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台勾霉素生产菌指孢囊菌NRRL 18085遗传操作体系的建立 被引量：6
1
作者 肖毅 李苏梅 +3 位作者 马亮 张改云 鞠建华 张长生 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1014-1022,共9页
【目的】建立新型大环内酯类抗生素台勾霉素的生产菌指孢囊菌Dactylosporangium aurantiacum NRRL18085的遗传操作体系,实现台勾霉素相关生物合成基因的敲除突变。【方法】以整合型质粒pSET152为载体,建立了外源DNA通过接合转移进入指... 【目的】建立新型大环内酯类抗生素台勾霉素的生产菌指孢囊菌Dactylosporangium aurantiacum NRRL18085的遗传操作体系,实现台勾霉素相关生物合成基因的敲除突变。【方法】以整合型质粒pSET152为载体,建立了外源DNA通过接合转移进入指孢囊菌NRRL18085的操作方法和培养条件,利用PCR-targeting系统在体外构建了一个台勾霉素卤化酶基因敲除的cosmid质粒,通过接合转移转入到指孢囊菌NRRL18085野生菌中。【结果】获得了台勾霉素卤化酶基因敲除的指孢囊菌NRRL18085的双交换突变株,该突变株失去了产生台勾霉素的能力。【结论】成功建立和优化了指孢囊菌NRRL18085菌株的遗传操作体系,使得在体内分析和鉴定台勾霉素生物合成基因的功能成为可能,同时也为建立其他类似放线菌的遗传操作体系提供了参考。 展开更多
关键词 指孢囊菌 遗传体系 台勾霉素 生物合成 卤化酶
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大环内酯类化合物产生菌的基因筛选及其代谢产物研究 被引量：5
2
作者 江宏磊 方志锴 +3 位作者 陈名洪 彭飞 江红 连云阳 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1895-1899,共5页
应用Ⅰ型聚酮合酶(PKS-I)基因筛选体系从32株海洋放线菌中寻找大环内酯类化合物的潜在产生菌,通过DNA序列相似性比对从5株阳性菌株中筛选获得了游动放线菌Actinoplanes sp.FIM060065。采用HPLC制备色谱从该菌株发酵液中分离纯化得到一... 应用Ⅰ型聚酮合酶(PKS-I)基因筛选体系从32株海洋放线菌中寻找大环内酯类化合物的潜在产生菌,通过DNA序列相似性比对从5株阳性菌株中筛选获得了游动放线菌Actinoplanes sp.FIM060065。采用HPLC制备色谱从该菌株发酵液中分离纯化得到一个大环内酯类化合物FW060065,紫外、质谱以及核磁共振波谱分析表明它与台勾霉素B同质,药敏实验表明其对艰难梭菌、消化链球菌、双歧杆菌等革兰氏阳性厌氧菌显示出较强的抗菌能力。本研究通过基因筛选获得了台勾霉素的产生菌及其相应的代谢产物,为Ⅰ型聚酮合酶基因与大环内酯类化合物之间的联系提供了证据。 展开更多
关键词 大环内酯类化合物 聚酮合酶 基因筛选 代谢产物 台勾霉素
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台勾霉素及其类似物的作用机制与生物合成研究进展
3
作者 吴小燕 邹祥 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期385-392,共8页
介绍近年上市用于治疗耐药性艰难梭菌的抗菌药物台勾霉素及其衍生物的开发现状、作用机制及生物合成途径,展望台勾霉素及衍生物的研究前景。台勾霉素具有不同于万古霉素的作用机制,通过阻碍RNA链合成的起始和转录来抑制核酸合成。台勾... 介绍近年上市用于治疗耐药性艰难梭菌的抗菌药物台勾霉素及其衍生物的开发现状、作用机制及生物合成途径,展望台勾霉素及衍生物的研究前景。台勾霉素具有不同于万古霉素的作用机制,通过阻碍RNA链合成的起始和转录来抑制核酸合成。台勾霉素的生物合成涉及台勾霉素内酯环的形成、2,4-二羟基-3,5-二氯-6-乙基苯甲酸及脱氧甘露糖侧链、以及后修饰等步骤;结合台勾霉素生物合成途径,采用组合生物合成与代谢工程改造,可快速获得高产菌株应用于工业化生产。 展开更多
关键词 台勾霉素 结构类似物 作用机制 生物合成 基因工程改造
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德干高原游动放线菌HS-16-20中活性次级代谢产物的分离纯化与结构鉴定
4
作者 任会军 韩双 +4 位作者 张灵坚 汤飞 应雪肖 陈学军 樊红梅 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期104-108,共5页
目的德干高原游动放线菌HS-16-20发酵液中活性次级代谢产物的鉴定。方法发酵液经过滤得到菌丝体,菌丝体用乙醇浸泡得乙醇浸泡液。通过HPLC分析与活性测试,确定了浸泡液中具有抑制MRSA活性的峰。浸泡液经过浓缩析出晶体,晶体通过半制备... 目的德干高原游动放线菌HS-16-20发酵液中活性次级代谢产物的鉴定。方法发酵液经过滤得到菌丝体,菌丝体用乙醇浸泡得乙醇浸泡液。通过HPLC分析与活性测试,确定了浸泡液中具有抑制MRSA活性的峰。浸泡液经过浓缩析出晶体,晶体通过半制备反相高效液相色谱分离得到目标单体化合物,然后利用高分辨质谱和核磁共振等方法确定单体化合物的结构。结果从菌株HS-16-20的发酵液中分离得到1个具有抑制MRSA活性的化合物,通过波谱分析,证实该化合物与台勾霉素B同质。结论从菌株HS-16-20发酵液中分离得到的活性化合物与台勾霉素B同质。文献报道台勾霉素B具有很好的抗MRSA活性,因此台勾霉素B为该菌抗MRSA活性的物质基础。另外,德干高原游动放线菌HS-16-20产台勾霉素B的效价高(>1000mg/L),组分单一,分离纯化工艺简单,非常适合产业化生产。 展开更多
关键词 德干高原游动放线菌HS-16-20 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 大环内酯 台勾霉素B 非达霉素
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