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测定人红细胞嘧啶5′核苷酸酶含量的双抗体夹心ELISA方法 被引量：2
1
作者 潘竹林 沈茜 +5 位作者 李津婴 闵碧荷 顾定伟 许小平 李红梅 张娴 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期368-371,共4页
为了进一步探讨嘧啶 5′核苷酸酶 (P5′N)缺乏症的发病机制 ,我们利用P5′N的特异性底物尿苷一磷酸 (UMP)作为配基 ,制备尿苷一磷酸 己二酰肼 琼脂糖 4B(UMP ADH Sepharose 4B)亲和层析柱 ,结合硫酸铵分级分离和沉淀、离子层析及亲和... 为了进一步探讨嘧啶 5′核苷酸酶 (P5′N)缺乏症的发病机制 ,我们利用P5′N的特异性底物尿苷一磷酸 (UMP)作为配基 ,制备尿苷一磷酸 己二酰肼 琼脂糖 4B(UMP ADH Sepharose 4B)亲和层析柱 ,结合硫酸铵分级分离和沉淀、离子层析及亲和层析等方法提纯人红细胞P5′N。将所得P5′N免疫家兔 ,获得兔抗人抗体。以兔抗人P5′N抗体为包被抗体 ,辣根过氧化物酶 (HRP) 兔抗人P5′N抗体为显示抗体 ,经方阵法、抗原阻断试验及抗原替代试验后 ,建立定量测定人红细胞的P5′N双抗体夹心酶联免疫吸附实验。实验结果显示 ,所得兔抗人红细胞P5′N抗体效价为 1∶4 ,所建双抗体夹心ELISA法灵敏度为 5ng ml,其阻断率大于 95 %,而取代率小于 30 %。同时 ,测定正常人红细胞P5′N含量为 (71.77± 10 .98)ng mgNHP。该法特异性强 ,敏感性高 ,可检测最低含量为 5 - 2 0ng ml的P5′N含量 ,在临床上能适应大样本测定。 展开更多
关键词 嘧啶5′核苷酸酶 双抗体夹心ELISA 红细胞
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嘧啶5′核苷酸酶的研究进展
2
作者 黄建国 贺江虹 《临床荟萃》 CAS 北大核心 2003年第1期52-54,共3页
关键词 嘧啶5′核苷酸酶 研究进展 红细胞 遗传性椭圆形红细胞症 临床特征 酶活性 溶血机能 电泳特性
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双抗体夹心ELISA法测定正常人红细胞中的嘧啶5′核苷酸酶含量
3
作者 潘竹林 李津婴 +5 位作者 闵碧荷 沈茜 章卫平 童书鹏 陆海琳 张娴 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第z1期91-92,共2页
　　我们在提纯嘧啶5′核苷酸酶(P5′ Nase)的基础上,建立了双抗体夹心ELISA法定量测定正常人红细胞P5′ Nase的含量,并与其酶活性作对比,以期为P5′ Nase缺陷症的诊断和研究提供一种新方法.……
关键词 嘧啶5′核苷酸酶 双抗体夹心ELISA 红细胞
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红细胞嘧啶5′核苷酸酶的纯化及其抗血清的制备 被引量：3
4
作者 李建婴 闵碧荷 21cn.com 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第3期327-330,共4页
利用UMP ADH Sepharose4B亲和层析的方法纯化正常人红细胞嘧啶 5′ 核苷酸酶 (P5′N ,EC 3 1 3 5) .结果表明 :利用UMP ADH Sepharose4B亲和层析柱可有效、专一性吸附P5′N ,纯化液经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示一条蛋白质带 ,测定纯化物... 利用UMP ADH Sepharose4B亲和层析的方法纯化正常人红细胞嘧啶 5′ 核苷酸酶 (P5′N ,EC 3 1 3 5) .结果表明 :利用UMP ADH Sepharose4B亲和层析柱可有效、专一性吸附P5′N ,纯化液经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示一条蛋白质带 ,测定纯化物相对分子质量 2 8× 10 3 ,等电点 ( pI) 5 2 .纯化物免疫家兔后 ,得兔抗人P5′N抗血清 。 展开更多
关键词 红细胞 嘧啶-5′-核苷酸酶 亲和层析 溶血性贫血
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人红细胞嘧啶5′-核苷酸酶Ⅰ分子量鉴定、氨基酸组成分析及其微量测序
5
作者 潘竹林 李津婴 +7 位作者 闵碧荷 应康 周虹 许小平 宋献民 韩凤来 章卫平 张娴 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第1期61-65,共5页
为进一步探讨遗传性红细胞嘧啶 5′ 核苷酸酶Ⅰ (P5′N Ⅰ )缺乏症的发病机制 ,在纯化人红细胞P5′N Ⅰ的基础上 ,分别用质谱仪和氨基酸分析仪分析其分子量及氨基酸组成 ,同时将该酶经胰蛋白酶水解后进行微量测序 ,并行生物信息学分析... 为进一步探讨遗传性红细胞嘧啶 5′ 核苷酸酶Ⅰ (P5′N Ⅰ )缺乏症的发病机制 ,在纯化人红细胞P5′N Ⅰ的基础上 ,分别用质谱仪和氨基酸分析仪分析其分子量及氨基酸组成 ,同时将该酶经胰蛋白酶水解后进行微量测序 ,并行生物信息学分析。研究结果 :质谱分析表明在蛋白电泳呈一条带的纯化的人红细胞P5′N Ⅰ中发现 3种分子量成倍数关系 ,且质谱图曲线非常吻合的蛋白 ,分子量分别为 2 6 95 2 .9,5 5 4 76及 110 938。测出 1个酶解肽片段N末端的 10个氨基酸序列为 :I E G P T I R Q I E。在数据库中未发现同源性片段。氨基酸分析表明该酶至少由 18种氨基酸 ,约 2 5 3个氨基酸残基组成。结论 :人红细胞P5′N Ⅰ可能为一种多亚基组成的变构酶 ,生理状态下可能存在同源二聚体或四聚体。所测氨基酸序列可作为筛选目的基因的探针。所测氨基酸组成为确定其蛋白一级结构提供了重要依据。 展开更多
关键词 嘧啶5′-核苷酸酶 红细胞 氨基酸成分 微量测序 贫血
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红细胞嘧啶5'-核苷酸酶缺乏症4例及文献复习 被引量：1
6
作者 赵玉平 张凤奎 +4 位作者 竺晓凡 刘建国 徐艳 薄丽津 沈琳 《临床血液学杂志》 CAS 2008年第4期359-361,共3页
目的:了解红细胞嘧啶5'-核苷酸酶(P5'N)缺乏症的特点。方法:回顾性分析4例红细胞P5'N缺乏症患者的病历资料,并结合文献进行复习。结果:4例患者中3例为男性,1例女性。年龄范围7个月～33岁,病程7个月～17年。所有患者均有轻... 目的:了解红细胞嘧啶5'-核苷酸酶(P5'N)缺乏症的特点。方法:回顾性分析4例红细胞P5'N缺乏症患者的病历资料,并结合文献进行复习。结果:4例患者中3例为男性,1例女性。年龄范围7个月～33岁,病程7个月～17年。所有患者均有轻度至中度的贫血,均有脾脏肿大,红细胞P5'N活性均低于正常。结论:遗传性P5'N缺乏症是一种少见的遗传性非球形细胞溶血性贫血,本病的血液学特点与其他遗传性非球形细胞溶血性贫血的主要区别在于本病红细胞P5'N活性下降。本病尚无特效治疗措施,目前仍以支持治疗为主。 展开更多
关键词 溶血性贫血 嘧啶5′-核苷酸酶 红细胞
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遗传性嘧啶5′-核苷酸酶缺乏症研究进展
7
作者 赵玉平（综述） 《国际输血及血液学杂志》 CAS 2007年第3期275-277,共3页
遗传性嘧啶5′-核苷酸酶（P5′N）缺乏症是由于P5′N-1基因突变导致的一种少见的遗传性非球形红细胞溶血性贫血。P5′N-1基因位于染色体7p15-p14，已在32个家系中发现了20种P5′N-1基因突变。本病临床表现以轻度至中度贫血为主，目前尚... 遗传性嘧啶5′-核苷酸酶（P5′N）缺乏症是由于P5′N-1基因突变导致的一种少见的遗传性非球形红细胞溶血性贫血。P5′N-1基因位于染色体7p15-p14，已在32个家系中发现了20种P5′N-1基因突变。本病临床表现以轻度至中度贫血为主，目前尚无有效的治疗方法。本文就该病近年来的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 嘧啶5′-核苷酸酶 遗传性溶血性贫血 突变
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红细胞嘧啶5′-核苷酸酶缺乏致溶血性贫血1例报道并文献复习
8
作者 刘媛 刘瑞璇 +5 位作者 庄泽钦 曾鹏琳 周佳 钟应彬 杨洪涌 杨志文 《临床血液学杂志》 2023年第11期831-834,共4页
红细胞嘧啶5′-核苷酸酶缺乏症(pyrimidine 5′-nucleotide deficiency,P5′ND)是一种罕见的遗传性酶缺陷疾病,目前报道较少。文中病例反复出现溶血性贫血、黄疸、脾脏肿大,经完善红细胞酶学试验最终诊断为P5′ND。笔者结合相关文献复... 红细胞嘧啶5′-核苷酸酶缺乏症(pyrimidine 5′-nucleotide deficiency,P5′ND)是一种罕见的遗传性酶缺陷疾病,目前报道较少。文中病例反复出现溶血性贫血、黄疸、脾脏肿大,经完善红细胞酶学试验最终诊断为P5′ND。笔者结合相关文献复习认为,对于慢性非球形溶血性贫血患者,需警惕此类红细胞酶缺陷相关疾病,有条件者可尽量完善二代基因测序筛选致病基因,更好地指导临床实践。现特将其诊疗过程初步整理、总结并报道如下,以期为罕见病的诊治思路提供一定参考价值。 展开更多
关键词 红细胞嘧啶5′-核苷酸酶缺乏症 遗传性红细胞酶缺乏 红细胞酶学检查 二代基因测序
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