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甘薯叶绿体表达载体构建及其融合基因在叶绿体中的瞬间表达
被引量：
7
1
作者
王玉华
张秀海
+3 位作者
吴忠义
王永勤
黄丛林
贾敬芬
《西北植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第9期1747-1755,共9页
利用叶绿体基因组进化中高度保守的特点,根据烟草叶绿体基因组全序列设计引物,从甘薯(Ipomoeabatatas)叶绿体基因组中克隆了2个相邻的功能基因rbcL(GenBank登录号为AY942199)和accD(GenBank登录号为AY942200),并以此作为定点整合外源基...
利用叶绿体基因组进化中高度保守的特点,根据烟草叶绿体基因组全序列设计引物,从甘薯(Ipomoeabatatas)叶绿体基因组中克隆了2个相邻的功能基因rbcL(GenBank登录号为AY942199)和accD(GenBank登录号为AY942200),并以此作为定点整合外源基因的同源重组片段。以来自叶绿体基因组的强启动子Prrn和Rps-bA-pro分别驱动选择标记基因aadA及phaC-gfp融合基因,构建成表达盒prrn-aadA-TpsbA-ter与RpsbA-pro-phaC-gfp-RpsbA-ter,然后将这2个表达盒串联在一起克隆进甘薯叶绿体同源片段中,获得甘薯叶绿体定点整合表达载体pSC-GFP。酶切分析证明,所构建的载体符合预期设计;采用该载体对甘薯叶片进行基因枪转化,结果显示,phaC-gfp融合基因可在叶绿体特异启动子和终止子的调控下在甘薯幼嫩叶片中瞬间表达,证明构建的载体pSC-GFP可用于甘薯叶绿体转化。
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关键词
甘薯
叶绿体
同源
片段
叶绿体
表达载体
瞬间表达
中长链聚羟基脂肪酸酯
下载PDF
职称材料
菊苣叶绿体同源片段的克隆及多顺反子定点整合表达载体的构建
2
作者
王玉华
韩晓玲
+1 位作者
黄丛林
贾敬芬
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2010年第1期11-17,共7页
利用叶绿体基因组进化中高度保守的特点,根据烟草叶绿体基因组全序列设计合成引物,从菊苣叶绿体基因组中扩增包括rps7-rps12-trnV-16S rDNA基因在内的一段序列(GenBank登录号为GQ199478),并以此作为定点整合外源基因的同源重组片段。以...
利用叶绿体基因组进化中高度保守的特点,根据烟草叶绿体基因组全序列设计合成引物,从菊苣叶绿体基因组中扩增包括rps7-rps12-trnV-16S rDNA基因在内的一段序列(GenBank登录号为GQ199478),并以此作为定点整合外源基因的同源重组片段。以叶绿体基因强启动子prrn驱动选择标记基因aadA及报告基因gfp构建多顺反子表达盒prrn-aadA-gfp-psbA-3,′然后将表达盒克隆进菊苣叶绿体同源片段中,获得菊苣叶绿体定点整合表达载体pJAG,酶切分析证明所构建的载体符合预期设计。该载体的构建为建立菊苣的叶绿体转化体系奠定基础,为进一步通过叶绿体基因工程手段将更多感兴趣的基因导入菊苣进行遗传改良,或以菊苣叶绿体作生物反应器生产动物口服疫苗等搭建技术平台。
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关键词
菊苣
叶绿体
同源
片段
多顺反子
定点整合表达载体
下载PDF
职称材料
题名
甘薯叶绿体表达载体构建及其融合基因在叶绿体中的瞬间表达
被引量：
7
1
作者
王玉华
张秀海
吴忠义
王永勤
黄丛林
贾敬芬
机构
西北大学生命科学学院/陕西省生物技术重点实验室/西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室
北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心
出处
《西北植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第9期1747-1755,共9页
基金
国家自然科学基金(30900914)
陕西省教育厅专项(09JK777)
西北大学重点实验室开放基金资助
文摘
利用叶绿体基因组进化中高度保守的特点,根据烟草叶绿体基因组全序列设计引物,从甘薯(Ipomoeabatatas)叶绿体基因组中克隆了2个相邻的功能基因rbcL(GenBank登录号为AY942199)和accD(GenBank登录号为AY942200),并以此作为定点整合外源基因的同源重组片段。以来自叶绿体基因组的强启动子Prrn和Rps-bA-pro分别驱动选择标记基因aadA及phaC-gfp融合基因,构建成表达盒prrn-aadA-TpsbA-ter与RpsbA-pro-phaC-gfp-RpsbA-ter,然后将这2个表达盒串联在一起克隆进甘薯叶绿体同源片段中,获得甘薯叶绿体定点整合表达载体pSC-GFP。酶切分析证明,所构建的载体符合预期设计;采用该载体对甘薯叶片进行基因枪转化,结果显示,phaC-gfp融合基因可在叶绿体特异启动子和终止子的调控下在甘薯幼嫩叶片中瞬间表达,证明构建的载体pSC-GFP可用于甘薯叶绿体转化。
关键词
甘薯
叶绿体
同源
片段
叶绿体
表达载体
瞬间表达
中长链聚羟基脂肪酸酯
Keywords
sweet potato
chloroplast homologous fragments
chloroplast expression vector
transient expression
medium-chain-length-polyhydroxybutyrates
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
菊苣叶绿体同源片段的克隆及多顺反子定点整合表达载体的构建
2
作者
王玉华
韩晓玲
黄丛林
贾敬芬
机构
西北大学生命科学学院
北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心
西安力邦制药有限公司医药科学研究所
出处
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2010年第1期11-17,共7页
基金
国家自然科学基金(30900914)
陕西省教育厅专项(09JK777)
西北大学西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室开放基金
文摘
利用叶绿体基因组进化中高度保守的特点,根据烟草叶绿体基因组全序列设计合成引物,从菊苣叶绿体基因组中扩增包括rps7-rps12-trnV-16S rDNA基因在内的一段序列(GenBank登录号为GQ199478),并以此作为定点整合外源基因的同源重组片段。以叶绿体基因强启动子prrn驱动选择标记基因aadA及报告基因gfp构建多顺反子表达盒prrn-aadA-gfp-psbA-3,′然后将表达盒克隆进菊苣叶绿体同源片段中,获得菊苣叶绿体定点整合表达载体pJAG,酶切分析证明所构建的载体符合预期设计。该载体的构建为建立菊苣的叶绿体转化体系奠定基础,为进一步通过叶绿体基因工程手段将更多感兴趣的基因导入菊苣进行遗传改良,或以菊苣叶绿体作生物反应器生产动物口服疫苗等搭建技术平台。
关键词
菊苣
叶绿体
同源
片段
多顺反子
定点整合表达载体
Keywords
Chicory Chloroplast homologous fragments Multicistron Site-specific integration expression vector
分类号
Q789 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
甘薯叶绿体表达载体构建及其融合基因在叶绿体中的瞬间表达
王玉华
张秀海
吴忠义
王永勤
黄丛林
贾敬芬
《西北植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
7
下载PDF
职称材料
2
菊苣叶绿体同源片段的克隆及多顺反子定点整合表达载体的构建
王玉华
韩晓玲
黄丛林
贾敬芬
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2010
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
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参考文献
引证文献
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