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极端嗜盐硫解酶基因的克隆和氨基酸组成分析 被引量：4
1
作者 刘铁汉 周培瑾 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期406-410,共5页
根据嗜盐菌 (Halobacteriumsalinarum)NRC 3 4 0 0 1中硫解酶的基因序列信息 ,采用PCR技术从菌株Halobacteriumsp.ZP 6中克隆了极端嗜盐硫解酶的基因 ,并对此酶的氨基组成进行了分析。同非嗜盐硫解酶相比 ,极端嗜盐硫解酶不但含有较多... 根据嗜盐菌 (Halobacteriumsalinarum)NRC 3 4 0 0 1中硫解酶的基因序列信息 ,采用PCR技术从菌株Halobacteriumsp.ZP 6中克隆了极端嗜盐硫解酶的基因 ,并对此酶的氨基组成进行了分析。同非嗜盐硫解酶相比 ,极端嗜盐硫解酶不但含有较多的负电荷氨基酸 ,较少的正电荷氨基酸和强疏水氨基酸 ,而且同类氨基酸中的小氨基酸含量明显增高。这表明极端嗜盐硫解酶的嗜盐特性不单来自形成的分子静电屏蔽网和疏水作用的调节 ,且与分子表面张力减小密切相关。 展开更多
关键词 极端嗜盐硫解酶 氨基酸组成分析 嗜盐蛋白 基因克隆 嗜盐菌
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嗜盐蛋白高级结构对其稳定性的影响
2
作者 张光亚 《华侨大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2012年第6期655-659,共5页
选择30对具有晶体结构的嗜盐和非嗜盐同源蛋白,通过计算氨基酸所处的结构状态,找出二者在统计学上具有显著差异的氨基酸.研究结果表明:在总的氨基酸组成上,嗜盐蛋白中天冬氨酸含量更多,而苯丙氨酸和赖氨酸含量显著较少.在不同二级结构区... 选择30对具有晶体结构的嗜盐和非嗜盐同源蛋白,通过计算氨基酸所处的结构状态,找出二者在统计学上具有显著差异的氨基酸.研究结果表明:在总的氨基酸组成上,嗜盐蛋白中天冬氨酸含量更多,而苯丙氨酸和赖氨酸含量显著较少.在不同二级结构区域,β-折叠中两种蛋白氨基酸组成差异最大;而在不同溶剂可及表面,两种蛋白在分别表面氨基酸组成差异最大,嗜盐蛋白表面酸性氨基酸显著较多,而碱性氨基酸则较少;48种高级结构结构参数中有4种存在显著差异,这4种结构参数都与可及性表面积有关. 展开更多
关键词 嗜盐蛋白 非嗜盐蛋白 二级结构 可及性表面积 溶剂可及性 嗜盐机制
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氨基酸嗜盐不对称指数与其理化性质的相关性
3
作者 张光亚 《计算机与应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期545-548,共4页
了解嗜盐蛋白氨基酸使用的偏好及该偏好与其理化性质之间的联系对探索嗜盐蛋白构效关系具有重要意义。本文选取极端嗜盐细菌Salinibacter ruber和非嗜盐菌Pelodictyon luteolum中362对同源蛋白,统计了52102个氨基酸突变位点,以此计算氨... 了解嗜盐蛋白氨基酸使用的偏好及该偏好与其理化性质之间的联系对探索嗜盐蛋白构效关系具有重要意义。本文选取极端嗜盐细菌Salinibacter ruber和非嗜盐菌Pelodictyon luteolum中362对同源蛋白,统计了52102个氨基酸突变位点,以此计算氨基酸的嗜盐不对称指数(HAI),并与243个理化性质进行相关性分析。结果表明:天冬氨酸的嗜盐性能最强,而异亮氨酸和赖氨酸最弱;243个理化性质中有16个同HAI存在显著相关性,其中5个呈正相关;氨基酸的亲疏水性及β折叠的倾向性是影响HAI值的两种最重要的理化性质。本文提出的氨基酸嗜盐不对称指数为了解嗜盐蛋白稳定性机制提供了新视角。 展开更多
关键词 嗜盐蛋白 Β折叠 氨基酸亲疏水性 嗜盐不对称指数 相关性分析
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极端嗜盐古生菌(Natrinema sp.)R6-5胞外嗜盐蛋白酶的纯化和性质研究 被引量：15
4
作者 石万良 钟传奇 +1 位作者 唐兵 沈萍 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期161-163,共3页
采用bacitracin-Sepharose 4B亲和层析的方法得到凝胶电泳均一的来自极端嗜盐古生菌(Natrinema sp.)R6-5的胞外嗜盐蛋白酶。经SDS-PAGE分析该酶亚基分子量为62kDa。PMSF对它的活性完全抑制,表明它是一种丝氨酸蛋白酶,该酶反应的最适NaC... 采用bacitracin-Sepharose 4B亲和层析的方法得到凝胶电泳均一的来自极端嗜盐古生菌(Natrinema sp.)R6-5的胞外嗜盐蛋白酶。经SDS-PAGE分析该酶亚基分子量为62kDa。PMSF对它的活性完全抑制,表明它是一种丝氨酸蛋白酶,该酶反应的最适NaCl浓度为3mol/L,最适温度为45℃,最适pH值为8.0。在高盐条件下能维持高活性并十分稳定,具有重要的潜在应用价值。 展开更多
关键词 嗜盐古生菌 胞外嗜盐蛋白酶 纯化 性质
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一株产蛋白酶的中度嗜盐菌Salinivibrio sp.MK070915的选育及产酶条件优化 被引量：2
5
作者 耿静 韩秋霞 +1 位作者 高文静 肖丽娇 《江苏农业科学》 2020年第5期287-294,共8页
以1株筛选自盐浓度为21%海盐水的中度嗜盐菌Salinivibrio sp.MK070915为研究对象,该菌株可产胞外蛋白酶。以Gibbons培养基为基底,采用单因素试验和最陡爬坡试验相结合的方法对影响嗜盐菌产蛋白酶能力的重要培养基成分和工艺条件进行筛选... 以1株筛选自盐浓度为21%海盐水的中度嗜盐菌Salinivibrio sp.MK070915为研究对象,该菌株可产胞外蛋白酶。以Gibbons培养基为基底,采用单因素试验和最陡爬坡试验相结合的方法对影响嗜盐菌产蛋白酶能力的重要培养基成分和工艺条件进行筛选,确定主要影响因子及其取值范围;并在此基础上,通过Design-Expert软件对主要影响因子进行四因素三水平响应面试验设计,以蛋白酶活性为响应值优化菌株产酶的培养条件,并验证响应面模型预测值与实测值的一致性。结果表明,最优培养条件如下:以Gibbons培养基为基底,NaCl浓度为5%,pH值为8,培养温度为20℃,碳源为麦芽糖,含量为1.85%,蛋白胨的含量为1.17%,KCl的含量为1.0‰,柠檬酸钠的含量为5‰,经响应面分析得到的蛋白酶活性为44.09 U,与预期值44.22 U相比,差异为0.299%。结果丰富了嗜盐蛋白酶的研究和开发依据,为高盐环境下食品工业催化和农业制剂催化提供了理论基础。 展开更多
关键词 嗜盐蛋白酶 单因素试验 响应面法 最陡爬坡试验 影响因子
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产蛋白酶的中度嗜盐菌Salinivibrio sp.MK070917的选育及产酶条件优化
6
作者 耿静 韩秋霞 +1 位作者 高文静 肖丽娇 《中国调味品》 CAS 北大核心 2019年第8期49-55,共7页
中度嗜盐菌Salinivibrio sp.MK070917,筛选自盐浓度为21%的海盐水,可产胞外蛋白酶。以Gibbons培养基为基底,采用单因素试验和最陡爬坡试验相结合的方法对影响嗜盐菌产蛋白酶的重要培养基成分和工艺条件进行筛选,确定主要影响因子及其取... 中度嗜盐菌Salinivibrio sp.MK070917,筛选自盐浓度为21%的海盐水,可产胞外蛋白酶。以Gibbons培养基为基底,采用单因素试验和最陡爬坡试验相结合的方法对影响嗜盐菌产蛋白酶的重要培养基成分和工艺条件进行筛选,确定主要影响因子及其取值范围。并在此基础上通过Design-Expert软件对主要影响因子进行四因素三水平响应面试验设计,以蛋白酶酶活为响应值优化菌株产酶的培养条件,并验证响应面预测值与实测值的一致性。结果表明:碳源为糊精,含量为0.66%,氮源为蛋白胨,含量为1.11%,KCl含量为1.16‰,柠檬酸钠含量为2.10‰。经响应面预测的最高产酶量为30.192 U,验证试验结果产酶量为30.18 U,与理论值相比差异为0.5%。 展开更多
关键词 嗜盐蛋白酶 单因素试验 响应面法 最陡爬试试验 影响因子
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