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高等植物启动子的研究进展 被引量：54
1
作者 王颖 麦维军 +1 位作者 梁承邺 张明永 《西北植物学报》 CAS CSCD 2003年第11期2040-2046,共7页
启动子是基因表达调控的重要顺式元件,综述了高等植物启动子的构成,包括转录起始位点、TATA框和上游启动子元件。并着重从组成型、组织特异型和诱导型启动子3个方面介绍了其结构特征、功能,以及它们在植物基因工程中的应用和研究进展,... 启动子是基因表达调控的重要顺式元件,综述了高等植物启动子的构成,包括转录起始位点、TATA框和上游启动子元件。并着重从组成型、组织特异型和诱导型启动子3个方面介绍了其结构特征、功能,以及它们在植物基因工程中的应用和研究进展,简述了双向启动子、可变启动子和串联启动子的研究情况,提出植物启动子研究中存在的问题与展望。 展开更多
关键词 启动子 顺式作用元件 组成型启动子 组织特异型启动子 诱导型启动子
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高等植物启动子研究进展 被引量：41
2
作者 李一琨 王金发 《植物学通报》 CSCD 1998年第A00期1-6,共6页
简述了高等植物来源启动子的多种保守顺式调控元件如ＴＡＴＡ盒、转录起始位点、Ｇ盒等，以及双向启动子和可变启动子。着重介绍了受环境包括激素、光、创伤、真菌、逆境等因子诱导表达的植物启动子以及显示出植物发育特异性表达的启动子。
关键词 启动子 顺式作用元件 发育特异性 高等植物
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启动子克隆概述 被引量：44
3
作者 孙晓红 陈明杰 潘迎捷 《食用菌学报》 2002年第3期57-62,共6页
启动子是基因表达调控的重要顺式元件 ,也是基因工程表达载体的一个重要元件。笔者阐述了启动子的结构、分类、克隆方法及其意义 。
关键词 启动子 克隆 结构 分类 食用菌
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高等植物启动子的研究进展 被引量：45
4
作者 李杰 张福城 +1 位作者 王文泉 黄丽云 《生物技术通讯》 CAS 2006年第4期658-661,共4页
从高等植物启动子的基本结构、启动子克隆方法入手,着重介绍了组成型、组织特异性及诱导型启动子的研究进展及其在植物基因工程方面的应用情况,提出了植物启动子研究中存在的问题与展望。
关键词 启动子 启动子类型 基因工程
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转Zm13-Barnase基因玉米的获得及其花粉育性研究 被引量：30
5
作者 刘大文 王守才 +1 位作者 谢友菊 戴景瑞 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2000年第6期611-615,共5页
研究了Z31×Q31、H×Z3、A188×B73三种玉米 (ZeamaysL .)基因型的愈伤组织对除草剂Bialaphos的耐性 ,从而确定 5mg·L-1为适宜的选择压。用基因枪将Zm13_Barnase基因转化玉米Q31×Z3、Z31×Q31的胚性愈伤组织 ... 研究了Z31×Q31、H×Z3、A188×B73三种玉米 (ZeamaysL .)基因型的愈伤组织对除草剂Bialaphos的耐性 ,从而确定 5mg·L-1为适宜的选择压。用基因枪将Zm13_Barnase基因转化玉米Q31×Z3、Z31×Q31的胚性愈伤组织 ,经 6轮的除草剂筛选获得 32块抗性愈伤组织 ,再生得到 2 4个植株。经PCR检测 ,18个植株PCR反应呈阳性。I_KI染色和花粉离体萌发观察发现 ,5个植株的花粉为部分不育。Southernblot分析证明 ,这 5个植株中整合有Bar nase基因。 展开更多
关键词 玉米 核酸酶基因 雄性不育 转基因技术 启动子
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植物非生物胁迫诱导启动子顺式元件及转录因子研究进展 被引量：55
6
作者 郭晋艳 郑晓瑜 +1 位作者 邹翠霞 李秋莉 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期16-20,30,共6页
顺式作用元件(cis-acting element)是与结构基因串联的特定DNA序列,是转录因子的结合位点,它们通过与转录因子结合调控基因转录的精确起始和转录效率,在植物基因表达调控过程中起着重要的作用。非生物胁迫诱导基因的表达受其上游启动子... 顺式作用元件(cis-acting element)是与结构基因串联的特定DNA序列,是转录因子的结合位点,它们通过与转录因子结合调控基因转录的精确起始和转录效率,在植物基因表达调控过程中起着重要的作用。非生物胁迫诱导基因的表达受其上游启动子顺式作用元件及转录因子的调控,目前已发现了多种与非生物胁迫相关的顺势作用元件及转录因子,如DRE元件及DREB类转录因子、MYB元件及MYB类转录因子、GT-1元件及GT-1类转录因子等。顺式作用元件及转录因子的研究对研究植物非生物胁迫相关基因的表达调控具有重要意义,综述植物非生物胁迫诱导启动子功能元件及转录因子的研究进展。 展开更多
关键词 非生物胁迫 启动子 顺式作用元件 转录因子
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提高转基因植物外源基因表达效率的途径 被引量：22
7
作者 皮灿辉 易自力 王志成 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2003年第1期1-4,10,共5页
目前 ,外源基因在转基因植物中表达效率低是一个普遍存在而又亟待解决的问题。现结合当前国内外在植物基因工程中取得的进展 ,初步探讨实现外源基因高效表达的种种途径 ,包括 :启动子的选择和改造 ;目的基因的改造 ;构建含有核基质结合... 目前 ,外源基因在转基因植物中表达效率低是一个普遍存在而又亟待解决的问题。现结合当前国内外在植物基因工程中取得的进展 ,初步探讨实现外源基因高效表达的种种途径 ,包括 :启动子的选择和改造 ;目的基因的改造 ;构建含有核基质结合区的表达载体 ;建立位点特异重组体系 ;利用细胞器定位信号和采用叶绿体进行转化等。同时对这些方法在实际应用中存在的问题和前景提出了一些看法。 展开更多
关键词 转基因植物 外源基因 表达效率 启动子 定位信号
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高等植物启动子功能和结构研究进展 被引量：29
8
作者 夏江东 程在全 +1 位作者 吴渝生 季鹏章 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 2006年第1期7-14,共8页
启动子是控制植物基因表达的重要DNA序列结构,文章简述了启动子的定义、分类和启动子的研究策略。并着重从组成型启动子、组织特异型启动子和诱导型启动子3个方面介绍了它们的功能和结构的研究现状。提出了植物基因工程中启动子研究存... 启动子是控制植物基因表达的重要DNA序列结构,文章简述了启动子的定义、分类和启动子的研究策略。并着重从组成型启动子、组织特异型启动子和诱导型启动子3个方面介绍了它们的功能和结构的研究现状。提出了植物基因工程中启动子研究存在的问题与展望。 展开更多
关键词 启动子 组成型启动子 组织特异型启动子 诱导型启动子
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玉米C_4型pepc基因的分子克隆及其在小麦的转基因研究 被引量：34
9
作者 陈绪清 张晓东 +3 位作者 梁荣奇 张立全 杨凤萍 曹鸣庆 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第19期1976-1982,共7页
通过LA-PCR方法，从玉米材料中获得了完整的C4型pepc基因．与GenBank中玉米C4型磷酸烯醇式丙酮酸竣化酶(phosphoenolpyruvate carboxylase，PEPC)基因序列进行同源性分析，结果表明，DNA序列的同源性达98．96％，mRNA同源性达99．38％... 通过LA-PCR方法，从玉米材料中获得了完整的C4型pepc基因．与GenBank中玉米C4型磷酸烯醇式丙酮酸竣化酶(phosphoenolpyruvate carboxylase，PEPC)基因序列进行同源性分析，结果表明，DNA序列的同源性达98．96％，mRNA同源性达99．38％，蛋白质的氧基酸推测序列同源性为99.38％，在DNA水平，两者之间有49处碱基差异，18处发生在内含子区，18处发生在外显子处．在mRNA水平，两者之间有15处差异，但是这些差异在蛋白质水平上仅导致了4个非连续排列的氨基酸差异，进一步构建了该基因包括5’启动子、3’非编码区以及内含子在内的完整序列(6．7kb)和以CaMV 35S启动子驱动的bar基因为选择标记的表达载体pBAC214(12kb)．通过PDS1000／He基因枪转化法，获得了该基因的转基因小麦植株．对转基因小麦进行Southern鉴定，结果表明来自玉米的pepc基因完全整合到了小麦基因组中．通过对转基因小麦叶片的可溶性蛋白质SDS-PAGE电泳分析，表明该基因在小麦中获得了正确的转录、剪接和翻译．通过对转基因小麦叶片中PEPC酶活性的初步测定，发现部分转基因植株叶片中PEPC酶活性提高了3～5倍，与玉米叶片中的PEPC酶活性相当，对转基因小麦旗叶光合生理指标进行测定，发现部分转基因植株光合速率有所提高，并且气孔的开放程度与叶片中的PEPC活性紧密相关，说明完整的玉米C4型pepc基因在小麦中可以正确表达，并起到一定的生理作用． 展开更多
关键词 玉米 转基因小麦 叶片 转基因植株 酶活性 BAR基因 光合生理指标 c基因 e基因 启动子
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肝内和肝外胆管癌肿瘤抑制基因启动子甲基化分析 被引量：46
10
作者 YANG Bin Michael G.House +2 位作者 GUO Mingzhou James G.Herman Douglas P.Clark 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2005年第1期59-65,共7页
目的　探讨胆管癌的表遗传学改变。方法　用甲基化特异PCR(MSP)法 ,检测了 12个候选肿瘤抑制基因 (APGE cad herin/CDH1,MGMT ,RASSF1A ,GSTP ,RAR β ,p14 ARF,p15 INK4b,p16INK4a,p73 ,hMLH1,DAPK)启动子在 72例胆管癌中的甲基化情... 目的　探讨胆管癌的表遗传学改变。方法　用甲基化特异PCR(MSP)法 ,检测了 12个候选肿瘤抑制基因 (APGE cad herin/CDH1,MGMT ,RASSF1A ,GSTP ,RAR β ,p14 ARF,p15 INK4b,p16INK4a,p73 ,hMLH1,DAPK)启动子在 72例胆管癌中的甲基化情况 ,其中肝内和肝外胆管癌各 3 6例 ,10例良性胆管上皮作为对照。结果　 85 %的胆管癌至少有一个肿瘤抑制基因的甲基化 ,在胆管癌中 ,肿瘤抑制基因的甲基化顺序是 :RASSF1A(65 %) ,p15 INK4b(5 0 %) ,p16INK4a(5 0 %) ,APC(4 6%) ,E cadherin/CDH1(4 3 %) ,p14 ARF(3 8%) ,p73 (3 6%) ,MGMT(3 3 %) ,hMHL1(2 5 %) ,GSTP(14 %) ,RAR β(14 %)和DAPK(3 %)。虽然单个肿瘤抑制基因的甲基化可见于良性胆管上皮 ,但是多个肿瘤抑制基因的甲基化只见于胆管癌。约 70 %(5 0 /72 )的胆管癌有 3个或 3个以上的肿瘤抑制基因的甲基化 ,5 2 %(3 8/72 )有 4个或 4个以上肿瘤抑制基因的甲基化。多个肿瘤抑制基因的协同甲基化 ,和RASSF1A ,p15 INK4b,p16INK4a和 /或hMHL1密切相关。RASSF1A的甲基化在肝外胆管癌 (83 %)较肝内胆管癌更常见 (4 7%) (P =0 . 0 0 3 ) ,而GSTP更多见于肝内胆管癌(肝内 3 1%,肝外 6%,P =0 . 0 12 ) ,本研究提示肿瘤抑制基因启动子CpG岛的甲基化在胆管癌中是一? 展开更多
关键词 甲基化 肝外胆管癌 肿瘤抑制基因 肝内 P14^ARF 常见 良性 启动子 MGMT p16^
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用衔接头PCR克隆新的胡萝卜Ⅱ型转化酶基因启动子 被引量：19
11
作者 王新国 肖成祖 +1 位作者 张国华 方荣祥 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期61-65,共5页
为克隆新的胡萝卜 型转化酶基因启动子 ,将胡萝卜基因组 DNA分别用 Pvu 、Eco R 、Dra 和 Sma 酶切 ,酶切片段与一特殊的衔接头连接 .取连接产物作模板 ,以衔接头引物和基因特异引物做 PCR,得到的主要 PCR产物分别为 3.4kb、1 .3kb、0 ... 为克隆新的胡萝卜 型转化酶基因启动子 ,将胡萝卜基因组 DNA分别用 Pvu 、Eco R 、Dra 和 Sma 酶切 ,酶切片段与一特殊的衔接头连接 .取连接产物作模板 ,以衔接头引物和基因特异引物做 PCR,得到的主要 PCR产物分别为 3.4kb、1 .3kb、0 .4kb和 0 .6kb.将 Eco R -衔接头体系的 PCR产物克隆和测序 ,并将其序列与 Gen Bank中的已知序列进行比较分析 ,发现了一个新的胡萝卜 型转化酶启动子序列 ,它含有类似于 TATA box和 CAAT box的元件 ,在启动子的远上游区域还含有多个 AT富含区 .该启动子的发现对于研究植物中糖代谢具有重要意义 . 展开更多
关键词 衔接头PCR Ⅱ型转化酶 启动子 胡萝卜 糖代谢
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杨树皮储藏蛋白基因启动子的克隆和功能研究 被引量：22
12
作者 蒋浩 秦红敏 +1 位作者 田颖川 DeanW.Gabriel 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 1999年第5期46-50,共5页
杨树树皮储藏蛋白BSP是类似种子储藏蛋白的氮素储藏物 ,冬季在韧皮部薄壁细胞中大量积累 ,是落叶树氮代谢中的重要成分。为了研究BSP基因启动子在转基因植物中的表达特性 ,探索其在植物基因工程研究中潜在的应用价值 ,我们用PCR方法从... 杨树树皮储藏蛋白BSP是类似种子储藏蛋白的氮素储藏物 ,冬季在韧皮部薄壁细胞中大量积累 ,是落叶树氮代谢中的重要成分。为了研究BSP基因启动子在转基因植物中的表达特性 ,探索其在植物基因工程研究中潜在的应用价值 ,我们用PCR方法从美洲黑杨基因组中DNA扩增得到了BSA启动子片段。与GUS基因融合构建中间载体后 ,转化烟草 ,获得了一批PCR检测为阳性的转化再生植株。经GUS组织化学检测 ,发现若干转基因烟草的茎和叶柄韧皮部以及叶脉都呈GUS染色阳性 ,初步证明杨树BSP基因启动子确有韧皮部表达特性 ,可介导GUS基因在转基因烟草韧皮部特异表达。 展开更多
关键词 杨树 启动子 GUS基因 树皮 储藏蛋白
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拟南芥菜花药绒毡层启动子的克隆和序列分析 被引量：11
13
作者 刘大文 谢友菊 +1 位作者 王守才 戴景瑞 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期406-410,共5页
以拟南芥菜 ( Arabidopsis thaliana)基因组 DNA为模板 ,通过 PCR扩增得到绒毡层特异表达基因 A9的启动子片段 ,克隆到 p UC18载体上。序列分析表明 ,该启动子大小为 360 bp,RNA聚合酶识别序列 TATA box,花药特异表达和增强序列 TGTGG、... 以拟南芥菜 ( Arabidopsis thaliana)基因组 DNA为模板 ,通过 PCR扩增得到绒毡层特异表达基因 A9的启动子片段 ,克隆到 p UC18载体上。序列分析表明 ,该启动子大小为 360 bp,RNA聚合酶识别序列 TATA box,花药特异表达和增强序列 TGTGG、 TGTGA两个 Motifs皆完整 ,与已报道的序列比较仅有 3个核苷酸发生改变 ,同源性为 99.2 %。该启动子与 GUS基因融合后用基因枪转化玉米花药 ,荧光分析显示花药中有 GUS酶活性存在。 展开更多
关键词 拟南芥菜 启动子 花药特异表达 遗传转化 克隆
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人类polⅡ启动子的识别 被引量：26
14
作者 吕军 罗辽复 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1185-1191,共7页
依据基因启动子区和非启动子区碱基分布的特征,应用基于多样性增量的二次判别分析(IDQD),对人类polⅡ启动子进行识别,识别精度达到90%以上的水平,优于其他已发表的(包括SVM分类器等)识别算法.使用IDQD算法也能对转录起始位点(TSS)进行... 依据基因启动子区和非启动子区碱基分布的特征,应用基于多样性增量的二次判别分析(IDQD),对人类polⅡ启动子进行识别,识别精度达到90%以上的水平,优于其他已发表的(包括SVM分类器等)识别算法.使用IDQD算法也能对转录起始位点(TSS)进行较准确的预测,10-fold交叉检验结果的敏感性和特异性分别为86%和91%.这些结果表明IDQD是一个有效的分类器. 展开更多
关键词 启动子 多样性增量 二次判别函数 转录起始位点
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斑马鱼Mylz2启动子的克隆与转绿色荧光蛋白基因鱼的构建 被引量：30
15
作者 简清 白俊杰 +3 位作者 叶星 夏仕玲 梁旭方 罗建仁 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期391-395,共5页
为获得能在肌肉表达绿色荧光蛋白的转基因斑马鱼(Brachydaniorerio),采用PCR方法,从斑马鱼基因组DNA中分离了肌球蛋白轻链2启动子,序列分析表明,该启动子与国外文献报道的斑马鱼肌球蛋白轻链2启动子序列的相似性为98.6%。将改造后的启... 为获得能在肌肉表达绿色荧光蛋白的转基因斑马鱼(Brachydaniorerio),采用PCR方法,从斑马鱼基因组DNA中分离了肌球蛋白轻链2启动子,序列分析表明,该启动子与国外文献报道的斑马鱼肌球蛋白轻链2启动子序列的相似性为98.6%。将改造后的启动子插入绿色荧光蛋白基因载体,构建成肌肉特异性表达载体。通过显微注射,将线性化的表达载体注入斑马鱼的受精卵,获得了转绿色荧光蛋白基因的斑马鱼。绿色荧光蛋白在胚胎期开始表达,随着鱼体的生长表达量有增加的趋势,成鱼在紫外灯下用肉眼即可观察到绿色荧光。转基因鱼绿色荧光蛋白的表达具有明显的肌肉特异性。本研究为下一步特定基因的表达研究和获得有特色的转基因观赏鱼奠定了基础。 展开更多
关键词 斑马鱼 绿色荧光蛋白 转基因 肌球蛋白 启动子
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ACC氧化酶基因研究进展 被引量：22
16
作者 陈银华 黄伟 王海 《海南大学学报（自然科学版）》 CAS 2006年第2期194-200,共7页
乙烯作为植物的五大类激素之一,在植物的生长发育过程中发挥着重要作用.而乙烯在植物体内的生物合成主要是由ACC合成酶和ACC氧化酶这2个限速酶来控制的,通过调节它们的表达能有效地调节乙烯的合成量.本文就ACC氧化酶基因克隆及表达调控... 乙烯作为植物的五大类激素之一,在植物的生长发育过程中发挥着重要作用.而乙烯在植物体内的生物合成主要是由ACC合成酶和ACC氧化酶这2个限速酶来控制的,通过调节它们的表达能有效地调节乙烯的合成量.本文就ACC氧化酶基因克隆及表达调控进行了综述,并对其应用前景进行了展望. 展开更多
关键词 乙烯 ACC氧化酶 基因克隆 启动子
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真核基因在pET系统中表达出现的问题与拟解决的方案 被引量：23
17
作者 张锐 孙美榕 +1 位作者 欧阳红生 张玉静 《生物技术》 CAS CSCD 2004年第2期62-63,共2页
pET表达系统是以噬菌体的T7为启动子 ,可以从各种基因 (包括原核、真核细胞 )生产大量的目的蛋白[1 ] ,然而一些真核基因在pET表达系统中的蛋白表达量却很少 ,有许多因素影响真核基因在该表达系统中的表达 ,如信号肽序列、毒性基因与质... pET表达系统是以噬菌体的T7为启动子 ,可以从各种基因 (包括原核、真核细胞 )生产大量的目的蛋白[1 ] ,然而一些真核基因在pET表达系统中的蛋白表达量却很少 ,有许多因素影响真核基因在该表达系统中的表达 ,如信号肽序列、毒性基因与质粒的稳定性、mRNA转录的二级结构和稀有密码子 ,以及实际操作过程中表达条件等均会影响真核基因在pET系统中的表达。该文旨在分析其主要原因 ,并提出拟解决的方案 ,以达到满意的高效表达。 展开更多
关键词 真核基因 原核表达系统 噬菌体 启动子
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人端粒酶催化亚基hTERT基因启动子的克隆 被引量：18
18
作者 黄君健 李杰之 +3 位作者 林坚 蒋晓山 高朝晖 黄翠芬 《生物技术通讯》 CAS 1999年第3期167-170,共4页
为了确定人端粒酶催化亚基 h TERT基因的启动子结构特征 ,采用 Panhandle PCR技术 ,从正常人外周血单核细胞基因组 DNA中扩增 h TERT基因 5′端上游旁侧序列 ,结果获得了 h TERT基因翻译起始位点上游 2 0 90 bp的基因组 DNA序列。序列... 为了确定人端粒酶催化亚基 h TERT基因的启动子结构特征 ,采用 Panhandle PCR技术 ,从正常人外周血单核细胞基因组 DNA中扩增 h TERT基因 5′端上游旁侧序列 ,结果获得了 h TERT基因翻译起始位点上游 2 0 90 bp的基因组 DNA序列。序列分析表明 h TERT基因的启动子区域缺少典型真核启动子的核心元件 ( TATA box和 CAAT box) ,但含有多个已知转录因子蛋白结合的核心序列 ,如 E box及 Sp1核心序列。提示 h TERT基因的表达可能受特殊的转录因子调控 ,这些转录因子的激活可能与癌变细胞中 h 展开更多
关键词 端粒酶 HTERT基因 启动子 PanhandlePCR
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植物诱导型启动子及相关顺式作用元件研究进展 被引量：28
19
作者 李濯雪 陈信波 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期8-15,共8页
启动子是基因表达调控的重要元件,而启动子能正确调控基因的表达需要核心启动子以及上下游的顺式作用元件协同作用。诱导型启动子的应用减少了外源基因表达时产生的大量异源蛋白等代谢产物的积累和植物能量的浪费。综合近几年关于诱导... 启动子是基因表达调控的重要元件,而启动子能正确调控基因的表达需要核心启动子以及上下游的顺式作用元件协同作用。诱导型启动子的应用减少了外源基因表达时产生的大量异源蛋白等代谢产物的积累和植物能量的浪费。综合近几年关于诱导型启动子的研究,从其启动子的结构及功能、分类、应用及相关顺式作用元件等方面进行概述,提出了在研究过程中存在的问题及展望。 展开更多
关键词 启动子 顺式作用元件 诱导型启动子
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水稻花药特异表达基因启动子的扩增及克隆 被引量：8
20
作者 张晓国 刘玉乐 +2 位作者 康良仪 朱英国 田波 《武汉大学学报（自然科学版）》 CSCD 1997年第4期480-484,共5页
采用ＤＮＡ聚合酶链式反应（ＰＣＲ）扩增技术，以水稻黄化苗总ＤＮＡ为模板成功地扩增到水稻花药特异表达基因启动子Ｏｓｇ６Ｂ的７７０ｂｐ和９６０ｂｐ两个片段Ｏｓｇ６Ｂａ和Ｏｓｇ６Ｂｂ．并将其克隆到ｐＵＣ１８上形成完整的Ｏｓ... 采用ＤＮＡ聚合酶链式反应（ＰＣＲ）扩增技术，以水稻黄化苗总ＤＮＡ为模板成功地扩增到水稻花药特异表达基因启动子Ｏｓｇ６Ｂ的７７０ｂｐ和９６０ｂｐ两个片段Ｏｓｇ６Ｂａ和Ｏｓｇ６Ｂｂ．并将其克隆到ｐＵＣ１８上形成完整的Ｏｓｇ６Ｂ，这为通过基因工程方法进行水稻杂种优势利用奠定了基础． 展开更多
关键词 启动子 PCR扩增 水稻 花药 克隆
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