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罗非鱼水产品中的喹诺酮类药物耐药菌和耐药基因检测分析 被引量:11
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作者 郭学中 张瑞泉 +6 位作者 姜兰 谭爱萍 邓玉婷 李金祥 赵飞 刘付翠 何山 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期1032-1039,共8页
本研究旨在了解水产品中携带的细菌对喹诺酮类药物的耐药状况及耐药基因类型,评估水产品中细菌耐药性风险。从广州市14家超市随机购买100条鲜活的罗非鱼,高通量测序分析结果显示,罗非鱼携带的优势菌群为大肠埃希菌(Escherichia hydrophi... 本研究旨在了解水产品中携带的细菌对喹诺酮类药物的耐药状况及耐药基因类型,评估水产品中细菌耐药性风险。从广州市14家超市随机购买100条鲜活的罗非鱼,高通量测序分析结果显示,罗非鱼携带的优势菌群为大肠埃希菌(Escherichia hydrophila)和气单胞菌(Aeromonas)。采用大肠埃希菌和气单胞菌筛选培养方法,分别从鳃、肌肉和肠内容物筛选分离出182株大肠埃希菌和280株气单胞菌;运用琼脂二倍稀释法测定了恩诺沙星和环丙沙星对分离菌株的最小抑菌浓度;通过PCR法扩增质粒介导的喹诺酮类耐药(PMQR)基因(qnrA、qnr B、qnrC、qnrD、qnrS、aac(6¢)-Ib-cr、qepA、oqxAB)并进行测序和比对分析。结果显示,分离的气单胞菌对恩诺沙星和环丙沙星的耐药率分别为2.50%和2.14%;分离的大肠埃希菌对恩诺沙星和环丙沙星的耐药率分别为25.82%和18.13%。肌肉中分离的气单胞菌和大肠埃希菌对恩诺沙星和/或环丙沙星的耐药率均低于鳃和肠道的;各组织分离的大肠埃希菌对氟喹诺酮类药物的耐药率均远高于气单胞菌。分离菌株中,携带PMQR基因的大肠埃希菌占59.89%,且检出的耐药基因种类较多,包括qnrB、qnrD、qnrS、aac(6?)-Ib-cr和oqx AB;而携带PMQR基因的气单胞菌仅占6.79%,只检出耐药基因aac(6¢)-Ib-cr和qnrS。结论认为,罗非鱼食用部分肌肉携带的耐药菌较少,食品相对安全;肠道和鳃组织携带的耐药菌以大肠埃希菌为主,而且大部分菌株携带有不同类型的PMQR基因,存在一定的耐药传播隐患。 展开更多
关键词 水产品 气单胞菌 大肠埃希菌 喹诺酮耐药 PMQR
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携带bla_(KPC-2)型碳青霉烯酶基因泛耐药肺炎克雷伯菌对喹诺酮类耐药机制研究 被引量:11
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作者 黄支密 夏守慧 +6 位作者 沈娟 周芸 杨海燕 邹玉秀 杨伟平 糜祖煌 朱健铭 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1684-1686,1692,共4页
目的了解临床分离的携带blaKPC-2型碳青霉烯酶基因泛耐药肺炎克雷伯菌对喹诺酮类药物的耐药机制,为临床治疗提供参考依据。方法在2008年11月-2009年7月从住院患者中分离19株携带blaKPC-2型碳青霉烯酶基因泛耐药肺炎克雷伯菌,采用聚合酶... 目的了解临床分离的携带blaKPC-2型碳青霉烯酶基因泛耐药肺炎克雷伯菌对喹诺酮类药物的耐药机制,为临床治疗提供参考依据。方法在2008年11月-2009年7月从住院患者中分离19株携带blaKPC-2型碳青霉烯酶基因泛耐药肺炎克雷伯菌,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析两种喹诺酮类药物作用靶位编码基因(gyrA、parC)和5种质粒介导的喹诺酮类耐药相关基因。结果 19株携带blaKPC-2型碳青霉烯酶基因泛耐药肺炎克雷伯菌gyrA和parC基因PCR扩增均阳性,1株(5.3%)aac(6′)-Ⅰb-cr基因阳性,qnrA、qnrB、qnrS和qepA基因均阴性;序列分析结果表明,19株gyrA和parC基因均发生突变,分别导致gyrA基因喹诺酮耐药决定区(QRDR)出现两个位点错义突变,导致第83位丝氨酸(Ser)被异亮氨酸(Ile)取代、第87位天冬氨酸(Asp)被甘氨酸(Gly)取代,parC基因QRDR出现1个位点错义突变,导致第80位丝氨酸被异亮氨酸取代。结论染色体介导的耐药机制仍是临床分离的携带blaKPC-2型碳青霉烯酶基因泛耐药肺炎克雷伯菌对喹诺酮类药物耐药主要机制。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 喹诺酮耐药 blaKPC-2型基因
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天津地区大肠埃希菌临床株质粒介导的喹诺酮类耐药机制的研究 被引量:10
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作者 赵庆英 刘德梦 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期297-302,共6页
目的了解天津地区临床分离的大肠埃希菌中qnr、aac(6')-Ib-cr及qepA基因的流行情况,分析阳性菌株感染的微生物学及临床特征。方法从天津某三甲医院收集环丙沙星耐药(CPLX,MIC≥4μg/mL)的大肠埃希菌共75株,采用PCR法检测qnrA、qnrB... 目的了解天津地区临床分离的大肠埃希菌中qnr、aac(6')-Ib-cr及qepA基因的流行情况,分析阳性菌株感染的微生物学及临床特征。方法从天津某三甲医院收集环丙沙星耐药(CPLX,MIC≥4μg/mL)的大肠埃希菌共75株,采用PCR法检测qnrA、qnrB、qnrS、aac(6')-Ib及qepA基因,对aac(6')-Ib基因阳性菌株用FokⅠ酶切确认aac(6')-Ib-cr基因,接合试验验证qnr的转移性。所有阳性菌株用PCR法检测β-内酰胺酶基因,并收集阳性菌株感染患者临床资料进行分析。结果 75株环丙沙星耐药的大肠埃希菌中共有18株(24%)携带qnr基因和(或)aac(6')-Ib-cr基因,其中qnrB、qnrS和aac(6')-Ib-cr检出率分别为5.3%,4%和21.3%,未检出qnrA和qepA。5株qnr阳性菌株均接合传递成功。18株qnr/aac(6')-Ib-cr阳性的大肠埃希菌中均检测出β-内酰胺酶基因。阳性菌株对喹诺酮类和头孢菌素类药物高度耐药且主要来源于泌尿系感染,感染患者均为中老年人。结论天津地区临床存在qnr和aac(6')-Ib-cr阳性菌株的流行,这是首次在天津发现qnr介导的喹诺酮类耐药。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 质粒介导 喹诺酮耐药 QNR aac(6')-Ib-cr Β-内酰胺酶
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临床分离大肠埃希菌质粒介导喹诺酮耐药基因和β内酰胺酶基因检测 被引量:7
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作者 兰芳俊 吴娟 +2 位作者 何清雯 曹颖平 李彬 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期293-297,共5页
目的探讨大肠埃希菌临床分离株质粒介导喹诺酮耐药(PMQR)基因的流行情况,及其与β内酰胺酶基因相关性。方法收集2013年7-12月福建医科大学附属协和医院临床分离的对左氧氟沙星和/或环丙沙星耐药的大肠埃希菌200株,采用PCR检测qnrA、qnrB... 目的探讨大肠埃希菌临床分离株质粒介导喹诺酮耐药(PMQR)基因的流行情况,及其与β内酰胺酶基因相关性。方法收集2013年7-12月福建医科大学附属协和医院临床分离的对左氧氟沙星和/或环丙沙星耐药的大肠埃希菌200株,采用PCR检测qnrA、qnrB、qnrC、qnrD、qnrS、aac(6')-Ib-cr、qepA和oqxAB基因,对PMQR基因阳性菌株扩增常见β内酰胺酶基因;采用琼脂稀释法对PMQR基因阳性菌株进行药敏试验,以及PCR法对菌株进行系统发育分型;利用肠杆菌基因重复一致序列分析(ERIC-PCR)进行菌株同源性分析。结果 PCR扩增结果显示实验菌株PMQR阳性率为29.0%(58/200)。其中qnr阳性率为5.5%(11/200),aac(6')-Ib-cr阳性率为20.5%(41/200),oqx AB阳性率为8.0%(16/200),qepA阳性率为0.5%(1/200)。58株PMQR基因阳性菌株中CTX-M-1组32株(55.2%)、CTX-M-9组17株(29.3%)和TEM型1株(1.7%),未检出SHV型β内酰胺酶基因。PMQR阳性菌呈现多重耐药现象;系统发育分型结果显示A型有21株(36.2%),D型17株(29.3%),B2型11株(19.0%),B1型9株(15.5%)。ERIC-PCR显示PMQR大肠埃希菌可分为50个不同的型别,其中1株未能分型。结论该院大肠埃希菌中PMQR基因以aac(6')-Ib-cr、qnr和oqxAB为主,且与β内酰胺酶耐药基因高度相关;此外PMQR菌株以非克隆播散方式在该院中流行。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 喹诺酮耐药 质粒介导喹诺酮耐药 Β内酰胺酶
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喹诺酮抗性决定区域位点突变诱导解脲脲原体耐喹诺酮类药物的系统评价 被引量:7
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作者 朱小飞 彭红新 李岷 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2015年第1期46-48,共3页
目的系统性评价解脲脲原体(Uu)对喹诺酮类抗菌药物的耐药机制。方法信息检索Pub Med、Web of Science、万方数据库和中国知网等数据库,检索时限均从2000年至2014年5月,查找研究Uu对喹诺酮类耐药机制的文献,按照纳入与排除标准筛选文献后... 目的系统性评价解脲脲原体(Uu)对喹诺酮类抗菌药物的耐药机制。方法信息检索Pub Med、Web of Science、万方数据库和中国知网等数据库,检索时限均从2000年至2014年5月,查找研究Uu对喹诺酮类耐药机制的文献,按照纳入与排除标准筛选文献后,进行系统评价。结果共纳入14篇文献,合计176株耐喹诺酮类Uu。统计分析结果显示,Gyr A、Gyr B、Par C和Par E基因的突变率分别为65.3%、0.0%、62.8%和9.0%,共报道23种氨基酸改变。结论 Uu对喹诺酮类抗菌药物的耐药机制以Gyr A、Par C基因或Gyr A/Par C双基因突变导致相应氨基酸改变为主,Par E介导的耐药较为少见,Gyr B基因突变尚未发现。 展开更多
关键词 解脲脲原体 喹诺酮耐药 DNA促旋酶 拓扑异构酶Ⅳ 系统评价
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2022年河南省不同来源耐喹诺酮沙门菌的分子分型及溯源研究
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作者 张广伟 张濛 +6 位作者 李辉 李艳芬 邱正勇 戚浩彧 吴玲玲 崔莹 廖兴广 《现代疾病预防控制》 2024年第1期31-34,42,共5页
目的 研究2022年河南省耐喹诺酮沙门菌在腹泻患者、食品和环境中的分布以及传播路径,了解该地区耐喹诺酮类抗生素沙门菌的分子流行病学特征。方法 采用微量肉汤稀释法测定抗生素敏感性,对107株分离自临床腹泻患者及303株来源于食品和环... 目的 研究2022年河南省耐喹诺酮沙门菌在腹泻患者、食品和环境中的分布以及传播路径,了解该地区耐喹诺酮类抗生素沙门菌的分子流行病学特征。方法 采用微量肉汤稀释法测定抗生素敏感性,对107株分离自临床腹泻患者及303株来源于食品和环境的耐喹诺酮沙门菌进行多位点序列分型,并构建最小生成树。结果 221株耐环丙沙星沙门菌分属27个ST型,ST45(59株)和ST198(56株)为优势ST型,共115株,占耐环丙沙星沙门菌菌株总数的52.04%。325株耐萘啶酸沙门菌分属34个ST型,ST11(152株)和ST198(56株)为优势ST型,共208株,占耐萘啶酸沙门菌菌株总数的64.00%。耐环丙沙星沙门菌7个ST型和耐萘啶酸沙门菌8个ST型,在腹泻患者、食品和环境中均有分布。结论 河南省耐喹诺酮沙门菌存在腹泻患者、食品和环境交叉污染现象,有从食品和环境向人类传播的风险。 展开更多
关键词 沙门菌 腹泻患者 食品 环境 多位点序列分型 喹诺酮耐药
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qnrS1阳性大肠埃希菌对喹诺酮药物耐药的分子特征研究 被引量:1
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作者 黄江庆 赵志常 +2 位作者 陈瑶 曹颖平 李彬 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期565-571,共7页
目的研究qnrS阳性大肠埃希菌对喹诺酮药物耐药的分子特征。方法收集福建医科大学附属协和医院临床分离的57株qnrS1阳性的大肠埃希菌,采用PCR法检测PMQR基因[qnrA, qnrB, qnrC, qnrD, aac(6′)-Ib-cr, qepA和oqxAB基因]和β-内酰胺酶编... 目的研究qnrS阳性大肠埃希菌对喹诺酮药物耐药的分子特征。方法收集福建医科大学附属协和医院临床分离的57株qnrS1阳性的大肠埃希菌,采用PCR法检测PMQR基因[qnrA, qnrB, qnrC, qnrD, aac(6′)-Ib-cr, qepA和oqxAB基因]和β-内酰胺酶编码基因(blaCTX-M-1, blaCTX-M-2, blaCTX-M-8, blaCTX-M-9, blaSHV和blaTEM);对菌株采用琼脂稀释法进行抗菌药物敏感性试验;PCR法对菌株进行系统发育分型;利用多位点序列分型(MLST)方法对菌株进行基因分型;肠杆菌基因间重复序列为引物的聚合酶链反应(ERIC-PCR)分析菌株同源性;质粒接合试验检测qnrS1基因在菌株间的转移情况,PCR法分析菌株进行喹诺酮耐药决定区(QRDR)基因的突变情况。结果所有qnrS1阳性大肠埃希菌均对喹诺酮产生较高的耐药性;14株菌检出PMQR基因,检出率为24.6%;68.4%的菌株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs);57株菌株中56株存在QRDR(gyrA, gyrB, parC和parE基因)的突变,占98.2%,其中最常见的点突变发生在gyrA S83L(89.5%),其次为parC S80I(54.4%)以及parE P415V(28.1%);13株qnrS1阳性大肠埃希菌通过接合试验传递成功;共检测到5种不同类型的质粒不相容性分群;系统发育分型结果显示A型有36株(63.2%),B1型有13株(22.8%),B2型有1株(1.8%),D型有7株(12.3%);ERIC-PCR结果显示qnrS1阳性大肠埃希菌可分为50个不同的型别;MLST法结果显示qnrS1阳性大肠埃希菌可分为39个不同的ST分型。结论qnrS1阳性大肠埃希菌与QRDR基因的突变相关,这些突变可能在细菌喹诺酮耐药的传播中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 qnrS 大肠埃希菌 喹诺酮耐药 质粒介导的喹诺酮耐药 喹诺酮耐药决定区
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宁波地区肠道感染志贺菌喹诺酮类药物耐药性及其耐药基因分析 被引量:2
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作者 毛联钢 沈玄艺 +2 位作者 冯伟云 梁珊燕 许小敏 《现代实用医学》 2019年第9期1206-1209,共4页
目的了解宁波地区肠道感染志贺菌喹诺酮类药物耐药性及耐药基因,为临床治疗及防控提供依据。方法从腹泻患者中分离志贺菌株;血清分型采用玻片凝集法;药敏采用K-B法;耐药基因检测采用PCR法,测序结果用BLAST进行比对分析。结果307株志贺... 目的了解宁波地区肠道感染志贺菌喹诺酮类药物耐药性及耐药基因,为临床治疗及防控提供依据。方法从腹泻患者中分离志贺菌株;血清分型采用玻片凝集法;药敏采用K-B法;耐药基因检测采用PCR法,测序结果用BLAST进行比对分析。结果307株志贺菌中福氏志贺菌(B群)211株(占68.73%),宋内志贺菌(D群)96株(31.27%)。其中福氏/宋内志贺菌对萘啶酸、环丙沙星、诺氟沙星、左旋氧氟沙星的耐药率分别为95.26%/87.50%、35.07%/9.38%、36.97%/11.46%、27.96%/5.21%。志贺菌gyrA、parC、qnrS、aac(6’)-Ib-cr基因携带率分别为83.71%、87.62%、2.93%、1.63%,未检出qnrA、qnrB、qnrC、qepA基因;环丙沙星耐药株中81株(97.59%)同时检测到Ser83Leu、Asp87Asn/Gly、Ser80Ile突变,而环丙沙星敏感株中只有47株(20.98%)同时检测到Ser83Leu、Asp87Asn/Gly、Ser80Ile突变。结论宁波地区肠道感染志贺菌以福氏志贺菌为主,福氏志贺菌喹诺酮耐药性明显高于宋内志贺菌,gyrA、parC基因突变是喹诺酮耐药的主要原因。 展开更多
关键词 志贺菌 血清型 喹诺酮耐药 耐药基因
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15株腹泻患者类志贺邻单胞菌的临床致病性和药敏分析
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作者 杨玮 楼正青 《中国卫生检验杂志》 CAS 2022年第22期2735-2737,2742,共4页
目的分析腹泻患者类志贺邻单胞菌的临床致病性及其药敏情况,以指导临床合理用药。方法选择2021年5月—10月肠道门诊分离的15株类志贺邻单胞菌为实验菌株。采用MALDI-TOF MS质谱技术进行菌种鉴定及同源性分析;VITKE 2进行药敏分析,部分... 目的分析腹泻患者类志贺邻单胞菌的临床致病性及其药敏情况,以指导临床合理用药。方法选择2021年5月—10月肠道门诊分离的15株类志贺邻单胞菌为实验菌株。采用MALDI-TOF MS质谱技术进行菌种鉴定及同源性分析;VITKE 2进行药敏分析,部分中介药物使用E-TEST法复查;手工凝集法进行志贺菌4种多价血清凝集。结果类志贺邻单胞菌检出率为1.3%(15/1122),其中1株与多价血清交叉凝集阳性,1株为产H_(2)S突变株,有2株与其他菌混合感染。药敏结果显示对大多数药物敏感,但对喹诺酮类、磺胺类抗生素耐药率高,分别为46.7%、53.3%。VITEK MS RUO数据库同源分析显示菌株主体上为非同源性关系。结论类志贺邻单胞菌是夏季沿海地区腹泻重要病原菌,该菌可与其他腹泻病原菌混合感染,产H_(2)S突变菌株可能毒力增强。目前类志贺邻单胞菌对喹诺酮类抗生素耐药突出,临床需高度重视。 展开更多
关键词 志贺邻单胞菌 产H2S突变株 同源性分析 喹诺酮耐药
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近期喹诺酮使用对前列腺穿刺后感染的影响 被引量:1
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作者 刘坤 孟峻嵩 +2 位作者 徐宗源 傅广波 庄海军 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第10期1659-1661,共3页
目的:分析B超引导下经直肠前列腺穿刺活检术预防感染措施对术后急性感染发生的影响,探讨目前预防感染措施的可能的不足之处。方法:对2009-2012年间在泌尿外科门诊及住院男性患者,共236例,进行前列腺穿刺活检。调查他们近期喹诺酮类使用... 目的:分析B超引导下经直肠前列腺穿刺活检术预防感染措施对术后急性感染发生的影响,探讨目前预防感染措施的可能的不足之处。方法:对2009-2012年间在泌尿外科门诊及住院男性患者,共236例,进行前列腺穿刺活检。调查他们近期喹诺酮类使用史,糖尿病史、慢性便秘史、术前是否灌肠、术后急性感染发生率,对术后发生感染者的血、尿样本进行培养及药物敏感试验,对统计结果进行分析。结果:近期使用喹诺酮类抗生素的患者较近期未使用者在前列腺穿刺活检术后更容易发生急性感染(P=0.017),对喹诺酮类耐药的比例较高。糖尿病史、慢性便秘史、是否灌肠、先前穿刺史对前列腺穿刺活检术后发生急性感染无明显影响。结论:近期喹诺酮类使用史是前列腺穿刺活检术后急性感染的危险因素,目前前列腺穿刺预防使用抗生素方案可能需要改进。 展开更多
关键词 前列腺穿刺活检 危险因素 喹诺酮耐药
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DHPLC法快速检测动物源大肠埃希菌gyrA、gyrB基因突变的研究 被引量:1
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作者 姜芹 孙冰清 +1 位作者 王晓旭 张文刚 《上海畜牧兽医通讯》 2019年第2期20-22,共3页
利用PCR结合变性高效液相色谱法快速检测大肠埃希菌喹诺酮耐药决定区gyrA基因和gyrB基因突变。方法:对22株喹诺酮耐药大肠埃希菌进行2种基因的PCR扩增,产物经DNA杂交形成同源和异源双链后进行变性高效液相色谱法检测和序列测定。结果:2... 利用PCR结合变性高效液相色谱法快速检测大肠埃希菌喹诺酮耐药决定区gyrA基因和gyrB基因突变。方法:对22株喹诺酮耐药大肠埃希菌进行2种基因的PCR扩增,产物经DNA杂交形成同源和异源双链后进行变性高效液相色谱法检测和序列测定。结果:20株试验菌gyrA基因出现异常峰型,14株试验菌gyrB基因出现异常峰型。测序证实所有异常峰型的样本均存在突变位点,正常单峰则无突变位点。其中gyrA基因存在Ser83Leu和Asp87Asn突变,突变率分别为90.9%和86.4%;gyrB基因存在Glu185Asp突变,突变率为4.5%,两种基因均存在多个位点的同义突变。结论:DHPLC方法可用于快速检测大肠埃希菌gyrA和gyrB基因突变。 展开更多
关键词 变性高效液相色谱 动物源大肠埃希菌 喹诺酮耐药 基因突变
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TaqMan-MGB荧光探针法检测北京地区幽门螺杆菌gyrA基因第87位密码子和第91位密码子耐药突变 被引量:1
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作者 沈维祥 胡泽斌 +3 位作者 陈春峰 张小燕 成虹 郜恒骏 《中国医药生物技术》 2017年第4期325-329,共5页
目的采用TaqM an-MGB荧光探针法检测北京地区幽门螺杆菌喹诺酮类耐药位点gyr A基因第87位密码子和第91位密码子突变情况,比较与药敏试验和一代测序法的一致性。方法收集北京大学第一医院消化内科门诊尿素酶试验阳性的患者252例,所有患... 目的采用TaqM an-MGB荧光探针法检测北京地区幽门螺杆菌喹诺酮类耐药位点gyr A基因第87位密码子和第91位密码子突变情况,比较与药敏试验和一代测序法的一致性。方法收集北京大学第一医院消化内科门诊尿素酶试验阳性的患者252例,所有患者均使用MGB荧光探针法和一代测序法对喹诺酮类耐药位点gyr A基因第87位密码子和第91位密码子进行检测。其中158例患者同时进行药敏试验检测,同时分析耐药位点突变发生率与耐药表型的关系。结果 158例传统培养联合药敏法检测的标本中成功培养出85例,占53.8%,其中耐药型菌株40例,敏感型菌株42例。而MGB荧光探针法成功检出155例,占98.1%,其中野生型93例,突变型62例。在药敏试验检测出的85例阳性标本中,两种方法检出的符合率为94.1%。252例标本中,一代测序法成功检测出234例,占92.9%,其中野生型160例,突变型74例。在74例突变型标本中,含gyr A基因第87位密码子突变的标本占60.8%,含gyr A基因第91位密码子突变的标本占39.2%。MGB荧光探针法成功检测出250例,占99.2%,其中野生型161例,突变型89例。在89例突变组标本中,含gyr A基因第87位密码子突变的标本占64.0%,含gyr A基因第91位密码子突变的标本占36.0%。一代测序法和MGB荧光探针法在区分是否含有突变上的符合率为95.3%。结论 Taq Man-MGB荧光探针法可快速、敏感地检测患者胃黏膜标本中幽门螺杆菌喹诺酮类耐药位点gyr A基因第87位密码子和第91位密码子的突变情况,与药敏试验和一代测序法有较高的符合性。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 MGB荧光探针 喹诺酮耐药
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泛耐药肺炎克雷伯菌血液分离株耐药机制研究 被引量:16
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作者 孙伏喜 冯旰珠 +3 位作者 姚静 崔进 高天明 赵水娣 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期365-369,共5页
目的探讨泛耐药肺炎克雷伯菌血液分离株耐药机制。方法对我院ICU住院患者血液分离的泛耐药肺炎克雷伯菌株,采用K-B纸片法药敏试验;采用聚合酶链反应(PCR)方法对该菌株可能携带的β-内酰胺酶编码基因及膜孔蛋白编码基因、与氨基糖苷类药... 目的探讨泛耐药肺炎克雷伯菌血液分离株耐药机制。方法对我院ICU住院患者血液分离的泛耐药肺炎克雷伯菌株,采用K-B纸片法药敏试验;采用聚合酶链反应(PCR)方法对该菌株可能携带的β-内酰胺酶编码基因及膜孔蛋白编码基因、与氨基糖苷类药物耐药相关的氨基糖苷类修饰酶编码基因、与氟喹诺酮类药物耐药相关基因以及与利福平耐药相关的aar基因进行检测,并对阳性产物进行测序,测序结果作BLAST对比分析。结果该株泛耐药肺炎克雷伯菌株检出TEM、SHV、DHA3种β-内酰胺酶编码基因,OmpK35膜孔蛋白编码基因检测呈阳性,OmpK36膜孔蛋白编码基因检测呈阴性,即该菌OmpK36膜孔蛋白编码基因为缺失型;aac(6')-Ⅰb氨基糖苷类修饰酶编码基因阳性;氟喹诺酮类药物作用靶位gyrA基因第83位密码子存在TCC→ATC有义突变(氨基酸序列S→I)、parC基因第80位密码子存在AGC→ATC有义突变(氨基酸序列S→I),且氟喹诺酮类药物作用靶位保护蛋白编码基因qnrB检测阳性;利福平获得性耐药基因arr检测阳性。结论泛耐药肺炎克雷伯菌同时存在多种耐药机制,从而对不同类抗菌药物形成耐药,给临床治疗带来极大的挑战;加强对该类菌株的监控、减少其在医院的传播、积极探寻对该类菌株的有效治疗措施迫在眉睫。 展开更多
关键词 耐药 肺炎克雷伯菌 血流感染 Β-内酰胺酶 喹诺酮耐药 利福平获得性耐药
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新疆多源喹诺酮类耐药大肠杆菌耐药基因检测及分析 被引量:17
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作者 南海辰 底丽娜 夏利宁 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第20期4096-4108,共13页
【目的】了解新疆不同动物源喹诺酮类耐药大肠杆菌携带质粒介导的喹诺酮耐药因子(plasmid mediated quinolone resistance,PMQR)的流行现状,及其与主要的β-内酰胺酶基因和16S rRNA甲基化酶基因的共存情况。【方法】通过PCR方法对猪源(7... 【目的】了解新疆不同动物源喹诺酮类耐药大肠杆菌携带质粒介导的喹诺酮耐药因子(plasmid mediated quinolone resistance,PMQR)的流行现状,及其与主要的β-内酰胺酶基因和16S rRNA甲基化酶基因的共存情况。【方法】通过PCR方法对猪源(79株)、牛源(8株)和羊源(96株)喹诺酮类(环丙沙星,诺氟沙星和恩诺沙星)耐药大肠杆菌进行PMQR(qnrA,qnrB,qnrC,qnrD,qnrS,qepA,oqxA,oqxB,aac(6’)-Ib-cr)、β-内酰胺酶基因(blaTEM,blaCTX-M,blaSHV,blaKPC,blaCMY-2,blaLAP-1)及16S rRNA(armA,rmtB)等基因检测,对目的条带进行DNA测序,确定阳性菌株,对检出携带β-内酰胺酶基因和16S rRNA甲基化酶基因的大肠杆菌进行β-内酰胺类及氨基糖苷类药敏试验,分析其携带的基因型与耐药表型之间的关系。【结果】猪源大肠杆菌中检出的PMQR因子为qnrS(5/79,6.33%),oqxA(35/79,44.30%),oqxB(40/79,50.60%)和aac(6’)-Ib-cr(4/79,5.06%),检出的β-内酰胺酶基因为blaTEM(79/79,100%),检出的16S rRNA基因为rmtB(3/79,3.80%);牛源大肠杆菌中检出的PMQR因子为qnrS(1/8,12.50%),oqxA(1/8,12.50%),oqxB(1/8,12.50%)和aac(6’)-Ib-cr(1/8,12.50%)和qepA(1/8,12.50%),检出的β-内酰胺酶基因为blaTEM(8/8,100%)和blaSHV(1/8,12.50%);羊源大肠杆菌中检出的PMQR因子为qnrS(6/96,6.25%),oqxA(32/96,33.3%),oqxB(37/96,38.5%)和aac(6’)-Ib-cr(22/96,22.91%),检出的β-内酰胺酶基因为blaTEM(96/96,100%)和blaCTX-M(2/96,2.08%),检出的16S rRNA基因为rmtB(2/96,2.08%);未检出qnrA,qnrB,qnrC,qnrD,blaKPC,blaCMY-2和blaLAP-1被检基因。不同动物源大肠杆菌中存在基因共存现象,携带β-内酰胺酶基因和16S rRNA甲基化酶基因的喹诺酮类耐药大肠杆菌对β-内酰胺类和氨基糖苷类药物耐药呈一定的相关性。【结论】不同动物源喹诺酮类耐药大肠杆菌中存在PMQR因子,可与主要的β-内酰胺酶和/或16S rRNA甲基化酶基因共存。此外,首次在羊源大肠杆菌中检出PMQR因子、β-内酰胺酶及16S rRNA甲基化酶� 展开更多
关键词 喹诺酮耐药大肠杆菌 不同动物源 PMQR因子 检测
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肺炎克雷伯菌质粒介导的喹诺酮类抗生素耐药机制的研究 被引量:11
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作者 马晓波 林粼 +6 位作者 张加勤 赵元勋 郑港森 郑燕青 房丽丽 宋秀宇 吴维生 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期625-629,共5页
目的研究质粒介导的喹诺酮类耐药机制(PMQR)在肺炎克雷伯菌临床分离株上的分布情况,并对阳性菌株上染色体介导的喹诺酮类耐药机制进行分析。方法细菌的鉴定和药敏采用Vitek-2compact系统;采用PCR法检测质粒介导的喹诺酮类耐药基因q... 目的研究质粒介导的喹诺酮类耐药机制(PMQR)在肺炎克雷伯菌临床分离株上的分布情况,并对阳性菌株上染色体介导的喹诺酮类耐药机制进行分析。方法细菌的鉴定和药敏采用Vitek-2compact系统;采用PCR法检测质粒介导的喹诺酮类耐药基因qnrA、qnrB、qnrS、aac,(69-Ib-cr和qepA的分布情况。对包含PMQR的细菌,采用E.试验测定环丙沙星的MIC大小,同时扩增测序分析染色体基因gyrA、gyrB、parC、parE的突变情况。结果临床分离的67株肺炎克雷伯菌中,qnrS、qnrB、aac-(6`).Ib.cr、qepA的检出率分别为14.93%、2.99%、2.99%和16.42%。8株细菌同时包含qn,和卵p4基因,其中2株qnr、qepA和aac-(6`)-Ib-cr同时阳性。PMQR阳性菌株对环丙沙星的MIC值不定(0.032~≥64μg/mL),其中8株(占61.54%)对环丙沙星高水平耐药(≥64μgg/mL)。比对结果显示,环丙沙星MIC≤0.5μg/mL的3株细菌几乎未见染色体的氨基酸序列改变;而环丙沙星MIC≥8μg/mL的菌株全部存在gyrA和parC编码氨基酸序列改变,且突变主要集中在gyrA83位、87位~[1parC80位上。所有PMQR阳性的肺炎克雷伯菌的∥膪和pa旭均未发现任何氨基酸序列突变。结论临床分离的肺炎克雷伯菌上检测到qnr、aac-(6`)-Ib-cr、qepA的分布与共存。PMQR阳性菌株对环丙沙星的MIC值不定,但染色体机制仍是肺炎克雷伯菌对喹诺酮类抗生素耐药的主要机制,突变主要见于gyrA的83位、87位及parC的80位上。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 质粒介导喹诺酮耐药 QNR aac-(6')-Ib-cr QEPA GYRA
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2017-2018年包头地区耐喹诺酮大肠埃希菌临床分离株的耐药特征与机制分析 被引量:7
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作者 李翠翠 胡同平 张利霞 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期518-524,共7页
目的了解内蒙古包头地区临床分离的耐喹诺酮大肠埃希菌的耐药特征以及机制。方法收集2017-2018年内蒙古包头地区11所参与全国细菌耐药监测网医院的大肠埃希菌临床分离株,采用纸片扩散法或自动化仪器法按统一技术方案进行药敏试验,采用... 目的了解内蒙古包头地区临床分离的耐喹诺酮大肠埃希菌的耐药特征以及机制。方法收集2017-2018年内蒙古包头地区11所参与全国细菌耐药监测网医院的大肠埃希菌临床分离株,采用纸片扩散法或自动化仪器法按统一技术方案进行药敏试验,采用酶抑制剂增强试验测定超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),分析病原菌耐药性。并且随机从大肠埃希菌喹诺酮类耐药(环丙沙星或/和左氧氟沙星耐药)组中筛选60株作为试验菌株,采用微量肉汤稀释法测定环丙沙星最低抑菌浓度(MIC)值,采用聚合酶链反应检测GyrA、GyrB、ParC、ParE、qnrA、qnrB、qnrS、aac(6′)-Ib以及qepA基因,限制性酶切反应确定aac(6′)-Ib-cr基因型。结果共收集上述医院非重复大肠埃希菌临床分离株4 262株。耐喹诺酮大肠埃希菌分离率居前3位的医院分别为包头市肿瘤医院(79.37%)、内蒙古包钢医院(74.45%)和包头市第八医院(72.52%);前3位科室分别为泌尿科(90.74%)、呼吸内科(87.58%)和肿瘤科(77.87%);前3位标本分别为尿液(73.77%)、痰液等呼吸道标本(65.63%)和引流液(63.27%)。4 262株大肠埃希菌中喹诺酮类耐药组和喹诺酮类非耐药组占比分别为66.31%和33.69%,喹诺酮类耐药组对绝大部分所测抗菌药物的耐药率和产ESBLs的检出率均高于喹诺酮类非耐药组(P<0.05)。60株试验菌株:GyrA、GyrB、ParC和ParE基因的阳性率均为100.00%;GyrA、ParC和ParE亚基突变发生率均为100.00%,GyrB亚基突变发生率为16.67%;发生最多的氨基酸取代种类是Ser83→Leu(100.00%),其次依次为Ser80→Ile(96.67%)和Asp87→Asn(91.67%);质粒介导的喹诺酮类耐药(PMQR)基因阳性率为18.33%,其中检出率由高到低分别为aac(6′)-Ib-cr基因(15.00%)、qnrS基因(6.67%)和qepA基因(3.33%)。在GyrA亚基双突变的基础上,发生ParC亚基单位点(Ser80或Glu84)突变的菌株对环丙沙星的MIC值多在32~64μg/ml范围内;发生ParC亚基双位点(Ser80和Glu84) 展开更多
关键词 喹诺酮抗菌 大肠埃希菌 喹诺酮耐药决定区 质粒介导的喹诺酮耐药
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碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌对喹诺酮类的高度耐药性及其耐药机制
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作者 阿力米热·艾买提 孙哲伟 +2 位作者 徐庆庆 徐晓刚 王明贵 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期326-331,共6页
目的了解碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)对喹诺酮类的耐药性及其耐药机制,包括可移动喹诺酮类耐药(TMQR)基因分布。方法对2019年我国7所医院临床分离的CRKP菌株采用肉汤微量稀释法进行抗菌药物敏感性试验。采用Illumina HiseqX测序... 目的了解碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)对喹诺酮类的耐药性及其耐药机制,包括可移动喹诺酮类耐药(TMQR)基因分布。方法对2019年我国7所医院临床分离的CRKP菌株采用肉汤微量稀释法进行抗菌药物敏感性试验。采用Illumina HiseqX测序平台进行基因组测序,并分析CRKP携带的毒力基因、MLST分型、染色体喹诺酮类耐药决定区(QRDR)的变异情况,以及TMQR基因分布。结果481株CRKP对左氧氟沙星和环丙沙星不敏感率分别为98.4%和99.2%,ST11型和ST15型为优势克隆。303株携带毒力基因的CRKP(CV-CRKP)中,ST11型和ST15型菌株分别为92.1%和5.0%。178株不携带毒力基因的CRKP(non-CV-CRKP)中,ST11型和ST15型菌株分别为53.4%和34.3%。全部ST11和ST15型菌株对喹诺酮类耐药并伴有gyrA和parC基因变异,对喹诺酮类敏感菌株均为非ST11和非ST15型菌株。可移动元件介导的喹诺酮耐药基因中,qnrS1(294株,61.1%)、qnrB4(48株,10.0%)及aac(6)-Ib-cr(90株,18.7%)的检出率高,其他基因的检出较低,包括有qnrB1(4株)、qnrB2(2株)、qnrD1(2株)、qnrB6(1株)。其中,qnrB4主要分布在左氧氟沙星高度耐药(MIC≥8 mg/L)菌株中。aac(6)-Ib-cr主要分布在环丙沙星耐药(MIC>8 mg/L)菌株中。结论临床分离的CRKP菌株对喹诺酮类耐药率高。喹诺酮类耐药的CRKP菌株中QRDR变异率高,TMQR基因携带率高。 展开更多
关键词 碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌 左氧氟沙星 环丙沙星 多位点序列分型 喹诺酮耐药决定区 QNR aac(6)-Ib-cr
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水产动物源细菌质粒介导的喹诺酮类耐药研究概况 被引量:5
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作者 吴甘林 邓玉婷 +3 位作者 姜兰 谭爱萍 赵飞 张瑞泉 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期631-638,共8页
喹诺酮类药物是一种人工合成的抗菌药物,这类抗菌药都有喹诺酮环结构,又称吡酮酸类或吡啶酮酸类。喹诺酮类药物能够穿透细胞壁进入细胞直接作用于DNA促旋酶(拓扑异构酶Ⅱ)和拓扑异构酶Ⅳ[1],通过抑制这两种酶而阻断DNA的复制,从而发挥... 喹诺酮类药物是一种人工合成的抗菌药物,这类抗菌药都有喹诺酮环结构,又称吡酮酸类或吡啶酮酸类。喹诺酮类药物能够穿透细胞壁进入细胞直接作用于DNA促旋酶(拓扑异构酶Ⅱ)和拓扑异构酶Ⅳ[1],通过抑制这两种酶而阻断DNA的复制,从而发挥抗菌作用[2]。由于这类药物拥有抗菌谱广、高效、用药量低、给药方便、毒副作用低和与其他抗菌药物不产生交叉耐药等优点[3],广泛应用于人医临床、畜牧水产养殖的细菌病治疗中。目前喹诺酮类药物主要用于治疗水产养殖动物常见病原如气单胞菌(Aeromonas)、弧菌(Vibrio)等引起的细菌性疾病[4]。 展开更多
关键词 水产养殖 质粒介导的喹诺酮耐药 质粒介导的喹诺酮耐药基因
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临床危重患者细菌感染的耐药性及耐药基因的检测及分析 被引量:6
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作者 韩辉 韩琳琳 +3 位作者 王少燕 刘宇 王书会 董辉 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第21期4441-4444,共4页
目的检测分析自重症监护病房(ICU)和临床各科危重症患者检出的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及鲍氏不动杆菌分离菌株的耐药性,以及耐药菌株喹诺酮类耐药基因携带状况,为指导临床合理应用抗菌药物、有效预防和控制耐药细菌感染提供科学依据... 目的检测分析自重症监护病房(ICU)和临床各科危重症患者检出的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及鲍氏不动杆菌分离菌株的耐药性,以及耐药菌株喹诺酮类耐药基因携带状况,为指导临床合理应用抗菌药物、有效预防和控制耐药细菌感染提供科学依据。方法采用BD Phoenix100全自动微生物分析仪,对临床分离的细菌进行鉴定,K-B纸片扩散法进行药敏试验;药敏推测法鉴定产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株;PCR技术检测耐喹诺酮类药物菌株parC和gyrA的耐药相关基因;对药敏和基因检测结果进行综合分析。结果大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及鲍氏不动杆菌均对喹诺酮类抗菌药物耐药,青岛地区和莒县地区大肠埃希菌临床分离株中喹诺酮类耐药相关基因gyrA检出率分别为42.9%和5.4%,parC基因检出率分别为42.9%和25.0%,青岛地区和莒县地区肺炎克雷伯菌gyrA检出率20.0%和17.6%、parC检出率40.0%和47.1%、鲍氏不动杆菌gyrA检出率10.3%和11.1%、parC检出率10.3%和22.2%,分离株中两种耐药基因的检出率差异均无统计学意义;耐药基因parC和gyrA的检出率,产ESBLs大肠埃希菌分离率为30.0%和14.0%、肺炎克雷伯菌分离率为50.0%和28.6%,非产ESBLs大肠埃希菌的分离率为25.0%和10.0%、肺炎克雷伯菌分离率为38.9%和11.1%,两个耐药基因检出率差异均无统计学意义。结论 ICU和临床各科危重症患者分离的3种细菌耐药现象严重,且表现为多药耐药性;携带喹诺酮类耐药基因是其对喹诺酮类药物产生耐药的原因,此外可能尚有其他喹诺酮类耐药机制存在。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 肺炎克雷伯菌 鲍氏不动杆菌 喹诺酮耐药基因 超广谱Β-内酰胺酶
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肺炎克雷伯菌的敏感性及其质粒介导的耐药基因的分布特点分析 被引量:6
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作者 翟俊斌 曹小利 +3 位作者 程莉 周万青 张之烽 沈瀚 《临床输血与检验》 CAS 2020年第4期425-429,共5页
目的分析肺炎克雷伯菌的敏感性和质粒介导的耐药基因在肺炎克雷伯菌中的分布特点。方法收集我院肺炎克雷伯菌115株,微量肉汤稀释法测定细菌的敏感性;使用PCR和DNA测序技术检测超广谱β内酰胺酶、AmpC酶、碳青霉烯酶及16S rRNA甲基化酶... 目的分析肺炎克雷伯菌的敏感性和质粒介导的耐药基因在肺炎克雷伯菌中的分布特点。方法收集我院肺炎克雷伯菌115株,微量肉汤稀释法测定细菌的敏感性;使用PCR和DNA测序技术检测超广谱β内酰胺酶、AmpC酶、碳青霉烯酶及16S rRNA甲基化酶的编码基因和喹诺酮耐药基因。根据亚胺培南的MIC,将菌株分为碳青霉烯不敏感肺炎克雷伯菌(CNSKP)和碳青霉烯敏感肺炎克雷伯菌(CSKP),分析上述基因在两组中的分布差异。结果 115株细菌对所测药物的不敏感率在30%以上;DNA分析显示blaCTX-M-14是最主要的blaESBL;oqxAB的流行率最高,为60.9%,并且在CSKP中的分布显著高于CNSKP组,而blaCTX-M、blaTEM和rmtB在CRKP组的分布在CNSKP显著高于CSKP组(P<0.05)。结论应加强抗生素的合理使用和感染控制措施的实施,以减缓耐药元件的播散,预防CNSKP的产生。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 超广谱Β内酰胺酶 质粒介导喹诺酮耐药基因 AmpC内酰胺酶 16S rRNA甲基化酶
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