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A蛋白酶联法检测苹果褪绿叶斑病毒和茎沟病毒的研究 被引量:32
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作者 洪霓 刘福昌 +1 位作者 王国平 王小凤 《中国果树》 1992年第1期44-47,共4页
苹果褪绿叶斑病毒(CLSV)和茎沟病毒(SGV)是苹果的两种主要潜隐病毒,严重影响苹果的产量和质量。检测苹果潜隐病毒的传统方法是木本指示植物二重芽接鉴定法,但这种方法耗工费时。由于两种病毒不稳定和在苹果树中含量低,用经典的血清学方... 苹果褪绿叶斑病毒(CLSV)和茎沟病毒(SGV)是苹果的两种主要潜隐病毒,严重影响苹果的产量和质量。检测苹果潜隐病毒的传统方法是木本指示植物二重芽接鉴定法,但这种方法耗工费时。由于两种病毒不稳定和在苹果树中含量低,用经典的血清学方法不能直接检测苹果植株粗汁液中的病毒。 展开更多
关键词 苹果 病毒 ELISA 检测 叶斑病毒
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苹果褪绿叶斑病毒和茎沟病毒的鉴定提纯和酶联法检测 被引量:29
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作者 王小凤 李秋波 +3 位作者 王荣 洪霓 王国平 刘福昌 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第2期137-144,共8页
苹果褪绿叶斑病毒(CLSV)和茎沟病毒(SGV)是感染苹果和其它果树的两种重要潜隐病毒。根据生物学特性和血清学反应,确定 W-55分离物属于 CLSV,W-29分离物属于 SGV。采用皂土澄清,PEG 6000沉淀及超离心等步骤,得到部分提纯的病毒。经电镜观... 苹果褪绿叶斑病毒(CLSV)和茎沟病毒(SGV)是感染苹果和其它果树的两种重要潜隐病毒。根据生物学特性和血清学反应,确定 W-55分离物属于 CLSV,W-29分离物属于 SGV。采用皂土澄清,PEG 6000沉淀及超离心等步骤,得到部分提纯的病毒。经电镜观察,W-55和W-29病毒颗粒长度分别为800 nm 和650nm。用 CLSV W-55分离物制备的兔抗血清效价为1/3200,用 SGV PV-71(ATCC)分离物制备小鼠腹水抗体效价为1/800,均用间接 ELISA 法测定。对感染 CLSV 和 SGV 的昆诺藜、苹果叶和花瓣检测结果表明,P/N 值具有显著性。本工作为苹果无毒苗木的生产提供了快速、灵敏的病毒检测手段。 展开更多
关键词 茎沟病毒 苹果 褪绿叶斑病毒
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苹果潜隐病毒(Latent virus)研究——Ⅱ.苹果品种和矮生砧木潜隐病毒鉴定 被引量:25
3
作者 刘福昌 王焕玉 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第4期193-197,共5页
在1980—1985年,对我国主要苹果产区的潜隐病毒种类进行调查鉴定,基本明确渤海湾果区、黄河故道果区和西北高原果区主栽苹果品种普遍潜带褪绿叶斑病毒、茎痘病毒和茎沟病毒,未检出其他病毒。营养系矮生砧木也普遍潜带这三种病毒。解决... 在1980—1985年,对我国主要苹果产区的潜隐病毒种类进行调查鉴定,基本明确渤海湾果区、黄河故道果区和西北高原果区主栽苹果品种普遍潜带褪绿叶斑病毒、茎痘病毒和茎沟病毒,未检出其他病毒。营养系矮生砧木也普遍潜带这三种病毒。解决潜隐病毒为害的主要途径是培育无病毒母本树,栽培无病毒苗木。这方面的研究工作正在进行中。 展开更多
关键词 苹果 潜隐病毒 栽培品种 矮生砧木 种类鉴定 褪绿叶斑病毒 茎痘病毒 茎沟病毒
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大樱桃病毒病研究进展 被引量:27
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作者 董薇 宋雅坤 +2 位作者 吴明勤 王林 吴元华 《中国农学通报》 CSCD 2005年第5期332-336,共5页
综述了近年来国际上李属坏死环斑病毒(PNRSV)、李矮缩病毒(PDV)、苹果褪绿叶斑病毒(A鄄CLSV)、樱桃卷叶病毒(CLRV)、樱桃小果病毒(LChV)、樱桃病毒A(CVA)及伊庇鲁斯樱桃病(EpCV)等几种侵染大樱桃的重要病毒的发生状况、形态、分类地位... 综述了近年来国际上李属坏死环斑病毒(PNRSV)、李矮缩病毒(PDV)、苹果褪绿叶斑病毒(A鄄CLSV)、樱桃卷叶病毒(CLRV)、樱桃小果病毒(LChV)、樱桃病毒A(CVA)及伊庇鲁斯樱桃病(EpCV)等几种侵染大樱桃的重要病毒的发生状况、形态、分类地位、基因组、检测技术等研究现状及存在的问题与展望。 展开更多
关键词 大樱桃 研究进展 病毒 苹果褪绿叶斑病毒 环斑病毒 卷叶病毒 发生状况 分类地位 研究现状 检测技术 基因组 李属 小果 侵染
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苹果褪绿叶斑病毒生物学及生化特性研究 被引量:18
5
作者 洪霓 王国平 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期77-81,共5页
对从苹果和扁桃上获得2个苹果褪绿叶斑病毒的分离物ACLSV-C和ACLSV-B的主要生物学和生化特性进行了比较。人工接种5科19种草本植物,发现两者均能侵染苋色藜(Chenopodiumamaranticolor)、... 对从苹果和扁桃上获得2个苹果褪绿叶斑病毒的分离物ACLSV-C和ACLSV-B的主要生物学和生化特性进行了比较。人工接种5科19种草本植物,发现两者均能侵染苋色藜(Chenopodiumamaranticolor)、昆诺藜(Ch.quinoa)和西方烟(Nicotianaocidentalis),产生局部侵染斑和系统褪绿斑。但症状反应存在差异,后者在这3种植物上引起叶片反卷等较强症状反应,还可潜伏侵染笋瓜(Cucurbitamaximacv.ButercupBurgess)。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示,ACLSV-B衣壳蛋白的迁移率较ACLSV-C快。两者的RNA分子量及双链RNA数量无明显差异。根据已报道的核苷酸系列设计合成引物,采用PCR法检测ACLSV分离物,均获得特异性扩增产物。 展开更多
关键词 苹果 褪绿叶斑病毒 生物学 生化特性
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三种ELISA方法检测苹果褪绿叶斑病毒和苹果茎沟病毒的比较 被引量:23
6
作者 吴雅琴 陈霜莹 +1 位作者 王文慧 王小凤 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期245-248,共4页
苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)和苹果茎沟病毒(ASGV)是感染苹果和其它一些果树的重要病毒。作者应用PAS-ELISA法成功地检测了苹果组培苗中的这两种病毒。为了简化操作步骤,试验了DAS-ELISA和改良DAS-ELISA法,并与PAS-ELISA的检测结果比较。... 苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)和苹果茎沟病毒(ASGV)是感染苹果和其它一些果树的重要病毒。作者应用PAS-ELISA法成功地检测了苹果组培苗中的这两种病毒。为了简化操作步骤,试验了DAS-ELISA和改良DAS-ELISA法,并与PAS-ELISA的检测结果比较。试验结果表明,DAS-ELISA能检测出ASGV,却不能检测出ACLSV,与此同时,这两种病毒均可用改良DAS-ELISA检测。DAS-ELISA与改良DAS-ELISA可缩短检测时间、提高效率,但此方法有较高的株系特异性,因而可能产生假阴性反应。 展开更多
关键词 苹果 褪绿叶斑病毒 茎沟病毒 ELISA
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几种玉米弯孢霉叶斑病菌生物学特性的比较 被引量:14
7
作者 李晓宇 石洁 董金皋 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期61-64,69,共5页
对画眉草弯孢、新月弯孢、棒状弯孢和中隔弯孢4种玉米弯孢霉叶斑病菌的生物学特性进行了比较,明确了它们在分生孢子形态、大小、产孢量以及对温度、pH值、光照适应性等方面的差异。总的看来,这4种弯孢霉菌丝生长的最适温度为25~30℃,... 对画眉草弯孢、新月弯孢、棒状弯孢和中隔弯孢4种玉米弯孢霉叶斑病菌的生物学特性进行了比较,明确了它们在分生孢子形态、大小、产孢量以及对温度、pH值、光照适应性等方面的差异。总的看来,这4种弯孢霉菌丝生长的最适温度为25~30℃,孢子产生的最适温度是25~35℃,最适pH范围为6~7,最适碳源为葡萄糖,碳源浓度对菌丝生长影响不大,光照能促进菌丝的生长。试验结果还发现,有的弯孢霉在培养基中可以产生不同的色素。供试所有种类弯孢霉的无菌培养滤液,可抑制玉米种子根的伸长,证明这4种弯孢霉在人工培养过程中都可产生致病毒素。 展开更多
关键词 玉米 弯孢霉叶斑病毒 生物学特性 病毒
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用离体微嫁接法快速检测苹果潜隐病毒 被引量:8
8
作者 吴雅琴 章德明 LU Qizhen 《落叶果树》 2001年第2期4-6,共3页
用离体微嫁接法同时检测了苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎沟病毒和苹果茎痘病毒。由于苹果褪绿叶斑病毒和苹果茎沟病毒 ,症状是在叶部表现黄斑 ,试管内不易观察 ,病毒检出率较低 ,检测带毒率分别为37.5%和 6 1 .1 % ,在检测苹果茎痘病毒上取... 用离体微嫁接法同时检测了苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎沟病毒和苹果茎痘病毒。由于苹果褪绿叶斑病毒和苹果茎沟病毒 ,症状是在叶部表现黄斑 ,试管内不易观察 ,病毒检出率较低 ,检测带毒率分别为37.5%和 6 1 .1 % ,在检测苹果茎痘病毒上取得成功 ,检出率达 81 .3%以上。用木本指示植物跟踪检测了带毒品种 ,试验证明采用离体微嫁接法检测果树病毒比用木本指示植物检测所需时间短 。 展开更多
关键词 离体微嫁接法 苹果褪绿叶斑病毒 苹果茎沟病毒 苹果茎痘病毒 检测方法
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中、西药剂在苹果褪绿叶斑病毒脱除中的应用 被引量:5
9
作者 陈超 王桂兰 梁志敏 《落叶果树》 北大核心 1995年第1期1-2,共2页
以鉴定明确带有褪绿叶斑病毒的新红星试管苗为试材。在培养基中分别加入南板兰根和三氮唑核苷,接入大(5mm)、小(0.5mm)两种茎尖。分化后,经一次继代,进行ELISA检测。结果南板兰根对茎尖分化略有抑制,但其浓度高低... 以鉴定明确带有褪绿叶斑病毒的新红星试管苗为试材。在培养基中分别加入南板兰根和三氮唑核苷,接入大(5mm)、小(0.5mm)两种茎尖。分化后,经一次继代,进行ELISA检测。结果南板兰根对茎尖分化略有抑制,但其浓度高低没有影响;三氮唑核苷对分化有抑制作用,浓度越高越强,因此应在低浓度下使用。两种药剂均对大茎尖的分化没有影响。经ELISA检测,南板兰根只在高浓度(4支/L)、较小茎尖时(0.5mm).对褪绿叶斑病毒有脱除作用。而三氮唑核苷在本试验中不论浓度高低(10mg/L、20mg/L)和茎尖大小(0.5mm,5mm),对褪绿叶斑病毒均有很好的脱除作用。 展开更多
关键词 苹果 褪绿叶斑病毒 药剂脱毒
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3种苹果潜隐病毒多重RT-PCR检测体系的建立 被引量:12
10
作者 范旭东 董雅凤 +2 位作者 张尊平 李丽丽 裴光前 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1821-1826,共6页
研究建立了能同时检测苹果茎沟病毒(Applestem grooving virus,ASGV)、苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)和苹果茎痘病毒(Apple stem pitting virus,ASPV)的多重RT-PCR方法。以复合感染3种病毒的苹果‘望山红’... 研究建立了能同时检测苹果茎沟病毒(Applestem grooving virus,ASGV)、苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)和苹果茎痘病毒(Apple stem pitting virus,ASPV)的多重RT-PCR方法。以复合感染3种病毒的苹果‘望山红’组培苗为试材,对影响多重PCR的反应条件进行了一系列的调整和优化。多重RT-PCR体系灵敏性测验显示,最低能从RNA总量187.5ng的样品中检测3种病毒的存在。多重RT-PCR产物的序列与报道的病毒序列有较高的同源性,12个田间苹果样品的多重RT-PCR检测结果与单一PCR的结果一致,初步证明了多重RT-PCR检测的准确性。 展开更多
关键词 苹果 多重RT-PCR 检测 苹果茎沟病毒 苹果褪绿叶斑病毒 苹果茎痘病毒
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两步多重RT-PCR快速检测苹果潜隐性病毒 被引量:11
11
作者 陈红霞 邵建柱 +2 位作者 孙建设 曹晓凤 乔雪华 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期695-701,共7页
【目的】为建立检测3种苹果潜隐性病毒更为快速准确的方法,【方法】以携带苹果茎沟病毒(ASGV)、苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)和苹果茎痘病毒(ASPV)的成龄苹果树韧皮部为试材,根据基因库中苹果茎痘病毒(Apple stempitting virus,A... 【目的】为建立检测3种苹果潜隐性病毒更为快速准确的方法,【方法】以携带苹果茎沟病毒(ASGV)、苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)和苹果茎痘病毒(ASPV)的成龄苹果树韧皮部为试材,根据基因库中苹果茎痘病毒(Apple stempitting virus,ASPV)的外壳蛋白基因序列,设计合成了2对特异性引物,分别与合成的苹果茎沟病毒(ASGV)引物和苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)的引物组合配伍,筛选出最佳的引物对组合。对eDNA的合成所用引物和总RNA模板进行遴选和量化,对PCR过程中eDNA的用量、引物对的终浓度、退火温度等主要影响因素进行优化。【结果】结果表明,反转录引物为Oligo(dT)18、总RNA0.1~3.0μL时,可以得到较好的eDNA;ASPV—FR与ASGV—Pch、ACLSV—Pch引物组合优于ASPV—Pch,并且筛选出4组最佳的终浓度处理组合;eDNA用量为2.0-4.0μL、退火温度为50.0~52.9℃、循环数为35时,扩增效果较好。采用优化的多重RT—PCR体系对采自陕西和山东两省的样品进行检测,并用3种病毒的单重RT—PCR体系进行验证。【结论】结果呈现高度一致性,充分印证了该多重RT—PCR体系的准确性,适用于大量样品的快速检测。 展开更多
关键词 苹果病毒 苹果茎沟病毒 苹果茎痘病毒 苹果褪绿叶斑病毒 两步多重RT—PCR
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梨组织中苹果褪绿叶斑病毒的原位RT-PCR检测 被引量:10
12
作者 牛建新 周民生 +2 位作者 马兵钢 赵英 刘宏 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期53-58,共6页
为了建立梨树苹果褪绿叶斑病毒原位RT-PCR检测技术,用已知带有苹果褪绿叶斑病毒的库尔勒香梨和无病毒实生苗叶片为材料,利用DIG标记,研究了香梨病毒的叶片石蜡切片IS-RT-PCR检测技术。包括AMV逆转录酶、dNTPs、RNasin及互补引物浓度... 为了建立梨树苹果褪绿叶斑病毒原位RT-PCR检测技术,用已知带有苹果褪绿叶斑病毒的库尔勒香梨和无病毒实生苗叶片为材料,利用DIG标记,研究了香梨病毒的叶片石蜡切片IS-RT-PCR检测技术。包括AMV逆转录酶、dNTPs、RNasin及互补引物浓度对cDNA合成的影响,退火温度、TaqDNA聚合酶、Mg^2+、引物浓度及循环次数对原位PCR效果的影响。结果表明:RNasin的用量大于0.2U·μL^-1时,信号强度随着RNasin量的加大而增强;只有当dNTPs浓度达1.0mmol·L^-1时才能生成一定量的cDNA;AMV浓度在0.3-0.5U·μL^-1均可进行正常的逆转录,而且在该范围内产物的量随AMV浓度提高而增多;引物浓度达到0.9μmol·L^-1以上时才能进行有效的逆转录,并且生成的cDNA的量随引物浓度增大而增加。原位扩增ACLSV的cDNA适合退火温度为56℃。循环20-30次可出现较强的蓝色信号,引物浓度在0.8-1.2μmol·L^-1时显色较好;Taq酶浓度为20U·μL^-1以上,均显示较深的蓝色;Mg^2+浓度为1.5mmol·L^-1就可满足原位PCR所需。获得了苹果褪绿叶斑病毒的原位PCR优化检测体系,利用建立的优化程序对香梨样品进行了检测验证,取得了很好效果。 展开更多
关键词 库尔勒香梨 苹果褪绿叶斑病毒 原位PCR
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苹果褪绿叶斑病毒RT-LAMP检测方法的建立 被引量:10
13
作者 张双纳 李正男 +4 位作者 范旭东 张尊平 任芳 胡国君 董雅凤 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1706-1716,共11页
【目的】建立一种利用反转录环介导等温扩增(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)技术简便、快速检测苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)的方法。【方法】在ACLSV基因组序列... 【目的】建立一种利用反转录环介导等温扩增(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)技术简便、快速检测苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)的方法。【方法】在ACLSV基因组序列的3个保守区域设计3组引物,每组引物包括一对外引物(F3/B3)和一对内引物(FIP/BIP),从3组引物中筛选出一组效果最好的引物。对RT-LAMP反应体系,即Mg^(2+)、d NTPs、Betaine、FIP/BIP、B3/F3浓度进行优化,Mg^(2+)浓度梯度设置为0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0 mmol·L^(-1),d NTPs浓度为0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8 mmol·L^(-1),Betaine浓度为0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mol·L^(-1),FIP/BIP浓度为0.8、1.2、1.6、2.0、2.4μmol·L^(-1),F3/B3浓度为0、0.1、0.2、0.3、0.4μmol·L^(-1);优化RT-LAMP反应条件,采用已优化的反应体系,设置65、63、61、59、57℃5个不同的反应温度,反应时间设定为90 min。在引物筛选和反应体系反应条件优化过程中,使用荧光定量PCR仪,在反应体系中加入荧光染料,利用荧光信号积累实时监测整个反应过程,根据扩增曲线判断反应结果。以携带苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)、苹果茎痘病毒(Apple stem pitting virus,ASPV)、苹果花叶病毒(Apple mosaic virus,Ap MV)的植株叶片中提取的总RNA为模板测试RT-LAMP检测方法的特异性。将含ACLSV的叶片总RNA原液进行10倍梯度稀释,以RNA原液和10^(-1)、10^(-2)、10^(-3)、10^(-4)、10^(-5)、10^(-6)稀释液作为模板,进行RT-LAMP反应,测试RT-LAMP检测方法的灵敏性。随机采集23株苹果树的叶片,同时进行RT-LAMP和RT-PCR检测,加入SYBR GreenⅠ进行可视化检测。【结果】建立了ACLSV RT-LAMP检测方法,优化的检测体系为:6.0 mmol·L^(-1) Mg^(2+)、1.2 mmol·L^(-1) d NTPs、0.2 mol·L^(-1) Betaine、1.6μmol·L^(-1) FIP/BIP和0.2μmol·L^(-1) F3/B3引物,最佳反应条件为59℃,60 min。特异性检测中,仅ACLSV检测结果为� 展开更多
关键词 苹果 苹果褪绿叶斑病毒 反转录环介导等温扩增 REAL-TIME PCR 病毒检测
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桃树病毒病研究现状与防控对策 被引量:7
14
作者 李世访 卢美光 《中国果业信息》 2013年第10期80-81,共2页
【导读】近年来,桃树病毒的侵染日益严重,严重影响了桃产业的正常发展。目前.桃树上已经报道的病毒和类病毒病原主要有苹果褪绿叶斑病毒、李属坏死环斑病毒、李痘病毒、李矮缩病毒、樱桃绿环斑驳病毒、杏假褪绿叶斑病毒和李树皮坏死... 【导读】近年来,桃树病毒的侵染日益严重,严重影响了桃产业的正常发展。目前.桃树上已经报道的病毒和类病毒病原主要有苹果褪绿叶斑病毒、李属坏死环斑病毒、李痘病毒、李矮缩病毒、樱桃绿环斑驳病毒、杏假褪绿叶斑病毒和李树皮坏死茎纹孔伴随病毒、桃潜隐花叶类病毒和啤酒花矮化类病毒等。 展开更多
关键词 病毒 桃树 防控对策 苹果褪绿叶斑病毒 桃潜隐花叶类病毒 矮化类病毒 环斑病毒 斑驳病毒
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苹果褪绿叶斑病毒的ELISA检测技术研究 被引量:7
15
作者 马书尚 阮小凤 杨勇 《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心 2000年第2期27-30,共4页
比较了直接双抗体夹心法 ( DAS- ELISA)和间接双抗体夹心法 ( F( ab) 2 -ELISA)检测 CLSV的范围 (不同株系 ) ,并分析了在病毒提取介质中加入某些特殊成分后 ,对直接双抗体夹心法检测 CLSV效果的影响。结果表明 ,间接法可以检测较宽范... 比较了直接双抗体夹心法 ( DAS- ELISA)和间接双抗体夹心法 ( F( ab) 2 -ELISA)检测 CLSV的范围 (不同株系 ) ,并分析了在病毒提取介质中加入某些特殊成分后 ,对直接双抗体夹心法检测 CLSV效果的影响。结果表明 ,间接法可以检测较宽范围的病毒株系 ;当常规病毒提取介质中加入尼古丁、氯化镁和聚酰胺时 。 展开更多
关键词 苹果褪绿叶斑病毒 ELISA检测 病毒提取介质
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苹果病毒的研究现状 被引量:7
16
作者 李文慧 牛建新 《北方果树》 2006年第4期3-5,共3页
关键词 苹果褪绿叶斑病毒 苹果茎痘病毒 苹果茎沟病毒 危害特点 花叶病毒 病毒侵染 品质变劣 生长量 果锈
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中国西南主要苹果产区潜隐性病毒分子鉴定 被引量:7
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作者 姚润东 史文森 +2 位作者 孙吴润泽 黄奎 王健美 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期357-362,共6页
为了深入了解苹果受潜隐性病毒的影响情况,本研究针对云南、贵州、四川三省的387份苹果叶片样本,利用RT-PCR及多重RT-PCR技术,分析鉴定了三种苹果潜隐性病毒——苹果茎痘病毒(ASPV)、苹果茎沟病毒(ASGV)和苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)在苹... 为了深入了解苹果受潜隐性病毒的影响情况,本研究针对云南、贵州、四川三省的387份苹果叶片样本,利用RT-PCR及多重RT-PCR技术,分析鉴定了三种苹果潜隐性病毒——苹果茎痘病毒(ASPV)、苹果茎沟病毒(ASGV)和苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)在苹果上的发生现状.结果显示,苹果样本中ASPV阳性率为89.4%,ASGV阳性率为100%,ACLSV阳性率为81.6%,且它们多为混合感染,共计304份样本同时感染了三种病毒,混合感染率为78.5%.与云南、贵州相比,采自四川的苹果样本受潜隐性病毒感染最为严重.本研究报道了我国西南苹果主产区潜隐性病毒感染现状,建立了一套快速有效的苹果潜隐性病毒分子生物学鉴定方法. 展开更多
关键词 潜隐性病毒 苹果茎痘病毒 苹果茎沟病毒 苹果褪绿叶斑病毒 逆转录聚合酶链反应
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褪绿叶斑病毒(CLSV)对苹果属植物过氧化物酶活性及同工酶的影响 被引量:7
18
作者 肖艳 成明昊 李育农 《西南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 1992年第2期100-105,共6页
26个苹果属植物种类受苹果褪绿叶斑病毒(CLSV)侵染后,其过氧化物酶活性升高,嫁接后95天内出现1或2个增酶高峰.同工酶的谱带也增多,特别是B 区变化更为明显,但不同种类反应不一,楸子、酸苹果等对CLSV 抗性强的种类出现2个增酶高峰,且表... 26个苹果属植物种类受苹果褪绿叶斑病毒(CLSV)侵染后,其过氧化物酶活性升高,嫁接后95天内出现1或2个增酶高峰.同工酶的谱带也增多,特别是B 区变化更为明显,但不同种类反应不一,楸子、酸苹果等对CLSV 抗性强的种类出现2个增酶高峰,且表现时间早,峰值低,同工酶出现2次特异性谱带;冬白果等对CLSV 敏感的种类则只有1个增酶高峰,表现时间迟,峰值高,只出现一次特异性谱带。这种过氧化物酶活性及其同工酶谱的变化可作为鉴定苹果属植物对CLSV 的抗性的生化指标. 展开更多
关键词 苹果属 褪绿叶斑病毒 过氧化物酶
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5种苹果病毒多重PCR检测体系的建立
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作者 胡国君 范旭东 +4 位作者 李军 任芳 孙喜陈 张尊平 董雅凤 《中国果树》 北大核心 2023年第10期79-83,88,共6页
苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)、苹果茎沟病毒(ASGV)、苹果茎痘病毒(ASPV)、苹果坏死花叶病毒(ApNMV)和苹果锈果类病毒(ASSVd)是影响我国苹果产业健康发展的重要病毒病害,建立快速、准确的检测方法是防控病毒病的基础。分别设计了ACLSV、ApNM... 苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)、苹果茎沟病毒(ASGV)、苹果茎痘病毒(ASPV)、苹果坏死花叶病毒(ApNMV)和苹果锈果类病毒(ASSVd)是影响我国苹果产业健康发展的重要病毒病害,建立快速、准确的检测方法是防控病毒病的基础。分别设计了ACLSV、ApNMV和ASSVd 3种病毒的检测引物ACL-F1/R1、ApN-F2/R2和ASS-F1/R1,片段的大小分别为1112、1025、213 bp。利用新设计和已报道的苹果病毒特异性引物,通过引物检测效果比较、组合筛选、用量优化及退火温度调试,建立了5种苹果病毒多重PCR检测体系。该检测体系的扩增片段大小分别为ACLSV1112 bp、ApNMV640 bp、ASGV449 bp、ASPV349 bp和ASSVd213 bp。利用多重PCR和单一PCR分别对50份田间苹果样品进行病毒检测,结果显示,各样品多重PCR检测与单一PCR检测结果一致,表明本研究建立的多重RT-PCR方法可准确、快速、高效地检测单一或复合侵染的5种苹果病毒。 展开更多
关键词 苹果 苹果褪绿叶斑病毒 苹果茎沟病毒 苹果茎痘病毒 苹果坏死花叶病毒 苹果锈果类病毒 多重PCR
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来源于桃和苹果的苹果褪绿叶斑病毒的部分分子生物学特性和cp基因的原核表达 被引量:5
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作者 郑银英 王国平 +2 位作者 洪霓 宋艳苏 游红 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期356-361,共6页
从桃和苹果上分离得到苹果褪绿叶斑病毒ACLSV-HBP和ACLSV-C2个分离物,采用RT-PCR法进行扩增,所获扩增片段经序列测定,其全长分别为1768nt(ACLSV-HBP)和1751nt(ACLSV-C)。这2个分离物扩增片段全长的同源性为83%,mp基因片段核苷酸和推导... 从桃和苹果上分离得到苹果褪绿叶斑病毒ACLSV-HBP和ACLSV-C2个分离物,采用RT-PCR法进行扩增,所获扩增片段经序列测定,其全长分别为1768nt(ACLSV-HBP)和1751nt(ACLSV-C)。这2个分离物扩增片段全长的同源性为83%,mp基因片段核苷酸和推导编码氨基酸序列同源性分别为82.6%和87.1%;cp基因均由582nt组成,其核苷酸和推导编码氨基酸序列同源性分别为87.8%和95.9%。将2个分离物的cp基因与已报道ACLSV分离物进行序列同源性比较,结果显示ACLSV-HBP与SX/2的cp基因核苷酸序列及推导编码氨基酸序列同源性最高,分别为94.0%和96.4%。将ACLSV-HBP分离物的cp基因克隆到原核表达载体pGEX-KG,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,SDS-PAGE分析表明,融合蛋白大小约为46kDa。Western-blot分析表明,该基因在大肠杆菌内得到高效表达,融合蛋白具有抗原性。 展开更多
关键词 苹果褪绿叶斑病毒 原核表达载体 CP基因 分子生物学特性 SDS-PAGE分析 序列同源性 核苷酸序列 RT-PCR法
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