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环境高温促进猪睾丸Apaf-1和Caspase-9的表达 被引量:2
1
作者 范小瑞 张禛 +2 位作者 席华明 梁亚俊 贺俊平 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1155-1160,共6页
高温热应激条件下,凋亡蛋白表达量升高,生殖细胞凋亡增加。凋亡蛋白酶活化因子1(apoptosis protease activating factor 1,Apaf-1)和凋亡蛋白酶活化起始者含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9,(cysteine aspartic acid specific proteas... 高温热应激条件下,凋亡蛋白表达量升高,生殖细胞凋亡增加。凋亡蛋白酶活化因子1(apoptosis protease activating factor 1,Apaf-1)和凋亡蛋白酶活化起始者含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9,(cysteine aspartic acid specific protease 9,Caspase-9)是细胞凋亡内源途径中的重要调节蛋白,热应激条件下猪睾丸Apaf-1和Caspase-9的表达未见报道。本研究发现,夏季畜舍高温使Apaf-1和Caspase-9表达量升高。qRT-PCR和Western印迹结果显示,与对照组(正常舍温20℃)相比,短时热应激组(40-42℃,1 h/d,7 d)和长时热应激组(40-42℃,1 h/d,42 d),Apaf-1和Caspase-9 mRNA和蛋白的相对表达量均显著升高。免疫组织化学研究发现,Apaf-1在猪睾丸组织中免疫反应阳性物定位于间质细胞、支持细胞和各个发育阶段生精细胞。热应激处理导致精母细胞和精子细胞Apaf-1表达量升高。在各实验猪睾丸组织中,Caspase-9定位于间质细胞、支持细胞和各个发育阶段生精细胞的胞质中。与对照组相比,热应激处理导致减数分裂以后的生精细胞和支持细胞Caspase-9表达量升高。上述结果表明,高温热应激促进Apaf-1和Caspase-9的表达,提示Apaf-1和Caspase-9表达的变化可能与猪舍高温导致的猪精液品质下降存在关联。 展开更多
关键词 热应激 公猪 睾丸 凋亡蛋白活化因子1(Apaf-1) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶9(caspase-9)
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铁超载对禽肝脏细胞内GRP78/Bip与Caspase-3分子表达影响的研究 被引量:1
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作者 刘志军 李静 龙塔 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第5期62-64,283,共4页
为了研究铁超载对禽肝脏细胞损伤的影响,试验用不同剂量Fe SO4饲喂试验鸡群,分别在试验开始后第7,14,21,28,35,42天从每组中随机选取8只鸡宰杀,取肝脏,用4%多聚甲醛固定,制作组织切片,用免疫组织化学技术检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78/Bip... 为了研究铁超载对禽肝脏细胞损伤的影响,试验用不同剂量Fe SO4饲喂试验鸡群,分别在试验开始后第7,14,21,28,35,42天从每组中随机选取8只鸡宰杀,取肝脏,用4%多聚甲醛固定,制作组织切片,用免疫组织化学技术检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78/Bip)与半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)分子表达。结果表明:低剂量组试验鸡群肝脏细胞GRP78/Bip与Caspase-3分子表达阳性细胞率均从第5周开始极显著高于对照组(P<0.01),高剂量组试验鸡群肝脏细胞GRP78/Bip与Caspase-3分子表达阳性细胞率均从第2周开始极显著高于对照组(P<0.01)。说明铁超载能显著影响禽肝脏细胞内GRP78/Bip与Caspase-3分子表达,细胞损伤与凋亡显著增加。 展开更多
关键词 铁超载 肝脏 葡萄糖调节蛋白78(GRP78/Bip) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(caspase-3) 分子表达
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EMMPRIN、Caspase-3表达水平与髋关节置换术后人工关节无菌性松动的关系
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作者 吴永东 李万忠 《海南医学院学报》 CAS 2014年第10期1403-1405,1408,共4页
目的:研究金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)以及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)表达水平与髋关节置换术后人工关节无菌性松动的关系。方法:将2001年1月~2004年5月在我院接受人工髋关节置换术的患者纳入研究,采用免疫组... 目的:研究金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)以及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)表达水平与髋关节置换术后人工关节无菌性松动的关系。方法:将2001年1月~2004年5月在我院接受人工髋关节置换术的患者纳入研究,采用免疫组化方法检测关节滑膜组织中EMMPRIN、Caspase-3的表达情况,并随访手术后人工关节无菌性松动的发生情况。结果:(1)EMMPRIN阳性率47.25%、Caspase-3阳性率48.5%,5年人工关节无菌性松动率11.25%,10年松动率17.25%;(2)单因素分析结果显示关节滑膜中EMMPRIN、Caspase-3阳性表达患者的人工关节5、10年松动率均高于阴性表达患者(P〈0.05);(3)logistic回归分析显示EMMPRIN、Caspase-3阳性表达是人工关节无菌性松动的危险因素。结论:关节滑膜中EMMPRIN、Caspase-3阳性表达是髋关节置换术后发生人工关节无菌性松动的危险因素,而抑制EMMPRIN、Caspase-3可能成为预防无菌性松动的治疗靶点。 展开更多
关键词 款关节置换术 无菌性松动 金属蛋白诱导因子(EMMPRIN) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(caspase-3)
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龙生蛭胶囊对脑卒中大鼠行为学的影响及脑组织的保护作用 被引量:11
4
作者 孙晓丽 王勇 +5 位作者 刘俊杰 李春 杨双杰 王旨引 谭楠楠 王伟 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第24期23-29,共7页
目的:评价龙生蛭胶囊对脑卒中大鼠行为学影响及其对血清生化学和核转录因子-κB(NF-κB)和半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)的影响。方法:采用健康雄性SD大鼠,采用单侧大脑中动脉永久性结扎手术(p MCAO),将模型制备成功大鼠... 目的:评价龙生蛭胶囊对脑卒中大鼠行为学影响及其对血清生化学和核转录因子-κB(NF-κB)和半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)的影响。方法:采用健康雄性SD大鼠,采用单侧大脑中动脉永久性结扎手术(p MCAO),将模型制备成功大鼠随机分为模型组,尼莫地平组(12 mg·kg^-1),龙生蛭胶囊高、中、低剂量组(2.4,1.2,0.6 g·kg^-1),同时设置假手术组。连续灌胃给药14 d,分别对大鼠神经缺陷功能进行评分并观察期行为学;实验结束,腹主动脉取血,考察血清超氧化物歧化酶(SOD),一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)的变化;解剖取脑组织进行2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察龙生蛭胶囊对脑梗死体积变化,并测定龙生蛭胶囊对脑含水量测定影响;苏木素-伊红(HE)染色观察梗死侧脑组织病理变化;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)和免疫组化检测梗死侧脑组织NF-κB和Caspase-3的表达情况。结果:与假手术比较,模型组神经功能评分显著升高(P<0.01),旋转耐受,抓力明显降低(P<0.01),脑含水量及梗死体积显著升高(P<0.01),SOD活力显著降低(P<0.01),NO和MDA含量显著升高(P<0.01),脑组织中NF-κB以及Caspase-3表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,龙生蛭胶囊能够显著降低神经功能缺陷行为学评分(P<0.05);提高大鼠旋转耐受力,大鼠抓力并提高大鼠自主活动能力;与模型组比较,各给药组能够明显降低脑水含量以及脑梗死体积(P<0.05,P<0.01);能够明显提高血清中SOD活性(P<0.01),降低NO和MDA含量(P<0.05)。能够明显降低脑卒中大鼠脑组织病理损伤,抑制NF-κB以及Caspase-3的表达。结论:龙生蛭胶囊能够改善大鼠的神经功能缺陷,提高大鼠的肌力和自主运动能力,其对脑组织的保护作用可能与抗氧化,抑制NF-κB以及Caspase-3的表达有关。 展开更多
关键词 龙生蛭胶囊 脑卒中 脑保护 核转录因子-κB(NF-κB) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)
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艾灸神阙穴对衰老模型小鼠脑组织凋亡相关因子bcl-2、bax、caspase-3和p53表达的影响 被引量:7
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作者 杨志虹 杨孝芳 +4 位作者 易玮 崔瑾 陈波 陈盼碧 张宁 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第2期321-324,共4页
目的研究艾灸神阙穴对衰老模型小鼠脑组织凋亡相关因子B淋巴细胞瘤-2基因(bcl-2)、bcl-2相关的X基因(bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-3和p53蛋白表达的影响,探讨艾灸神阙穴延缓衰老的作用机制。方法健康2月龄昆明雄性小... 目的研究艾灸神阙穴对衰老模型小鼠脑组织凋亡相关因子B淋巴细胞瘤-2基因(bcl-2)、bcl-2相关的X基因(bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-3和p53蛋白表达的影响,探讨艾灸神阙穴延缓衰老的作用机制。方法健康2月龄昆明雄性小鼠,将其随机分为青年组、衰老模型组、艾灸组;青年组不做任何处理,衰老模型组和艾灸组每日颈背部皮下注射D-半乳糖120 mg/kg,连续注射42 d;艾灸组从模型复制的第15天起开始对神阙穴进行施灸,每次灸15 min,每日1次,每周连续施灸5 d后休息2 d再灸,连续4 w。艾灸结束后取出各组小鼠脑组织,采用Western印迹法检测小鼠脑组织bcl-2、bax、caspase-3和p53的蛋白表达。结果与青年组比,衰老模型组bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.001),bax、caspase-3和p53的蛋白表达均显著升高(P<0.001,P<0.05);与衰老模型组比,艾灸组bcl-2蛋白表达显著升高(P<0.001),bax、caspase-3和p53的蛋白表达均显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论艾灸神阙穴能延缓D-半乳糖所致衰老模型小鼠的衰老,其作用机制可能与调节脑组织bcl-2、bax、caspase-3和p53的蛋白表达有关。 展开更多
关键词 灸法 bcl-2 bax 半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-3 p53 衰老
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丁苯酞注射液对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮质区星型胶质细胞、β-catenin表达量及细胞凋亡的影响 被引量:4
6
作者 逯冉冉 耿建红 +2 位作者 张群英 付文玉 赵敏 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第21期5340-5343,共4页
目的探讨丁苯酞(NBP)注射液对局灶型脑缺血再灌注(I/R)大鼠皮质区星型胶质细胞、β-连环蛋白(catenin)蛋白表达及细胞凋亡的影响。方法60只SD大鼠随机分4组:假手术(Sham)组、模型(I/R)组、NBP低剂量(NBP1)组、NBP高剂量(NBP2)组。采用... 目的探讨丁苯酞(NBP)注射液对局灶型脑缺血再灌注(I/R)大鼠皮质区星型胶质细胞、β-连环蛋白(catenin)蛋白表达及细胞凋亡的影响。方法60只SD大鼠随机分4组:假手术(Sham)组、模型(I/R)组、NBP低剂量(NBP1)组、NBP高剂量(NBP2)组。采用线栓法制备大鼠大脑局灶性中动脉栓塞模型(MACO),缺血1.5h后再灌注。NBP1和NBP2组大鼠分别在术后6h、12h、24h腹腔注射NBP溶液(4mg/kg、6mg/kg),Sham组和I/R组注射等量生理盐水;24h后分别对各组大鼠进行神经功能学评分;干/湿法测定脑组织含水量;免疫荧光检测星型胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP),Hoechest33258荧光核染色观察神经细胞核;Western印迹检测β-catenin、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)3、caspase8的蛋白表达量。结果NBP1组及NBP2组神经功能学评分及脑含水量均显著低于I/R组(P<0.05),NBP1组和NBP2组间有明显统计学差异(P<0.05)。免疫荧光显示I/R组大鼠星形胶质细胞大量活化,形态发生明显改变,凋亡细胞数量显著多于NBP1及NBP2组(P<0.05)。Western印迹显示与I/R组相比,NBP1组和NBP2组β-catenin的表达量均显著增加,同时caspase3、caspase8的表达量显著降低(P<0.05)。与NBP1组相比,NBP2组β-catenin的表达显著增加,同时caspase3、caspase8的蛋白表达量明显降低(P<0.05)。结论NBP可能通过调控β-catenin的蛋白表达量影响星型胶质细胞的激活状态,减少caspase3、caspase8的表达,从而有效降低I/R对大鼠大脑皮质神经元损伤。 展开更多
关键词 丁苯酞 脑缺血再灌注 神经元 半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)3 caspase8 Β-CATENIN
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解耦联蛋白2对脓毒症腹腔感染大鼠心肌细胞凋亡、氧化应激及PKR/Caspase-11蛋白的影响 被引量:1
7
作者 陈群 李霖 +2 位作者 李秀娟 何德剑 王逸君 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第17期4322-4326,共5页
目的探究解耦连蛋白(UCP)2对脓毒症腹腔感染大鼠心肌细胞凋亡、氧化应激及链RNA依赖的蛋白激酶(PKR)/含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-11蛋白的影响。方法按照数字随机法将80只大鼠分为假手术(Sham)组、盲肠结扎穿孔术(CLP)致... 目的探究解耦连蛋白(UCP)2对脓毒症腹腔感染大鼠心肌细胞凋亡、氧化应激及链RNA依赖的蛋白激酶(PKR)/含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-11蛋白的影响。方法按照数字随机法将80只大鼠分为假手术(Sham)组、盲肠结扎穿孔术(CLP)致脓毒症模型(CLP)组、单纯腺相关病毒(AAV)组、UCP2过表达手术(UCP2)组各20只。比较各组UCP2、PKR、Caspase-11蛋白表达、心肌组织病理学形态变化、心肌细胞凋亡指数、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果与Sham组相比,CLP组、AAV组和UCP2组心肌组织中UCP2、Caspase-11、MDA表达明显升高,心肌组织中PKR蛋白表达、SOD活性明显减少(P<0.05);与CLP和AAV组相比,UCP2组心肌组织中PKR蛋白表达、SOD活性得到明显升高,Caspase-11蛋白MDA含量显著降低(P<0.05)。Sham组心肌仅有少数视野偶见个别凋亡细胞,CLP组和AAV组细胞的凋亡指数明显增加(P<0.05);与CLP组相比,UCP2组心肌细胞凋亡指数明显降低(P<0.05)。结论过表达UCP2可抑制脓毒症腹腔感染大鼠心肌细胞凋亡,调控体内氧化应激平衡,同时对PKR/Caspase-11蛋白有一定的调控作用,增加PKR表达,抑制Caspase-11的表达。 展开更多
关键词 解耦连蛋白2 脓毒症腹腔感染 心肌细胞凋亡 氧化应激 链RNA依赖蛋白(PKR)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-11
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含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase-1)对猪伪狂犬病毒复制的影响 被引量:2
8
作者 马英先 常雯茹 +7 位作者 张爽 翟云云 李佳佳 曾磊 李国利 明胜利 万博 杜永坤 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期159-168,共10页
猪伪狂犬病是伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)感染引起的一种烈性接触性传染病,其感染宿主会触发机体先天免疫应答,引起I型干扰素(Type I interferon,IFN-1)和炎性细胞因子等细胞因子的产生,为研究可诱导产生炎性细胞因子的含半胱... 猪伪狂犬病是伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)感染引起的一种烈性接触性传染病,其感染宿主会触发机体先天免疫应答,引起I型干扰素(Type I interferon,IFN-1)和炎性细胞因子等细胞因子的产生,为研究可诱导产生炎性细胞因子的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Cysteinyl aspartate specific proteinase 1,caspase-1)的基因敲除对PRV复制的影响,本试验利用近年来发展迅速的一项规律性短重复回文序列簇/Cas9核酸酶(Clustered regulatory interspaced short palindromic repeat/CRISPR associated system 9,CRISPR/Cas9)基因定点修饰技术构建猪肾上皮细胞(Porcine kidney epithelial cells,PK15)caspase-1基因稳定敲除细胞系,并通过T7核酸酶检测敲除效率;细胞毒性(Cell counting kit-8,CCK-8)试剂盒检测PK15敲除caspase-1增殖影响;采用流式细胞术检测PRV-GFP感染PK15以及PK15-caspase-1^(-/-)的增殖差异;实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-PCR)检测PRV-gB、TK及白细胞介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)、IFN-β、干扰素刺激基因(Interferon-stimulated genes 20,ISG20)mRNA的表达;Western Blot检测PRV-gB蛋白表达;滴度测定检测子代病毒滴度。结果表明,2对特异性单链引导RNA(Single guide RNA,sgRNA)均能对caspase-1进行基因编辑,但经T7核酸酶酶切进行基因编辑效率分析结果表明sgRNA2的基因编辑效率较高;CCK-8试剂盒检测细胞活力结果表明caspase-1基因敲除对PK15以及PK15-caspase-1^(-/-)细胞活力无影响(P>0.05);流式细胞仪检测结果表明PRV-GFP在PK15-caspase-1^(-/-)中的增殖显著低于PK15细胞(P<0.05);定量RT-PCR结果表明PRV-gB、TK基因在PK15-caspase-1^(-/-)的mRNA表达显著低于PK15细胞(gB:P<0.05,TK:P<0.05),而IFN-β、ISG20基因在PK15-caspase-1^(-/-)的mRNA表达显著高于PK15细胞(gB:P<0.05,TK:P<0.05);Western Blot结果表明,PRV的gB蛋白在PK15-caspase-1^(-/-)的表达显著低于PK15细胞(P<0.05);滴度测定结果表明,敲除caspase-1能够抑制PRV子代� 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(caspase-1) 猪肾上皮细胞(PK15) 猪伪狂犬病毒(PRV)
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