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题名化学试剂对塔宾曲霉同源重组效率的影响
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作者
梁丽存
刘文龙
刘晓青
姚斌
黄火清
杨浩萌
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机构
中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
山东隆科特酶制剂有限公司
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出处
《生物技术进展》
2024年第4期586-593,共8页
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基金
国家重点研发计划项目(2021YFC2104805)
国家现代农业产业技术体系专项(CARS-41)。
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文摘
某些化学试剂可以通过调节细胞周期或胞内DNA修复途径来提高基因编辑效率。以塔宾曲霉作为研究对象,通过CRISPR/Cas9工具,对其孢子色素合成相关基因fwn进行基因编辑,在转化过程中分别加入8种化学试剂,最后通过统计孢子颜色和抗性基因PCR验证,检测8种化学试剂对塔宾曲霉同源重组效率的影响。结果发现,与零添加对照组相比,在原生质体转化过程中,添加苯菌灵(benomyl)、RS-1、香草醛(vanillin)和氯丙嗪(chlorpromazine),同源重组效率分别达到85.45%、60.90%、59.45%、65.95%,比对照组提高了18.05%、9.35%、7.9%、14.4%;当苯菌灵与其他试剂叠加使用时,同源重组效率进一步提高,最高可达97.92%。因此,化学试剂在原生质体转化中的应用为提高丝状真菌的基因编辑效率提供了新的思路。
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关键词
化学试剂
同源重组效率
塔宾曲霉
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Keywords
chemical reagents
homologous recombination efficiency
Aspergillus tubingensis
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分类号
Q784
[生物学—分子生物学]
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