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PKC通过对MPF活性的影响在G2/M期调节细胞周期进程 被引量:1
1
作者 刘莹 王亚杰 +3 位作者 张杰 袁莹 宗志红 于秉治 《药物生物技术》 CAS CSCD 2002年第5期274-277,共4页
为了研究PKC在NIH3T3细胞中G2/M期作用,检测了PKC的激动剂1-oleoty-2-acetyl-sn-glycerol(OAG)对G2/M期关键的调控因子MPF活性变化及细胞周期进程的影响。细胞同步化处理用Aphidicolin。用 PI(Propidium Iodide)染料与DNA结合,流式... 为了研究PKC在NIH3T3细胞中G2/M期作用,检测了PKC的激动剂1-oleoty-2-acetyl-sn-glycerol(OAG)对G2/M期关键的调控因子MPF活性变化及细胞周期进程的影响。细胞同步化处理用Aphidicolin。用 PI(Propidium Iodide)染料与DNA结合,流式细胞仪检测细胞周期的改变。同时测定OAG加入后G2期 PKC和MPF的活性改变。结果表明Aphidicolin同步在G1/S期的细胞,释放后在经过1-2h的恢复期后,约在7h左右到达早G2期,并在10h达到G2末期。OAG在浓度为50μmol/L,100μmol/L,150μmol/L时都可激活 PKC,而CalphostinC在300nmol/L时最大限度地抑制PKC活性。50μmol/L的OAG至少1150see没有改变细胞内钙。50μmol/L的OAG在G2期使MPF活性降低,而300nmol/L calphostin C可以使MPF活性升高。在G2早期加入 OAG50μmol/L可以引起NIH3T3细胞阻滞在G2/M期交界。 展开更多
关键词 蛋白激酶C M-期促进因子 周期素b P34^CDC2 细胞周期
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食管支架术后再狭窄组织中CDC_2、周期素A、B的表达
2
作者 宛新建 许国铭 +3 位作者 李兆申 孙振兴 湛先保 满晓华 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期127-128,共2页
关键词 食管支架术 再狭窄 CDC2 周期素A 手术后 周期素b 基因表达
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小鼠未受精卵和早1-细胞期受精卵中MPF蛋白水平的检测
3
作者 于爱鸣 陈菲 +2 位作者 宗志宏 武迪迪 于秉治 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期105-106,110,共3页
目的::检测小鼠未受精卵和早1-细胞期受精卵中M期促进因子(MPF)蛋白水平,探讨MPF在早1-细胞期受精卵中的变化.方法:利用超排卵及反复冻融裂解细胞的方法,对卵母细胞和受精卵细胞中MPF的催化亚基Cdc2、调节亚基周期素B进行Western印迹分... 目的::检测小鼠未受精卵和早1-细胞期受精卵中M期促进因子(MPF)蛋白水平,探讨MPF在早1-细胞期受精卵中的变化.方法:利用超排卵及反复冻融裂解细胞的方法,对卵母细胞和受精卵细胞中MPF的催化亚基Cdc2、调节亚基周期素B进行Western印迹分析.结果:在500个MⅡ卵母细胞和受精卵细胞样品中,可以清楚看到各有一条粉紫色的特异免疫印迹带显示Cdc2,根据凝胶成像及分析系统的Gelworks应用软件分析,得到的强度的相对值分别是100%和约80%.用700个卵细胞进行观察时可以看到MⅡ卵母细胞显示有2条免疫印迹带显示细胞周期素B,其中一条为60~63 kDa,是周期素B;另一条则位于周期素B的下方,约40~45 kDa,且色调偏淡.而受精卵细胞样品在相应的部位则未能见到特异的免疫印迹带.结论:小鼠早1-细胞期受精卵(G1期)中的Cdc2蛋白水平仍保持在相对的较高水平;而细胞周期素B的量显著减少,难以检测. 展开更多
关键词 受精卵 CDC2 周期素b M期促进因子
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Cyclin B1蛋白在血管瘤组织中的表达 被引量:8
4
作者 陈志雄 张端莲 +2 位作者 陕声国 刘涓 余瑛 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2003年第3期259-262,共4页
目的 检测CyclinB1蛋白在皮肤血管瘤组织中的表达 ,探讨CyclinB1在血管瘤发生、发展中的作用及意义。方法 采用免疫组织化学S P法检测增生期血管瘤、退化期血管瘤及正常皮肤组织 (各 2 0例 )中CyclinB1蛋白的表达。结果 在增生期血... 目的 检测CyclinB1蛋白在皮肤血管瘤组织中的表达 ,探讨CyclinB1在血管瘤发生、发展中的作用及意义。方法 采用免疫组织化学S P法检测增生期血管瘤、退化期血管瘤及正常皮肤组织 (各 2 0例 )中CyclinB1蛋白的表达。结果 在增生期血管瘤、退化期血管瘤和正常皮肤组组织中 ,CyclinB1蛋白免疫组织化学阳性反应颗粒的平均光密度分别为 :0 14 6± 0 0 16 ,0 0 79± 0 0 18,0 0 6 8± 0 0 2 1;阳性面积率分别为 :0 5 38± 0 0 6 5 ,0 2 0 4± 0 0 79,0 176±0 0 5 4。增生期血管瘤与退化期血管瘤、正常皮肤组分别相比 ,CyclinB1蛋白阳性表达的平均光密度和阳性面积率均有极显著性差异 (P <0 0 0 1) ,退化期血管瘤与正常皮肤组之间 ,CyclinB1蛋白阳性表达的差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 Cy clinB1蛋白在血管瘤发生发展和毛细血管内皮细胞的异常过度增生中起着重要的作用。 展开更多
关键词 Cyclinb1蛋白 血管瘤 组织 表达 细胞周期素b1 免疫组织化学 皮肤肿瘤
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Cyclin D1和Cyclin B1在鼻咽癌中表达的免疫组织化学研究 被引量:5
5
作者 朱红 曾亮 +1 位作者 谢志海 胡国斌 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2004年第11期103-105,共3页
目的为探讨CyclinD1和CyclinB1在鼻咽癌中的表达、相关性及临床意义。方法用免疫组化SP法分别检测CyclinD1和CyclinB1在58例鼻咽癌组织标本中的表达。结果CyclinD1和CyclinB1在鼻咽癌组织中的阳性表达率分别为58.6%(34/58)和60.3%(35/58... 目的为探讨CyclinD1和CyclinB1在鼻咽癌中的表达、相关性及临床意义。方法用免疫组化SP法分别检测CyclinD1和CyclinB1在58例鼻咽癌组织标本中的表达。结果CyclinD1和CyclinB1在鼻咽癌组织中的阳性表达率分别为58.6%(34/58)和60.3%(35/58);CyclinD1和CyclinB1阳性和阴性病例的平均生存期、五年生存率和中位生存期存在显著性差异(P<0.05);鼻咽癌组织中CyclinD1和CyclinB1的表达一致率为60.3%(35/58),无显著相关。结论CyclinD1和CyclinB1表达均可以反映鼻咽癌的生存情况,在鼻咽癌预后预测中有重要意义。 展开更多
关键词 细胞周期素D1 细胞周期素b1 鼻咽癌 免疫组织化学
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卵巢上皮性癌组织中细胞周期素B1和CDK1的表达 被引量:5
6
作者 樊素珍 姚丽 程劼 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2012年第4期527-530,共4页
目的:探讨卵巢上皮性癌组织中细胞周期素B1(CyclinB1)和细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)的表达及其意义。方法:应用免疫组化SP法检测20例正常卵巢组织、20例卵巢良性上皮性肿瘤组织、40例卵巢上皮性癌组织中CyclinB1和CDK1蛋白的表达。结... 目的:探讨卵巢上皮性癌组织中细胞周期素B1(CyclinB1)和细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)的表达及其意义。方法:应用免疫组化SP法检测20例正常卵巢组织、20例卵巢良性上皮性肿瘤组织、40例卵巢上皮性癌组织中CyclinB1和CDK1蛋白的表达。结果:①卵巢上皮性癌组织中CyclinB1和CDK1蛋白的阳性表达率分别为77.5%和90.0%,良性卵巢上皮肿瘤组织分别为25.0%和35.0%,正常卵巢组织分别为5.0%和10.0%,3者相比差异有统计学意义(χ2=33.036,39.568;P<0.001)。②CyclinB1蛋白的表达与卵巢上皮性癌FIGO分期、组织分化和淋巴结转移有关(P<0.05),CDK1蛋白的表达与卵巢上皮性癌临床病理特征无关。结论:CyclinB1和CDK1蛋白在卵巢上皮性癌组织中存在异常高表达,可能在卵巢上皮性癌的早期恶变过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 卵巢上皮性癌 细胞周期素b1 细胞周期蛋白依赖性激酶1
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糖基化终末产物对人表皮角质形成细胞周期调控的影响机制 被引量:2
7
作者 董叫云 牛轶雯 +2 位作者 谢挺 青春 陆树良 《创伤外科杂志》 2009年第5期402-406,共5页
目的通过体外试验探讨糖基化终末产物(AGEs)对表皮角质形成细胞周期调控的影响机制。方法体外培养的人表皮角质形成细胞经AGEs(150mg/ml)作用后,用噻唑兰(MTT)法研究其增殖活力、流式细胞仪研究细胞周期和凋亡率。用小片断RNA干扰(siRNA... 目的通过体外试验探讨糖基化终末产物(AGEs)对表皮角质形成细胞周期调控的影响机制。方法体外培养的人表皮角质形成细胞经AGEs(150mg/ml)作用后,用噻唑兰(MTT)法研究其增殖活力、流式细胞仪研究细胞周期和凋亡率。用小片断RNA干扰(siRNA)的方法阻断细胞中AGEs受体(receptor of AGEs,RAGE)mRNA的表达,realtime PCR鉴定其阻断效率。RT-PCR法检测RAGE阻断前后各组细胞内RAF-1、黏着斑激酶(FAK)、周期素(cyclin)D1、cyclinB1、周期表依赖性激酶4(CDK4)的核酸水平表达差异。结果经AGEs干预后表皮角质形成细胞增殖活性下降,凋亡率升高,细胞周期G2期的比例显著增高,而细胞周期调控相关因子及信号因子RAF-1、cyclinD1、cyclinB1、CDK4的核酸表达较对照组却明显升高,用RAGE阻断以上因子后表达则与对照组相比无差异。结论在上述体外模型下,表皮角质形成细胞的周期调控因子升高,而增殖却下降且凋亡增加,可能是AGEs干预后细胞内启动内源性代偿调控机制,且这种调控机制与其受体(RAGE)途径相关;AGEs也可能还通过以上细胞周期调控因子以外的其他途径或机制影响细胞生物学功能。 展开更多
关键词 糖基化终末产物 周期素D1 周期素b1 周期素依赖性激酶4 细胞增殖
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G_0/G_1期异时相Cyclin B1的表达对细胞凋亡的影响 被引量:4
8
作者 何乐亚 魏欣 +6 位作者 徐丰 李川 闵江 刘鹭 陶德定 胡俊波 龚建平 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期38-41,共4页
目的研究G0/G1期异时相细胞周期素B1(Cyclin B1)的大量表达对细胞凋亡的影响。方法首先构建了四环素可诱导表达Cyclin B1的单克隆细胞株,其次,筛选出能最大程度阻滞细胞于G0/G1期的胸腺嘧啶核苷(Thymidine)浓度,最后,在阻滞的时间内加... 目的研究G0/G1期异时相细胞周期素B1(Cyclin B1)的大量表达对细胞凋亡的影响。方法首先构建了四环素可诱导表达Cyclin B1的单克隆细胞株,其次,筛选出能最大程度阻滞细胞于G0/G1期的胸腺嘧啶核苷(Thymidine)浓度,最后,在阻滞的时间内加入四环素诱导Cyclin B1表达,并用免疫印迹和流式细胞仪检测证实后,用膜联蛋白/碘化丙啶(AnnexinⅤ/PI)双染法和API法检测细胞凋亡。结果终浓度为5mmol/L的胸腺嘧啶核苷能阻滞单克隆细胞株在G0/G1期,并至少维持48h;在细胞同步化期间加四环素诱导后,Cyclin B1表达增加,并且G0/G1期特异性细胞凋亡增加。结论 G0/G1期异时相Cyclin B1的表达能诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 细胞周期素b1 细胞周期 细胞凋亡
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双环醇下调细胞周期素B2基因启动子转录活性研究 被引量:2
9
作者 郭江 纪冬 +6 位作者 成军 高学松 吴顺华 邵清 刘妍 罗金 兰培 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2005年第4期346-348,共3页
目的探讨双环醇对细胞周期素(cyclin)B2启动子转录活性的调节作用。方法根据文献报道的结果确定细胞周期素B2的启动子DNA序列区域,以聚合酶链反应(PCR)扩增细胞周期素启动子(B2p),克隆至真核报告载体pCAT3Basic中,构建pCAT3cyclinB2p报... 目的探讨双环醇对细胞周期素(cyclin)B2启动子转录活性的调节作用。方法根据文献报道的结果确定细胞周期素B2的启动子DNA序列区域,以聚合酶链反应(PCR)扩增细胞周期素启动子(B2p),克隆至真核报告载体pCAT3Basic中,构建pCAT3cyclinB2p报告载体;以该质粒转染肝癌细胞系HepG2细胞,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性并与双环醇共刺激的HepG2细胞,用ELISA法检测CAT的表达活性。结果成功获得细胞周期素B2启动子的止确克隆。pCAT3cyclinB2p和双环醇(106Mol/L)瞬时转染的HepG2细胞的CAT表达活性是pCAT3Basic空载体的2.4倍,pCAT3cyclinB2p的0.35倍。结论细胞周期素B2启动子有顺式激活下游基因的活性,双环醇具有对细胞周期素B2基因有下调作用。 展开更多
关键词 双环醇 细胞周期素b2 基因启动子 下调
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人肝再生增强因子上调细胞周期素B2基因的表达 被引量:3
10
作者 邵凤娟 成军 +3 位作者 马英骥 郭江 刘妍 王巧侠 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期646-649,共4页
目的研究人肝再生增强因子(ALR)转基因表达对细胞周期素B2启动子(cyclin B2p)转录的调节作用,从而进一步探讨ALR的生物学作用及机制。方法根据文献确定细胞周期素B2p区域,聚合酶链反应(PCR)扩增细胞周期素B2p,克隆至报告基因表达载体pCA... 目的研究人肝再生增强因子(ALR)转基因表达对细胞周期素B2启动子(cyclin B2p)转录的调节作用,从而进一步探讨ALR的生物学作用及机制。方法根据文献确定细胞周期素B2p区域,聚合酶链反应(PCR)扩增细胞周期素B2p,克隆至报告基因表达载体pCAT3-Basic中,构建pCAT3-cyclin B2p报告载体;以该质粒转染肝癌细胞系HepG2细胞系,同时与ALR的真核表达载体pcDNA3.1(-)-ALR共转染HepG2细胞系,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测报告基因氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性。结果成功构建pCAT3- cyclin B2p报告基因表达载体;pCAT3-cyclin B2p与pcDNA3.1(-)-ALR共转染HepG2细胞系的CAT表达活性是pCAT3-Basic空载体的25.13倍,是pCAT3-cyclin B2p单转染的2.60倍。结论人ALR对细胞周期素B2p基因的转录表达具有反式激活作用。 展开更多
关键词 肝再生增强因子 细胞周期素b2 启动子 反式激活
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丹参素对妊娠高血压大鼠妊娠结局的影响 被引量:4
11
作者 陈丽敏 汪佳佳 金苏菊 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期977-980,共4页
目的探究丹参素对妊娠高血压大鼠妊娠结局及胎盘组织胎盘生长因子(PLGF)、p21及细胞周期素B1(cyclinB1)蛋白表达的影响。方法用皮下注射L-精氨酸甲酯(L-NAME)建立妊娠高血压大鼠模型;将60只孕鼠随机分为对照组、模型组、实验组及阳性对... 目的探究丹参素对妊娠高血压大鼠妊娠结局及胎盘组织胎盘生长因子(PLGF)、p21及细胞周期素B1(cyclinB1)蛋白表达的影响。方法用皮下注射L-精氨酸甲酯(L-NAME)建立妊娠高血压大鼠模型;将60只孕鼠随机分为对照组、模型组、实验组及阳性对照组,每组15只。妊娠第17天起,实验组以尾静脉注射每日40 mg·kg^(-1)丹参素溶液,阳性对照组肌肉注射每日100 mg·kg^(-1)硫酸镁,对照组及模型组则尾静脉注射等量的生理盐水,各组均连续干预至妊娠第20天。分别于妊娠第17和20天用血压测量仪和邻苯三酚红法分别检测各组大鼠尾静脉压及24 h尿蛋白水平;于妊娠第21天剖腹取胎,统计各组妊娠结局;用蛋白免疫印迹法检测各组大鼠胎盘组织中胎盘生长因子(PLGF)、p21、细胞周期素B1(cyclinB1)蛋白表达水平。结果对照组、模型组、实验组及阳性对照组妊娠第17天尾静脉压分别为(102.09±4.21),(136.12±3.99),(135.87±4.02),(136.01±3.79)mmHg;第20天尾静脉压分别为(102.13±3.97),(136.24±3.95),(121.13±2.97),(122.85±3.01)mmHg;第17天大鼠24 h尿蛋白含量分别为(171.06±33.15),(633.21±49.87),(629.86±58.23),(628.97±61.20)mg·L^(-1);第20天大鼠24 h尿蛋白含量分别为(175.38±40.03),(637.96±58.15),(428.21±60.12),(445.37±59.64)mg·L^(-1);大鼠胎盘重量分别是(0.63±0.12),(0.45±0.13),(0.56±0.10),(0.53±0.11)g;胎鼠质量分别是(5.39±0.13),(4.05±0.09),(4.63±0.12),(4.58±0.14)g;PLGF蛋白相对表达量分别为0.31±0.07,0.11±0.05,1.19±0.12,1.05±0.10;p21蛋白相对表达量分别为0.41±0.11,1.38±0.07,0.81±0.11,0.97±0.09;cyclinB1蛋白相对表达量分别为0.94±0.13,0.21±0.07,0.61±0.11,0.57±0.09。模型组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);实验组及阳性对照组分别与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论丹参素可有效降低妊娠高血压大鼠血压,改善其妊娠结局,其作用机制可能与下调胎盘组织p21� 展开更多
关键词 妊娠高血压 丹参 胎盘生长因子 P21 细胞周期素b1
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人成釉细胞瘤中细胞周期素B_1的异常表达 被引量:2
12
作者 钟鸣 张英 +3 位作者 王洁 李自娟 包刚 岳阳丽 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期481-484,共4页
目的 :探讨人成釉细胞瘤 (ameloblastoma ,AB)中G2 /M期周期素B1临床生物学意义。方法 :采用免疫组化 (S P法 )对 73例AB(原发组 3 2例、复发组 3 3例、恶变组 8例 )进行了同期素B1检测 ,同时选取牙源性角化囊肿 (odontogenickeratocyst... 目的 :探讨人成釉细胞瘤 (ameloblastoma ,AB)中G2 /M期周期素B1临床生物学意义。方法 :采用免疫组化 (S P法 )对 73例AB(原发组 3 2例、复发组 3 3例、恶变组 8例 )进行了同期素B1检测 ,同时选取牙源性角化囊肿 (odontogenickeratocyst ,OKC) 19例 ,正常口腔黏膜 7例进行对比研究。结果 :cyclinB1(细胞周期蛋白B1)在正常口腔黏膜 2例中核阳性 ,7例OKC中的棘层细胞核为阳性。 46例AB核为阳性。三者相比P <0 .0 0 1。在AB中伴随复发与恶变核阳性表达增加 ,其中原发AB 13例 ,复发AB 2 5例 ,恶变AB 8例核为阳性 ,三者相比P <0 .0 5。结论 :cyclinB1与AB的发生复发及恶变的临床生物学行为相关 ,在G2 /M调控点上可能存在异常细胞周期进程。 展开更多
关键词 成釉细胞瘤 牙源性角化囊肿 细胞周期素b1 免疫组化
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模拟IMRT对CNE-2细胞周期及Cyclin D1/Cyclin B1表达的影响 被引量:1
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作者 王若峥 王多明 +2 位作者 李品东 黄莉 吾甫尔 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期914-917,930,共5页
目的探讨模拟调强放射治疗(IMRT)对人鼻咽低分化鳞癌细胞株(CNE-2)细胞周期及细胞周期素Cyclin D1、Cyclin B1转录水平的影响。方法CNE-2分为急速照射(ART)组和模拟IMRT组,两组分别给予6MVX线2、4、6和8Gy四个剂量点的照射;ART... 目的探讨模拟调强放射治疗(IMRT)对人鼻咽低分化鳞癌细胞株(CNE-2)细胞周期及细胞周期素Cyclin D1、Cyclin B1转录水平的影响。方法CNE-2分为急速照射(ART)组和模拟IMRT组,两组分别给予6MVX线2、4、6和8Gy四个剂量点的照射;ART组的照射时间为1~3min,模拟IMRT组的完成时间为35min。另设空白对照组,不接受照射,其余条件相同。照射后12h,流式细胞术分析细胞周期分布,RT—PCR检测细胞周期素Cyclin D1和Cyclin B1的转录水平。结果在相同剂量点,模拟IMRT组G2期细胞比例均低于ART组,两组G2期细胞比例随照射剂量的增加而逐渐增加。模拟IMRT组与ART组在相同剂量点之间比较,Cyclin D1转录水平的差异均无统计学意义(P均〉0.05);Cyclin B1转录水平的差异均有统计学意义(P均〈0.05),且随照射剂量的增加而下降,模拟IMRT组Cyclin B1的表达高于ART组。结论模拟IMRT照射时间延长对G2期阻滞作用下降,细胞周期素Cyclin B1的表达相对升高。 展开更多
关键词 人鼻咽低分化鳞癌细胞株 模拟调强放疗 细胞周期 细胞周期素b1 细胞周期素D1
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新基因NS5ATP4表达产物下调细胞周期素B2基因表达的研究 被引量:2
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作者 郭江 成军 +7 位作者 赵龙凤 杨倩 纪冬 曲建慧 高学松 刘妍 张黎颖 戴久增 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2005年第4期352-354,共3页
目的探讨新基因NS5ATP4表达产物对细胞周期素B2(cyclinB2)基因启动子转录的调节作用。方法根据文献确定细胞周期素B2的启动子区域,聚合酶链反应(PCR)扩增细胞周期素基因因启动子(B2p),克隆至真核报告基因表达载体pCAT3Basic中,构建pCAT3... 目的探讨新基因NS5ATP4表达产物对细胞周期素B2(cyclinB2)基因启动子转录的调节作用。方法根据文献确定细胞周期素B2的启动子区域,聚合酶链反应(PCR)扩增细胞周期素基因因启动子(B2p),克隆至真核报告基因表达载体pCAT3Basic中,构建pCAT3cyclinB2p报告载体;以该质粒转染肝癌细胞系HepG2细胞系,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测报告基因氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性并与pcDNA3.1()NS5ATP4共转染HepG2细胞系,用ELISA法检测CAT的表达活性。结果成功获得细胞周期素B2启动子的正确克隆。pCAT3cyclinB2p和pcDNA3.1()NS5ATP4共转染的HepG2细胞的CAT表达活性是pCAT3Basic空载体的10倍,pCAT3cyclinB2p的0.14倍。结论本文克隆的细胞周期素B2启动子有顺式调节下游基因表达的活性,NS5ATP4对细胞周期素B2基因的转录具有下调作用。 展开更多
关键词 NS5ATP4 细胞周期素b2 基因启动子 下调
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四环素诱导可控表达细胞周期素B1单克隆的筛选 被引量:2
15
作者 何乐亚 魏欣 +7 位作者 左学良 田铭 张永红 于冬冬 董硕 陶德定 胡俊波 龚建平 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第4期307-311,共5页
目的筛选四环素诱导细胞周期素B1(CyclinB1)可控表达的293单克隆细胞株(tetracycline-regulated expression 293 cells,T-REx^TM-293)。方法从人胎肝cDNA文库中PCR带有酶切位点的CyclinB1基因全长,将其酶切后插入到pcDNA4/TO/my... 目的筛选四环素诱导细胞周期素B1(CyclinB1)可控表达的293单克隆细胞株(tetracycline-regulated expression 293 cells,T-REx^TM-293)。方法从人胎肝cDNA文库中PCR带有酶切位点的CyclinB1基因全长,将其酶切后插入到pcDNA4/TO/myc-HisB载体中。然后用测序正确的质粒转染T-RExTM-293细胞,加杀稻瘟菌素(Blasticidin)和腐草霉素(Zeocirt)双药物筛选两周后,传96孔板,等单个细胞扩增出单克隆。然后用Western印迹和流式细胞仪检测CyclinB1的诱导表达情况。结果构建好的pcDNA4/TO/myc-HisB—CyclinB1载体,经鉴定序列正确。筛选出的单克隆细胞株,在未加四环素时没有外源性的CyclinB1表达,在加入四环素后,3h就有表达,随时间的增加,CyclinB1表达量也增加,48h最多。结论筛选出的T-REx^TM-293单克隆细胞株能可控表达CyclinB1。 展开更多
关键词 细胞周期素b1 四环 单克隆 T-RExr^TM-293
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Survivin和CyclinB1在膀胱癌中的表达及其意义 被引量:2
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作者 张学峰 曾甫清 汪良 《临床泌尿外科杂志》 2005年第7期432-434,共3页
目的:探讨存活素Survivin和cyclinB1在膀胱癌发病中的作用。方法:用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白———过氧化物酶法,检测52例膀胱癌组织Survivin和CyclinB1的表达,并和5例正常膀胱黏膜进行对照。结果:52例膀胱癌组织中Survivin阳性... 目的:探讨存活素Survivin和cyclinB1在膀胱癌发病中的作用。方法:用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白———过氧化物酶法,检测52例膀胱癌组织Survivin和CyclinB1的表达,并和5例正常膀胱黏膜进行对照。结果:52例膀胱癌组织中Survivin阳性表达率为82.7%(43/52),CyclinB1阳性率为75%(39/52),均主要表达于细胞浆。二者的联合表达率为71.5%(37/52),具有较强的相关性。结论:Survivin和CyclinB1在膀胱癌细胞分裂增殖过程中可能具有促进作用,是膀胱癌潜在的治疗靶点。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 存活 细胞周期素b1
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凋亡相关基因livin及cyclin B1在乳腺癌中的表达及意义
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作者 王勇军 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期575-577,共3页
目的:探讨livin在乳腺癌组织中的表达情况及其与细胞周期素B1(cyclin B1)的关系;方法:应用免疫组织化学方法检测Livin和cyclin B1在57例乳腺癌和10例正常乳腺组织中的表达情况,并分析livin和cyclin B1与临床病理学特征的关系。结果:Livi... 目的:探讨livin在乳腺癌组织中的表达情况及其与细胞周期素B1(cyclin B1)的关系;方法:应用免疫组织化学方法检测Livin和cyclin B1在57例乳腺癌和10例正常乳腺组织中的表达情况,并分析livin和cyclin B1与临床病理学特征的关系。结果:Livin和cyclin B1蛋白在乳腺癌阳性表达率分别为77.2%(44/57)和68.4%(39/57),两者的表达呈正相关性(γ=0.701,P<0.001);Livin的表达与淋巴结转移、年龄、临床分期、肿瘤大小未见显著相关性,cyclin B1的表达与淋巴结转移有显著相关性,而与年龄、临床分期、肿瘤大小未见明显相关性。结论:Livin和cyclin B1在乳腺癌组织中表达上调,提示其可能在乳腺癌发生、发展中起重要促进作用,cyclin B1和淋巴结转移的密切关系表明它的高表达可能反映患者较差的预后。 展开更多
关键词 乳腺癌 细胞周期素b1 LIVIN
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cyclin B1的启动子在乏氧条件下活性的变化 被引量:1
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作者 王昱 卢仲毅 朱宇熹 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期930-932,共3页
目的探讨细胞周期素B1(cyclin B1)的启动子在乏氧条件下活性的变化。方法采用PCR法获得对Hela细胞cy-clin B1的启动子,通过基因重组插入pGL3 promoter vector从而获得表达。荧光素酶的活性检测,了解通过双萤光素酶活性检测分析cyclin B... 目的探讨细胞周期素B1(cyclin B1)的启动子在乏氧条件下活性的变化。方法采用PCR法获得对Hela细胞cy-clin B1的启动子,通过基因重组插入pGL3 promoter vector从而获得表达。荧光素酶的活性检测,了解通过双萤光素酶活性检测分析cyclin B1的启动子在乏氧条件下活性的变化。结果双萤光素酶活性检测cyclin B1的启动子活性在乏氧条件下,表达明显下降。结论在乏氧条件下,Hela细胞的cyclin B1的启动子活性下降,可能是乏氧条件下肿瘤细胞的自我保护机制。 展开更多
关键词 乏氧 细胞周期素b1 启动子 HELA细胞 萤光
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儿童急性白血病生存素和细胞周期素B1基因表达 被引量:1
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作者 谭丽珍 刘壮 《第四军医大学学报》 北大核心 2006年第23期2179-2182,共4页
目的:探讨基因生存素,细胞周期素B1的表达与儿童急性白血病(AL)的关系.方法:采用RT-PCR对初治或复发AL患儿42例和完全缓解AL(AL-CR)患儿13例及非恶性疾病患儿15例骨髓单个核细胞进行基因生存素,细胞周期素B1表达的检测.结果:初治和复发A... 目的:探讨基因生存素,细胞周期素B1的表达与儿童急性白血病(AL)的关系.方法:采用RT-PCR对初治或复发AL患儿42例和完全缓解AL(AL-CR)患儿13例及非恶性疾病患儿15例骨髓单个核细胞进行基因生存素,细胞周期素B1表达的检测.结果:初治和复发AL组生存素mRNA表达水平分别为0.472和0.810,细胞周期素B1mRNA为0.609和0.739,均高于AL-CR组(0)和对照组(0)(P<0.01);复发AL组生存素mRNA表达水平高于初治组,有统计学差异(P=0.025).生存素基因的表达与白细胞总数及临床分型有关,与性别、年龄、免疫分型无明显相关性.细胞周期素B1表达与性别、年龄、免疫分型、白细胞总数及临床分型无明显相关关系.儿童AL中生存素与细胞周期素B1的表达呈正相关.生存素mRNA表达水平高者缓解率低.结论:儿童AL中存在生存素,细胞周期素B1异常表达,两者表达存在相关性.生存素是AL复发的高危因素;AL生存素高表达者可以降低AL的化疗敏感性,生存素水平对AL有判断疗效和预后的价值. 展开更多
关键词 生存基因 细胞周期素b1基因 急性白血病 逆转录聚合酶链反应
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人cyclin B1对神经胶质瘤细胞增殖、侵袭和转移的影响 被引量:1
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作者 高海滨 周剑云 +2 位作者 王利清 王宇 孙炜 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第40期43-44,共2页
目的探讨人细胞周期素B1(cyclin B1)对神经胶质瘤细胞增殖、侵袭和转移的影响。方法将体外培养的神经胶质瘤细胞U87MG随机分为high cyclin B1组、control cyclin B1组、cyclin B1 siRNA组、control siRNA组,high cyclin B1组、control c... 目的探讨人细胞周期素B1(cyclin B1)对神经胶质瘤细胞增殖、侵袭和转移的影响。方法将体外培养的神经胶质瘤细胞U87MG随机分为high cyclin B1组、control cyclin B1组、cyclin B1 siRNA组、control siRNA组,high cyclin B1组、control cyclin B1组瞬时转染pc DNA3.1 cyclin B1及空载体,cyclin B1 siRNA组、control siRNA组瞬时转染p GCsi-U6/Neo/GFP/sh cyclin B1及空载体。转染0、24、48、72 h时采用酶联免疫检测仪测定各组光密度(OD)值,转染48 h时采用Transwell小室检测侵袭及转移细胞数。结果培养24、48、72 h时high cyclin B1组OD值均高于control cyclin B1组(P均<0.05),cyclin B1 siRNA组均低于control siRNA组(P均<0.05)。培养48、72 h时high cyclin B1组OD值均高于cyclin B1 siRNA组(P均<0.05)。high cyclin B1组培养48 h时侵袭及转移细胞数均高于control cyclin B1组及cyclin B1 siRNA组(P均<0.05),cyclin B1 siRNA组侵袭及转移细胞数均低于control siRNA组(P均<0.05)。结论 cyclin B1可促进神经胶质瘤细胞增殖、侵袭和转移。 展开更多
关键词 神经胶质细胞瘤 细胞周期素b1 细胞增殖 侵袭 转移
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