腺苷酸激活蛋白激酶在大鼠酒精性肝病中的表达减少 被引量：4

1

作者 周东方 魏峰 周俊英 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2012年第10期1154-1160,共7页

目的观察酒精对大鼠肝脏腺苷酸激活化蛋白激酶(AMPK)表达水平的影响及意义。方法雄性Wistar大鼠50只,随机分为模型组和对照组,模型组采用乙醇灌胃法,分别于4、8、12和16周末随机分批处死,检测其血清ALT、AST、CHE、TG、TC、LDL、VLD和H... 目的观察酒精对大鼠肝脏腺苷酸激活化蛋白激酶(AMPK)表达水平的影响及意义。方法雄性Wistar大鼠50只,随机分为模型组和对照组,模型组采用乙醇灌胃法,分别于4、8、12和16周末随机分批处死,检测其血清ALT、AST、CHE、TG、TC、LDL、VLD和HDL;应用HE、天狼红及苏丹Ⅳ染色观察肝组织病理变化;应用免疫组织化学染色、RT-PCR法检测AMPK、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和固醇调节原件结合蛋白(SREBP)及其mRNA的表达。结果随着造模时间延长,大鼠血清ALT、AST、TG、TC和LDL水平逐渐升高,CHE和HDL水平逐渐降低;模型16周组肝组织中AMPK的表达为0.50±0.094,显著低于对照组的0.84±0.041,而ACC及SREBP表达逐渐多于对照组(P<0.05);肝组织AMPK与ACC及SREBP的表达呈负相关(P<0.01)。结论酒精性肝病中AMPK表达减少,导致脂质合成增多,脂肪堆积于肝脏中,可能是造成肝脏损伤的重要因素。 展开更多

关键词 腺苷酸激活蛋白激酶 酒精性肝病 固醇调节原件结合蛋白 乙酰辅酶A羧化酶 脂质代谢

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Scap-Insig-2-25HC复合物与细胞内胆固醇水平的调控 被引量：1

2

作者 唐尚书 张敏 唐朝克 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2021年第3期344-346,共3页

固醇调节原件结合蛋白(sterol regulatory element-binding protein,SREBP)是调节细胞内固醇类物质水平的重要细胞核转录因子,通过负反馈机制维持细胞内固醇稳态.SREBP裂解激活蛋白(SREBP-cleavage activating protein,Scap)和胰岛素诱... 固醇调节原件结合蛋白(sterol regulatory element-binding protein,SREBP)是调节细胞内固醇类物质水平的重要细胞核转录因子,通过负反馈机制维持细胞内固醇稳态.SREBP裂解激活蛋白(SREBP-cleavage activating protein,Scap)和胰岛素诱导基因2(insulin-induced gene-2,Insig-2)、25-羟基胆固醇(25-hydroxycholesterol,25HC)对SREBP激活、成熟及核转位具有重要调节作用.最近研究揭示了Scap-Insig-2-25HC复合物的分子结构,这对细胞内胆固醇代谢研究具有重要的意义. 展开更多

关键词 固醇调节原件结合蛋白 SREBP裂解激活蛋白 胰岛素诱导基因2

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胰岛素对骨骼肌细胞固醇调节原件结合蛋白1c的调节作用

3

作者 曹姝 毕艳 +3 位作者 汤孙寅焱 吴文君 尹雯雯 朱大龙 《江苏医药》 CAS 2015年第8期869-873,共5页

目的研究胰岛素对骨骼肌细胞固醇调节原件结合蛋白1c(SREBP-1c)的调节作用。方法将诱导分化完成的大鼠骨骼肌L6肌管细胞分为对照组、胰岛素组、磷酸酰基醇3激酶抑制剂wortmannin+胰岛素组、单磷酸腺苷依赖的蛋白激酶(AMPK)抑制剂compoun... 目的研究胰岛素对骨骼肌细胞固醇调节原件结合蛋白1c(SREBP-1c)的调节作用。方法将诱导分化完成的大鼠骨骼肌L6肌管细胞分为对照组、胰岛素组、磷酸酰基醇3激酶抑制剂wortmannin+胰岛素组、单磷酸腺苷依赖的蛋白激酶(AMPK)抑制剂compound C+胰岛素组、高脂对照组、高脂+胰岛素组、高脂+wortmannin+胰岛素组和高脂+compound C+胰岛素组。Western blot检测SREBP-1c、苏氨酸蛋白激酶(Akt)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、AMPK-mTOR通路相关蛋白的表达。结果与对照组相比,胰岛素组SREBP-1c、p-Akt、p-AMPK、p-mTOR蛋白表达升高(P<0.05);与胰岛素组相比,wortmannin+胰岛素组SREBP-1c表达降低(P<0.05);与高脂对照组相比,高脂+胰岛素组SREBP-1c、p-mTOR蛋白表达降低,p-Akt、p-AMPK蛋白表达升高(P<0.05);与高脂+胰岛素组相比,高脂+compound C+胰岛素组SREBP-1c表达升高(P<0.05)。结论骨骼肌细胞生理状态下,胰岛素对SREBP-1c的上调作用可能主要通过Akt-mTOR通路;胰岛素抵抗状态下,胰岛素治疗对SREBP-1c的下调作用可能主要通过AMPK-mTOR通路。 展开更多

关键词 胰岛素抵抗 固醇调节原件结合蛋白1c 单磷酸腺苷依赖的蛋白激酶 骨骼肌细胞

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靶向FoxO1通过调节脂质代谢影响非酒精性脂肪性肝病的初步机制研究 被引量：1

4

作者 全颖 首第文 +4 位作者 程洁敏 黄琛 李永强 陈慧婷 周永健 《现代消化及介入诊疗》 2022年第11期1376-1380,1387,共6页

目的探讨FoxO1在高脂高胆固醇(high-fat high-cholesterol,HFHC)诱导的非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)小鼠模型中肝脏脂质代谢作用和潜在机制。方法选择8周龄雄性C57BL/6J小鼠18只,分为3组:LFD组小鼠喂... 目的探讨FoxO1在高脂高胆固醇(high-fat high-cholesterol,HFHC)诱导的非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)小鼠模型中肝脏脂质代谢作用和潜在机制。方法选择8周龄雄性C57BL/6J小鼠18只,分为3组:LFD组小鼠喂养低脂对照饲料;HFHC组小鼠喂养高脂高胆固醇(HFHC)饲料16周;HFHC+AS2856组小鼠在喂养HFHC饲料8周后再给予60 mg/kg/d FoxO1抑制剂AS1842856(简称AS2856)治疗8周。Western blot检测各组小鼠肝脏中FoxO1的磷酸化水平,观察小鼠体质量、肝脏组织形态学改变情况及非酒精性脂肪性肝病活动度评分(non-alcoholic fatty liver disease activity score,NAS),检测血清中谷丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、甘油三酯(triglyceride,TG)和空腹血糖(fasting plasma glucose,FBG),通过qPCR检测脂质代谢相关基因SREBP1c、FAS、ACC1 mRNA水平。结果FoxO1在HFHC小鼠肝脏中活性增加。与HFHC组相比,HFHC+AS2856组小鼠体重、肝重均明显下降,肝脏脂肪变性减轻以及血清TG水平明显下降(P<0.05),且TG合成相关的基因mRNA水平也显著降低了,包括SREBP1c,FAS和ACC1(P<0.05)。结论FoxO1抑制剂AS2856可下调NAFLD小鼠SREBP1c及其下游基因FAS和ACC1的表达,改善TG的累积,从而减缓肝脏脂肪变性。 展开更多

关键词 非酒精性脂肪性肝病 FOXO1 甘油三酯 胆固醇调节原件结合蛋白1c 脂质代谢

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核因子κB和胆固醇调节原件结合蛋白2在原发性肝癌组织中的表达及与患者临床特征和预后的关系 被引量：1

5

作者 张蓓 答秀维 +1 位作者 张乐 兰飞 《癌症进展》 2020年第23期2408-2412,共5页

目的探讨核因子κB(NF-κB)和胆固醇调节原件结合蛋白2(SREBP2)在原发性肝癌组织中的表达及与患者临床特征和预后的关系。方法收集原发性肝癌组织74例和癌旁正常组织46例。采用免疫组织化学染色法检测两种组织中NF-κB和SREBP2的表达情... 目的探讨核因子κB(NF-κB)和胆固醇调节原件结合蛋白2(SREBP2)在原发性肝癌组织中的表达及与患者临床特征和预后的关系。方法收集原发性肝癌组织74例和癌旁正常组织46例。采用免疫组织化学染色法检测两种组织中NF-κB和SREBP2的表达情况,分析NF-κB和SREBP2表达与患者临床特征和预后的关系,采用Cox回归模型分析原发性肝癌患者预后的影响因素。结果原发性肝癌组织中NF-κB、SREBP2的阳性表达率均高于癌旁正常组织,差异均有统计学意义(P <0.05)。低分化、TNM分期为Ⅲ期、有脉管侵犯、有淋巴结转移、病理类型为肝细胞癌的原发性肝癌患者原发性肝癌组织中NF-κB和SREBP2的阳性表达率分别高于中/高分化、TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期、无脉管侵犯、无淋巴结转移、其他病理类型的患者,差异均有统计学意义(P <0.05)。NF-κB、SREBP2阴性表达患者的生存情况分别优于NF-κB、SREBP2阳性表达的患者,差异均有统计学意义(P <0.05)。Cox多因素回归分析结果显示,NF-κB阳性、SREBP2阳性、低分化、TNM分期为Ⅲ期、有脉管侵犯、有淋巴结转移、病理类型为肝细胞癌均是原发性肝癌患者预后的独立危险因素(P <0.05)。NF-κB阴性原发性肝癌患者原发性肝癌组织中SREBP2的阳性表达率为33.33%(7/21),明显低于NF-κB阳性患者的83.02%(44/53),差异有统计学意义(P <0.01)。结论 NF-κB和SREBP2在原发性肝癌组织中的阳性表达率较高,NF-vB和SREBP2阳性表达患者多合并脉管侵犯、低分化、高TNM分期及淋巴结转移等特征,NF-κB和SREBP2阳性表达的原发性肝癌患者的预后较差。 展开更多

关键词 原发性肝癌 核因子ΚB 胆固醇调节原件结合蛋白2 临床特征

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姬松茸多糖提取物对高脂血症大鼠降血脂作用研究 被引量：13

6

作者 李晓 卢学春 +3 位作者 李雨鑫 刘馨竹 杜培革 安丽萍 《食品科学技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期56-64,共9页

为探讨姬松茸多糖对高脂血症大鼠降血脂作用及机制,采用水提醇沉法提取姬松茸粗多糖,并用DEAE-纤维素离子交换柱对多糖进行层析分级,采用高效液相色谱法分析单糖组成,并测定多糖含量;高脂饮食诱导建立高脂血症大鼠模型,将大鼠随机分成4... 为探讨姬松茸多糖对高脂血症大鼠降血脂作用及机制,采用水提醇沉法提取姬松茸粗多糖,并用DEAE-纤维素离子交换柱对多糖进行层析分级,采用高效液相色谱法分析单糖组成,并测定多糖含量;高脂饮食诱导建立高脂血症大鼠模型,将大鼠随机分成4组(空白对照组、模型组、辛伐他汀阳性对照组、姬松茸多糖组),同时对大鼠口服灌胃给药,连续42 d;测定大鼠相对肝脏指数,ELISA法检测大鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量;HE染色法观察肝脏组织病理变化,RT-PCR法检测大鼠肝脏组织中低密度脂蛋白(LDL-R)、固醇调节原件结合蛋白-1C(SREBP-1C)、胆固醇7a-羟化酶(CYP7a-1)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)、B类清道夫F(SCARB-1F)的mRNA表达水平。研究结果显示:姬松茸多糖中糖的质量分数为75.1%,DEAE-纤维素离子交换柱层析分级得到姬松茸酸性多糖级分(ABP-A),ABP-A中含有质量分数为88.6%的葡萄糖、2.4%的半乳糖、1.9%的甘露糖、1.0%的鼠李糖、0.5%的半乳糖醛酶、1.9%的木糖、2.1%的阿拉伯糖、1.6%的岩藻糖;ABP-A干预后大鼠肝脏指数显著降低(P<0.05);血清TC、TG、LDL-C含量极显著降低(P<0.01),HDL-C含量极显著升高(P<0.01);肝脏内脂滴沉积减少,肝脏中LDL-R、SCARB-1F mRNA相对表达量显著升高(P<0.05),CYP7a-1、PPAR-αmRNA相对表达量极显著升高(P<0.01),SREBP-1C mRNA相对表达量极显著降低(P<0.01)。ABP-A具有显著的降血脂作用,ABP-A的降血脂机制可能与其调控肝脏脂质代谢关键因子LDL-R、SREBP-1C、CYP7a-1、PPAR-α、SCARB-1F的表达有关。 展开更多

关键词 姬松茸多糖 高脂血症 降血脂 固醇调节原件结合蛋白-1c 过氧化物酶体增殖物激活受体Α

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富硒灵芝多糖改善高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝大鼠症状 被引量：10

7

作者 贾亚敏 武俊紫 +2 位作者 胡跃高 李树德 沈平瑞 《基础医学与临床》 CSCD 2016年第9期1193-1198,共6页

目的探讨富硒灵芝多糖对非酒精性脂肪肝病大鼠SREBP-1c及ACCα表达的影响。方法 120只SD大鼠随机分为正常组、高脂饮食组、多烯磷脂酰胆碱组、富硒灵芝多糖低、中和高剂量干预组等6组,每组20只,分别于治疗4和8周后处死大鼠各半,测血清... 目的探讨富硒灵芝多糖对非酒精性脂肪肝病大鼠SREBP-1c及ACCα表达的影响。方法 120只SD大鼠随机分为正常组、高脂饮食组、多烯磷脂酰胆碱组、富硒灵芝多糖低、中和高剂量干预组等6组,每组20只,分别于治疗4和8周后处死大鼠各半,测血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆固醇(CHOL)和三酰甘油(TG);用Western blot和RT-PCR检测肝脏组织中SREBP-1c及ACCα蛋白和mRNA表达;其余肝脏行病理学检测。结果富硒灵芝多糖可显著减少肝脏组织中的脂肪颗粒,并降低血清中AST、ALT、CHOL和TG含量,中、高剂量的灵芝多糖处理可显著降低肝脏中SREBP-1c、ACCαmRNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论富硒灵芝多糖可缓解高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝大鼠症状。 展开更多

关键词 富硒灵芝多糖 非酒精性脂肪肝 固醇调节原件结合蛋白-1c 乙酰辅酶A羧化酶α

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老年原发性肝癌患者癌组织中FoxO1、SREBP2及中心体蛋白55表达特点及意义 被引量：2

8

作者 王建峰 王军 +2 位作者 高姗 杨春艳 杜佳 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第10期2357-2360,共4页

目的探讨老年原发性肝癌患者癌组织中叉头转录因子O家族(FoxO)1、胆固醇调节原件结合蛋白(SREBP)2及中心体蛋白55表达特点及意义。方法选取老年原发性肝癌患者75例,收集患者性别、年龄、肝硬化情况、肿瘤直径、分化程度、肿瘤数量、病... 目的探讨老年原发性肝癌患者癌组织中叉头转录因子O家族(FoxO)1、胆固醇调节原件结合蛋白(SREBP)2及中心体蛋白55表达特点及意义。方法选取老年原发性肝癌患者75例,收集患者性别、年龄、肝硬化情况、肿瘤直径、分化程度、肿瘤数量、病理类型、TNM分期情况、门静脉侵袭情况;术中采集肝癌组织标本和距离肝癌病灶边缘约5 cm的癌旁正常组织标本,免疫组化法检测FoxO1、SREBP2及中心体蛋白55表达。出院后进行3年随访,记录患者生存情况。结果肝癌组织中FoxO1蛋白阳性率明显低于癌旁组织,SREBP2蛋白、中心体蛋白55阳性率明显高于癌旁组织(P<0.01)。FoxO1蛋白、SREBP2蛋白、中心体蛋白55阳性率在不同肿瘤直径、分化程度、肿瘤数量、病理类型、TNM分期、门静脉侵袭的老年原发性肝癌患者间比较差异有统计学意义(P<0.01)。FoxO1阴性者3年生存率明显高于FoxO1阳性者(P<0.01);SREBP2、中心体蛋白55阳性者3年生存率明显高于SREBP2、中心体蛋白55阴性者(P<0.01)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,FoxO1、SREBP2、中心体蛋白55单独和联合检测对老年原发性肝癌患者3年生存情况具有较高的预测价值(P<0.05);其中联合检测的预测价值最高,灵敏度、阳性预测值明显高于各指标单独检测。结论老年原发性肝癌患者癌组织中FoxO1低表达,SREBP2及中心体蛋白55高表达,与临床病理特征及预后相关,联合检测可用于预后评估。 展开更多

关键词 原发性肝癌 叉头转录因子O家族1 胆固醇调节原件结合蛋白2 中心体蛋白55

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Roux-en-Y胃旁路术对肥胖大鼠脂肪肝的影响及机制研究 被引量：3

9

作者 高源 吕一峰 +1 位作者 马大喜 李志红 《同济大学学报（医学版）》 CAS 2017年第3期25-29,共5页

目的探讨Roux-en-Y胃旁路术(Roux-en-Y gastric bypass surgery,RYGB)对肥胖大鼠脂肪肝的影响及可能的机制。方法将30只8周龄雄性Wistar大鼠随机分为正常饮食组(ND组)、高脂饮食组(HFD组)及高脂饮食且接受RYGB组(HFD+RYGB组),每组10只,... 目的探讨Roux-en-Y胃旁路术(Roux-en-Y gastric bypass surgery,RYGB)对肥胖大鼠脂肪肝的影响及可能的机制。方法将30只8周龄雄性Wistar大鼠随机分为正常饮食组(ND组)、高脂饮食组(HFD组)及高脂饮食且接受RYGB组(HFD+RYGB组),每组10只,分别给予正常饮食、高脂饮食。饲养16周后,对HFD+RYGB组大鼠行RYGB,对ND组及HFD组行假手术。术后,ND组大鼠继续给予正常饮食,HFD组与HFD+RY G B组大鼠接受高脂饮食。术后第4周,处死大鼠,收集血样,采用EL IS A法测定大鼠血清TG、TC、游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)浓度。观察大鼠肝脏外形,取肝脏组织,行H-E染色及油红O染色,显微镜下观察肝脏组织的病理学变化。采用real-time PCR检测肝组织糖类应答元件结合蛋白(ChREBP)、固醇调节原件结合蛋白-1c(SREBP-1c)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)mRNA表达水平。结果HFD组大鼠体质量、肝脏湿重及内脏脂肪总量高于N D组(P<0.05),HFD+RY G B组大鼠体质量、肝脏湿重及内脏脂肪总量低于HFD组(P<0.05);HFD大鼠血清TG、TC、FFA水平高于ND组(P<0.05),HFD+RY G B组大鼠血清T G、T C、FFA水平低于HFD组(P<0.05);HFD组肝脏T G、T C含量高于N D组(P<0.05),HFD+RY G B组大鼠肝脏T G、T C低于HD F组(P<0.05);H-E及油红O染色结果显示,HFD+RY G B组干细胞脂质沉积、脂滴空泡减少;术后第4周,HFD+RY G B组大鼠肝脏中的C hREB P和S REB P-1 c的mRNA的表达量较HFD组均显著降低(P<0.05)。结论 RYGB能显著缓解肝脏脂肪沉积及血脂,其机制可能与抑制脂肪酸合成途径的关键分子ChREBP和SREBP-1c有关。 展开更多

关键词 ROUX-EN-Y胃旁路术 非酒精性脂肪肝 糖类应答元件结合蛋白 固醇调节原件结合蛋白-1c 大鼠

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水飞蓟宾对高脂饮食小鼠胰岛β细胞的保护作用 被引量：3

10

作者 陈科 徐君 +3 位作者 何红晖 赵立玲 熊静 莫朝晖 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期165-170,共6页

目的:研究水飞蓟宾对高脂饮食喂养的C57BL/6J小鼠胰岛β细胞的保护作用及其可能的机制。方法:18只3周龄雄性C57BL/6J小鼠分为普通饮食组(n=6)、高脂饮食组(n=6)及水飞蓟宾干预高脂饮食组(n=6),干预10周后观察各组小鼠空腹血糖、胰岛素... 目的:研究水飞蓟宾对高脂饮食喂养的C57BL/6J小鼠胰岛β细胞的保护作用及其可能的机制。方法:18只3周龄雄性C57BL/6J小鼠分为普通饮食组(n=6)、高脂饮食组(n=6)及水飞蓟宾干预高脂饮食组(n=6),干预10周后观察各组小鼠空腹血糖、胰岛素、血脂、谷丙转氨酶、肌酐、尿素氮变化及胰岛β细胞的脂质含量、抗氧化水平及凋亡情况,并检测胰腺组织胰岛素诱导基因-1(insulin-induced gene-1,Insig-1)、固醇调节原件结合蛋白-1c(sterol regulatory element binding protein-1c,SREBP-1c)和脂肪酸合成酶(fatty acid synthetase,FAS)的m RNA,以及Insig-1和SREBP-1c蛋白的表达水平。结果:与高脂饮食组相比,水飞蓟宾干预高脂饮食组小鼠胰岛分泌功能明显改善,血糖水平降低(P<0.05),胰岛组织脂质含量、氧化应激水平及凋亡水平均降低(均P<0.05);水飞蓟宾能促进胰岛组织Insig-1的表达,抑制SREBP-1c和FAS的表达(均P<0.05)。三组间谷丙转氨酶、肌酐、尿素氮功能差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:水飞蓟宾对高脂饮食小鼠的胰岛β细胞具有保护作用,其机制可能与调节Insig-1/SREBP-1c途径及增加抗氧化活性有关,且长期口服水飞蓟宾安全性良好。 展开更多

关键词 水飞蓟宾 胰岛Β细胞 胰岛素诱导基因-1 固醇调节原件结合蛋白-1c 糖脂毒性

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胆固醇敏感器SCAP功能失调通过上调P2X7受体表达促进THP-1源性巨噬细胞炎症小体活化 被引量：3

11

作者 伍莎莎 欧阳南 +1 位作者 何泉 周超 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第13期1327-1332,共6页

目的探讨胆固醇调节原件结合蛋白裂解激活蛋白(sterol regulatory element binding proteins cleavage-activating protein,SCAP)功能失调促进THP-1源性巨噬细胞炎症小体活化及IL-1β成熟的分子机制。方法采用基因转染方法在THP-1源性... 目的探讨胆固醇调节原件结合蛋白裂解激活蛋白(sterol regulatory element binding proteins cleavage-activating protein,SCAP)功能失调促进THP-1源性巨噬细胞炎症小体活化及IL-1β成熟的分子机制。方法采用基因转染方法在THP-1源性巨噬细胞中过表达SCAP,结合使用P2X7受体(P2X7 receptor,P2X7R)激动剂ATP(5 mmol/L)或抑制剂A438079(100μmol/L)处理THP-1源性巨噬细胞,将细胞分为:(1)对照组、(2)ATP处理组、(3)A438079处理组、(4)ATP+A438079组、(5)过表达SCAP组、(6)过表达SCAP+ATP组、(7)过表达SCAP+A438079组、(8)过表达SCAP+ATP+A438079组。RTPCR检测过表达SCAP以及激动或抑制P2X7R对P2X7R、pro-IL-1β、NLRP3、pro-caspase-1基因表达水平的影响。流式细胞术检测细胞表面P2X7R的表达。Western blot检测SCAP、pro-IL-1β、NLRP3、caspase-1(p20)以及培养上清中IL-1β的蛋白水平。同一实验在细胞水平重复4次。结果 (1)过表达SCAP组与对照组比较,其pro-IL-1β、P2X7R基因表达水平显著升高(P<0.01),细胞表面P2X7R表达明显上调。(2)P2X7R激动剂ATP与抑制剂A438079对THP-1源性巨噬细胞SCAP及P2X7R m RNA表达无影响(P>0.05)。P2X7R激动剂ATP能够显著促进THP-1源性巨噬细胞pro-IL-1βm RNA表达(P<0.05),在过表达SCAP基础上激动P2X7R能够进一步激活pro-IL-1β基因转录(P<0.01),同时显著促进细胞内pro-IL-1β剪切成熟并向细胞外分泌(P<0.01),抑制P2X7R活性并不影响过表达SCAP致pro-IL-1β表达上调的作用,但将减少上清中成熟IL-1β的含量。过表达SCAP并不影响NLRP3及caspase-1表达(P>0.05),但在过表达SCAP基础上充分激动P2X7R将显著上调NLRP3及caspase-1基因及蛋白水平(P<0.01),上述变化能够被P2X7R抑制剂A438079抵消。结论胆固醇敏感器SCAP功能失调能够促进THP-1源性巨噬细胞内pro-IL-1β表达,同时通过上调细胞表面P2X7R表达激活NLRP3炎症小体,促进pro-IL-1β成熟及其向细胞外分泌。 展开更多

关键词 胆固醇调节原件结合蛋白裂解激活蛋白 IL-1Β 炎症 P2X7R NLRP3炎症小体

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