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题名副溶血性弧菌PMA-LAMP方法的建立
被引量：9
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作者
马骉
吴莹莹
戴明雁
方结红
张明洲
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机构
中国计量学院生命科学学院
浙江省海洋食品品质及危害物控制技术重点实验室
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出处
《现代食品科技》
EI
CAS
北大核心
2016年第7期205-213,共9页
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基金
浙江省自然科学基金(LY13C200009)
浙江省重大科技专项重点项目(2012C12013-3)
宁波市重大农业科技专项(2013C11003)
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文摘
副溶血性弧菌(Vibrio parahemolyticus)是一种常见的食源性致病菌,在海鲜等食物中检出率很高,食用没有煮熟的带菌食物或者腌制品,极易引起食物中毒。目前用以检测副溶血性弧菌的快速检测方法都不能区别死活菌,容易出现假阳性结果。本研究基于DNA结合染料叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA),利用荧光染料钙黄绿素(Calcein)的特性,建立了一种实时的可视化环介导等温扩增方法(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),并与q PCR方法进行比较。实时可视化LAMP方法的反应结果,既可以肉眼直接观测,也可以借助荧光分析设备实时监测,并对半定量分析进行初探,为之后向定量分析深入研究打下基础。实验结果表明,实时可视化PMA-LAMP方法的灵敏度可达5.0×102 CFU/m L,模拟食样灵敏度为1.9×102 CFU/m L,与PMA-q PCR方法结果一致。除去前增菌时间,整个检测过程只需2 h,且准确率高,为副溶血性弧菌快速检测的开展提供了有效的技术支持。
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关键词
副溶血性弧菌
可视化环介导等温扩增方法
叠氮溴化丙锭
实时荧光定量PCR
快速检测
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Keywords
Vibrio parahaemolyticus
visual loop mediated isothermal amplification
propidium monoazide
real-time quantitative polymerase chain reaction
rapid detection
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分类号
TS207.4
[轻工技术与工程—食品科学]
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