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固氮斯氏假单胞菌四碳二羧酸转移酶DctPQM的跨膜结构分析与功能研究 被引量：1
1
作者 闫春玲 林敏 +5 位作者 宛煜嵩 侯胜强 平淑珍 陈明 张保明 C.Elmerich 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1186-1190,共5页
固氮斯氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)A1501四碳二羧酸转移酶系由dctPQM基因编码。基因序列和结构分析表明,dctP,dctQ和dctM紧密连锁,并在核苷酸和氨基酸水平上与自生固氮菌棕色固氮菌的四碳二羧酸结合蛋白基因dctP和转运蛋白基因dc... 固氮斯氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)A1501四碳二羧酸转移酶系由dctPQM基因编码。基因序列和结构分析表明,dctP,dctQ和dctM紧密连锁,并在核苷酸和氨基酸水平上与自生固氮菌棕色固氮菌的四碳二羧酸结合蛋白基因dctP和转运蛋白基因dctQM高度同源。经分析表明,DctP不含跨膜区,DctQ包含5个跨膜区,DctM包含12个跨膜区。为验证四碳二羧酸转运系统对固氮能力的增强作用,将含有完整dctPQM基因的DNA片段连接在自杀性转移质粒载体pSZ21的Tn5转座区域中,获得重组质粒pSZY6.采用三亲接合方法,经Tn5转座作用将dctPQM基因随机插入到野生型菌株A1501的染色体上,构建了重组菌株 A-142.经nptⅡ基因的PCR扩增实验证明,该重组菌株确实携带了额外拷贝的dct结构基因。该重组菌株以不同浓度的琥珀酸、延胡索酸和苹果酸(20,10和 5 mmol/L)为惟一碳源生长时,其固氮活性均明显高于野生型菌株A1501,表明额外拷贝的四碳二羧酸转移酶系编码基因dctPQM能增强受体菌的固氮能力。 展开更多
关键词 固氮斯氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri) 四碳二羧酸 dct基因 固氮活性
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四碳二羧酸与根瘤菌共生固氮
2
作者 李友国 周俊初 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期110-115,共6页
根瘤菌 豆科植物共生体系进行的共生固氮是一个需要消耗大量能量的生物学过程 ,植物提供类菌体将空气中的分子态氮转变为氨必需的光合产物。大量的研究结果证明 :苹果酸、琥珀酸和延胡索酸等四碳二羧酸 (dCAs)是植物直接供给类菌体以... 根瘤菌 豆科植物共生体系进行的共生固氮是一个需要消耗大量能量的生物学过程 ,植物提供类菌体将空气中的分子态氮转变为氨必需的光合产物。大量的研究结果证明 :苹果酸、琥珀酸和延胡索酸等四碳二羧酸 (dCAs)是植物直接供给类菌体以支持共生固氮所需要的碳源及能源 (FinanTM ,etal ,1 983 ;RosonCW ,etal ,1 984;VanceCP ,etal ,1 997)。它们必须通过细胞膜和类菌体周膜 (PBM)两道屏障才能进入类菌体细胞。研究者还发现了一个运输四碳二羧酸的共同系统 Dct转运系统 (StreeterJG ,1 995)。就四碳二羧酸等有机酸的产生、转移、dct基因的结构、功能与表达调控。 展开更多
关键词 四碳二羧酸 根瘤菌-豆科植物共生体系 共生固氮
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固氮施氏假单胞菌A1501四碳二羧酸结合蛋白DctP的功能及表达特性
3
作者 戴淑玲 李红权 +5 位作者 尚立国 杨智敏 闫宁 陆伟 燕永亮 战嵛华 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期825-834,共10页
【目的】研究施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)A1501四碳二羧酸结合蛋白Dct P的生物学功能和自身表达特性。【方法】构建结合蛋白编码基因dct P的非极性突变株,测定dct P突变株以不同四碳二羧酸(琥珀酸延、胡索酸、苹果酸)为唯一碳... 【目的】研究施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)A1501四碳二羧酸结合蛋白Dct P的生物学功能和自身表达特性。【方法】构建结合蛋白编码基因dct P的非极性突变株,测定dct P突变株以不同四碳二羧酸(琥珀酸延、胡索酸、苹果酸)为唯一碳源时的生长情况和固氮酶活性;构建dct P基因启动子的融合表达载体dct P-lac Z,将其分别转入野生型A1501和ntr BC、rpo N和dct B突变株中,测定在不同四碳二羧酸为唯一碳源诱导条件下重组菌株中的β-半乳糖苷酶活性。【结果】dct P基因的突变使菌株丧失了四碳二羧酸的利用能力,影响了菌株的固氮酶活性;苹果酸、延胡索酸、琥珀酸对dct P-lac Z具有明显的诱导作用;在rpo N、ntr BC和dct B突变株中,dct P的表达量均显著降低。【结论】Dct P蛋白在四碳二羧酸的利用过程中起重要的作用,dct P基因的表达是Rpo N依赖型,可被四碳二羧酸诱导,受到调控蛋白Ntr BC/Dct B的协同调控。 展开更多
关键词 施氏假单胞菌A1501 四碳二羧酸 DctP
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细菌四碳二羧酸转运载体的研究进展
4
作者 李红权 平淑珍 +3 位作者 昌艳萍 何升 陈明 林敏 《河北大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2007年第5期555-560,共6页
四碳二羧酸是细菌重要的碳源与能源物质,四碳二羧酸的转运需要细菌四碳二羧酸转运载体的参与.本文对细菌四碳二羧酸转运载体的分类,四碳二羧酸基因的表达与调控机制,以及四碳二羧酸转运系统在生物固氮过程中的重要作用等方面的研究进展... 四碳二羧酸是细菌重要的碳源与能源物质,四碳二羧酸的转运需要细菌四碳二羧酸转运载体的参与.本文对细菌四碳二羧酸转运载体的分类,四碳二羧酸基因的表达与调控机制,以及四碳二羧酸转运系统在生物固氮过程中的重要作用等方面的研究进展进行了综述. 展开更多
关键词 四碳二羧酸 转运载体 生物固氮
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应用高效液相色谱分析藏灵菇源乳酸菌发酵液中的四碳二羧酸
5
作者 刘慧 丁轲 +2 位作者 王瑞琼 单冬雪 张红星 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第6期180-186,共7页
目的:分析藏灵菇源乳酸菌发酵液中的四碳二羧酸,研究发酵条件对合成四碳二羧酸的影响。方法:采用高效液相色谱分析藏灵菇源乳酸菌Tx、KS4、KL1菌株发酵液中的四碳二羧酸,通过四因素三水平[L9(34)]正交试验确定高产四碳二羧酸的发酵条件... 目的:分析藏灵菇源乳酸菌发酵液中的四碳二羧酸,研究发酵条件对合成四碳二羧酸的影响。方法:采用高效液相色谱分析藏灵菇源乳酸菌Tx、KS4、KL1菌株发酵液中的四碳二羧酸,通过四因素三水平[L9(34)]正交试验确定高产四碳二羧酸的发酵条件。结果:发酵液中草酰乙酸含量0.03318 g/L,延胡索酸含量0.05002 g/L,苹果酸含量0.000046 g/L;优化的发酵条件是:乳酸菌Tx、KS4与KL1菌种比例为3:3:3,接种量2%,发酵温度40℃,发酵时间24 h。在此条件下,合成四碳二羧酸含量是优化前的27.25倍,其中,草酰乙酸含量是优化前的41.21倍,延胡索酸含量是优化前的17.08倍,苹果酸含量是优化前的1 001.3倍。结论:在优化的发酵条件下,藏灵菇源乳酸菌混合发酵液中的四碳二羧酸含量明显提高。 展开更多
关键词 乳酸菌 四碳二羧酸 混合发酵 高效液相色谱
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导入四碳二羧酸转移酶基因对费氏中华根瘤菌共生固氮效率的影响 被引量：8
6
作者 李友国 李杰 +2 位作者 刘墨青 周岷江 周俊初 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第5期1-7,共7页
将来自苜蓿中华根瘤菌 (Sinorhizobiummeliloti)的四碳二羧酸转移酶基因(dctABD)经 pIJ2 92 5克隆到广宿主、稳定性质粒 pTR10 2上 ,获得诱导型表达的重组质粒 pHN2 0 2。在此基础上再引入来自 pDB30所含的发光酶基因 (luxAB)作分子标... 将来自苜蓿中华根瘤菌 (Sinorhizobiummeliloti)的四碳二羧酸转移酶基因(dctABD)经 pIJ2 92 5克隆到广宿主、稳定性质粒 pTR10 2上 ,获得诱导型表达的重组质粒 pHN2 0 2。在此基础上再引入来自 pDB30所含的发光酶基因 (luxAB)作分子标记 ,以 pTR10 2为基础构建成带有dctABD和luxAB的重组质粒 pHN2 0 5。经三亲本接合转移 ,将重组质粒 pHN2 0 5导入费氏中华根瘤菌 (Sinorhizobium fredii)HNO1,GR3和YC4。与出发菌相比较的盆栽试验结果表明 :HN0 1(pHN2 0 5)和GR3(pHN2 0 5)分别在宁镇一号和川早一号大豆上能显著提高植株地上部分干重 (生物量 )和总氮量 ,YC4 (pHN2 0 5)在黑龙 33大豆上能同时显著提高植株地上部分干重 (生物量 ) ,总氮量和根瘤鲜重。本研究结果表明 :导入dctABD基因对共生固氮效率的增效性与受体根瘤菌和大豆品种等因素有关。以luxAB为报告基因进行的转移接合子培养条件下分离单菌落和共生条件下形成根瘤的发光活性检测结果表明 :pHN2 0 5可在供试费氏中华根瘤菌中稳定遗传。 展开更多
关键词 四碳二羧酸转移酶基因 费氏中华根瘤菌 发光酶
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转dct结构基因固氮斯氏假单胞菌工程菌株构建及其特性研究 被引量：1
7
作者 闫春玲 林敏 +3 位作者 徐玉泉 平淑珍 陈明 张保明 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第10期36-40,共5页
固氮斯氏假单胞菌 (Pseudomonasstutzeri)A15 0 1是一种定殖于水稻根部的联合固氮菌。将含有A15 0 1四碳二羧酸转运系统 (Dct transportsystem)结构基因dctPQM的亚克隆大片段克隆到具有广泛宿主范围转移特性的质粒载体 pSZ2 1上。通过... 固氮斯氏假单胞菌 (Pseudomonasstutzeri)A15 0 1是一种定殖于水稻根部的联合固氮菌。将含有A15 0 1四碳二羧酸转运系统 (Dct transportsystem)结构基因dctPQM的亚克隆大片段克隆到具有广泛宿主范围转移特性的质粒载体 pSZ2 1上。通过三亲接合试验 ,重组质粒 pSZY6中所携带的dctPQM基因随机转座插入到菌株A15 0 1的染色体基因组中 ,构建了含有额外拷贝dct结构基因的遗传工程菌株。在A15卡那霉素 (5 0 μg/mol)平板上 ,共筛选到约 6 0株转接合子。其中工程菌株A 136、A 115和A 14 2在以不同的四碳二羧酸如琥珀酸、延胡索酸和苹果酸 ,以及乳酸为唯一碳源生长时 ,表现了较高的固氮活性 ,其固氮水平明显高于野生型菌株A15 0 1。 展开更多
关键词 固氮斯氏假单胞菌 水稻 染色体 四碳二羧酸运输系统 Dct系统
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