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高效抗虫转基因水稻的研究与开发 被引量:65
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作者 朱祯 《中国科学院院刊》 2001年第5期353-357,共5页
植物转基因技术为培育高效抗虫水稻新品种开辟了新的途径。豇豆胰蛋白酶抑制剂 (CpTI)基因是一种广谱抗虫基因 ,该成果采用最新研究策略 ,对该基因进行体外修饰 ,使其转译产物最终定位于细胞的内质网中 ,以增加外源抗虫物质的稳定性。... 植物转基因技术为培育高效抗虫水稻新品种开辟了新的途径。豇豆胰蛋白酶抑制剂 (CpTI)基因是一种广谱抗虫基因 ,该成果采用最新研究策略 ,对该基因进行体外修饰 ,使其转译产物最终定位于细胞的内质网中 ,以增加外源抗虫物质的稳定性。实验证明 ,转修饰cpti基因的植物无论是抗虫蛋白含量还是抗虫能力均比转野生型cpti基因植物有显著的提高。已获大量转基因水稻株系 ,包括著名水稻恢复系明恢 81和明恢 86,并用其配制了杂交组合。转基因抗虫杂交水稻已获国家有关部门批准进行中间试验和环境释放 ,大田试验结果表明 ,转基因杂交水稻具有优良的抗虫特性和广阔的应用前景。 展开更多
关键词 抗虫水稻 植物基因工程 豇豆 胰蛋白酶抑制剂基因 基因修饰 细胞内定位 抗虫转基因 基因技术
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基因编辑技术的研究和应用:伦理学的视角 被引量:58
2
作者 邱仁宗 《医学与哲学(A)》 北大核心 2016年第7期1-7,共7页
介绍了基因编辑技术的历史和现状,归纳总结了CRISPR/Cas9技术的发展历程,及其优缺点。着重讨论了基因编辑技术研究和应用中的伦理问题,提出应对基因编辑研发技术采取积极、审慎的基本方针,在证据和审查机制基础上,分阶段开展相关工作;... 介绍了基因编辑技术的历史和现状,归纳总结了CRISPR/Cas9技术的发展历程,及其优缺点。着重讨论了基因编辑技术研究和应用中的伦理问题,提出应对基因编辑研发技术采取积极、审慎的基本方针,在证据和审查机制基础上,分阶段开展相关工作;同时将基础研究和前临床研究置于优先地位;应该允许将基因编辑技术用于体细胞的基因治疗,目前应禁止将该技术用于生殖系细胞的治疗,不考虑用于基因增强,对非人生物的基因修饰也必须有所规范和管控。 展开更多
关键词 基因编辑 基因修饰 增强 实施性研究 实质性伦理问题 程序性伦理问题 风险-受益比
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骨形态发生蛋白-2基因修饰的组织工程化骨修复羊胫骨干骨缺损 被引量:25
3
作者 戴克戎 徐小良 +6 位作者 汤亭亭 朱振安 郁朝锋 徐旻 朱六龙 郝永强 楼觉人 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第15期1345-1349,共5页
目的 评价腺病毒介导的人骨形态发生蛋白 2 (Adv hBMP 2 )基因转染的组织工程化人工骨对大动物长骨干骨缺损的修复效果。方法 建立羊胫骨干骨缺损模型 (2 .6cm) ,单侧 (右 )植入体外构建的组织工程化骨 ,2 6只羊分为 5组 :(1)Adv hBM... 目的 评价腺病毒介导的人骨形态发生蛋白 2 (Adv hBMP 2 )基因转染的组织工程化人工骨对大动物长骨干骨缺损的修复效果。方法 建立羊胫骨干骨缺损模型 (2 .6cm) ,单侧 (右 )植入体外构建的组织工程化骨 ,2 6只羊分为 5组 :(1)Adv hBMP 2转染的骨髓间充质干细胞 (BMSC)加煅烧骨 (CB)组 (9侧 ) ;(2 )腺病毒介导的 β 半乳糖苷酶 (Adv βgal)基因转染的BMSC加CB组 (6侧 ) ;(3)未转染的BMSC加CB组 (6侧 ) ;(4)单纯CB组 (3侧 ) ;(5 )未治疗组 (2侧 )。分期行X线、计量组织学检查和生物力学测定。结果 X线 :4~ 8周 ,Adv hBMP 2转染组的羊胫骨干骨缺损内有明显骨痂形成 ;2 6周 ,(1)、(2 )、(3)、(4)和 (5 )组的完全愈合率 ,分别为 5 / 8、1/ 5、0 / 5、0 / 2、0 / 1。计量组织学示 ,与其他组相比 ,1组的新生骨量最多 ,并有皮质骨形成 ;第 1组移植骨的压缩载荷和弹性模量明显大于其他各组。结论 hBMP 2基因修饰的组织工程化人工骨可以修复大动物 (羊 )负重骨 (胫骨 )的节段性缺损。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白-2 基因修饰 组织工程化骨 修复 胫骨干骨缺损 骨代用品 骨再生
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人脑源性神经营养因子基因修饰神经干细胞移植对痴呆大鼠学习记忆的改善 被引量:24
4
作者 赵志英 胡海涛 +2 位作者 冯改丰 许杰华 张海英 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期331-334,共4页
目的 观察神经干细胞( neural stem cell,NSC)和人脑源性神经营养因子( human brain derivedneurotrophic factor,h BDNF)基因修饰NSC移植对阿尔茨海默病( Alzheimer disease,AD)模型鼠的学习记忆改善作用。 方法 SD大鼠4 0只随机分... 目的 观察神经干细胞( neural stem cell,NSC)和人脑源性神经营养因子( human brain derivedneurotrophic factor,h BDNF)基因修饰NSC移植对阿尔茨海默病( Alzheimer disease,AD)模型鼠的学习记忆改善作用。 方法 SD大鼠4 0只随机分为4组,每组10只。 组为正常对照组;其余3组进行单侧切断大鼠穹窿海马伞( fibria-fornix,FF)制备AD模型, 组为损伤组; 、组于术后10~12 d,侧脑室移植h BDNF基因修饰及未修饰的NSC分别为NSC组和BDNF组。移植后2周进行Morris水迷宫定位航行及空间探索行为学检测。 结果  组和 组的平均逃避潜伏期为4 1.84±2 1.76 s和2 5 .2 3±17.0 6 s,较 组潜伏期70 .91±2 3.6 7s明显缩短,差异有统计学意义( P<0 .0 1) ;平台象限游泳距离占总游泳距离的百分比: 组和 组分别为36 .9%和4 2 .0 % ,较 组2 6 .0 %明显增高,差异有统计学意义( P<0 .0 1) ; 组大鼠采取边缘式和随机式搜索模式显著多于其它各组,差异有统计学意义( P<0 .0 1)。其中 组大鼠的平均逃避潜伏期和平台象限游泳距离百分比及搜索策略接近 组( P>0 .0 5 ) ,采取直线式和趋向式的搜索策略显著多于其它各组( P<0 .0 1)。 结论 NSC和h BDNF基因修饰NSC移植对AD模型鼠的行为学有不同程度的改善,h BDNF基因修饰NSC移植较? 展开更多
关键词 人脑源性神经营养因子 基因修饰 学习记忆 神经干细胞移植 痴呆大鼠 Morris水迷宫 HBDNF disease 逃避潜伏期 SC移植 factor 阿尔茨海默病 搜索策略 brain 正常对照组 穹窿海马伞 侧脑室移植 行为学检测 AD模型鼠 统计学
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陆地棉栽培品种新陆早1号转基因抗虫植株的获得 被引量:18
5
作者 王伟 朱祯 +5 位作者 邓朝阳 高越峰 徐鸿林 肖桂芳 郭仲琛 李向辉 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1998年第5期1-5,共5页
通过根农杆菌介导法成功地将修饰的豇豆胰蛋白酶抑制剂(CpTI)基因导入新疆陆地棉栽培品种新陆早1号。棉花幼苗下胚轴经根农杆菌共培养、抗性愈伤组织筛选和胚性愈伤的诱导等阶段获得了胚状体;经ELISA检测选择Npt-Ⅱ阳... 通过根农杆菌介导法成功地将修饰的豇豆胰蛋白酶抑制剂(CpTI)基因导入新疆陆地棉栽培品种新陆早1号。棉花幼苗下胚轴经根农杆菌共培养、抗性愈伤组织筛选和胚性愈伤的诱导等阶段获得了胚状体;经ELISA检测选择Npt-Ⅱ阳性的克隆进行分化培养和植株再生;经ELISA再度检测,选择Npt-Ⅱ阳性的再生植株进一步培养。当生长至5—6片真叶时,将再生植株直接移栽到温室或进行嫁接。通过PCR鉴定和PCRSouthern杂交检测证明,修饰的CpTI基因已存在于再生植株的基因组内。抗虫测试结果表明,转化棉株对棉铃虫具有较强的抗性。 展开更多
关键词 抗虫基因 基因修饰 陆地棉 根农杆菌 棉花
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转化生长因子-β1基因修饰对骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的影响 被引量:19
6
作者 霍建忠 蒋淳 +1 位作者 郭常安 陈峥嵘 《中华手外科杂志》 CSCD 北大核心 2005年第4期245-248,共4页
目的观察骨髓间充质干细胞经转化生长因子-β1(transforminggrowthfactor,TGF-β1)基因修饰后增殖能力和向软骨细胞分化能力的变化。方法利用脂质体将pcDNA3-TGF-β1基因导入骨髓间充质干细胞,通过大体形态观察、CCK-8测定转染前后骨髓... 目的观察骨髓间充质干细胞经转化生长因子-β1(transforminggrowthfactor,TGF-β1)基因修饰后增殖能力和向软骨细胞分化能力的变化。方法利用脂质体将pcDNA3-TGF-β1基因导入骨髓间充质干细胞,通过大体形态观察、CCK-8测定转染前后骨髓间充质干细胞的增殖代谢能力,同时RT-PCR和Westernblot法检测软骨特异性细胞外基质蛋白Ⅱ型胶原的表达。结果基因修饰后骨髓间充质干细胞倍增能力明显增强,并且Ⅱ型胶原蛋白表达增加。结论经TGF-β1基因修饰的MSCs向软骨细胞分化能力增强,是优秀的软骨组织工程种子细胞。 展开更多
关键词 转化生长因子-Β1 基因修饰 骨髓间充质干细胞 软骨细胞 细胞分化 组织工程
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TGF-β_1基因修饰的间充质干细胞/仿生基质材料复合移植修复兔关节软骨缺损 被引量:17
7
作者 郭晓东 杜靖远 +4 位作者 郑启新 刘勇 段德宇 全大萍 卢泽俭 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期112-117,共6页
目的 :探讨转化生长因子 β1(TGF β1)基因转染间充质干细胞 (MSCs)能否提高关节软骨缺损的修复质量和远期疗效。方法 :把组织工程学与分子生物学有机结合 ,体外将具有促进MSCs增殖分化、抑制多种炎性介质活性及免疫排斥反应等多重生物... 目的 :探讨转化生长因子 β1(TGF β1)基因转染间充质干细胞 (MSCs)能否提高关节软骨缺损的修复质量和远期疗效。方法 :把组织工程学与分子生物学有机结合 ,体外将具有促进MSCs增殖分化、抑制多种炎性介质活性及免疫排斥反应等多重生物学效应的TGF β1基因转入关节软骨组织工程首选种子细胞MSCs,并与涂覆多聚赖氨酸的聚DL乳酸可降解多孔仿生基质材料复合移植 ,修复同种异体兔关节软骨缺损。以单纯空载体转染MSCs为对照 ,通过组织学、电镜及免疫组化等方法检测。结果 :转基因细胞 /仿生基质材料体外复合培养扫描电镜观察证实TGF β1基因修饰的MSCs增殖分化活性明显优于对照组。体内实验组织学及透射电镜结果显示实验组新生组织为透明样软骨 ,关节面平整 ,软骨下骨完全再生 ,与宿主骨软骨结合紧密 ,未见免疫排斥反应 ;对照组则新生软骨质量欠佳 ,与宿主骨整合欠佳 ,有不同程度的免疫排斥反应。免疫组化结果显示转基因细胞可继续表达TGF β1至少 4周以上。结论 :利用分子组织工程学 ,使TGF β1持续高效发挥作用 ,使提高关节软骨缺损、特别是创伤和骨关节炎关节软骨缺损的修复质量和远期疗效成为可能。 展开更多
关键词 关节软骨缺损修复 组织工程 间充质干细胞 转化生长因子Β1 基因修饰
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BMSCs构建组织工程软骨的研究进展 被引量:21
8
作者 许澍洽 许扬滨 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期163-166,共4页
目的综述BMSCs构建组织工程软骨的进展。方法查阅近10年来有关BMSCs构建组织工程软骨的文献,并进行综述。结果支架为软骨细胞的生长提供了理想的环境,细胞因子和基因修饰可促进BMSCs分化为软骨细胞,三者在软骨组织工程中具有重要作用。... 目的综述BMSCs构建组织工程软骨的进展。方法查阅近10年来有关BMSCs构建组织工程软骨的文献,并进行综述。结果支架为软骨细胞的生长提供了理想的环境,细胞因子和基因修饰可促进BMSCs分化为软骨细胞,三者在软骨组织工程中具有重要作用。结论三维支架的改良、合理使用细胞因子及基因修饰技术的提高,将推动临床上软骨重建技术的发展。 展开更多
关键词 组织工程软骨 BMSCS 基因修饰 细胞因子
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神经营养素3基因修饰的神经干细胞对周围神经再生修复的影响 被引量:18
9
作者 雷正旺 薄占东 +2 位作者 洪光祥 王发斌 康皓 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期80-82,i003,共4页
目的 探讨神经营养素 3基因修饰的神经干细胞对周围神经再生的影响。方法  5 4只SD大鼠随机分为 3组 ,造成坐骨神经切断损伤模型 ,神经外膜端端缝合 ,于小腿三头肌每周分别注射生理盐水、未被神经营养素 3基因修饰的神经干细胞、及神... 目的 探讨神经营养素 3基因修饰的神经干细胞对周围神经再生的影响。方法  5 4只SD大鼠随机分为 3组 ,造成坐骨神经切断损伤模型 ,神经外膜端端缝合 ,于小腿三头肌每周分别注射生理盐水、未被神经营养素 3基因修饰的神经干细胞、及神经营养素 3基因修饰的神经干细胞。术后 3、6、9周动态观察坐骨神经功能指数 (SFI)以了解后肢功能恢复情况、组织学切片观察、肌湿重恢复率测定、9周后吻合口神经干的电镜观察。结果 神经营养素 3基因修饰的神经干细胞组动物的有髓神经纤维密度、神经组织面积、髓鞘厚度、肌湿重以及坐骨神经功能指数均显著优于未被神经营养素 3基因修饰的神经干细胞组和生理盐水组 ,9周时差异有统计学意义。单纯神经干细胞组各项指标优于生理盐水组。结论 将神经营养素 3基因修饰的神经干细胞移植于修复的周围神经 ,使局部释放的NT 3加快轴突再生速度以促进周围神经再生 ,减缓失神经支配肌肉的萎缩。 展开更多
关键词 神经营养素3 基因修饰 神经干细胞 周围神经再生 生理盐水 坐骨神经 修复 外膜 动物 肌肉
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抗玉米纹枯病材料的鉴定及抗性遗传研究 被引量:20
10
作者 杨俊品 唐海涛 +5 位作者 杨家秀 李晓 陈德全 张彪 石永刚 黄宜祥 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期174-178,共5页
通过1997~2000年抗性鉴定,获得CML270为高抗玉米纹枯病且抗性稳定的抗性材料.该自交系在不同年份,对不同地理来源的玉米纹枯病强致病菌丝融合群AG-1-IA表现高抗(病情指数10左右),抗性表现明显优于国内玉米骨干自交系478和48-2.抗性遗... 通过1997~2000年抗性鉴定,获得CML270为高抗玉米纹枯病且抗性稳定的抗性材料.该自交系在不同年份,对不同地理来源的玉米纹枯病强致病菌丝融合群AG-1-IA表现高抗(病情指数10左右),抗性表现明显优于国内玉米骨干自交系478和48-2.抗性遗传初步分析表明,玉米纹枯病抗性表现为质量-数量性状,抗性遗传受主效基因控制,同时受微效多基因修饰,最少基因数目4~7对.玉米纹枯病抗原的获得为最终解决玉米纹枯病危害提供了技术和材料支撑. 展开更多
关键词 玉米纹枯病 遗传研究 抗性表现 抗性遗传 2000年 菌丝融合群 骨干自交系 抗性鉴定 抗性材料 病情指数 地理来源 数量性状 基因控制 基因修饰 基因数目 分析表 最终解 抗原
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IL-2基因修饰对树突状细胞表达细胞因子的影响 被引量:13
11
作者 孙黎飞 曹雪涛 +4 位作者 田野苹 章卫平 张明徽 黄欣 于益芝 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2000年第1期21-24,共4页
目的:观察用白细胞介素 2(interleukin-2,IL-2)基因修饰小鼠骨髓来源的树突状细胞(dendric cells, DC)后,DC表达细胞因子和趋化因子的变化及DC体内免疫后,小鼠体内主要脏器中IL-2表... 目的:观察用白细胞介素 2(interleukin-2,IL-2)基因修饰小鼠骨髓来源的树突状细胞(dendric cells, DC)后,DC表达细胞因子和趋化因子的变化及DC体内免疫后,小鼠体内主要脏器中IL-2表达情况。探讨其对抗原提呈微环境的改善及其可能的机制。方法:用EIJSA方法检测DC培养上清和小鼠血清及脏器中IL-2的含量,用RT-PCR方法检测DC中IL-2,IFN-γ,IL-12,GM-CSF,IL-4,IL-10,TNF-α,IL-1-β,MIP-1β,MCP-1,RANTES和IP10等的表达,用FACS分析DC表面IL-2受体的变化。结果:经IL-2基因修饰后,DC除了分泌高水平的IL-2外,尚能分泌一定水平的IFN-γ和IL-12,其表面表达的IL-2Rα密度增加。RT-PCR分析表明其表达多种细胞因子和趋化因子,用IL-2基因修饰的DC免疫小鼠后,血清和脏器中能检测到高水平的IL-2。结论:IL-2基因修饰DC,能促进DC表达IL-2受体,并以自分泌形式分泌高水平的ILZ,优化其抗原提呈的微环境,提示可增强DC的抗原提呈功能。 展开更多
关键词 树突状细胞 基因修饰 IL-2 肿瘤 免疫疗法
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抑制淀粉回生方法的研究现状和进展 被引量:18
12
作者 吴跃 陈正行 李晓暄 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期423-427,共5页
回生对淀粉基质的产品的影响往往是人们不期望的,因为其能引起这些产品的硬化,导致大量食物不能食用而浪费。本文综述了目前抑制淀粉回生的各种方法,并指出了各种方法的局限性,对今后的研究方向进行了展望。
关键词 淀粉 回生(老化) 基因修饰 化学修饰 物理修饰
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Differential mercury volatilization by tobacco organs expressing a modi-fied bacterial merA gene 被引量:14
13
作者 HE YU KE, JIAN GE SUN, XIAN ZHONG FENG, MIHALY CZAKU, LASZLO MARTON Depariment of Biological Sciences, University of South Carolina, 700 Sumter Street, Columbia, SC29208, USA National Laboratory of Plant Molecular Genetics, Shanghai Institute of Plant Phy 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2001年第3期231-236,共6页
Mercury pollution is a major environmental problem accompanying industrial activities. Most of the mercury released ends up and retained in the soil as complexes of the toxic ionic mercury (Hg2+), which then can be co... Mercury pollution is a major environmental problem accompanying industrial activities. Most of the mercury released ends up and retained in the soil as complexes of the toxic ionic mercury (Hg2+), which then can be converted by microbes into the even more toxic methylmercury which tends to bioaccumulate. Mercury detoxification of the soil can also occur by microbes converting the ionic mercury into the least toxic metallic mercury (Hg0) form, which then evaporates. The remediation potentia1 of transgenic plants carrying the MerA gene from E. coLi encoding mercuric ion reductase could be evaluated. A modified version of the gene, optimized for plant codon preferences (merApe9, Rugh et al. 1996), was introduced into tobacco by Agrobacterium-mediated leaf disk transformation. Transgenic seeds were resistant to HgCl2 at 50 μM and some of them (10-20% ) could germinate on media containing as much as 350 μM HgCl2, while the control plants were fully inhibited or died on 50 μM HgCl2. The rate of elemental mercury evolution from Hg2+ (added as HgCl2) was 5-8 times higher for transgenic plants than the control. Mercury volatilization by isolated organs standardized for fresh weight was higher (up to 5 times) in the roots than in shoots or the leaves. The data suggest that it is the root system of the transgenic plants that volatilizes most of the reduced mercury (Hg0). It also suggests that much of the mercury need not enter the vascular system to be transported to the leaves for volatilization. Thansgenic plants with the merApe9 gene may be used to mercury detoxification for environmental improvement in mercury-- contaminated regions more efficiently than it had been predicted based on data on volatilization of whole plants via the upper parts only (Rugh et al. 1996). 展开更多
关键词 Environment heavy metals mercury remediation tobacco.
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骨髓基质细胞与关节软骨细胞生物学特性的比较研究 被引量:15
14
作者 张东 黄靖香 +3 位作者 哈小琴 赵斌 余征 卢世璧 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2004年第1期53-57,共5页
目的 观察兔骨髓基质细胞 (MSCs)诱导和基因修饰后的主要生物学特性 ,并与关节软骨细胞进行比较。 方法 抽取成年雄性新西兰大白兔髂骨骨髓 ,密度梯度离心获得骨髓基质细胞 ,培养传至第 5代 ,按处理方法分为常规培养液组 (A组 )、条... 目的 观察兔骨髓基质细胞 (MSCs)诱导和基因修饰后的主要生物学特性 ,并与关节软骨细胞进行比较。 方法 抽取成年雄性新西兰大白兔髂骨骨髓 ,密度梯度离心获得骨髓基质细胞 ,培养传至第 5代 ,按处理方法分为常规培养液组 (A组 )、条件培养液组 (B组 )及重组缺陷型腺病毒携带肝细胞生长因子 c DNA转染组 (C组 )。条件培养液为常规培养液中含转化生长因子 - β1 (10 ng/ml)、碱性成纤维细胞生长因子 (2 5 ng/ml)和地塞米松 (10 - 7mol/L)。切取兔膝关节软骨 ,3mg/ml 型胶原酶消化传代培养至第 3代 (D组 )。观察原代 MSCs及第 5代 MSCs(体外培养 8~ 10周后 )细胞形态 ,对第 5代 MSCs及第 3代软骨细胞进行 、 型胶原免疫组织化学染色 ,MTT法检测细胞增殖情况。阿利新蓝法检测细胞培养上清液中糖胺多糖 (GAG)含量。提取各组培养细胞总 RNA,RT- PCR检测 、 型胶原表达。 结果 原代 MSCs为短梭形、簇状生长 ,传代细胞呈长梭形、旋涡样生长。A组细胞爬片 型胶原免疫组织化学染色阳性 , 型胶原免疫组织化学染色阴性 ,GAG含量低 ,与 D组比较 ,差异有统计学意义 (P<0 .0 5 )。B组细胞爬片 、 型胶原免疫组织化学染色阳性 ,GAG含量升高 ,与 D组比较差异无统计学意义 (P>0 .0 5 ) ;C组转染后第 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 关节软骨 细胞生物学特性 基因修饰 组织工程
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NGF、BDNF基因修饰嗅鞘细胞脊髓内移植对损伤脊髓细胞的保护作用 被引量:12
15
作者 布林 钟环 +1 位作者 姜汉国 袁即山 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2003年第18期1277-1278,共2页
目的:观察神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)基因修饰的嗅神经鞘细胞(Olfactory ensheathing cells,OECs)移植对损伤脊髓组织的保护作用。方法:将脊髓半横断伤SD大... 目的:观察神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)基因修饰的嗅神经鞘细胞(Olfactory ensheathing cells,OECs)移植对损伤脊髓组织的保护作用。方法:将脊髓半横断伤SD大鼠模型,随机分为:NGF、BDNF基因修饰的OECs移植组(A组)、OECs移植组(B组)、损伤对照组(C组)和正常对照组(D组)。24h后每组8只动物取伤段标本,测水离子含量。其余动物第6周和12周每组8只动物爬坡试验,评价下肢运动功能及运动诱发电位(MEP)检测。结果:脊髓损伤(SCI)后组织水肿,Na^+、Ca^(2+)离子浓度升高,K^+、Mg^(2+)离子浓度降低。NGF、BDNF基因修饰的OECs脊髓内移植后显著改善这些变化,且使SCI后神经功能有显著恢复。结论:NGF、BDNF基因修饰的OECs脊髓内移植对SCI有保护作用。其机制可能与减少神经细胞离子失衡,改善细胞内环境有关。 展开更多
关键词 基因修饰 嗅神经鞘细胞 移植 脊髓损伤
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烟草黄酮类物质及其与品质的关系 被引量:15
16
作者 李亚培 杨铁钊 +1 位作者 申培林 尚晓颍 《浙江农业科学》 2010年第6期1391-1396,共6页
黄酮类化合物是次生代谢过程中的重要产物之一,不仅对烟草的生长发育起重要的作用,而且黄酮类化合物中的芸香苷也是衡量烟草品质的一个重要因素。黄酮类化合物在次生代谢过程中的合成和积累受到一些关键合成酶和转运蛋白的调控,利用生... 黄酮类化合物是次生代谢过程中的重要产物之一,不仅对烟草的生长发育起重要的作用,而且黄酮类化合物中的芸香苷也是衡量烟草品质的一个重要因素。黄酮类化合物在次生代谢过程中的合成和积累受到一些关键合成酶和转运蛋白的调控,利用生物合成途径和基因工程技术对控制这些酶和蛋白的基因进行克隆和修饰,促进这些基因的表达,可以获得更多的目标产物。主要介绍黄酮类化合物的次生代谢途径,及利用基因工程技术对调控次生代谢途径的一些重要的酶和相关蛋白的基因修饰的研究概况。 展开更多
关键词 烟草品质 类黄酮 次生代谢 生物合成 基因修饰
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移植pSVPoMcat微基因修饰雪旺氏细胞对脊髓损伤后细胞凋亡的影响 被引量:13
17
作者 陈礼刚 高立达 +6 位作者 曾凡俊 胡威夷 毛伯镛 陈俊杰 赖立辉 李开慧 卢敏 《中华创伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期157-159,共3页
目的探讨pSVPoMcat微基因修饰雪旺氏细胞(SC)移植对脊髓损伤(SCI)后细胞凋亡的作用。方法将实验动物分为pSVPoMcat微基因修饰SC组(A组),SC移植组(B组),损伤对照组(C组)。移植后12周,对S... 目的探讨pSVPoMcat微基因修饰雪旺氏细胞(SC)移植对脊髓损伤(SCI)后细胞凋亡的作用。方法将实验动物分为pSVPoMcat微基因修饰SC组(A组),SC移植组(B组),损伤对照组(C组)。移植后12周,对SCI区的脊髓组织切片进行细胞凋亡的检测(甲基绿-派诺宁染色法和荧光原位标记法)以及Bc1~2和Fas蛋白表达的测定(免疫组化法)。结果在A、B、C组中,均发现凋亡细胞及Bc1~2和Fas蛋白阳性表达。体视学计量发现,细胞凋亡率为C>B>A;Bc1~2蛋白阳性表达顺序为A>B>C;Fas蛋白阳性表达顺序为C>B>A。结论pSVPoMcat微基因修饰SC移植能抑制SCI后的细胞凋亡。 展开更多
关键词 细胞凋亡 脊髓损伤 基因修饰 雪旺氏细胞
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CRISPR-Cas介导的基因编辑工具 被引量:14
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作者 左其生 李东 +1 位作者 张亚妮 李碧春 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期37-43,共7页
近年来,随着人们对CRISPR-Cas系统研究的不断深入和改造,CRISPR-Cas系统已成为一项新的基因靶向修饰技术,能够定向对靶基因进行定向沉默,目前该项技术已经成功地用于HEK293、小鼠及斑马鱼的细胞并产生了稳定的基因敲除细胞株,在小鼠、... 近年来,随着人们对CRISPR-Cas系统研究的不断深入和改造,CRISPR-Cas系统已成为一项新的基因靶向修饰技术,能够定向对靶基因进行定向沉默,目前该项技术已经成功地用于HEK293、小鼠及斑马鱼的细胞并产生了稳定的基因敲除细胞株,在小鼠、果蝇等模式动物上成功构建了基因敲除模型。CRISPR-Cas以其设计简单,耗时短、效率高等优点使其成为一项具有广阔应用前景的基因靶向敲除技术。就CRISPR-Cas的发现、结构、作用机理以及Cas9/gRNA目前的一些应用进行综述。 展开更多
关键词 CRISPR-Cas 基因修饰 基因敲除
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基因修饰技术研究进展 被引量:13
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作者 张白雪 孙其信 李海峰 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1162-1174,共13页
基因修饰技术是用于基因组定点改造的分子工具,目前主要有锌指核酸酶(ZFN)技术、转录激活子样效应物核酸酶(TALEN)技术和CRISPR-Cas核酸酶(CRISPR-Cas)技术。这些核酸酶都可以在DNA靶位点产生双链断裂(DSB),诱发细胞内源性的修复机制,... 基因修饰技术是用于基因组定点改造的分子工具,目前主要有锌指核酸酶(ZFN)技术、转录激活子样效应物核酸酶(TALEN)技术和CRISPR-Cas核酸酶(CRISPR-Cas)技术。这些核酸酶都可以在DNA靶位点产生双链断裂(DSB),诱发细胞内源性的修复机制,激活体内非同源末端连接(NHEJ)或同源重组(HR)两种不同的修复机制,从而实现内源基因的敲除或外源基因的定点敲入。近年来,基因修饰技术已成功应用到细菌、酵母、人类细胞、果蝇、斑马鱼、小鼠、大鼠、家畜、食蟹猴、拟南芥、水稻、烟草、玉米、高粱、小麦和大麦等多种生物,显示了其强大的基因编辑优势。特别是新近出现的CRISPR-Cas9技术,降低了成本,使基因编辑变得简洁、高效和易于操作,得到了很多研究人员的关注。本文系统介绍了以上3种技术的原理及最新研究进展,并对未来的研究和应用做出了展望。 展开更多
关键词 基因修饰 锌指核酸酶(ZFN) 转录激活子样效应物核酸酶(TALEN) CRISPR-Cas核酸酶
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人骨形成蛋白4基因修饰的组织工程化骨的实验研究 被引量:6
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作者 蒋欣泉 张志愿 +2 位作者 陈建国 马贵骧 陈传俊 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期390-392,I001,共4页
目的 探讨基因治疗与组织工程方法相结合促进成骨的效果。方法 应用亚克隆法构建真核表达载体 pEGFP hBMP 4。贴壁法培养兔骨髓基质干细胞 (bonemarrowstromalcells,bMSCs) ,体外转染pEGFP hBMP 4 ,pEGFP基因并留置空白对照 ,以天然... 目的 探讨基因治疗与组织工程方法相结合促进成骨的效果。方法 应用亚克隆法构建真核表达载体 pEGFP hBMP 4。贴壁法培养兔骨髓基质干细胞 (bonemarrowstromalcells,bMSCs) ,体外转染pEGFP hBMP 4 ,pEGFP基因并留置空白对照 ,以天然型无机骨为支架材料 ,分别构建组织工程化骨 ,植入裸鼠皮下 (每组 6例 ) ,4周取材 ,进行组织学及新骨成骨面积定量分析。结果成功构建了序列完全正确的 pEGFP hBMP 4表达载体。bMSCs可以在天然型无机骨支架网孔内表面贴壁生长。裸鼠体内实验表明术后 4周转染pEGFP hBMP 4基因组支架材料中已大部由新骨充满 ,新骨面积大于对照组 (P <0 0 5 )。结论 应用hBMP 4基因转染的bMSCs作为种子细胞构建组织工程化骨 。 展开更多
关键词 骨形成蛋白4 基因修饰 组织工程化骨 基因治疗 骨髓基质干细胞 BMSCS
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