期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到5篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
可见光对培养的人视网膜色素上皮细胞内碱性成纤维细胞生长因子、成纤维细胞生长因子受体1、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因及caspase-3的影响 被引量：7
1
作者 周咏东 严密 张军军 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期655-659,共5页
目的　观察可见光诱导的培养人视网膜色素上皮 (RPE)细胞凋亡中 ,RPE细胞内碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)、成纤维细胞生长因子受体 1(FGFR1)、B细胞淋巴瘤 /白血病 2基因(bcl 2 )及caspase 3的表达变化。方法　建立可见光诱导培养的人... 目的　观察可见光诱导的培养人视网膜色素上皮 (RPE)细胞凋亡中 ,RPE细胞内碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)、成纤维细胞生长因子受体 1(FGFR1)、B细胞淋巴瘤 /白血病 2基因(bcl 2 )及caspase 3的表达变化。方法　建立可见光诱导培养的人RPE细胞凋亡的模型 ,通过细胞免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)、酶联免疫测定等方法 ,对培养的人RPE细胞内bFGF和其受体FGFR1的mRNA表达变化、Bcl 2表达改变以及caspase 3的活性变化进行了检测。 结果(1)光照后 6及 12h ,培养的人RPE细胞胞质内Bcl 2蛋白的表达有一定的下降趋势 ,但与无光照组之间差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。光照后 2 4h ,Bcl 2蛋白表达下降明显 (P <0 0 1)。bcl 2mRNA表达与上述蛋白表达变化相似 ,但早在光照 12h后已能检测到其表达下降。 (2 )光照后 6hbFGF及FGFR1的表达尚无明显改变 (P >0 0 5 ) ,随着时间延长 ,其表达增加的差异具有显著意义(P <0 0 5 )。(3)光照后caspase 3活性随时间延长而明显增加 ,与未光照时比较 ,光照结束后 6、12及2 4h活性差异有显著意义 (P <0 0 5 )。 12和 2 4h间差异无显著意义 (P >0 0 5 )。结论　可见光照诱导培养的人RPE细胞凋亡时 ,RPE细胞内bcl 2表达下降 ,内源性bFGF及FGFR1上调 ,caspase 3? 展开更多
关键词 可见光 培养人视网膜色素上皮 细胞凋亡 bFGF FGFR1 B细胞淋巴瘤 白血病-2基因 CASPASE-3
原文传递
P21-GFP融合基因表达载体的构建与在视网膜色素上皮细胞的表达定位 被引量：3
2
作者 韩勇娟 曾水清 +1 位作者 胡义珍 张海江 《临床眼科杂志》 2005年第3期277-279,290,共4页
目的构建绿色荧光蛋白GFP-p21融合基因表达载体,并观察其在人视网膜色素上皮细胞中的表达及定位,为研究细胞周期蛋白激酶抑制因子p21对视网膜色素上皮细胞细胞周期的影响提供实验基础。方法以含有p21的全长序列的质粒为模板PCR扩增p21cD... 目的构建绿色荧光蛋白GFP-p21融合基因表达载体,并观察其在人视网膜色素上皮细胞中的表达及定位,为研究细胞周期蛋白激酶抑制因子p21对视网膜色素上皮细胞细胞周期的影响提供实验基础。方法以含有p21的全长序列的质粒为模板PCR扩增p21cDNA,应用基因重组技术与GFP基因融合,构建以绿色荧光蛋白GFP为报告基因的重组表达质粒pGFP-p21。利用脂质体转染体外培养的人视网膜色素上皮细胞,在活细胞状态下用荧光显微镜直接观察pGFP-p21融合蛋白在细胞中的分布和定位,用WesternBlot方法分析其蛋白的表达。结果1酶切、DNA测序均证实插入片断的正确性。2荧光显微镜观察结果显示在空载体pEGFP-C1转染组中,细胞内绿色荧光呈弥散分布;重组质粒pGFP-p21转染组中,绿色荧光主要集中在细胞核内。3WesternBlot证实了pGFP-P21融合基因的表达。结论成功的构建了pGFP-p21质粒。视网膜色素上皮细胞能高效表达pGFP-p21融合基因,且主要定位于细胞核内,与p21基因的表达方式相同。 展开更多
关键词 基因表达载体 培养的人视网膜色素上皮细胞 表达定位 细胞周期蛋白激酶抑制因子 Western 绿色荧光蛋白 荧光显微镜 基因重组技术 重组表达质粒 Blot 细胞核内 融合基因 PCR扩增 脂质体转染 DNA测序 PEGFP P21基因 全长序列
下载PDF
维拉帕米对培养的人视网膜色素上皮细胞增殖和DNA合成的影响 被引量：3
3
作者 余建洪 赵刚平 邢怡桥 《国际眼科杂志》 CAS 2005年第2期232-234,共3页
目的:观察钙通道阻滞剂维拉帕米(verapamil)对培养的人视网膜色素上皮细胞(human retinalpig-ment epithelium,hRPE)增殖和DNA合成的影响。方法:含不同浓度维拉帕米的条件培养液作用于培养的hRPE细胞后,利用细胞计数和MTT比色试验观察... 目的:观察钙通道阻滞剂维拉帕米(verapamil)对培养的人视网膜色素上皮细胞(human retinalpig-ment epithelium,hRPE)增殖和DNA合成的影响。方法:含不同浓度维拉帕米的条件培养液作用于培养的hRPE细胞后,利用细胞计数和MTT比色试验观察维拉帕米对培养的hRPE细胞的作用,同时采用氚标胸腺嘧啶核苷(3H-thymidine,3H-TdR)掺入试验测定维拉帕米对培养的hRPE细胞DNA合成的影响。结果:维拉帕米在实验所设的浓度范围均能抑制培养的hRPE细胞的增殖和DNA合成,在浓度为10,50,100,200μm ol/L时其细胞增殖抑制率分别为:26.72%,37.25%,58.21%,79.54%(P<0.01);cpm值分别为对照组的0.81,0.61,0.52,0.44倍(P<0.01)。结论:维拉帕米对培养的hRPE细胞增殖和DNA合成具有抑制作用。 展开更多
关键词 维拉帕米 上皮细胞增殖 培养的人视网膜色素上皮细胞 hRPE细胞 细胞DNA合成 钙通道阻滞剂 胸腺嘧啶核苷 条件培养液 MTT比色 增殖抑制率 mol/L 不同浓度 试验观察 细胞计数 浓度范围 抑制作用 对照组
下载PDF
机械牵拉对培养人视网膜色素上皮细胞MCP-1和IL-8表达的影响 被引量：3
4
作者 张晓光 惠延年 +3 位作者 韩泉洪 侯旭 陈立军 马吉献 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第32期2264-2268,共5页
目的模拟和了解培养的人视网膜色素上皮细胞(hRPE)单核细胞趋化蛋白1(MCP1)和白介素8(IL8)的表达,可能在原发性视网膜脱离形成早期的作用。方法将胶原包被的磁珠悬液加入培养的hRPE细胞,孵育并洗去未结合的磁珠。用逆转录聚合酶链反应... 目的模拟和了解培养的人视网膜色素上皮细胞(hRPE)单核细胞趋化蛋白1(MCP1)和白介素8(IL8)的表达,可能在原发性视网膜脱离形成早期的作用。方法将胶原包被的磁珠悬液加入培养的hRPE细胞,孵育并洗去未结合的磁珠。用逆转录聚合酶链反应和酶联免疫反应分别测定hRPE细胞在磁场垂直方向力作用下,以及在细胞松弛素D处理后,各时间点的MCP1和IL8的mRNA和培养液上清中的蛋白水平。结果不受磁场作用的hRPE表达极低的MCP1及IL8。在牵拉力作用下,MCP1及IL8的表达有2个峰值。其mRNA的第1个峰值出现在0.5h内,分别达到3.30ng/L±0.12ng/L和1.88ng/L±0.08ng/L。蛋白水平的第1个峰值出现在1h内,分别为552.05ng/L±7.64ng/L和236.67ng/L±14.30ng/L。第2个峰值出现在4h左右。细胞松弛素D预处理后两种因子的表达和分泌量均明显降低,分别为2.36ng/L±0.27ng/L和1.64ng/L±0.08ng/L,以及353.80ng/L±16.68ng/L和101.86ng/L±15.92ng/L。结论机械牵拉力可诱导hRPE细胞表达MCP1和IL8,这种作用在细胞松弛素D预处理后出现部分抑制,提示其影响有细胞骨架的参与,这两种炎性因子在视网膜脱离发生的起始阶段起到一定作用。 展开更多
关键词 视网膜脱离 色素上皮 眼 视网膜疾病 单核细胞化学吸引蛋白质-1 白细胞介素-8 培养的人视网膜色素上皮细胞 MCP-1 IL-8 机械牵拉
原文传递
YVAD-cmK及DEVD-CHO对培养的人视网膜色素上皮细胞光损伤的影响
5
作者 周咏东 严密 张军军 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期344-346,共3页
目的 观察半胱天冬酶(caspase-3)选择性抑制剂天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酰胺醛(Asp-Glu-Val-Asp-CHO,DEVD-CHO),及caspase-1选择性抑制剂酪氨酸-缬氨酸-丙氨酸-天冬氨酰胺(Tyr-Val-Ala-Asp-cmK,YVAD-cmK)对可见光诱导的培养的人视... 目的 观察半胱天冬酶(caspase-3)选择性抑制剂天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酰胺醛(Asp-Glu-Val-Asp-CHO,DEVD-CHO),及caspase-1选择性抑制剂酪氨酸-缬氨酸-丙氨酸-天冬氨酰胺(Tyr-Val-Ala-Asp-cmK,YVAD-cmK)对可见光诱导的培养的人视网膜色素上皮(RPE)细胞凋亡的影响。方法 用(2000±500)lx的白色荧光灯光源,照射培养的人RPE细胞。在培养液中加入YVAD-cmK和DEVD-CHO,利用荧光素标记的连接素V/碘化丙锭双染色流式细胞测定观察RPE细胞的凋亡情况。结果 本研究模型下,DEVD-CHO预处理组的细胞凋亡及坏死与无光照组相比,差异无显著性(P>0.05),与光照组及YVAD-cmK预处理组相比,细胞存活数增高,差异有显著性(P<0.05)。而YVAD-cmK组与无光照组比较,其结果与单纯光照组一样,表现出细胞的明显损伤(P<0.05)。结论 可见光诱导培养的人RPE细胞凋亡的发生机制中,可能不涉及casrpase-1的作用。外源性的caspase-3抑制剂(DEVD-CHO)对RPE细胞光性损伤有一定的保护作用。 展开更多
关键词 YVAD-cmK DEVD-CHO 培养的人视网膜色素上皮细胞 光损伤 半胱天冬酶
下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部