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周期性机械应力通过激活EGFR-ERK1/2信号通路促进大鼠软骨细胞增殖和细胞外基质合成 被引量：8
1
作者 任科伟 范卫民 +2 位作者 姜雪峰 张云庆 周正明 《江苏医药》 CAS 北大核心 2013年第21期2526-2528,共3页
目的探讨周期性机械应力促进大鼠软骨细胞增殖和细胞外基质合成的细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2信号传导机制。方法取第二代大鼠软骨细胞,随机分为预处理组和对照组。预处理组采用上皮生长因子受体(EGFR)特异性抑制剂(AG1478)阻断EGFR的活... 目的探讨周期性机械应力促进大鼠软骨细胞增殖和细胞外基质合成的细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2信号传导机制。方法取第二代大鼠软骨细胞,随机分为预处理组和对照组。预处理组采用上皮生长因子受体(EGFR)特异性抑制剂(AG1478)阻断EGFR的活化;对照组不给予特殊预处理。两组细胞分别在有、无周期性机械应力条件下培养,1h后采用Western blot检测ERK1/2的表达和磷酸化水平;8h后采用Real-time PCR检测aggrecan和Ⅱ型胶原的基因表达水平。两组细胞分别在有、无周期性机械应力条件下每天培养8h,连续3d后采用CCK-8法检测细胞增殖。结果当EGFR被抑制以后,周期性机械应力促进的软骨细胞增殖和细胞外基质合成均显著降低,而且ERK1/2的磷酸化水平也下降(P<0.05)。结论周期性机械应力通过激活EGFRERK1/2信号通路促进大鼠软骨细胞增殖和细胞外基质合成。 展开更多
关键词 周期性机械应力 软骨细胞
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过度周期性机械应力刺激可引起软骨细胞炎症反应及凋亡 被引量：4
2
作者 伍伟挺 黎润光 +1 位作者 曹生鲁 梁双武 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第29期4608-4613,共6页
背景:软骨细胞为软骨的惟一细胞成分,软骨细胞表型丢失是骨关节炎的特征性改变,而周期性机械应力刺激对软骨细胞的生物特性有重要影响,明确周期性机械应力对软骨细胞的作用机制可为骨关节炎的治疗提供借鉴。目的:观察周期性机械应力对... 背景:软骨细胞为软骨的惟一细胞成分,软骨细胞表型丢失是骨关节炎的特征性改变,而周期性机械应力刺激对软骨细胞的生物特性有重要影响,明确周期性机械应力对软骨细胞的作用机制可为骨关节炎的治疗提供借鉴。目的:观察周期性机械应力对体外软骨细胞炎症反应和凋亡的影响。方法:将原代大鼠软骨细胞接种于Ⅰ型胶原包被的Bioflex板中培养1 d后,采用细胞体外加力实验系统(Flexcell-5000T Tension System)处理细胞,在拉伸频率为0.5 Hz条件下将软骨细胞拉伸24 h,依据拉伸应变率大小分为对照组(0%拉伸)、2%拉伸组、6%拉伸组、8%拉伸组、10%拉伸组、14%拉伸组。拉伸结束后采用ELISA法检测软骨细胞炎症反应(白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α),TUNEL染色及Annexin V-FITC/PI法检测凋亡情况,利用RT-PCR检测内质网应激信号分子(半胱氨酸蛋白酶12、蛋白激酶R样内质网激酶、葡萄糖调节蛋白78)。结果与结论:①光镜下可观察到正常细胞(对照组)为多角形,形态不规则;而随机械拉伸应变率增加,细胞有不同程度脱落,边缘模糊变圆,出现凋亡现象;②与对照组相比,施力组白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α升高,尤其是10%拉伸组、14%拉伸组升高较明显(P<0.05);③周期性机械应力作用下,2%、6%拉伸组细胞凋亡率分别为(12.45±1.64)%,(12.48±1.75)%,与对照组(12.14±1.43)%相比差异无显著性意义(P>0.05);而8%、10%、14%拉伸组软骨细胞凋亡率[(29.18±3.04)%,(34.12±3.57)%,(44.32±45.08)%]显著增加(P<0.05);④RT-PCR检测结果显示,8%、10%、14%拉伸组半胱氨酸蛋白酶12、蛋白激酶R样内质网激酶、葡萄糖调节蛋白78的mRNA表达量明显高于对照组(P<0.05);⑤提示周期性机械应力可加速软骨细胞凋亡过程,促进软骨细胞炎症反应,可能与内质网应激通路启动有关。 展开更多
关键词 周期性机械应力 体外研究 软骨细胞 炎症反应 凋亡
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周期性机械应力条件下大鼠软骨细胞的蛋白质组学分析 被引量：2
3
作者 许舜 李曾 +1 位作者 翟晨骏 范卫民 《江苏医药》 CAS 2016年第8期869-871,I0001,共4页
目的应用定量蛋白质组学技术筛选周期性机械应力条件下大鼠软骨细胞差异表达蛋白质。方法将体外培养的大鼠软骨细胞随机分为对照组和周期性机械应力组,分别提取细胞蛋白,并依次进行同位素标记、液相色谱分离、质谱鉴定和生物信息学分析... 目的应用定量蛋白质组学技术筛选周期性机械应力条件下大鼠软骨细胞差异表达蛋白质。方法将体外培养的大鼠软骨细胞随机分为对照组和周期性机械应力组,分别提取细胞蛋白,并依次进行同位素标记、液相色谱分离、质谱鉴定和生物信息学分析。结果共鉴定出5468个蛋白,差异性表达蛋白为485个;其中上调168个,下调317个。经生物信息学分析,共有478个蛋白被6079条基因本体论(GO)功能条目注释,230个蛋白参与了241条京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路。结论成功构建周期性机械应力条件下大鼠软骨细胞差异蛋白质表达谱,为周期性机械应力促进大鼠软骨细胞增殖和细胞外基质合成的机制研究提供实验基础。 展开更多
关键词 周期性机械应力 蛋白质组学 软骨细胞
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周期性机械应力对大鼠软骨细胞增殖的影响 被引量：1
4
作者 胡海 刘旭卓 +1 位作者 贾维中 徐西林 《川北医学院学报》 CAS 2020年第1期35-37,56,共4页
目的:探讨周期性机械应力对大鼠软骨细胞增殖的影响。方法:通过Ⅱ型胶原酶消化分离大鼠原代软骨细胞,并将软骨细胞分为对照组和实验组。MTT法检测细胞活力,实时荧光定量PCR(Realtime PCR)法检测蛋白聚糖(Aggrecan)及Ⅱ型胶原酶(ColⅡ)m... 目的:探讨周期性机械应力对大鼠软骨细胞增殖的影响。方法:通过Ⅱ型胶原酶消化分离大鼠原代软骨细胞,并将软骨细胞分为对照组和实验组。MTT法检测细胞活力,实时荧光定量PCR(Realtime PCR)法检测蛋白聚糖(Aggrecan)及Ⅱ型胶原酶(ColⅡ)mRNA的表达,western blot检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、增殖细胞抗原(PCNA)及细胞周期蛋白D1(CyclinD1)蛋白表达水平与细胞外调节蛋白激酶(ERK)磷酸化水平。结果:与对照组比较,实验组1 h、2 h的软骨细胞活力均明显提高(P<0.05),Aggrecan及ColⅡmRNA表达量均明显提高(P<0.05),Bcl-2、PCNA及CyclinD1蛋白表达量均明显上调(P<0.05),ERK1/2磷酸化水平明显上调(P<0.05)。结论:周期性机械应力能显著促进软骨细胞增殖。 展开更多
关键词 周期性机械应力 软骨细胞 增殖
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周期性机械应力通过IGF1R调控兔关节软骨细胞增殖和细胞外基质合成实验研究
5
作者 胡海 刘旭卓 +1 位作者 刘沛然 刘泽霖 《川北医学院学报》 CAS 2020年第3期370-373,共4页
目的:探讨周期性机械应力下胰岛素样生长因子1型受体(IGF1R)对兔关节软骨细胞增殖和细胞外基质(ECM)合成的影响。方法:分离培养1只新西兰白兔的关节软骨细胞,分为对照组、加压组、加压+IGF1R阻断组,3组细胞分别在无周期性机械应力条件... 目的:探讨周期性机械应力下胰岛素样生长因子1型受体(IGF1R)对兔关节软骨细胞增殖和细胞外基质(ECM)合成的影响。方法:分离培养1只新西兰白兔的关节软骨细胞,分为对照组、加压组、加压+IGF1R阻断组,3组细胞分别在无周期性机械应力条件下、周期性机械应力场中、加入5μmol/L IGF1R特异性抑制剂OSI-906后于周期性机械应力场中培养1 h。采用CCK8法检测各组软骨细胞增殖率,采用Western blot法检测各组软骨细胞中IGF1R、Aggrecan、Ⅱ型胶原(Col-Ⅱ)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、磷酸化丝氨酸苏氨酸激酶(p-AKT)蛋白表达量。结果:加压组软骨细胞增殖率明显高于对照组(P<0.05);加压+IGF1R阻断组软骨细胞增殖率明显低于加压组(P<0.05),但与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);软骨细胞IGF1R、Aggrecan、Col-Ⅱ、PI3K、p-AKT蛋白表达量比较,加压组和加压+IGF1R阻断组明显高于对照组(P<0.05),加压+IGF1R阻断组明显低于加压组(P<0.05)。结论:周期性机械应力通过上调兔关节软骨细胞中IGF1R,将机械信号转化为生物化学信号,激活PI3K/Akt信号通路,从而促进兔关节软骨细胞增殖和ECM合成。 展开更多
关键词 周期性机械应力 胰岛素样生长因子1型受体 兔 关节软骨细胞 细胞增殖 细胞外基质 PI3K/AKT信号通路
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机械压应力刺激对人牙髓干细胞体外增殖矿化的影响 被引量：4
6
作者 肖敏 陈博 +2 位作者 李明伟 何文喜 余擎 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2015年第4期187-192,共6页
目的:研究不同大小的周期性机械压应力刺激对人牙髓干细胞(h DPSCs)体外增殖和矿化的影响。方法:用体外离心力加压模式,对各组h DPSCs施加30 min/d、大小分别为170、210、250 g的周期性机械压应力刺激,以不加力组作为对照。分别利用CCK-... 目的:研究不同大小的周期性机械压应力刺激对人牙髓干细胞(h DPSCs)体外增殖和矿化的影响。方法:用体外离心力加压模式,对各组h DPSCs施加30 min/d、大小分别为170、210、250 g的周期性机械压应力刺激,以不加力组作为对照。分别利用CCK-8试剂盒及碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测各组h DPSCs的增殖情况及ALP活性;茜素红染色检测各组h DPSCs的矿化能力;透射电镜观察各组h DPSCs的超微结构。结果:3种大小的机械压应力刺激均可显著抑制h DPSCs增殖、ALP活性显著下降(P<0.05);各加力组形成的矿化结节明显减少,且以250 g的应力刺激对矿化能力的抑制最为显著(P<0.05)。结论:一定大小、频率范围内的周期性机械压应力刺激可抑制人牙髓干细胞体外增殖和矿化,且对矿化的抑制作用与周期性机械压应力大小成正相关。 展开更多
关键词 牙髓干细胞 周期性机械压应力 增殖 矿化
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