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从噬菌体短肽库中筛选模拟乳腺血清抗原表位
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作者 吴晓琳 吴自荣 吕学诜 《上海免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期234-247,共14页
目的： 从１５ 肽 ＰⅢ融合噬菌体库中筛选乳腺血清抗原（ Ｍ Ｓ Ａ） 的模拟表位， 并验证免疫 Ｐ Ｃ Ｒ 筛选法是否与传统的 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 筛选方法具有一致的结果。方法： 用 Ｍ Ｓ Ａ 的特异单克隆抗体３ Ｅ１２ 作 “诱饵”... 目的： 从１５ 肽 ＰⅢ融合噬菌体库中筛选乳腺血清抗原（ Ｍ Ｓ Ａ） 的模拟表位， 并验证免疫 Ｐ Ｃ Ｒ 筛选法是否与传统的 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 筛选方法具有一致的结果。方法： 用 Ｍ Ｓ Ａ 的特异单克隆抗体３ Ｅ１２ 作 “诱饵”， 亲和选择法（ｐａｎｎｉｎｇ ） 富集特异噬菌体， 用 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 及免疫 Ｐ Ｃ Ｒ 法挑选阳性克隆并验证特异性。结果： 经过四轮ｐａｎｎｉｎｇ ， 特异噬菌体产出率约为第一轮的１８８倍， 说明抗体３ Ｅ１２ 对噬菌体进行了选择性富集。选出了１０ 个 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 反应呈明显阳性克隆， 其中４ 个克隆能抑制天然 Ｍ Ｓ Ａ 抗原抗体的结合。免疫 Ｐ Ｃ Ｒ 的筛选结果与前者基本一致， 但竞争抑制试验中， 未能达到理想效果。结论： 推测这４个克隆表达的短肽与抗体３ Ｅ１２ 识别的表位具有一致或相似的结构。免疫 Ｐ Ｃ Ｒ 的筛选法可以同 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 方法结合起来作为常规方法之一， 但它不适于做竞争抑制试验。 展开更多
关键词 噬菌体短肽库 模拟表位 免疫PCR 亲和选择
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