明显降低P125蛋白表达(P<0.05);对p53 mRNA和蛋白的表达有明显的促进作用(P<0.01);高剂量NC组对p21 mRNA和蛋白的表达有显著增强作用(P<0.01)。结论:NC能明显抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖,其作用机制之一可能与上调p53表达水平,抑制P125表达有关。 展开更多
关键词 氯化两面针碱 乳腺癌细胞MCF-7 P125 P125编码基因dna聚合酶δ催化亚基基因 p53 P21
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细菌人工染色体文库的构建方法分析 被引量：1
8
作者 吴宏梅 刘长青 +4 位作者 刘帅 包阿东 陆涛峰 关伟军 马月辉 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第2期83-87,共5页
细菌人工染色体是一种承载大片段DNA的新型载体系统,它具有插入片断大、嵌合率低、遗传稳定性好、易于操作等优点。在高等生物基因组文库的构建和基因功能的分析等方面有广泛应用。BAC文库的构建是基因组较大的真核生物基因组学研究的... 细菌人工染色体是一种承载大片段DNA的新型载体系统,它具有插入片断大、嵌合率低、遗传稳定性好、易于操作等优点。在高等生物基因组文库的构建和基因功能的分析等方面有广泛应用。BAC文库的构建是基因组较大的真核生物基因组学研究的重要基础。介绍了近年来细菌人工染色体文库构建方法上的研究进展,对其中载体的制备和高分子量DNA的制备这两个关键环节作了较深入的探讨。 展开更多
关键词 细菌人工染色体 基因组文库 构建方法 载体制备 大片段基因dna制备
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桃ACC合酶基因组DNA(pACSG01)的序列分析及其表达
9
作者 金勇丰 陆胜民 张耀洲 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 2001年第2期138-142,共5页
以桃基因组DNA为模板 ,用套式PCR技术扩增并克隆了桃ACC合酶基因片段 ,将其克隆 (定名为pACSG0 1)并进行序列测定 ,表明该片段全长 132 0bp ,并富含HindⅢ和EcoRI位点 ,与其它ACC合酶基因结构序列有一定的相似性 ,内含两个内含子 ,编码... 以桃基因组DNA为模板 ,用套式PCR技术扩增并克隆了桃ACC合酶基因片段 ,将其克隆 (定名为pACSG0 1)并进行序列测定 ,表明该片段全长 132 0bp ,并富含HindⅢ和EcoRI位点 ,与其它ACC合酶基因结构序列有一定的相似性 ,内含两个内含子 ,编码的氨基酸序列与已克隆桃ACC合酶cDNA推导的氨基酸序列的同源性分别为 5 7.4%和5 6 .8%.pACSG0 1与我们已克隆的两个桃ACC合酶cDNA基因表达有所不同 ,RNA点杂交和RT -PCR结合Southern杂交分析表明 ,该基因在成熟和乙烯处理的果实均不表达 ,伤处理、LiCl和生长素处理也不能诱导该基因的表达 ,在衰老花瓣中也不表达 .图 3参 展开更多
关键词 桃 ACC合酶基因dna 序列分析 基因表达 果实 乙烯
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血吸虫多基因非融合性膜锚定表达疫苗的研究 被引量：2
10
作者 唐成武 刘朔婕 +8 位作者 马彦彬 梁靓 郭萍 王淑玉 邹镇 高红 段秋红 程继忠 戴五星 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期412-416,共5页
目的构建日本血吸虫多基因非融合性膜锚定表达疫苗pIRES-Sj97-Sj14-Sj26,并研究其免疫原性及免疫保护作用。方法构建日本血吸虫脂肪酸结合蛋白(Sj14)、谷胱甘肽-S-转移酶(Sj26)和副肌球蛋白(Sj97)的跨膜共表达质粒pIRES-Sj97-Sj14-Sj26... 目的构建日本血吸虫多基因非融合性膜锚定表达疫苗pIRES-Sj97-Sj14-Sj26,并研究其免疫原性及免疫保护作用。方法构建日本血吸虫脂肪酸结合蛋白(Sj14)、谷胱甘肽-S-转移酶(Sj26)和副肌球蛋白(Sj97)的跨膜共表达质粒pIRES-Sj97-Sj14-Sj26,转染HeLa细胞。通过RT-PCR法检测Sj14、Sj26和Sj97mRNA的表达,免疫荧光(IFA)检测Sj14、Sj26和Sj97蛋白的表达。用纯化的该质粒免疫BALB/c小鼠(100μg/只),设生理盐水和空载体对照组,20只/组,每隔2周加强免疫1次,共免疫3次。末次免疫2周后,每组取10只小鼠,眼球取血并断颈处死,取脾淋巴细胞及腹腔巨噬细胞。分别检测免疫小鼠血清中总IgG抗体及脾淋巴细胞培养上清干扰素-γ(IFN-γ)水平,淋巴细胞刺激指数(SI)及NO释放量,并分析脾淋巴细胞亚群。各组中余下小鼠每只经腹部感染40±1条尾蚴,45d后剖杀,计数成虫数及肝卵数,计算减虫率和减卵率。结果构建的质粒可在体外表达。疫苗组、生理盐水组和空白质粒组血清总IgG抗体含量分别为(5.62±0.64)、(1.22±0.20)及(1.48±0.36)mg/ml,疫苗组与各对照组差异均具有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。疫苗组、生理盐水组和空白质粒组小鼠腹腔巨噬细胞NO含量分别为(321.19±18.03)、(184.12±11.05)及(213.51±15.93)nmol/ml,疫苗组与生理盐水组间差异有统计学意义(P<0.05)。疫苗组、生理盐水组、空白质粒组小鼠脾淋巴细胞刺激指数分别为(2.25±0.29)、(1.18±0.07)及(1.22±0.09),疫苗组显著升高(P<0.01)。疫苗组INF-γ水平与各对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.01);CD4+和CD8+T细胞百分比明显升高。疫苗组减虫率和肝减卵率分别为39.9%和43.94%。结论pIRES-Sj97-Sj14-Sj26疫苗具有较强的免疫原性,可对日本血吸虫感染的小鼠产生一定保护作用。 展开更多
关键词 日本血吸虫 多基因dna疫苗 免疫保护作用
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衰老现象:生命科学的探究 被引量：2
11
作者 刘足云 王笑峰 《科学》 北大核心 2013年第3期26-30,4,共5页
“健康与长寿”是人类永恒的主题。生命科学在揭示衰老机理和干预衰老进程上取得不少进展，也留下许多有待探索的课题。综合多种指标与多重途径的探讨思路，是今后取得防病抗衰老进展之关键。
关键词 衰老 长寿基因dna 甲基化 组蛋白修饰氧化应激假设
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人乳头瘤病毒16型亚基因DNA体外转化功能的细胞学研究
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作者 张卫 司静懿 +3 位作者 李昆 陈连凤 赵维敏 韩日才 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第3期222-226,共5页
利用HZIP16和HZIP16K(见材料和方法)质粒,将人乳头瘤病毒16型(HPV-16)的全早期区基因及其开放读码框架(ORF)E6-E7分别转入ψ2细胞,所产生的重组病毒能诱导NIH3T3细胞发生转化。转化细胞具有恶性细胞的生物学和形态学特征,可在0.3％软琼... 利用HZIP16和HZIP16K(见材料和方法)质粒,将人乳头瘤病毒16型(HPV-16)的全早期区基因及其开放读码框架(ORF)E6-E7分别转入ψ2细胞,所产生的重组病毒能诱导NIH3T3细胞发生转化。转化细胞具有恶性细胞的生物学和形态学特征,可在0.3％软琼脂中形成集落,可使裸鼠致瘤。Southern blot证明,HPV-16 E6-E7 ORFs序列以整合形式存在于转化细胞和裸鼠肿瘤细胞DNA中,表明HPV-16 DNA具有体外诱导NIH3T3细胞恶性转化的作用,E6-E7 ORFs是诱导细胞转化的关键基因。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 亚基因dna 细胞转化
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MTNRIB基因DNA甲基化与妊娠期糖尿病及妊娠期间糖脂代谢关系的研究 被引量：2
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作者 李嘉佩 赵维纲 +3 位作者 付勇 董颖越 李娟 刘俊涛 《中华临床营养杂志》 CAS CSCD 2019年第3期138-143,共6页
目的探讨MTNR1B基因DNA甲基化与妊娠期糖尿病及妊娠期间糖脂代谢指标的相关性。方法纳入2009年至2012年孕中期行100克口服葡萄糖耐量试验(OGTT)的妊娠期糖尿病患者50例以及年龄和孕前体重指数(bodymassindex,BMI)匹配的正常糖耐量孕妇50... 目的探讨MTNR1B基因DNA甲基化与妊娠期糖尿病及妊娠期间糖脂代谢指标的相关性。方法纳入2009年至2012年孕中期行100克口服葡萄糖耐量试验(OGTT)的妊娠期糖尿病患者50例以及年龄和孕前体重指数(bodymassindex,BMI)匹配的正常糖耐量孕妇50例,收集临床指标及孕中期全血标本,完成MTNR1B基因DNA甲基化测定。结果校正年龄与孕前BMI后,据翻译起始位点+64bp的MTNRIBCpG位点DNA甲基化程度与妊娠期糖尿病相关(OR=0.859,95%可信区间:0.772-0.955,P=0.005),MTNR1B基因许多位点DNA甲基化水平和妊娠期间糖脂代谢指标相关。结论MTNR1B基因DNA甲基化和妊娠期糖尿病与妊娠期糖脂代谢相关。 展开更多
关键词 MTNR1B基因dna甲基化 妊娠期糖尿病 妊娠期糖脂代谢
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牡丹籽蛋白酶解产物对禽多杀性巴氏杆菌ptfA基因DNA疫苗免疫效果的影响 被引量：1
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作者 杜珍奇 宫强 +5 位作者 牛明福 秦翠丽 任国艳 马丽苹 伍家发 张彬 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1053-1058,共6页
为研究牡丹籽蛋白酶解产物对禽多杀性巴氏杆菌(Pm) ptfA基因DNA疫苗免疫效果的影响,本研究以牡丹籽蛋白酶解产物为佐剂制备佐剂-DNA疫苗,分别以DNA疫苗和佐剂-DNA疫苗免疫鸡,同时设置牡丹籽蛋白酶解产物灌胃-DNA疫苗免疫组以及弱毒疫苗... 为研究牡丹籽蛋白酶解产物对禽多杀性巴氏杆菌(Pm) ptfA基因DNA疫苗免疫效果的影响,本研究以牡丹籽蛋白酶解产物为佐剂制备佐剂-DNA疫苗,分别以DNA疫苗和佐剂-DNA疫苗免疫鸡,同时设置牡丹籽蛋白酶解产物灌胃-DNA疫苗免疫组以及弱毒疫苗、pcDNA3.1(+)空载体和PBS对照组。每两周免疫一次,共免疫3次。间接ELISA检测免疫后鸡血清特异性抗体水平,MTT法检测免疫鸡外周血淋巴细胞增殖情况,双抗夹心ELISA检测鸡IL-2和IL-4的分泌情况。三免2周后以强毒菌株CVCC474 (5 LD50/只)攻毒,计算强毒攻击后各组鸡的存活数及保护率。结果显示,佐剂-DNA疫苗组和灌胃组鸡的血清特异性抗体水平与DNA疫苗组相比无显著差异(p>0.05)。三免后,佐剂-DNA疫苗组和灌胃组鸡的SI值和IL-4水平显著高于DNA疫苗组(p<0.05)。二免和三免后,佐剂-DNA疫苗组和灌胃组鸡的IL-2水平明显高于DNA疫苗组(p<0.05),且为免疫鸡提供的保护率高于DNA疫苗,其中以牡丹籽蛋白酶解产物为佐剂时效果较好,但均不及弱毒疫苗。表明预先灌胃牡丹籽蛋白酶解产物或以其为佐剂均可在一定程度上增强ptfA基因DNA疫苗的免疫效果。本研究为Pm DNA疫苗的研究及牡丹籽蛋白酶解产物在疫苗佐剂中的应用提供一定的参考。 展开更多
关键词 禽多杀性巴氏杆菌 牡丹籽蛋白酶解产物 ptfA基因dna疫苗 免疫效果
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胃癌组织中Syk基因甲基化状态及临床意义 被引量：1
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作者 吕萍 余江流 +4 位作者 韩静 余齐鸣 王实 郑智国 凌志强 《浙江医学》 CAS 2013年第2期102-104,110,共4页
目的探讨胃腺癌患者肿瘤组织、癌旁组织中Syk基因的甲基化状态与临床病理特征及预后的关系。方法应用Real—time甲基化特异性聚合酶联反应技术（MSP）检测92例胃腺癌患者肿瘤组织、配对的癌旁组织中Syk基因的甲基化状态，并分析其与临... 目的探讨胃腺癌患者肿瘤组织、癌旁组织中Syk基因的甲基化状态与临床病理特征及预后的关系。方法应用Real—time甲基化特异性聚合酶联反应技术（MSP）检测92例胃腺癌患者肿瘤组织、配对的癌旁组织中Syk基因的甲基化状态，并分析其与临床病理因素及预后之间的关系。选取40例年龄对应的健康志愿者及48例非萎缩性胃炎患者胃镜获取的组织DNA作对照。结果胃腺癌患者肿瘤组织中检测到Syk基因甲基化有33．7％（31／92），明显高于癌旁组织54％（5／92）。健康对照者和胃炎患者均无Syk基因甲基化。Syk基因甲基化与肿瘤大小、生长方式、分化程度、是否有静脉或淋巴管侵犯、TNM分期有关（17〈005）。结论胃腺癌患者Syk基因甲基化与肿瘤的生物学行为有关，提示肿瘤进展，预后不佳。 展开更多
关键词 胃癌Syk基因dna甲基化
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斑节对虾金属硫蛋白全基因DNA克隆及生物学信息分析
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作者 周发林 郑丽明 +3 位作者 杨其彬 黄建华 杨丽诗 江世贵 《湖北农业科学》 2017年第3期575-578,582,共5页
为深入研究斑节对虾(Penaeus monodon)金属硫蛋白MT(Pm-MT)基因参与斑节对虾性腺发育调控的分子机制,根据Pm-MT基因的c DNA序列,利用普通PCR和染色体步移(Genome Walking)技术获得Pm-MT基因的DNA全长序列,该基因序列DNA全长为2 744 bp,... 为深入研究斑节对虾(Penaeus monodon)金属硫蛋白MT(Pm-MT)基因参与斑节对虾性腺发育调控的分子机制,根据Pm-MT基因的c DNA序列,利用普通PCR和染色体步移(Genome Walking)技术获得Pm-MT基因的DNA全长序列,该基因序列DNA全长为2 744 bp,由2个内含子和3个外显子组成。其中启动子区域为806 bp,2个内含子长度分别为1 194、242 bp,3个外显子长度分别为22、78、77 bp。在启动子区域预测到转录因子糖皮质激素应答元件和雌激素应答元件与卵巢发育密切相关。 展开更多
关键词 斑节对虾(Penaeus monodon) 金属硫蛋白 全基因dna克隆 生物信息学分析
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乙型肝炎病毒X基因DNA竞争子的构建及鉴定
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作者 刘汉平 宴萍 方志正 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第5期480-481,487,共3页
目的构建乙型肝炎病毒X基因DNA(xDNA)竞争子L180,为竞争PCR定量分析xDNA打下基础。方法以扩增的xDNA片段为模板,用引物1434和Lx PCR扩增竞争子DNA,并将扩增产物克隆到pUCm-T载体,转化感受态大肠杆菌DH5α,酶切鉴定和测序,筛选阳性竞争... 目的构建乙型肝炎病毒X基因DNA(xDNA)竞争子L180,为竞争PCR定量分析xDNA打下基础。方法以扩增的xDNA片段为模板,用引物1434和Lx PCR扩增竞争子DNA,并将扩增产物克隆到pUCm-T载体,转化感受态大肠杆菌DH5α,酶切鉴定和测序,筛选阳性竞争子质粒,并建立竞争PCR定量分析xDNA的方法。结果所构建xDNA竞争子L180,经测序及PCR定量分析证实,PCR扩增的产物即为目的xDNA。初步建立了竞争PCR定量分析xDNA的方法。结论已成功构建乙肝病毒xDNA竞争子。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 X基因dna 竞争子 竞争PCR
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编码草鱼呼肠孤病毒VP5与NS38 B细胞表位的DNA疫苗壳聚糖纳米口服制剂的研制与评价
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作者 唐庆权 张子涵 +9 位作者 毛颖睿 鲁子怡 陶敏慧 徐婷婷 曾杭 樊慧敏 许晓牧 彭开松 朱若林 鲍传和 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 2019年第3期389-393,共5页
以编码II型GCRV VP5和NS38的B细胞线性表位的cDNA串联构建pcDNA3.1(+)-Bs5-10(GenBank登录号为MH234474),并包被成纳米级壳聚糖颗粒;无GCRV草鱼(11~12 cm、25~30 g)随机分为空白对照组、空白对照-GCRV攻毒组、裸空载体注射组、壳寡糖包... 以编码II型GCRV VP5和NS38的B细胞线性表位的cDNA串联构建pcDNA3.1(+)-Bs5-10(GenBank登录号为MH234474),并包被成纳米级壳聚糖颗粒;无GCRV草鱼(11~12 cm、25~30 g)随机分为空白对照组、空白对照-GCRV攻毒组、裸空载体注射组、壳寡糖包被空载体口服组、裸DNA疫苗注射组(每尾鱼注射10μg载体,1d和29d各免疫1次)、壳寡糖包被DNA疫苗口服组(每尾鱼大约投喂50μg载体,1~3d、15~17d和43~45 d各口服免疫1次),在28℃水温下评价疫苗保护力和特异性抗体水平。结果显示,裸DNA疫苗注射组和壳寡糖包被DNA疫苗口服组的相对保护率分别为66.67%和50%;两组血清抗VP5和抗NS38的IgM水平均随加强免疫而显著升高(P<0.05);且在对应时间点(22 d或50 d),前组特异性IgM水平均显著高于后者(P<0.05)。结果表明,壳聚糖包被的DNA疫苗口服免疫能在一定程度上抵抗GCRV攻击,且体液免疫参与了该保护机制。 展开更多
关键词 草鱼呼肠孤病毒 多基因dna疫苗 口服免疫 注射免疫
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应用毒力基因DNA微阵列技术快速鉴定大肠埃希菌的致病型
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作者 徐鹏辉 《国外医学（微生物学分册）》 2003年第6期41-42,共2页
大肠埃希菌(简称大肠杆菌)是寄居在人和动物肠道的常见菌,其中少数具有致病性,主要引起肠道感染、泌尿系统感染、败血症以及脑膜炎3类疾病,依其毒力特性和所致疾病症状不同。
关键词 毒力基因dna微阵列技术 大肠埃希菌 致病型 鉴定
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生物钟基因DNA甲基化水平及动态变化与老年失眠障碍关联的巢式病例
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作者 李楚清 邹练武 孙香凤 《心电图杂志（电子版）》 2020年第2期52-54,共3页
目的探讨生物钟基因DNA甲基化水平及动态变化与老年失眠障碍关联的巢式病例。方法选择2018年4月-2019年7月老年患者1500例作为对象,所有患者入院后采用阿森斯失眠量表对患者睡眠情况进行调查,根据评估结果分为失眠障碍组和睡眠良好组。... 目的探讨生物钟基因DNA甲基化水平及动态变化与老年失眠障碍关联的巢式病例。方法选择2018年4月-2019年7月老年患者1500例作为对象,所有患者入院后采用阿森斯失眠量表对患者睡眠情况进行调查,根据评估结果分为失眠障碍组和睡眠良好组。查阅两组病例资料,记录患者性别、年龄、家庭经济、饮酒、超重/肥胖、冠心病史及胃溃疡病史等并完成单因素、多因素Logistic分析;采用实时荧光PCR(RT-PCR)方法测定两组生物钟基因CLOCK、PER、CRY基因的mRNA表达水平,并与老年障碍完成相关性分析。结果老年患者1500例中失眠障碍患者424例,发生率为28.27%。单因素及多因素Logistic分析结果表明:老年失眠障碍发生率与饮酒、超重/肥胖、年龄具有统计学意义(P<0.05);失眠障碍组生物钟基因CLOCK mRNA水平高于睡眠良好组(P<0.05);失眠障碍组生物钟基因PER、CRY基因的mRNA表达水平低于睡眠良好组(P<0.05);Pearson相关性分析结果表明:老年失眠障碍发生率与生物钟CLOCK呈正相关性(P<0.05);与PER、CRY基因呈负相关性(P<0.05)。结论老年失眠障碍发生率较高,受到的影响因素较多,且与生物钟基因DNA甲基化及动态变化存在相关性,加强其表达水平测定能预测老年失眠障碍发生率。 展开更多
关键词 生物钟基因dna甲基化水平 老年失眠障碍 巢式病例
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