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Autologous cytokine-induced killer cell therapy in clinical trial phase I is safe in patients with primary hepatocellular carcinoma 被引量:95
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作者 MingShi BingZhang Zi-RongTang Zhou-YunLei Hui-FenWang Yong-YiFeng Zhen-PingFan Dong-PingXu Fu-ShengWang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2004年第8期1146-1151,共6页
AIM:To investigate the influence of autologous cytokine- induced killer (CIK) cells on the phenotypes of CIK effector cells,peripheral T lymphocyte subsets and dendritic cell subsets in patients with primary hepatocel... AIM:To investigate the influence of autologous cytokine- induced killer (CIK) cells on the phenotypes of CIK effector cells,peripheral T lymphocyte subsets and dendritic cell subsets in patients with primary hepatocellular carcinoma (HCC). METHODS:Peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were collected by a blood cell separator from 13 patients with HCC,then expanded by priming them with interferon- gamma (IFN-γ) followed by monoclonal antibody (mAb) against CD3 and interleukin-2 (IL-2) the next day.The phenotypic patterns of CIK cells were characterized by flow cytometry on d 0,4,7,10,13 and 15 of incubation, respectively.Then,5 mL of venous blood was obtained from HCC patients before or 8-10 d after CIK cells were transfused into patients to assess the influence of CIK cells on the percentages of effector cells,and proportions of DC1 or DC2 in peripheral blood by flow cytometry. RESULTS:After two weeks of in vitro incubation,the percentages of CD3^+CD8^+,CD3^+CD56^+,and CD25^+ cells increased significantly from 33.5±10.1%,7.7±2.8%,and 12.3±4.5% to 36.6±9.0% (P<0.05),18.9±6.9% (P<0.01), and 16.4±5.9% (P<0.05),respectively.However,the percentages of CD3^+CD4^+ and NK cells had no significant difference.The percentages of CD3^+ and CD3^+CD8^+ cells were kept at high levels during the whole incubation period,but those of CD25^+,and CD3^+CD56^+ cells began to decrease on d 7 and 13,respectively.The proportions of type Ⅰ dendritic cell (DC1) and type Ⅱ dendritic cell (DC2) subsets increased from 0.59±0.23% and 0.26±0.12% before CIK cell therapy to 0.85±0.27% and 0.43±0.19% (all P<0.01) after CIK cell transfusion,respectively.The symptoms and characteristics of HCC patients were relieved without major side effects. CONCLUSION:Our results indicated that autologous CIK cells can efficiently improve the immunological status in HCC patients,and may provide a potent approach for HCC patients as the adoptive immunotherapy. 展开更多
关键词 原发性肝细胞癌 基因疗法 细胞因子 自杀基因 病毒性肝炎
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重组人p53腺病毒注射液联合放射线治疗头颈鳞癌的Ⅱ期临床试验 被引量:69
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作者 张珊文 肖绍文 +8 位作者 刘长清 孙艳 苏星 李东明 徐刚 蔡勇 朱广迎 徐博 吕有勇 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第23期2023-2028,共6页
目的 评价重组人p5 3腺病毒注射液 (rAd p5 3)联合放射线治疗头颈鳞癌的疗效及安全性。方法 自 2 0 0 1年 10月至 2 0 0 2年 9月 ,对 4 2例头颈鳞癌进行了rAd p5 3制剂结合放疗 (基因治疗加放疗 ,GTRT)对比单纯放疗 (单纯放疗 ,RT)的... 目的 评价重组人p5 3腺病毒注射液 (rAd p5 3)联合放射线治疗头颈鳞癌的疗效及安全性。方法 自 2 0 0 1年 10月至 2 0 0 2年 9月 ,对 4 2例头颈鳞癌进行了rAd p5 3制剂结合放疗 (基因治疗加放疗 ,GTRT)对比单纯放疗 (单纯放疗 ,RT)的前瞻性随机对照Ⅱ期临床试验。患者被随机地分入结合治疗的GTRT组 (共 2 0例 )和作为对照的RT组 (共 2 2例 )。在GTRT组 ,每周 1次行瘤内注射rAd p5 3制剂 1× 10 1 2 病毒颗粒共 8次 ,同时结合放疗。两组都采用同样的常规放疗方案 ,每次 2Gy ,每周 5次 ,使原发灶和颈部转移淋巴结都达到 70Gy 35f 7~ 8w。观测病人的不良反应、血清抗腺病毒抗体水平和肿瘤变化。以CT对比分析GTRT组和RT组病人在 4 0Gy、70Gy及疗效确认时 (治疗后 2月 )肿瘤即刻反应率。结果 随机对比分析或自身对比分析结果都表明 ,rAd p5 3明显地提高了头颈鳞癌患者放疗的疗效 (P <0 0 5 )。随机对比结果表明 ,rAd p5 3对 4 0Gy放疗的增效倍数为 1 72 ,疗效确认时头颈鳞癌GTRT组CR率比RT组CR率提高 1 6 8倍。自身对比结果表明 ,rAd p5 3对 4 0Gy放疗的增效倍数为 1 6 9,疗效确认时头颈鳞癌GTRT瘤灶的CR率比自身RT瘤灶CR率提高 2 5 3倍。 2 0例头颈鳞癌患者接受多次rAd p5 3瘤内注射 ,除了出现一时性? 展开更多
关键词 重组人P53腺病毒 放射线治疗 头颈部肿瘤 鳞癌 安全性 基因疗法
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重组人p53腺病毒注射液治疗喉癌的Ⅰ期临床试验及追踪观察 被引量:60
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作者 韩德民 黄志刚 +6 位作者 张伟 于振坤 王琪 倪鑫 陈晓红 潘锦华 王鸿 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第23期2029-2032,共4页
目的 评价重组人p5 3腺病毒注射液 (rAd p5 3)对喉癌患者的毒理、药理作用。方法将 12例各期喉癌患者随机平分成 3个剂量组 (1× 10 1 0 VP、1× 10 1 1 VP、1× 10 1 2 VP) ;局部注射rAd p5 3,1次 隔日× 5次× ... 目的 评价重组人p5 3腺病毒注射液 (rAd p5 3)对喉癌患者的毒理、药理作用。方法将 12例各期喉癌患者随机平分成 3个剂量组 (1× 10 1 0 VP、1× 10 1 1 VP、1× 10 1 2 VP) ;局部注射rAd p5 3,1次 隔日× 5次× 2个疗程 ,经 3年以上的追踪 ,通过症状、体检 (含喉镜检查 )和实验室检查观察其副作用及临床疗效。结果 在 1× 10 1 2 VP组 1例患者出现自限性发热 ,余 11例无异常。所有患者在治疗后常规和重要脏器等检测值均在正常范围。rAd p5 3特异性抗体在治疗后 2~ 3周后转阳性 ;rAd p5 3治疗患者肿瘤组织p5 3蛋白表达明显增强 ;2例患者治疗后SIL 2R水平异常和T细胞亚群失调指标好转 ;所有患者随访 3年以上示无瘤生存。结论 rAd p5 3局部治疗喉癌安全、有效 ,具有广阔的临床应用前景。 展开更多
关键词 重组人P53腺病毒 喉癌 临床试验 毒理学 药理作用 P53基因 基因疗法
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重组人p53腺病毒注射液结合放射治疗鼻咽癌Ⅱ期临床试验观察 被引量:52
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作者 陈传本 潘建基 徐鹭英 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第23期2033-2035,共3页
目的 观察重组人p5 3腺病毒注射液 (rAd p5 3)配合放疗治疗鼻咽癌 (NPC)的疗效及毒性反应。方法  2 9例鼻咽鳞癌随机分成基因治疗 +放疗组 (GTRT) 16例和单纯放疗组 (RT) 13例。GTRT组患者应用rAd p5 3瘤内注射 1次 周× 8,放疗... 目的 观察重组人p5 3腺病毒注射液 (rAd p5 3)配合放疗治疗鼻咽癌 (NPC)的疗效及毒性反应。方法  2 9例鼻咽鳞癌随机分成基因治疗 +放疗组 (GTRT) 16例和单纯放疗组 (RT) 13例。GTRT组患者应用rAd p5 3瘤内注射 1次 周× 8,放疗在rAd p5 3注射 3d后开始。两组放疗剂量和方法相同。结果 采用rAd p5 3注射液治疗 4周后 ,两组肿瘤平均缩小率分别为 71%± 18%和 4 9%±2 3% (P <0 0 0 1)。治疗 8周后 ,两组肿瘤平均缩小率分别为 95 %± 10 %和 80 %± 17% (P <0 0 0 1)。治疗结束 4周后 ,两组肿瘤完全消退率分别为 75 %和 15 % (P <0 0 1)。GTRT组有 3例患者治疗过程中出现自限性低热 ,余无明显毒副反应。结论 rAd p5 3配合放疗治疗NPC具有较好疗效 ,临床使用安全 ,不良反应轻微。 展开更多
关键词 重组人P53腺病毒 放射疗法 鼻咽癌 临床试验 毒性反应 基因疗法
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乙型肝炎抗病毒治疗的新进展 被引量:49
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作者 张定凤 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 1999年第1期1-2,共2页
关键词 乙型肝炎 抗病毒治疗 干扰素 核苷类 基因疗法
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丙型肝炎病毒致病的分子生物学机制 被引量:41
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作者 成军 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期23-27,共5页
丙型肝炎病毒 (HCV)属于黄病毒属 ,基因组为单股正链RNA ,其致病机制与DNA病毒和逆转录病毒截然不同。由于诱导中和抗体的抗原表位恰好位于其包膜抗原E2蛋白的高变区 1(HVR1) ,因而容易逃避机体的免疫监视 ,形成慢性感染 ,同时造成发展... 丙型肝炎病毒 (HCV)属于黄病毒属 ,基因组为单股正链RNA ,其致病机制与DNA病毒和逆转录病毒截然不同。由于诱导中和抗体的抗原表位恰好位于其包膜抗原E2蛋白的高变区 1(HVR1) ,因而容易逃避机体的免疫监视 ,形成慢性感染 ,同时造成发展广谱预防性疫苗的困难。噬菌体表面展示技术和模拟表位的理论和技术 ,是构建新型蛋白或基因疫苗 ,克服这一困难的可能途径。HCV基因复制和翻译有关的调节基因序列与肝细胞来源的蛋白质之间相互作用的研究 ,将有助于阐明HCV调节机制和相对嗜肝特性的分子生物学基础 ;HCV特异性受体的研究 ,将有助于阐明HCV感染并进入肝细胞的各个细节 ;酵母双杂交技术对于HCV结构和非结构蛋白结合的肝细胞蛋白的筛选 ,以抑制性消减杂交 (SSH)技术对HCV蛋白调节的肝细胞靶基因的筛选 ,将有助于阐明HCV与肝细胞大分子之间相互作用的分子机制。所有这些 ,将为最终揭密HCV感染引起慢性病毒性肝炎、肝纤维化、肝细胞癌、肝脏脂肪变、B细胞淋巴瘤、冷球蛋白血症等的分子生物学机制 ,并为反义技术、人源化单链可变区抗体为目的基因的细胞内免疫基因治疗和治疗性基因疫苗等抗HCV治疗新型方法的研究奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 致病 分子生物学机制 模拟表位 反式激活 基因疗法
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肺癌靶向治疗研究进展与我国肺癌的EGFR基因突变概况 被引量:35
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作者 董强刚 黄进肃 +2 位作者 黄建 卢丽琴 杨立民 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期625-628,634,共5页
近年来,以上皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)为靶标的分子靶向治疗(molecular targeted therapy)受到国内外肿瘤界的普遍关注,其中EGFR酪氨酸激酶抑制剂Gefitinib(又称Iressa)和Erlotinib(又称Tarceva)已被美... 近年来,以上皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)为靶标的分子靶向治疗(molecular targeted therapy)受到国内外肿瘤界的普遍关注,其中EGFR酪氨酸激酶抑制剂Gefitinib(又称Iressa)和Erlotinib(又称Tarceva)已被美国食品药品管理局(FDA)批准用于治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC),并且Gefitinib还获得包括日本、澳大利亚等27个国家的批准,我国也于2005年2月批准了Genfitinib进入临床. 展开更多
关键词 肺肿瘤 受体 表皮生长因子 基因疗法 突变 药物作用
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肝纤维化的治疗 被引量:32
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作者 蒋树林 姚希贤 孙玉凤 《世界华人消化杂志》 CAS 2000年第6期684-685,共2页
肝纤维化(hepatic fibrosis)是指肝脏纤维组织的过度沉积,系纤维增生(细胞外基质合成增加)和纤维分解(细胞外基质降解)不平衡的结果.肝纤维化是多种病因导致肝硬变的基础,故对慢性肝病的治疗除强调病因治疗外,还应强调对肝纤维化的治疗... 肝纤维化(hepatic fibrosis)是指肝脏纤维组织的过度沉积,系纤维增生(细胞外基质合成增加)和纤维分解(细胞外基质降解)不平衡的结果.肝纤维化是多种病因导致肝硬变的基础,故对慢性肝病的治疗除强调病因治疗外,还应强调对肝纤维化的治疗,以减缓、阻止乃至逆转其病理进程.但迄今为止,尚乏较为理想的治疗肝纤维化药物.在肝纤维化治疗上,劳逸结合、合理营养,戒酒、避免使用有损于肝脏的药物为本病治疗的基础.去除病因、消除炎症以及肝纤维化的防治为治疗的关键,对有 HBV,HCV 感染的慢性肝病,病毒持续复制者,应及时采用抗病毒辅以调节免疫治疗. 展开更多
关键词 肝硬化 治疗 药物疗法 基因疗法 干扰素
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三维彩色血管能量成像在诊断乳腺肿瘤及预测肿瘤血管生成的应用价值 被引量:29
9
作者 谷涛 傅庆诏 +3 位作者 马喆 李传福 李海鹰 陶国伟 《中华超声影像学杂志》 CSCD 2005年第8期584-587,共4页
目的探讨三维彩色血管能量成像在诊断乳腺肿瘤及预测肿瘤血管生成的临床应用价值。方法对85例由手术及病理证实乳腺肿瘤患者行三维彩色血管能量成像检查,并对肿瘤血管三维图像进行定量及半定量分析。采用链霉素-生物素免疫组化技术对所... 目的探讨三维彩色血管能量成像在诊断乳腺肿瘤及预测肿瘤血管生成的临床应用价值。方法对85例由手术及病理证实乳腺肿瘤患者行三维彩色血管能量成像检查,并对肿瘤血管三维图像进行定量及半定量分析。采用链霉素-生物素免疫组化技术对所有乳腺肿瘤进行CD34指标检测。结果乳腺良恶性肿瘤的三维血管形态不一,以血管分型Ⅲ型诊断乳腺恶性肿瘤,其敏感性为88.24%,特异性为68.29%。其定量指标血管指数也有明显差异,以血管指数>0.3条/cm3诊断恶性肿瘤敏感性为81.57%,特异性为67.56%。良性肿瘤血管指数与微血管密度无显著相关性(P>0.05),恶性肿瘤血管指数与微血管密度有显著相关性(P<0.05)。结论三维彩色血管能量成像技术为乳腺肿瘤的诊断提供了新的途径和方法,并且可初步评估肿瘤组织微血管的丰富程度,从而预测预后及为抗肿瘤血管生成的基因疗法、手术切除等治疗方案的选择提供重要的依据。 展开更多
关键词 三维彩色血管能量成像 乳腺肿瘤 肿瘤血管生成 基因疗法 手术治疗 图像处理
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骨形成蛋白2基因转染的人牙周膜成纤维细胞的骨诱导作用 被引量:22
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作者 司晓辉 刘正 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期347-349,共3页
目的 建立表达骨形成蛋白 2 (BMP_2 )的人牙周膜成纤维细胞 (HPDLFs) ,观察其体内成骨作用 ,为牙周缺损修复基因疗法的建立提供实验依据。方法 采用脂质体载体将人BMP_2噬菌粒表达载体pBK_B2转染至HPDLFs。利用免疫组化ABC法检测转染... 目的 建立表达骨形成蛋白 2 (BMP_2 )的人牙周膜成纤维细胞 (HPDLFs) ,观察其体内成骨作用 ,为牙周缺损修复基因疗法的建立提供实验依据。方法 采用脂质体载体将人BMP_2噬菌粒表达载体pBK_B2转染至HPDLFs。利用免疫组化ABC法检测转染细胞内BMP_2蛋白的表达 ,并于无菌条件下将转染细胞注射于裸鼠股部肌肉内 ,2 1d后取材 ,苏木精—伊红染色观察肌肉组织内骨形成情况。结果 BMP_2基因转染后HPDLFs内有BMP_2蛋白的表达。在注射BMP_2基因转染细胞的肌肉组织内可见明显的新骨形成。结论 BMP_2基因成功转入HP DLFs中并得到有效表达 。 展开更多
关键词 骨形成蛋白2 基因转染 人牙周膜成纤维细胞 牙周缺损 修复 基因疗法
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Caspase-3融合蛋白基因的构建及其对HeLa细胞凋亡的诱导作用 被引量:22
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作者 贾林涛 于翠娟 +5 位作者 许彦鸣 朱峰 彭玮丹 苏成芝 王成济 杨安钢 《第四军医大学学报》 北大核心 2001年第12期1057-1060,共4页
目的 观察重构型 caspase- 3及其 N-端融合蛋白的表达对 He L a细胞的凋亡诱导作用 .方法 用反转录 PCR获取人 caspase- 3基因 ,用重组 PCR方法构建人重构型 caspase-3及其融合蛋白基因 ,将基因克隆入表达载体 pc DNA3,脂质体法转染 H... 目的 观察重构型 caspase- 3及其 N-端融合蛋白的表达对 He L a细胞的凋亡诱导作用 .方法 用反转录 PCR获取人 caspase- 3基因 ,用重组 PCR方法构建人重构型 caspase-3及其融合蛋白基因 ,将基因克隆入表达载体 pc DNA3,脂质体法转染 He L a细胞 ,通过细胞计数、电镜观察、MTT法等检测被转染细胞的生长及其凋亡状况 .结果 成功获得了 cas-pase- 3基因 ,构建了重构型 caspase- 3基因和重构型 caspase- 3与绿脓杆菌外毒素 (PE)转膜结构域部分肽段的融合蛋白基因及其表达载体 ,与对照组相比 ,在转染后 1~ 4d内 ,两种基因的表达均导致 He L a细胞存活数减少 ,大量细胞发生凋亡 ,且二者活性相当 .结论 重构型 caspase- 3及其融合蛋白可以诱导转染的 He L 展开更多
关键词 天冬氨酸蛋白酶类 脱噬作用 肿瘤 基因疗法
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树突状细胞与肿瘤的免疫治疗和基因治疗——树突状细胞的细胞与分子生物学Keystone会议(美国)简介 被引量:20
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作者 曹雪涛 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1998年第2期82-84,共3页
树突状细胞(Dendritic cells, DC)的细胞与分子生物学Keystone会议(Keystone Symposium on Cellular and Molecular Biology of Dendritic Cells)于1998年3月7日~13日于美国Santa Fe召开,来自不同国家的300余名学者参加了会议。
关键词 肿瘤 免疫疗法 基因疗法 树突状细胞 分子生物学
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论器官移植的法律问题 被引量:21
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作者 郭自力 《中外法学》 CSSCI 北大核心 1998年第5期98-101,共4页
Ⅰ 在代表现代生物医学最高成就的基因疗法、人工生殖和器官移植三大领域中,器官移植的医学和法律实践最为成熟,取得了举世公认的重大进展。所谓器官移植,是指摘除一个身体的器官并把它置于同一个体(自体移植),或同种另一个体(同种异体... Ⅰ 在代表现代生物医学最高成就的基因疗法、人工生殖和器官移植三大领域中,器官移植的医学和法律实践最为成熟,取得了举世公认的重大进展。所谓器官移植,是指摘除一个身体的器官并把它置于同一个体(自体移植),或同种另一个体(同种异体移植),或不同种个体(异体移植)的相同部位(常位)或不同部位(异位)。1902年,卡雷尔(A·Carrl)和古斯里(C·Guthrie)发展了血管缝合技术,奠定了器官移植临床技术的基础。以后,美国、前苏联和欧洲一些国家相继进行过一些肾移植手术,均因无法解决人体的免疫排斥反应而告失败。1954年,第一例同卵双生子之间的肾移植在美国波士顿的一家医院获得成功,从而为器官移植技术带来了新的曙光和希望。过去几十年间,由于新的免疫抑制药物的研制和应用。 展开更多
关键词 器官移植 肾移植 存活率 异体移植 捐赠人 肝移植 医疗机构 基因疗法 器官和组织 免疫排斥反应
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抗肿瘤药物的研究进展与发展策略 被引量:18
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作者 丁健 《江西医学院学报》 2001年第2期33-39,共7页
关键词 抗肿瘤药物 药理学 药物疗法 肿瘤相关基因 细胞毒性药物 基因疗法
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腺相关病毒介导心肌肌浆网Ca^(2+)-ATPase2a基因转导治疗大鼠慢性心力衰竭 被引量:22
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作者 惠海鹏 李小鹰 +4 位作者 刘秀华 孙胜 鲁晓春 刘涛 杨伟 《中华心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期357-362,共6页
目的研究腺相关病毒为载体的心肌肌浆网Ca2+-ATPase2a(sarcoplasmicreticulumCa2+-ATPase,SERCA2a)基因转导对慢性心力衰竭(HF)大鼠的治疗作用,并探讨其多种可能的机理。方法采用腹主动脉缩窄术建立HF大鼠模型,应用经腹心包腔内注射术... 目的研究腺相关病毒为载体的心肌肌浆网Ca2+-ATPase2a(sarcoplasmicreticulumCa2+-ATPase,SERCA2a)基因转导对慢性心力衰竭(HF)大鼠的治疗作用,并探讨其多种可能的机理。方法采用腹主动脉缩窄术建立HF大鼠模型,应用经腹心包腔内注射术分别将生理盐水、携带eGFP基因和携带SERCA2a基因的重组腺相关病毒导入HF、HF+EGFP和HF+SERCA2a组大鼠心脏。于导入30天,检测各组大鼠的心脏功能、SERCA2a蛋白表达和活性;比较HF组和HF+SERCA2a组大鼠心肌蛋白质组表达的差异;检测各组大鼠心肌肌球蛋白重链(MHC)亚型的表达。结果HF大鼠心脏内转导入SERCA2a基因30天,心脏收缩和舒张功能达到对照组大鼠水平,并且HF+SERCA2a组左室重/体重比值显著降低;SERCA2a蛋白表达和活性明显升高至对照组大鼠水平;多种能量代谢酶表达明显增加;α-MHC、β-MHC的表达以及α-MHC/β-MHC恢复至对照组大鼠水平。结论以重组腺相关病毒2作为载体,SERCA2a基因转导可以增强衰竭心脏的SERCA2a功能,增加心脏能量代谢,纠正MHC亚型的异常表达;在临床方面表现为显著改善心脏收缩和舒张功能,可能能够减轻心脏肥厚等病理性结构改变。 展开更多
关键词 心力衰竭 充血性 肌浆网 钙调蛋白 基因疗法
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脑胶质瘤综合治疗进展 被引量:19
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作者 刘伟国 《实用肿瘤杂志》 CAS 北大核心 2004年第6期462-464,共3页
关键词 脑肿瘤/治疗 神经胶质瘤/治疗 基因疗法 综合疗法 综述文献
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“分子搭桥术”基因治疗闭塞性血管病的实验研究 被引量:23
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作者 周爱儒 郑卫 +5 位作者 邢德智 王富强 汤健 马大龙 朱国英 陈光慧 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第9期662-666,共5页
目的 应用血管内皮生长因子(VEGF)基因治疗实验性闭塞性外周血管病。方法构建重组VEGF165基因的真核表达载体,其上游含巨细胞病毒(CMV)启动子;通过基因缝线,向一侧髂外动脉结扎引起血管闭塞症大鼠的肌肉内转移V... 目的 应用血管内皮生长因子(VEGF)基因治疗实验性闭塞性外周血管病。方法构建重组VEGF165基因的真核表达载体,其上游含巨细胞病毒(CMV)启动子;通过基因缝线,向一侧髂外动脉结扎引起血管闭塞症大鼠的肌肉内转移VEGF基因(200μg/只);应用逆转录-聚合酶链反应,Westernblot以及免疫组织化学方法观察VEGF基因的表达,并通过血管造影技术观察VEGF基因导入大鼠体内的生物效应。结果转pcDNA3/VEGF基因7天后,肌肉组织内VEGFmRNA及其表达产物明显高于对照组单纯转pcDNA3组;血管造影可见大量新生血管和侧支循环的形成,在14天和30天时更明显,转VEGF基因可以明显促进闭塞性下肢血流的恢复和改善组织坏死的程度。结论肌肉内转移VEGF基因,通过促进血管新生和侧支循环建立,促进血流恢复,为闭塞性血管病的治疗,提供一种新的可能性──分子搭桥术。 展开更多
关键词 基因疗法 内皮生长因子 血栓闭塞性 脉管炎
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血管内皮生长因子转染骨髓间充质干细胞心肌移植对心肌梗死后大鼠心功能及血管新生的作用 被引量:22
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作者 杨进福 周文武 +3 位作者 唐滔 喻杰锋 周新民 胡建国 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第15期1027-1034,共8页
目的建立重组人血管内皮生长因子(VEGF)165基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)的方法,探讨该细胞心肌移植对缺血性心脏病心功能及血管新生的影响,并比较联合治疗与单独基因或细胞治疗的疗效差异。方法采用密度梯度离心-贴壁培养法获取Wi... 目的建立重组人血管内皮生长因子(VEGF)165基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)的方法,探讨该细胞心肌移植对缺血性心脏病心功能及血管新生的影响,并比较联合治疗与单独基因或细胞治疗的疗效差异。方法采用密度梯度离心-贴壁培养法获取Wistar近交系大鼠MSC,用脂质体将pcDNA3.1-hVEGF165转入该细胞,通过ELISA、RT—PCR和Western印迹检测后者VEGF的表达情况;以Wistar近交系大鼠建立心肌缺血模型,随机分成4组(每组12只),心肌梗死模型建立2周后,联合组在心肌梗死区移植转染VEGF165基因的MSC,细胞组移植等量的MSC,基因组注射脂质体-pcDNA3.1-VEGF165DNA复合物,对照组注射等容积培养液;另取12只未结扎冠脉的大鼠为假手术组。细胞移植4周后,用Buxco系统检测心功能;然后处死动物,取心肌标本,测量心肌梗死面积;用5-溴脱氧尿嘧啶(Brdu)、肌钙蛋白T免疫组化双染法确定移植细胞的存活与分化;用Ⅷ因子染色法检测血管新生,RT-PCR法检测VEGF165基因的体内表达情况。结果(1)pcDNA3.1-hVEGF165基因通过脂质体转染大鼠MSC后获稳定表达;(2)移植4周后,联合组心肌梗死面积(27.8%±3.0%)明显低于细胞组(37.0%±10.1%)与基因组(37.1%±5.2%,均P<0.05),心功能改善优于细胞组与基因组;(3)联合组心肌梗死区毛细血管密度(每视野40.2个±5.5个)高于细胞组(27.2个±6.3个,P<0.01)和对照组(18.5个±5.8个,P<0.01),较基因组(35.8个±7.7个)亦有增加的趋势(P=0.189);(4)Brdu、肌钙蛋白T双染示各治疗组心肌梗死区心肌细胞数量不同程度的多于对照组;(5)联合组VEGF基因的体内表达(hVEGFmRNA相对含量0.18±0.04)高于基因组(0.10±0.03,P<0.01)。结论转染VEGF基因的MSC移植可使鼠冠脉结扎造成的心肌梗死面积缩小、心功能明显改善,其疗效优于单独应用基因或细胞治疗,为缺血性心脏病的细胞基� 展开更多
关键词 基因疗法 心肌梗塞 血管内皮生长因子转染 骨髓间充质干细胞 细胞心肌移植
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超声造影剂促进野生型p53基因转染抑制大鼠卵巢癌生长的实验研究 被引量:20
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作者 彭幼玲 郭爱林 肖敏 《中华超声影像学杂志》 CSCD 2006年第1期61-64,共4页
目的探讨超声辐照造影剂微泡促进野生型p53基因转染进而抑制大鼠卵巢癌生长的有效性。方法构建野生型p53真核质粒表达载体pcDNA3.1+/p53,将40只卵巢癌荷瘤大鼠分成4组。第1组瘤体内注入造影剂微泡和野生型p53质粒混合物,并用超声辐照大... 目的探讨超声辐照造影剂微泡促进野生型p53基因转染进而抑制大鼠卵巢癌生长的有效性。方法构建野生型p53真核质粒表达载体pcDNA3.1+/p53,将40只卵巢癌荷瘤大鼠分成4组。第1组瘤体内注入造影剂微泡和野生型p53质粒混合物,并用超声辐照大鼠腹部瘤区;第2组注入裸质粒后予以超声辐照瘤体;第3组注射超声造影剂和基因混合物后无超声辐照;第4组仅注入裸质粒而无超声辐照。每组进行基因转染每周1次,共进行8次。2月后用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测野生型p53mRNA在卵巢癌组织中的表达,Western Blot检测野生型p53基因蛋白表达。结果成功构建野生型p53真核质粒表达载体pcDNA3.1+/p53,埋线法建立卵巢癌动物模型;用超声波辐照微泡促进基因转染后见p53基因转录及表达。第1组p53mRNA的表达明显增强,高于其他3组,约是第2组的2.65倍,第4组的5.95倍。第2组高于未行超声辐照组,是第4组的2.23倍。第3、4组基因表达差异无统计学意义;Western Blot分析示p53基因蛋白表达的差异模式基本同mRNA,即第1组p53mRNA的表达增强,高于其他3组,约是第2组的1.75倍,第4组的3.13倍;第2组高于未行超声辐照组,是第4组的1.79倍;第3、4组基因表达差异无统计学意义。结论瘤体内注射造影剂微泡和野生型p53质粒混合物后行超声辐照,可明显增加质粒基因在癌瘤组织中的导入及表达,超声联合造影剂微泡可作为卵巢癌基因治疗中促进基因转移的辅助方法。 展开更多
关键词 超声检查 造影剂 卵巢肿瘤 基因疗法
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结直肠癌基因治疗研究进展 被引量:23
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作者 范应方 黄宗海 《世界华人消化杂志》 CAS 2001年第4期427-430,共4页
结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤,其治疗以手术治疗为主,同时辅以放化疗,但术后5年生存率在50%左右,约半数的患者5 a后出现复发或转移.对失去手术机会或转移性患者主要采取以5-FU为主的化疗和生物治疗.肿瘤基因治疗是生物治疗的发展和... 结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤,其治疗以手术治疗为主,同时辅以放化疗,但术后5年生存率在50%左右,约半数的患者5 a后出现复发或转移.对失去手术机会或转移性患者主要采取以5-FU为主的化疗和生物治疗.肿瘤基因治疗是生物治疗的发展和新支柱,是肿瘤生物治疗的里程碑.它是将含目的基因的重组DNA或RNA转移到受体细胞内,使之在细胞内表达,以诱发免疫应答反应,控制和调节机体抗癌功能.本文就结直肠癌基因治疗现状予以综述. 展开更多
关键词 结肠直肠肿瘤 治疗 基因疗法
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