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不同启动子相关双链小分子RNA介导激活p21 Waf1/Cip1 基因研究 被引量：3
1
作者 龚化 陈忠 +3 位作者 盖强强 汪成合 李凡 叶章群 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期2990-2992,共3页
目的探讨针对p21基因启动子序列不同转录起始位点设计的小双链RNA（dsRNA）对p21基因表达的正向调控作用。方法针对p21基因启动子DNA序列设计合成4对dsRNA分子dsP21．382、dsP21-436、dsP21-484、dsP21—625，转染人体外培养的人膀胱肿... 目的探讨针对p21基因启动子序列不同转录起始位点设计的小双链RNA（dsRNA）对p21基因表达的正向调控作用。方法针对p21基因启动子DNA序列设计合成4对dsRNA分子dsP21．382、dsP21-436、dsP21-484、dsP21—625，转染人体外培养的人膀胱肿瘤细胞株5637细胞及T24细胞中，并以具有激活功能的dsRNA分子dsP21—322作为阳性对照，以未转染的5637和T24细胞为空白对照，以dsControl为阴性对照。采用实时定量聚合酶链反应（Real-timePCR）和Westernblot等观察各dsRNA转染后，细胞内p21基因mRNA及蛋白表达量的差异，以及dsRNA转染对肿瘤细胞株生长的影响。结果PCR结果显示，与空白对照组比较，dsP21—382、dsP21-436、dsP21-484、dsP21-625分别上调5637细胞中p21mRNA的表达1．56、1．88、2．41和1．74倍（P〈0．05），dsP21-382、dsP21-436、dsP21-484、dsP21-625分别上调T24细胞中021mRNA的表达1．71、1．69、2．62和1．85倍（P〈0．05）。Westernblot结果显示，与空白对照组比较，p21蛋白表达的升高与021mRNA水平的升高一致。4对dsRNA均能显著抑制膀胱肿瘤细胞株的生长。结论dsRNA对基因表达正向调控作用可能是一种普遍现象。 展开更多
关键词 RNA激活 小激活RNA P21基因 启动子相关
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