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靶向髓源性抑制细胞的叶酸循环增强肿瘤免疫治疗效果研究
1
作者 何蕊 颜克鹏 王静 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1011-1022,共12页
目的·探究叶酸循环代谢对髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)免疫抑制作用的调控机制。方法·在C57BL/6小鼠骨髓细胞的培养体系中加入细胞因子粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor... 目的·探究叶酸循环代谢对髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)免疫抑制作用的调控机制。方法·在C57BL/6小鼠骨髓细胞的培养体系中加入细胞因子粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor, GM-CSF)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),体外诱导MDSCs。利用流式细胞仪检测诱导MDSCs的程序性死亡受体配体1 (programmed deathligand 1,PD-L1)表达水平和活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生水平。采用磁珠分选出小鼠脾脏CD8^(+)T细胞并用Celltrace violet或CFSE标记,再与MDSCs共培养,72 h后用流式细胞术检测CD8^(+)T细胞增殖情况。通过实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)检测MDSCs中叶酸循环相关代谢酶的表达水平。采用叶酸循环代谢酶亚甲基四氢叶酸脱氢酶2 (methylenetetrahydrofolate dehydrogenase 2,MTHFD2)抑制剂DS18561882(DS18)和叶酸拮抗剂培美曲塞(Pemetrexed)处理MDSCs,并用流式分析检测MDSCs产生ROS和线粒体ROS的水平。将DS18或培美曲塞处理后的MDSCs与磁珠分选出来并用Celltrace violet或CFSE标记的CD8^(+)T细胞共培养,72 h后用流式细胞术检测CD8^(+)T细胞增殖情况。利用RNA测序(RNA-seq)检测DS18和培美曲塞处理后MDSCs在转录组水平的变化。建立小鼠结肠癌(mouse colon cancer cells,MC38)和Lewis肺癌(Lewis lung carcinoma,LLC)皮下瘤模型。造模后第10天开始,采用Isotype抗体、抗CD8单抗(1 mg/kg,清除CD8^(+)T细胞)、培美曲塞以及抗CD8单抗联合培美曲塞处理MC38荷瘤小鼠;利用Isotype抗体、抗Gr1单抗(1.25 mg/kg,清除MDSCs)、培美曲塞以及抗Gr1单抗联合培美曲塞处理MC38荷瘤小鼠;分别给予MC38和LLC荷瘤小鼠培美曲塞(50 mg/kg)、抗PD-1单克隆抗体(250μg/kg)以及培美曲塞联用抗PD-1单克隆抗体治疗;第14天收集小鼠肿瘤组织,记录� 展开更多
关键词 髓源性抑制细胞 叶酸循环 亚甲基四氢叶酸脱氢酶2 培美曲塞 肿瘤免疫治疗
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叶酸加工厂的观光之旅
2
作者 明秋雨 姜慧君 张志豪 《大学化学》 CAS 2024年第9期11-15,共5页
通过游览叶酸加工厂的形式,介绍了叶酸的结构、代谢和作用机制,并给出了补充叶酸的建议。通过科学性、趣味性兼备方式,让读者深入了解叶酸的功能,达到提示适用人群合理补充叶酸的目的。
关键词 叶酸 结构 代谢 叶酸循环 科普 建议
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高硒干扰肝细胞内糖与一碳单位代谢的体外研究 被引量：1
3
作者 张雪 王建荣 +4 位作者 王琴 韩枫 向雪松 刘轶群 黄振武 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期115-118,共4页
目的 探究高硒环境对人正常肝细胞内硒蛋白以及糖代谢和一碳单位代谢相关酶表达的影响。方法 用10个剂量浓度(0、0.001、0.005、0.01、0.05、0.1、0.5、1、5和10μmol/L)的硒代蛋氨酸(SeMet)对人正常肝细胞干预48 h后,采用免疫印迹法检... 目的 探究高硒环境对人正常肝细胞内硒蛋白以及糖代谢和一碳单位代谢相关酶表达的影响。方法 用10个剂量浓度(0、0.001、0.005、0.01、0.05、0.1、0.5、1、5和10μmol/L)的硒代蛋氨酸(SeMet)对人正常肝细胞干预48 h后,采用免疫印迹法检测细胞内硒蛋白P1(SELENOP1)、谷胱甘肽过氧化物酶1(glutathione peroxidase 1,GPX1)、糖酵解旁路关键酶3-磷酸甘油酸脱氢酶(phosphoglycerate dehydrogenase, PHGDH)以及一碳代谢通路关键酶丝氨酸羟甲基转移酶1(serine hydroxymethyltransferase 1,SHMT1)、亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase, MTHFR)和蛋氨酸合成酶(methionine synthase, MS)的表达。结果 SeMet在0~10μmol/L范围内,硒蛋白(GPX1和SELENOP1)的表达先升高后降低,GPX1和SELENOP1的拐点分别在0.5和0.1μmol/L;丝氨酸从头合成通路关键酶(PHGDH)和叶酸循环代谢酶(SHMT1、MTHFR和MS)表达与硒蛋白类似,同样先升高后降低,但拐点有差异,分别为0.1μmol/L(PHGDH和SHMT1)和0.01μmol/L(MTHFR和MS)。结论 高硒环境下,细胞内因硒蛋白过表达而导致丝氨酸供应不足,被迫启用糖酵解旁路——丝氨酸从头合成通路合成内源性的丝氨酸,从而引起糖代谢异常。 展开更多
关键词 硒代蛋氨酸 丝氨酸 谷胱甘肽过氧化物酶 硒蛋白P 3-磷酸甘油酸脱氢酶 叶酸循环关键酶
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