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小鼠生物净化中体外受精试剂对其受精率和产仔率的影响
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作者 李斯特 唐玉玲 +3 位作者 崔晶 王进 武文卿 邱业峰 《实验动物科学》 2024年第4期56-60,共5页
目的在基因修饰小鼠的生物净化中探索体外受精试剂对受精率和产仔率的影响。方法根据体外受精试剂厂家不同,实验体系分为A组、B组和C组。分别选择5~11种基因修饰小鼠品系进行超数排卵-体外受精-胚胎移植实验,记录捡卵数、2细胞数、移植... 目的在基因修饰小鼠的生物净化中探索体外受精试剂对受精率和产仔率的影响。方法根据体外受精试剂厂家不同,实验体系分为A组、B组和C组。分别选择5~11种基因修饰小鼠品系进行超数排卵-体外受精-胚胎移植实验,记录捡卵数、2细胞数、移植胚胎数、仔鼠出生数等指标,并计算受精率和产仔率。结果A组的受精率为(51.89±13.91)%,产仔率为(14.70±10.95)%;B组的受精率为(57.71±17.12)%,产仔率为(34.96±9.92)%;C组的受精率为(54.78±18.56)%,产仔率为(22.01±9.54)%。受精率:B>C>A,产仔率:B>C>A,但各组之间无统计学差异。A组所需试剂配制难度大、使用复杂、稳定性较差,而B组和C组试剂使用简单、稳定性强。但与A组和C组相比,B组所使用的试剂单价高,因此实验成本较高。结论B组和C组的试剂均可作为基因修饰小鼠体外受精的常规试剂使用,实验人员可根据受精率、产仔率、价格和使用简便性等综合因素进行选择。 展开更多
关键词 基因修饰小鼠 辅助生殖 生物净化 体外受精 受精率 产仔率
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胚胎移植技术用于微生物感染小鼠的生物净化 被引量:4
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作者 王芊芊 丁贤明 +2 位作者 陈瑜 刘璐 刘迪文 《实验动物与比较医学》 CAS 2013年第1期69-71,共3页
目的净化受微生物感染的10个品系基因修饰小鼠种群。方法通过获取基因修饰小鼠的2-细胞期胚胎,将胚胎充分清洗并移植入假孕小鼠的输卵管中。通过对新生鼠的基因型和微生物鉴定判定小鼠净化的效果。结果经基因型鉴定显示,7种转基因小... 目的净化受微生物感染的10个品系基因修饰小鼠种群。方法通过获取基因修饰小鼠的2-细胞期胚胎,将胚胎充分清洗并移植入假孕小鼠的输卵管中。通过对新生鼠的基因型和微生物鉴定判定小鼠净化的效果。结果经基因型鉴定显示,7种转基因小鼠净化后阳性仔鼠率为33.33%-57.14%。3个品系纯合子基因敲除小鼠净化后仔鼠全为杂合子。选取同窝野生型仔鼠和假孕雌鼠进行微生物检测,所有指标均符合sPF级要求。结论采用胚胎移植技术有效净化受感染的小鼠种群。 展开更多
关键词 小鼠净化 基因修饰小鼠 胚胎移植 SPF级
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数种神经科学常用基因修饰小鼠生育状况的影响因素分析
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作者 黄琦逸 齐宇欣 +3 位作者 毛宏晖 武胜昔 王文挺 姜鸣 《空军军医大学学报》 CAS 2023年第2期117-122,共6页
目的探究神经科学常用基因修饰小鼠生育状况的影响因素。方法追溯10年内2642笼多种基因型健康雌雄小鼠的配种及生育数据,探究季节、配种雌雄小鼠的基因型、配种雌雄小鼠的年龄对每窝新生小鼠数量及配种-生产间期的影响。结果多元线性回... 目的探究神经科学常用基因修饰小鼠生育状况的影响因素。方法追溯10年内2642笼多种基因型健康雌雄小鼠的配种及生育数据,探究季节、配种雌雄小鼠的基因型、配种雌雄小鼠的年龄对每窝新生小鼠数量及配种-生产间期的影响。结果多元线性回归分析结果显示,配种雌性小鼠年龄(P<0.001)、配种雄性小鼠年龄(P=0.007)、配种雌性小鼠基因型(P=0.018)、配种雄性小鼠基因型(P=0.002)均对新生小鼠数量有显著性影响,而季节(P=0.803)未显著影响新生小鼠数量;新生小鼠配种-生产间期多元线性回归分析的结果显示,季节因素(P=0.006)、配种雌性小鼠年龄(P<0.001)、配种雄性小鼠年龄(P<0.001)均对新生小鼠配种-生产间期有显著性影响,而配种雌性小鼠基因型(P=1.000)、配种雄性小鼠基因型(P=0.293)并未显著影响新生小鼠配种-生产间期。在此基础上对所筛选出的危险因素进行单因素分析,结果显示,在配种雌雄小鼠年龄均为青年期(雌:P<0.001,雄:P<0.001)、配种雌鼠基因型为野生型(P<0.001)且配种雄鼠基因型为多基因型(P=0.004)时新生小鼠数量最多;在春季(P=0.006)配种雌雄小鼠年龄均为青年期(雌:P<0.001,雄:P<0.001)时配种-生产间期最短。结论新生小鼠每窝的数量与配种小鼠的年龄及基因型显著相关;新生小鼠的配种-生产间期与季节及配种小鼠的年龄显著相关。基于此,建议在春季挑选青年期的雌雄小鼠并使配种雌鼠基因型为野生型且配种雄鼠基因型为多基因型时进行配种,此种方案可使新生小鼠数量最多且配种-生产间期最短。 展开更多
关键词 生育状况 多元线性回归 基因修饰小鼠
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通过骨髓移植建立骨髓源性细胞特异性基因修饰小鼠模型
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作者 余钢 陈锡坚 +3 位作者 郭锦伟 葛佳辉 周应毕 刘斌 《汕头大学医学院学报》 2023年第4期193-196,204,共5页
目的:通过骨髓移植建立骨髓源性细胞特异性基因修饰小鼠模型。方法:将具有相同遗传背景的供体小鼠(C57BL/6野生型小鼠)的骨髓细胞移植到经X射线辐照的受体小鼠(C57BL/6 Ep3^(-/-)小鼠)中,通过不同辐射剂量和方式的对比,确定基因修饰小... 目的:通过骨髓移植建立骨髓源性细胞特异性基因修饰小鼠模型。方法:将具有相同遗传背景的供体小鼠(C57BL/6野生型小鼠)的骨髓细胞移植到经X射线辐照的受体小鼠(C57BL/6 Ep3^(-/-)小鼠)中,通过不同辐射剂量和方式的对比,确定基因修饰小鼠骨髓移植实验的最适辐照方案。提取受体小鼠血液和鼠尾组织DNA进行基因型鉴定和嵌合率分析。结果:受体小鼠经合适剂量的X射线辐照(辐射剂量为8.0 Gy,分2次照射,每次4.0 Gy,中间间隔6 h),小鼠存活率可达到(74.3±2.4)%,嵌合率(95.77±0.52)%,符合骨髓移植实验要求。结论:成功建立了符合骨髓移植实验要求的骨髓源性细胞特异性基因修饰小鼠模型,可用于心血管及炎症等相关的研究工作。 展开更多
关键词 骨髓移植 骨髓源性细胞 辐射 嵌合率 基因修饰小鼠
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基因修饰小鼠在脂代谢紊乱与动脉粥样硬化研究中的新进展 被引量:4
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作者 丁银元 刘国庆 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期151-153,共3页
近十余年来,载脂蛋白(ApoE)与低密度脂蛋白(LDL)受体(LDLr)基因敲除小鼠已成为研究脂代谢和动脉粥样硬化最为常用的模型。在这两种小鼠模型基础上,通过与不同的转基因、基因敲除小鼠杂交,产生了多种脂代谢紊乱和动脉粥样硬化小鼠模型,... 近十余年来,载脂蛋白(ApoE)与低密度脂蛋白(LDL)受体(LDLr)基因敲除小鼠已成为研究脂代谢和动脉粥样硬化最为常用的模型。在这两种小鼠模型基础上,通过与不同的转基因、基因敲除小鼠杂交,产生了多种脂代谢紊乱和动脉粥样硬化小鼠模型,为发现调控血浆脂蛋白以及动脉粥样硬化发生的机制,创造了有利条件。此外,新的严重高甘油三酯血症小鼠模型也制备成功,本文笔者研究组研究了其中的脂蛋白脂酶缺陷模型与代谢性疾病的关系,得到了许多有意义的结果。而利用不同转基因和去基因小鼠作为供体,以及ApoE或LDL受体缺陷小鼠作为接受体的骨髓移植技术,则大大丰富了人们对于巨噬细胞中不同基因在动脉粥样硬化发生、发展和消退过程中作用的认识。动脉粥样硬化的易损斑块形成是近年来的一个研究热点,应用小鼠模型进行模拟也取得了一定的成功。然而,小鼠与人类在脂代谢和动脉粥样硬化中存在很大的种系差异,本文对此也予以评述。 展开更多
关键词 基因修饰小鼠 脂代谢 动脉粥样硬化
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葡萄糖转运蛋白2与胰岛β细胞研究进展 被引量:2
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作者 杨锦慧 刘雅琳 何军华 《临床医药实践》 2018年第9期698-702,共5页
葡萄糖转运蛋白2(GLUT-2)在胰岛β细胞、肝、肠、肾以及中枢神经系统中均有表达。对基因修饰小鼠的生理学研究揭示了GLUT-2在不同的调控机制中通过影响胰岛β细胞发挥调节葡萄糖代谢的作用。在胰岛β细胞中,GLUT-2是葡萄糖刺激胰岛素... 葡萄糖转运蛋白2(GLUT-2)在胰岛β细胞、肝、肠、肾以及中枢神经系统中均有表达。对基因修饰小鼠的生理学研究揭示了GLUT-2在不同的调控机制中通过影响胰岛β细胞发挥调节葡萄糖代谢的作用。在胰岛β细胞中,GLUT-2是葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)所必需的。在肝细胞中,观察到GLUT-2表达受到抑制,表明在肝细胞中存在另一种葡萄糖输出途径. 展开更多
关键词 葡萄糖转运蛋白2 胰岛Β细胞 中枢神经系统 基因修饰小鼠 葡萄糖代谢 胰岛素分泌 肝细胞 生理学
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基于microCT的基因修饰小鼠骨微结构的分形维数分析 被引量:2
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作者 杨春艳 王姝 +4 位作者 李书书 林梓桐 刘澍 王超 王铁梅 《江苏医药》 CAS 北大核心 2014年第19期2241-2243,I0001,共4页
目的分析基因修饰小鼠股骨及下颌骨显微CT(microCT)扫描影像的分形维数(FD)。方法采集1-α羟化酶敲除纯合子小鼠(A组)、人成纤维细胞生长因子23过表达小鼠(B组)、1-α羟化酶敲除联合成纤维细胞生长因子23过表达小鼠(C组)和野生型小鼠(D... 目的分析基因修饰小鼠股骨及下颌骨显微CT(microCT)扫描影像的分形维数(FD)。方法采集1-α羟化酶敲除纯合子小鼠(A组)、人成纤维细胞生长因子23过表达小鼠(B组)、1-α羟化酶敲除联合成纤维细胞生长因子23过表达小鼠(C组)和野生型小鼠(D组)的股骨和下颌骨,采用microCT扫描及三维重建影像评估骨质疏松程度,并测量小鼠股骨和下颌骨影像兴趣区域的FD值。结果与D组相比,A、B、C组小鼠股骨和下颌骨的皮质骨厚度、骨小梁容量减少,下颌第一、第二磨牙的牙尖釉质磨耗增加,股骨远端各兴趣区以及下颌第一、第二磨牙牙槽骨的FD值增加(P<0.05);而A、B、C组间股骨和牙槽骨的FD值均无统计学差异(P>0.05)。下颌第一磨牙牙槽骨与股骨远端干骺端的FD值显著相关(r=0.777,P<0.01)。结论 FD值可以较好地反映骨质疏松状况,股骨干骺端和下颌牙槽骨是较合适的兴趣部位,分形分析可运用于下颌骨影像的再分析。 展开更多
关键词 基因修饰小鼠 骨质疏松症 显微CT断层扫描 分形维数
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基因修饰小鼠饲养管理及使用过程中问题探讨 被引量:1
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作者 田枫 任波 +2 位作者 张云凤 马利伟 郑振辉 《中国比较医学杂志》 CAS 2014年第7期72-74,共3页
随着基因修饰小鼠的广泛使用,在饲养管理中必然会遇到一些新问题。文章以北京大学医学部实验动物科学部清洁级动物实验设施中饲养的基因修饰小鼠为对象,着重探讨其在饲养管理和使用中出现的问题,并加以分析,为建立基因修饰小鼠的管理规... 随着基因修饰小鼠的广泛使用,在饲养管理中必然会遇到一些新问题。文章以北京大学医学部实验动物科学部清洁级动物实验设施中饲养的基因修饰小鼠为对象,着重探讨其在饲养管理和使用中出现的问题,并加以分析,为建立基因修饰小鼠的管理规范奠定基础。 展开更多
关键词 基因修饰小鼠 管理 使用 管理规范
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hDPP4转基因及定点敲入小鼠模型的建立及其对MERS⁃CoV易感性比较 被引量:1
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作者 熊芮 李倩倩 +5 位作者 彭泽旭 黄维金 刘甦苏 王辰飞 柳全明 范昌发 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期650-659,共10页
中东呼吸系统综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)是2012年发现的新型高致病性冠状病毒,其病死率高达34.4%。人二肽基肽酶-4(human dipeptidyl peptidase-4,hDPP4)分子是MERS-CoV进入宿主细胞的受... 中东呼吸系统综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)是2012年发现的新型高致病性冠状病毒,其病死率高达34.4%。人二肽基肽酶-4(human dipeptidyl peptidase-4,hDPP4)分子是MERS-CoV进入宿主细胞的受体。为了获得稳定的MERS-CoV易感小鼠模型,本文分别利用Tol2转基因技术和CRISPR/Cas9技术将hDPP4受体导入C57BL/6小鼠,筛选获得转基因小鼠hDPP4-Tg、定点敲入小鼠hDPP4-KI;通过Q-PCR、Western Blot及活体成像技术,分析了hDPP4基因的表达特征。结果显示,在hDPP4-Tg小鼠中,其表达水平较低,在脑中高表达;而在hDPP4-KI中整体表达水平高,表达优势脏器为肺。假病毒感染实验表明,hDPP4-Tg几乎不易感,而hDPP4-KI小鼠对假病毒高度易感。进而,对假病毒感染hDPP4-KI小鼠的感染途径、感染剂量、是否剃除被毛等条件进行优化,获得了稳定易感的MERS-CoV假病毒感染模型,并利用该模型初步评价了单克隆抗体hMS-1的体内活性。本研究显示,即使相同的受体基因,不同策略构建的遗传修饰小鼠模型的效果差异较大;受体分子表达水平与模型的易感性高度相关;本研究获得的高效而稳定的MERS-CoV假病毒感染模型可望在抗体评价、疫苗研制、药物筛选等领域提供模型工具,提示将受体分子定点插入小鼠基因组、高表达受体基因是成功构建病毒易感模型首选策略。 展开更多
关键词 中东呼吸系统综合征冠状病毒(MERS-CoV) 假病毒 基因修饰小鼠 受体表达 易感性
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Clcn3敲除对幼龄小鼠实质器官的影响
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作者 经争辉 李春英 +4 位作者 刘蓉 任俞华 崔诗雨 赵文宝 张海峰 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期326-332,共7页
目的探究Clcn3敲除对幼龄小鼠实质器官发育的影响,为Clcn3基因敲除动物应用提供理论参考。方法PCR鉴定FVB小鼠基因型:野生型(Clcn3^(+/+))、杂合子(Clcn3^(+/-))及纯合子(Clcn3-/-);小鼠3周龄时,采集心、肝、脾、肺、肾和脑等主要实质... 目的探究Clcn3敲除对幼龄小鼠实质器官发育的影响,为Clcn3基因敲除动物应用提供理论参考。方法PCR鉴定FVB小鼠基因型:野生型(Clcn3^(+/+))、杂合子(Clcn3^(+/-))及纯合子(Clcn3-/-);小鼠3周龄时,采集心、肝、脾、肺、肾和脑等主要实质器官并拍照,利用Image J软件测量其投影面积;中性福尔马林溶液固定各实质器官,石蜡切片进行HE染色,全切片利用全自动数字病理扫描分析系统扫描后观察器官细微结构。结果与Clcn3^(+/+)和Clcn3^(+/-)小鼠相比,Clcn3-/-小鼠体重显著降低(P<0.05);Clcn3缺失会显著降低小鼠心、肝、脾、肺及肾的体积(P<0.05),但不会影响小鼠脑的大小(P>0.05);HE染色显示,Clcn3-/-小鼠各实质器官组织结构未见异常,实质细胞体积相对较小。结论Clcn3敲除导致幼龄小鼠的实质器官减小,未对幼龄小鼠实质器官产生明显病理损伤。 展开更多
关键词 基因修饰小鼠 Clcn3 敲除 实质器官 HE 染色
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基因修饰小鼠的病毒检测方法初探
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作者 刘香梅 张钰 +1 位作者 袁文 罗显立 《实验动物与比较医学》 CAS 2011年第5期389-391,共3页
目的探讨血清学方法对基因修饰小鼠检测适用性。方法根据国家标准要求,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)(血清学方法)等方法对基因修饰小鼠的11个病毒项目进行检测。结果应用血清学方法对基因剔除小鼠在ECT、TMEV等8项病毒检测中,非... 目的探讨血清学方法对基因修饰小鼠检测适用性。方法根据国家标准要求,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)(血清学方法)等方法对基因修饰小鼠的11个病毒项目进行检测。结果应用血清学方法对基因剔除小鼠在ECT、TMEV等8项病毒检测中,非特性对照OD值显著升高,出现明显干扰现象。结论用血清学方法检测基因剔除小鼠病毒时,检测结果的判定受到影响。 展开更多
关键词 基因修饰小鼠 血清学 检测
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基因修饰小鼠应用于心脏研究的进展:从小鼠到人类,从基因到临床
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作者 杜晓军 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期241-246,共6页
基因修饰(敲除、变异和过度表达)小鼠自90年代初应用于心脏学研究。近十余年来,利用这一类模型的研究发现对心血管领域所取得的重要进展有着突出的贡献,已经成为该领域里具有举足轻重地位的研究手段。目前,基因修饰小鼠模型的数量日益... 基因修饰(敲除、变异和过度表达)小鼠自90年代初应用于心脏学研究。近十余年来,利用这一类模型的研究发现对心血管领域所取得的重要进展有着突出的贡献,已经成为该领域里具有举足轻重地位的研究手段。目前,基因修饰小鼠模型的数量日益增多并已形成系统,有关的心脏表现型数据库日趋丰富,多种从整体到分子水平的表现型的研究手段已十分成熟。在今后的心脏研究中,小鼠模型有望对阐明疾病的分子机制和探索新的治疗途径起到很大的推动作用。 展开更多
关键词 基因修饰小鼠 心脏学 基因敲除 基因过度表达
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基因修饰小鼠实验室生物安全管理体系建设
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作者 王芊芊 刘冲 +3 位作者 傅军 陈若宁 刘迪文 汪洌 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2023年第6期144-149,共6页
随着《中华人民共和国生物安全法》的实施,实验室生物安全问题越来越受到关注。基因修饰小鼠实验室属于复杂、综合性实验室,在生物安全管理方面难度较大。现结合基因修饰小鼠实验室,分析基因修饰小鼠实验室在建设使用中存在的生物安全风... 随着《中华人民共和国生物安全法》的实施,实验室生物安全问题越来越受到关注。基因修饰小鼠实验室属于复杂、综合性实验室,在生物安全管理方面难度较大。现结合基因修饰小鼠实验室,分析基因修饰小鼠实验室在建设使用中存在的生物安全风险,介绍了实验室在生物安全管理体系建设中的实践经验,包括管理组织构架、制度建设、监督机制、人员培训等方面的内容,为高校同类型实验室安全管理提供借鉴和参考。 展开更多
关键词 基因修饰小鼠实验室 生物安全 风险评估 安全管理
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HCMV IE86对恶性胶质瘤细胞凋亡及p53表达活性的影响 被引量:1
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作者 刘婷 钱冬萌 +5 位作者 胡明 于淼 张现娟 秦子英 刘小可 王斌 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2019年第2期44-49,共6页
人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)能诱导肿瘤细胞恶性转化且抑制肿瘤细胞凋亡,但HCMV编码的主要即刻早期调控蛋白IE86在这一过程中是否发挥关键作用仍然未知。为探究IE86对基因修饰荷胶质瘤小鼠p53表达水平及恶性胶质瘤细胞凋... 人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)能诱导肿瘤细胞恶性转化且抑制肿瘤细胞凋亡,但HCMV编码的主要即刻早期调控蛋白IE86在这一过程中是否发挥关键作用仍然未知。为探究IE86对基因修饰荷胶质瘤小鼠p53表达水平及恶性胶质瘤细胞凋亡情况的影响,本研究通过PCR技术鉴定基因修饰小鼠IE86表达情况;实时定量PCR技术检测IE86和p53mRNA表达水平变化;免疫组织化学方法检测p53和p21蛋白的表达水平;TUNEL检测肿瘤组织细胞凋亡情况。结果显示,成功构建了IE86基因修饰小鼠模型;与IE86阴性组相比IE86阳性组p53表达水平上升(P<0.05),但p21表达水平下降(P<0.05);IE86阳性组细胞抗凋亡能力增强(P<0.05)。以上结果表明,在基因修饰的小鼠中IE86持续表达但p53转录活性的指示标志p21下调,且IE86可提高恶性胶质瘤细胞抗凋亡能力。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 胶质瘤细胞UL261 IE86基因修饰小鼠 IE86 P53 p21 凋亡
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