降钙素基因相关肽(CGRP)受体 被引量：10

1

作者 孙飞 秦旭平 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期731-734,共4页

降钙素基因相关肽(CGRP)是一个含37个氨基酸残基的神经肽,对心血管、神经和消化等系统的功能有重要的调节作用。CGRP功能主要由其受体介导。研究发现,CGRP受体由降钙素受体样受体(CRLR)、受体活性修饰蛋白-1(RAMP1)和受体组分蛋白(RCP)... 降钙素基因相关肽(CGRP)是一个含37个氨基酸残基的神经肽,对心血管、神经和消化等系统的功能有重要的调节作用。CGRP功能主要由其受体介导。研究发现,CGRP受体由降钙素受体样受体(CRLR)、受体活性修饰蛋白-1(RAMP1)和受体组分蛋白(RCP)组成,不同受体组分在受体的跨膜信号转导中所起的作用存在差异。 展开更多

关键词 降钙素基因相关肽 降钙素受体样受体 受体活性修饰蛋白-1 受体组分蛋白

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hRAMP1修饰的骨髓间充质干细胞移植对兔球囊损伤血管再狭窄及心功能的影响 被引量：7

2

作者 龙仙萍 赵然尊 +2 位作者 石蓓 许官学 沈长银 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第30期2134-2139,共6页

目的观察受体活性修饰蛋白1（hRAMP1）修饰的骨髓间充质干细胞（MSC）移植对血管再狭窄及心肌梗死后兔心功能的影响及其基因修饰MSC治疗的安全性。方法建立兔心肌梗死早期再灌注模型并行右侧颈动脉球囊损伤（简称双模型），携带增强型... 目的观察受体活性修饰蛋白1（hRAMP1）修饰的骨髓间充质干细胞（MSC）移植对血管再狭窄及心肌梗死后兔心功能的影响及其基因修饰MSC治疗的安全性。方法建立兔心肌梗死早期再灌注模型并行右侧颈动脉球囊损伤（简称双模型），携带增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的腺病毒转染MSC，实验按数字随机分为hRAMP1转染MSC移植组（hRAMP1-MSC组，n,=24），空病毒转染MSC移植组（MSC组，n=24）和PBS移植对照组（对照组，n=24）组，细胞移植后28d免疫荧光检测心肌和血管组织MSC归巢和分化及存活情况，免疫组织化学检测心肌血小板-内皮细胞黏附分子（CD31）及血管α-平滑肌抗体（α-SMA）和增殖细胞核抗原表达（PCNA），HE染色对心肌和血管组织形态学检测，TTC检测心肌梗死面积，超声心动图测定心功能。结果细胞移植28d，损伤血管内膜有EGFP标记的MSC，EGFP表达位置检测到CD31表达，并沿损伤内膜分布，对照组无EGFP表达；与对照组比较，hRAMP1-MSC和MSC组新生内膜面积（0．15±0．05和0．33±0．08比0．77±0．11）与新生内膜和中膜面积比（0．24±0．07和0．51±0．12比1．09±0．23）均明显低（均P〈0．05），尤以hRAMP1-MSC组显著（均P〈0．05）；损伤血管增生内膜细胞α-SMA表达阳性，PCNA表达率在对照组最高，MSC组次之，hRAMP1-MSC组最低（0．627±0．049、0．366±0．013和0．120±O．028，均P〈0．05）。与对照组比较，细胞移植后28dhRAMP1-MSC组和MSC组梗死交界区毛细血管密度增加（44．2±3．8和22．3±1．7比9．3±3．6，均P〈0．05）；心功能均得到改善（射血分数：60．6％±1．5％和50．8％±3．2％比38．2％±2．O％，均P〈0．05）；心肌梗死面积缩小（20．7％±1．4％和33．2％±3．7％比35．6％±2．7％，均P〈0．05），尤以hRAMP1-MSC组显著。结论hRAMP1基因修饰MSC较单纯MSC移植更能改善梗死后心脏� 展开更多

关键词 心肌梗死 间质干细胞 肌细胞 平滑肌 受体活性修饰蛋白-1

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降钙素基因相关肽受体组分蛋白 被引量：5

3

作者 唐江琼 秦旭平 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期277-280,共4页

降钙素基因相关肽受体组分蛋白(calcitonin gene-related peptide-receptor component protein,CGRP-RCP)是降钙素基因相关肽受体的一个具有146/148个氨基酸的胞内膜周边蛋白,特异地与降钙素受体样受体(calcitonin receptor-like recept... 降钙素基因相关肽受体组分蛋白(calcitonin gene-related peptide-receptor component protein,CGRP-RCP)是降钙素基因相关肽受体的一个具有146/148个氨基酸的胞内膜周边蛋白,特异地与降钙素受体样受体(calcitonin receptor-like receptor,CRLR)相互作用并促进CGRP和肾上腺髓质素的信号跨膜转导,现认为CGRP-RCP也是G蛋白偶联受体中一个动态的调节器。CGRP-RCP的mRNA在人和鼠的几乎所有组织均可检测到,在小鼠睾丸中分布尤其明显。在哺乳动物中,CGRP-RCP与C17(酵母菌中聚合酶III的必需亚基)是直系同源蛋白,人体的CGRP-RCP能取代酵母中的C17,发挥与C17相同的生物学作用。 展开更多

关键词 降钙素基因相关肽受体 降钙素基因相关肽受体组分蛋白 降钙素受体样受体 受体活性修饰蛋白-1

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腺病毒介导人受体活性修饰蛋白-1修饰骨髓间充质干细胞移植对兔心肌梗死后心肌新生血管形成的影响 被引量：2

4

作者 龙仙萍 赵然尊 +2 位作者 石蓓 许官学 喻田 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期699-703,I0002,共6页

目的应用人受体活性修饰蛋白-1(hRAMP1)修饰骨髓间充质干细胞(MSCs)移植治疗急性心肌梗死(AMI)兔模型,观察基因修饰干细胞移植对AMI后兔新生血管及心功能的影响。方法采用密度梯度离心结合贴壁法培养兔MSCs,取第3～5代MSCs用于实验。应... 目的应用人受体活性修饰蛋白-1(hRAMP1)修饰骨髓间充质干细胞(MSCs)移植治疗急性心肌梗死(AMI)兔模型,观察基因修饰干细胞移植对AMI后兔新生血管及心功能的影响。方法采用密度梯度离心结合贴壁法培养兔MSCs,取第3～5代MSCs用于实验。应用带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的hRAMP1重组腺病毒载体和空病毒载体转染MSCs,建立AMI兔模型,随机分为hRAMP1转染MSCs移植组(hRAMP1-MSCs组)、空病毒转染MSCs移植组(MSCs组)和等体积的磷酸盐缓冲液(PBS)注射组(对照组),每组12只。模型建立后40 min,经局部注射等体积MSCs悬液或PBS至梗死交界区。MSCs移植后7、14、28 d,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清血管内皮生长因子(VEGF)水平;MSCs移植后28 d,应用超声心动仪检测兔的心脏功能,采用苏木精-伊红(H-E)染色评估心肌病理学改变、2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测定心肌梗死面积,采用免疫组织化学染色检测梗死交界区CD31的表达,并计数新生毛细血管密度。结果流式细胞术测定结果显示,CD29阳性率为95.8%,CD90为98.6%,CD45为12.5%。MSCs移植后7、14、28 d,hRAMP1-MSCs组的血清VEGF水平均又显著高于MSCs组和对照组(P值均<0.05),MSCs组又显著高于对照组(P值均<0.05)。MSCs移植后28 d,hRAMP1-MSCs组的心肌纤维化程度、心肌梗死面积均显著小于MSCs组和对照组(P值均<0.05),MSCs组又显著小于对照组(P值均<0.05)。MSCs移植后28 d,3组梗死交界区均有CD31表达,hRAMP1 MSCs组新生毛细血管密度显著高于MSCs组和对照组(P值均<0.05),MSCs组又显著高于对照组(P<0.05)。结论 hRAMP1基因修饰MSCs移植较MSCs移植更能增加梗死交界区心肌新生血管密度,改善梗死后心脏的功能。 展开更多

关键词 心肌梗死 间充质干细胞 受体活性修饰蛋白-1 血管形成 心功能

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过表达受体活性修饰蛋白-1对人气道平滑肌细胞增殖和细胞周期的影响 被引量：1

5

作者 吴雷 叶树培 +2 位作者 黄玉娥 陈翠仪 陈美华 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2019年第4期579-582,共4页

目的:探讨过表达受体活性修饰蛋白-1(RAMP)对人气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖和细胞周期的影响及机制。方法:从人正常肺叶支气管分离出ASMCs,取第3~8代细胞,转染重组pcDNA3.1-RAMP-1,同时将转染pcDNA3.1空载体的细胞作对照,并设置空白组。... 目的:探讨过表达受体活性修饰蛋白-1(RAMP)对人气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖和细胞周期的影响及机制。方法:从人正常肺叶支气管分离出ASMCs,取第3~8代细胞,转染重组pcDNA3.1-RAMP-1,同时将转染pcDNA3.1空载体的细胞作对照,并设置空白组。转染48h后,Westernblot检测RAMP-1、IκBα、p65NF-κB、PCNA和CyclinD1蛋白表达,流式细胞术检测细胞周期。CCK-8法检测转染24、48和72h后细胞增殖情况。结果:pcDNA3.1-RAMP-1组ASMCs中RAMP-1蛋白表达明显高于空白组(P<0.05)。与空白组和pcDNA3.1组比较,pcDNA3.1-RAMP-1组细胞增殖降低,G0/G1期细胞比例升高,而S期和G2/M期细胞比例降低,IκBα蛋白表达升高,p65NF-κB、PCNA和CyclinD1蛋白表达降低(P<0.05)。结论:RAMP-1可抑制人ASMCs增殖,阻滞细胞周期进程,机制可能与抑制NF-κB信号通路有关。 展开更多

关键词 气道平滑肌细胞 受体活性修饰蛋白-1 NF-ΚB信号通路

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转染hRAMP1的间充质干细胞对心肌梗死后局部血管再生的作用

6

作者 赵然尊 龙仙萍 +2 位作者 刘志江 王冬梅 石蓓 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第15期1496-1500,共5页

目的探讨腺病毒介导hRAMP1基因转染间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植对心肌梗死后新生血管生成及其可能机制。方法密度梯度离心并贴壁培养获得兔骨髓MSCs,并分别转染pAd2-hRAMP1或pAd2-EGFP后给予CGRP刺激,ELISA法测定细... 目的探讨腺病毒介导hRAMP1基因转染间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植对心肌梗死后新生血管生成及其可能机制。方法密度梯度离心并贴壁培养获得兔骨髓MSCs,并分别转染pAd2-hRAMP1或pAd2-EGFP后给予CGRP刺激,ELISA法测定细胞培养上清液中VEGF和HGF水平。建立心肌梗死再灌注兔模型,采用随机数字表法分为MSChRAMP1组(pAd2-hRAMP1转染MSCs移植)、MSCnull组(pAd2-EGFP转染MSCs移植)组和对照组(等量生理盐水注射)(n=10)。2周时Western blot检测心肌梗死组织促血管生长因子VEGF和HGF蛋白表达;4周时TTC染色测定心肌梗死面积比;抗CD31免疫组化染色检测心肌梗死区及梗死周边区新生毛细血管密度。结果 CGRP诱导72 h后MSChRAMP1培养上清液中VEGF和HGF水平显著高于MSCnull组[VEGF:(1 859.4±267.4)vs(1 344.4±137.2);(1 052.2±239.3)vs(683.8±150.5)pg/ml,P<0.05]。细胞移植后4周TTC染色检测显示MSChRAMP1组心肌梗死面积显著降低对照组和MSCnull组[(10.1±2.9)%vs(30.6±2.7)%和(22.5±3.2)%,P<0.05];抗CD31免疫组化染色显示,MSChRAMP1组的梗死区和梗死交界区新生毛细血管计数明显高于对照组和MSCnull组(P<0.05);Western blot检测显示细胞移植后2周MSChRAMP1组心肌梗死区促血管生长因子VEGF和HGF蛋白表达显著高于对照组和MSCnull组(P<0.05)。结论MSChRAMP1能通过提高梗死区心肌组织中促血管生长因子VEGF和HGF的表达,促进心肌梗死区和梗死交界区新生毛细血管生成,降低心肌梗死面积。 展开更多

关键词 受体活性修饰蛋白-1 间充质干细胞 心肌梗死 再血管化 细胞因子

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电针对功能性消化不良肝郁脾虚型大鼠中枢及外周降钙素基因相关肽及受体活性修饰蛋白的影响 被引量：14

7

作者 徐派的 辛玉 +2 位作者 张红星 周利 杨云 《世界华人消化杂志》 CAS 2015年第21期3433-3439,共7页

目的:观察电针对功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)肝郁脾虚模型大鼠中枢及外周胃肠激素:降钙素基因相关肽(calcitonin generelated peptide,CGRP)及其相应受体-受体活性修饰蛋白质1(receptor activity modifying protein 1,RAM... 目的:观察电针对功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)肝郁脾虚模型大鼠中枢及外周胃肠激素:降钙素基因相关肽(calcitonin generelated peptide,CGRP)及其相应受体-受体活性修饰蛋白质1(receptor activity modifying protein 1,RAMP1)的影响.方法:将48只SD大鼠随机分为空白组、模型组和电针组,每组16只.除正常组以外,剩余两组大鼠采用郭氏夹尾刺激法(14 d,2次/d)+不规则饮食法(逢单日禁食,饮水正常)+冰生理盐水灌胃法(-7℃0.9%NaCl注射液2 mL,2次/d)的多因素干预法造模.造模成功后进行电针治疗,治疗时间为28 d,1次/24 h.治疗结束后分别对3组大鼠进行灌胃处理,解剖取材,测定胃内残留率及小肠推进率;免疫印迹法(Western blot)分别测定各组下丘脑、胃、肠的CGRP、RAMP1含量.结果:与空白组相比,模型组大鼠胃内残留率明显升高,小肠推进率显著降低(P<0.001),模型组大鼠胃窦、空肠的CGRP及其受体RAMP1的表达含量均明显升高(P<0.05),模型组大鼠下丘脑CGRP及其受体RAMP1的表达含量明显升高(P<0.01);与模型组相比,电针组胃内残留率显著降低(P<0.001),小肠推进率明显升高(P<0.01),电针组大鼠中枢与外周的CGRP及其受体RAMP1的含量显著降低,且均有显著性差异(P<0.05).结论:电针能够显著地降低外周及其受体RAMP1的水平,从而达到降低胃肠道的敏感性的作用.同样,对中枢的CGRP及其受体的表达有着显著的影响,提示电针是通过脑-肠轴调节脑肠肽的分泌,从而调节胃肠道的活动,这可能是电针治疗FD的脑-肠轴机制. 展开更多

关键词 功能性消化不良 电针 降钙素基因相关肽 受体活性修饰蛋白质1

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腺病毒载体介导hRAMP1调节兔颈动脉球囊损伤后炎症细胞因子表达对增生内膜的影响

8

作者 龙仙萍 石蓓 +3 位作者 赵然尊 许官学 崔璨 喻田 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第14期1384-1387,共4页

目的探讨腺病毒载体介导人受体活性修饰蛋白-1(receptor activity modifying protein-1,hRAMP1)基因对兔颈动脉粥样硬化并球囊成形术后炎性细胞因子表达的影响。方法建立兔动脉粥样硬化狭窄模型并行球囊损伤血管(简称血管成形术),随机... 目的探讨腺病毒载体介导人受体活性修饰蛋白-1(receptor activity modifying protein-1,hRAMP1)基因对兔颈动脉粥样硬化并球囊成形术后炎性细胞因子表达的影响。方法建立兔动脉粥样硬化狭窄模型并行球囊损伤血管(简称血管成形术),随机抽样分为RAMP1组(n=18)和对照组(n=18),经球囊局部注射携带hRAMP1基因腺病毒载体(pAd2-GFP-RAMP1)或PBS,于注射后7、14 d和28 d,应用ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和C-反应蛋白(CRP)表达水平;Western blot检测局部hRAMP1目的基因表达;免疫组织化学染色测定血管局部TNF-α表达,HE染色检测血管形态学。结果血管成形术后不同时间点TNF-α表达增加[7 d:(74.13±4.99),14 d:(93.40±6.69),28 d:(67.46±6.57)],外源hRAMP1注射后TNF-α表达下降[7 d:(64.95±6.77),14 d:(75.29±4.73),28 d:(45.08±5.00),P<0.05],病毒注射后7 d和14 d RAMP1组CRP水平[7 d:(29.27±1.57),14 d:(9.68±1.60)]与对照组比较[7 d:(43.96±7.88),14 d:(13.51±1.68)]显著下降(P<0.05),28 d 2组间无差异性;腺病毒注射后28 d损伤血管局部仍检测到hRAMP1蛋白表达,同时RAMP1组局部TNF-α表达与对照组比较明显下降,HE染色显示:RAMP1组新生内膜面积[7 d:(0.07±0.18),14 d:(0.15±0.05),28 d:(0.35±0.05)]与对照组[7 d:(0.14±0.02),14 d:(0.39±0.09),28 d:(0.56±0.05]比较明显降低(P<0.05)。结论外源hRAMP1基因调节兔动脉粥样硬化并血管成形术后CRP和TNF-α的表达,抑制血管成形术后再狭窄。 展开更多

关键词 人受体活性修饰蛋白-1 炎症细胞因子 血管成形术 增生内膜

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疏肝调神针法对偏头痛大鼠受体活性修饰蛋白1、5-羟色胺1D受体表达的影响 被引量：21

9

作者 王萌萌 于晓华 +4 位作者 耿炜 崔华峰 王长春 韩晶 杨佃会 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期440-444,共5页

目的:探讨疏肝调神针法对偏头痛大鼠三叉神经脊束核、中脑受体活性修饰蛋白1(RAMP1)、5-羟色胺1D受体(5-HT1DR)表达的影响,探讨本法治疗偏头痛的镇痛机制。方法:雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、疏肝调神组、普通针刺组,每组10... 目的:探讨疏肝调神针法对偏头痛大鼠三叉神经脊束核、中脑受体活性修饰蛋白1(RAMP1)、5-羟色胺1D受体(5-HT1DR)表达的影响,探讨本法治疗偏头痛的镇痛机制。方法:雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、疏肝调神组、普通针刺组,每组10只。疏肝调神组取"百会""风池""内关""太冲"、普通针刺组取"百会""风池"进行针刺,每次30min,每日1次,共8d。针刺干预结束后,于大鼠颈后皮下注射硝酸甘油复制偏头痛模型。采用荧光定量PCR法、Western blot法检测大鼠三叉神经脊束核、中脑RAMP1、5-HT1D R的mRNA和蛋白表达情况。结果:与对照组比较,模型组三叉神经脊束核、中脑中RAMP1的mRNA、蛋白表达均显著升高(P<0.05),5-HT1DR的mRNA、蛋白表达均显著降低(P<0.05)。与模型组比较,疏肝调神组、普通针刺组三叉神经脊束核、中脑中RAMP1的mRNA、蛋白表达均明显降低(P<0.05),5-HT1DR的mRNA、蛋白表达均明显升高(P<0.05)。与普通针刺组比较,疏肝调神组三叉神经脊束核、中脑中RAMP1的mRNA、蛋白表达均明显降低(P<0.05),5-HT1DR的mRNA、蛋白表达均明显升高(P<0.05)。结论:疏肝调神针法对偏头痛的治疗作用可能与抑制中枢降钙素基因相关肽的表达、激活5-HT的表达有关。 展开更多

关键词 针刺 疏肝调神针法 偏头痛 受体活性修饰蛋白1 5-羟色胺1D受体

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受体活性修饰蛋白1基因载体构建及其对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响 被引量：5

10

作者 郑元斌 秦旭平 +2 位作者 孙飞 唐江琼 廖端芳 《南华大学学报（医学版）》 2010年第1期1-5,共5页

目的探讨受体活性修饰蛋白1(RAMP1)表达载体的构建及其高表达RAMP1对血管平滑肌细胞增殖的影响。方法通过构建RAMP1大鼠基因开放阅读框的真核表达载体,利用脂质体将其转入原代培养的大鼠主动脉平滑肌细胞,G418筛选稳定表达细胞集落。逆... 目的探讨受体活性修饰蛋白1(RAMP1)表达载体的构建及其高表达RAMP1对血管平滑肌细胞增殖的影响。方法通过构建RAMP1大鼠基因开放阅读框的真核表达载体,利用脂质体将其转入原代培养的大鼠主动脉平滑肌细胞,G418筛选稳定表达细胞集落。逆转录-聚合酶链反应和蛋白印迹法检测RAMP1的表达量;MTT法测定细胞的增殖或生存率,并计算细胞倍增时间。结果成功构建RAMP1基因真核表达载体,脂质体能将RAMP1表达载体稳定转入血管平滑肌细胞,RAMP1高表达能明显增强降钙素基因相关肽抑制血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞生存率及明显延长其倍增时间。结论RAMP1高表达能增强CGRP抑制血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖。 展开更多

关键词 受体活性修饰蛋白1 降钙素基因相关肽 血管平滑肌细胞 增殖

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支气管哮喘患者外周血及诱导痰中CGRP、RAMP-1含量水平的测定及其意义 被引量：3

11

作者 陈翠仪 吴雷 +2 位作者 吕嘉春 陈美华 黄玉娥 《国际呼吸杂志》 2022年第6期410-415,共6页

目的探究支气管哮喘(哮喘)患者外周血及诱导痰中降钙素基因相关肽(CGRP)、受体活性修饰蛋白1(RAMP-1)表达水平的测定及其临床意义。方法本研究为病例对照研究。采用单纯随机抽样法,选择2017年2月至2019年10月东莞松山湖中心医院呼吸内... 目的探究支气管哮喘(哮喘)患者外周血及诱导痰中降钙素基因相关肽(CGRP)、受体活性修饰蛋白1(RAMP-1)表达水平的测定及其临床意义。方法本研究为病例对照研究。采用单纯随机抽样法,选择2017年2月至2019年10月东莞松山湖中心医院呼吸内科收治的122例哮喘患者为研究对象,根据病情严重程度将其分为非重症哮喘组(85例)及重症哮喘组(37例),另选择同期来东莞松山湖中心医院健康体检的50名志愿者作为对照组。测定3组治疗前及哮喘患者治疗后的外周血、诱导痰中CGRP、RAMP-1水平,并收集受试者肺功能及气道炎症指标,采用组胺支气管激发试验测定受试者第1秒用力呼气容积(FEV1)下降20%的累积吸入组胺剂量(PD20)。采用多因素logistic回归分析哮喘患者血清中CGRP及诱导痰中CGRP、RAMP-1与治疗效果的相关性。结果(1)3组外周血及诱导痰中CGRP、RAMP-1水平差异均有统计学意义(P值均<0.05),且重症哮喘组高于非重症哮喘组和对照组,非重症哮喘组高于对照组(P值均<0.05)。(2)外周血及诱导痰中CGRP、RAMP-1水平与诱导痰中白细胞介素4(IL-4)、IL-9均呈正相关(P值均<0.05),与肺功能指标、PD20均呈负相关(P值均<0.05)。(3)重症哮喘组中治疗无效者的血清、诱导痰中CGRP、RAMP-1水平高于有效者;多因素logistic回归分析显示,血清中CGRP及诱导痰中CGRP、RAMP-1水平是重症哮喘患者治疗效果的独立危险因素(OR值分别为1.07、1.25、1.01、1.02,P值均<0.05)。结论哮喘患者外周血及诱导痰中CGRP、RAMP-1水平异常升高,且重症哮喘患者的上述指标水平与病情严重程度及治疗效果相关。 展开更多

关键词 哮喘 降钙素基因相关肽 受体活性修饰蛋白1 痰 诱导

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人受体活性修饰蛋白1基因修饰的骨髓间充质干细胞移植对兔血管成形术后新生内膜的影响 被引量：4

12

作者 龙仙萍 赵然尊 +1 位作者 石蓓 许官学 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期675-682,共8页

目的:探讨人受体活性修饰蛋白1(hRAMP1)基因修饰的骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对动脉粥样硬化模型兔颈动脉球囊成形术后新生内膜增殖的影响。方法:密度梯度离心法加贴壁培养法获得MSCs,并以携带hRAMP1的腺病毒转染MSCs获得hRAMP1基因修... 目的:探讨人受体活性修饰蛋白1(hRAMP1)基因修饰的骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对动脉粥样硬化模型兔颈动脉球囊成形术后新生内膜增殖的影响。方法:密度梯度离心法加贴壁培养法获得MSCs,并以携带hRAMP1的腺病毒转染MSCs获得hRAMP1基因修饰的MSCs(hRAMP1-MSCs)。建立动脉粥样硬化狭窄并球囊损伤血管成形术的兔模型,随机分为hRAMP1-MSCs组、MSCs组和对照组,模型建立成功后经耳缘静脉分别注射携带pAd2-EGFP-hRAMP1或pAd2-EGFP的MSCs和PBS,于细胞移植后7 d、14 d和28 d分别处死动物取材,观察MSCs归巢、血管内皮化程度及内膜增生程度,同时检测血清血管内皮生长因子(VEGF)水平和血管局部内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)表达。结果:细胞移植后不同时点hRAMP1-MSCs组和MSCs组损伤血管增生内膜均有CD31和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)分布,但以hRAMP1-MSCs组内皮化程度明显,MSCs组次之,两者与对照组比较均有显著差异(P<0.05);细胞移植后不同时点hRAMP1-MSCs组和MSCs组内膜增生面积及再狭窄率均低于对照组(P<0.05),尤以hRAMP1-MSCs组降低明显;细胞移植后不同时点hRAMP1-MSCs组和MSCs组血清VEGF水平和血管eNOS表达较对照组增加(P<0.05),而hRAMP1-MSCs组又明显高于MSCs组(P<0.05);损伤血管新生内膜增殖细胞核抗原(PCNA)阳性表达在hRAMP1-MSCs组最少,对照组最多。结论:hRAMP1基因修饰的MSCs能更有效促进损伤内膜快速内皮化,重组hRAMP1腺病毒载体不影响MSCs向内皮细胞分化潜能。基因联合干细胞治疗能更好地促进损伤动脉快速内皮化,降低血管成形术后再狭窄。 展开更多

关键词 受体活性修饰蛋白1 间充质干细胞 新生内膜 再内皮化 血管成形术

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受体活性修饰蛋白1促进成骨作用的研究进展 被引量：2

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作者 张勤 宫苹 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 2019年第1期30-36,共7页

生理状态下,骨吸收与骨形成过程的动态平衡对维持骨组织功能至关重要。而在骨损伤状态下,如何通过促进骨形成,抑制骨吸收从而促进骨愈合过程一直是该领域研究的热点。近年来,受体活性修饰蛋白-1(RAMP1)在骨代谢过程中的调节作用已受到... 生理状态下,骨吸收与骨形成过程的动态平衡对维持骨组织功能至关重要。而在骨损伤状态下,如何通过促进骨形成,抑制骨吸收从而促进骨愈合过程一直是该领域研究的热点。近年来,受体活性修饰蛋白-1(RAMP1)在骨代谢过程中的调节作用已受到越来越多的关注。RAMP1广泛存在于骨组织中,它可以与不同的G蛋白偶联受体(GPCR)结合,修饰受体行为,调节相应的配体作用。此外,它还能进一步参与到受体介导的信号转导中,影响成骨相关细胞内蛋白的相互作用,从而影响成骨相关细胞增殖、迁移、分化等生物学特性。本文就近年来RAMP1促进成骨作用的研究作一综述。 展开更多

关键词 受体活性修饰蛋白1 降钙素基因相关肽 成骨作用 G蛋白偶联受体 降钙素受体样受体

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腺病毒介导hRAMP1基因转染血管平滑肌细胞的增殖和凋亡 被引量：3

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作者 龙仙萍 赵然尊 +3 位作者 石蓓 崔璨 盛瑾 陈攀科 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第46期8598-8602,共5页

背景:外源性受体活性修饰蛋白1基因转染可能对血管平滑肌细胞增殖调控具有重要的作用。目的:探讨腺病毒载体介导人受体活性修饰蛋白1基因对体外培养的兔血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响。方法:分离培养获得兔主动脉血管平滑肌细胞,分别... 背景:外源性受体活性修饰蛋白1基因转染可能对血管平滑肌细胞增殖调控具有重要的作用。目的:探讨腺病毒载体介导人受体活性修饰蛋白1基因对体外培养的兔血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响。方法:分离培养获得兔主动脉血管平滑肌细胞,分别以携带人受体活性修饰蛋白1基因的腺病毒和空腺病毒转染后,分成人受体活性修饰蛋白1组、空病毒组和对照组。结果与结论:腺病毒转染细胞后随时间延长,报告基因绿色荧光蛋白表达逐渐增加,72h表达最强,感染率达80%,96h时仍有绿色荧光蛋白表达。人受体活性修饰蛋白1组的受体活性修饰蛋白1蛋白表达增加,血管平滑肌细胞凋亡率增加,细胞增殖明显抑制,与空病毒组和对照组比较差异有显著性意义(P<0.05)。提示人受体活性修饰蛋白1基因感染血管平滑肌细胞后明显抑制血管平滑肌细胞增殖,促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 受体活性修饰蛋白1 降钙素基因相关肽 血管平滑肌细胞 增殖 凋亡

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RAMP1-siRNA对CGRP促MG-63细胞增殖作用影响的实验研究 被引量：3

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作者 蒋章 张慧宇 +3 位作者 张纲 冯小倩 孙嵩 谭颖徽 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期339-342,共4页

目的:探讨阻断降钙素基因相关肽(CGRP)受体活性修饰蛋白(RAMP1)在MG-63细胞中表达对促成骨样MG-63细胞增殖作用的影响。方法:体外转录合成法合成及筛选RAMP1 siRNA,传代培养的MG-63细胞分为:RAMP1 siRNA干扰组、空载体组、空白对照组。... 目的:探讨阻断降钙素基因相关肽(CGRP)受体活性修饰蛋白(RAMP1)在MG-63细胞中表达对促成骨样MG-63细胞增殖作用的影响。方法:体外转录合成法合成及筛选RAMP1 siRNA,传代培养的MG-63细胞分为:RAMP1 siRNA干扰组、空载体组、空白对照组。实时聚合酶链反应、免疫荧光法分别检测降钙素受体样受体(CRLR)、受体组分蛋白(RCP)在MG-63细胞中mRNA表达及膜上的分布变化。结果:转染siRNA后MG-63细胞RAMP1、CRLR mRNA和荧光强度明显下调(P<0.05),RAMP1干扰组RCP mRNA的表达及荧光强度高于其它2组(P<0.05)。RAMP1 siRNA干扰后,MG-63细胞的增殖被抑制(P<0.05)。结论:转染RAMP1 siRNA降低了MG-63细胞CRLR的表达,抑制了MG-63细胞的增殖能力。 展开更多

关键词 受体活性修饰蛋白(RAMP1) 降钙素基因相关肽(CGRP) MG-63 增殖

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高表达受体活性修饰蛋白1对血管紧张素Ⅱ和降钙素基因相关肽诱导的A10细胞降钙素受体样受体膜分布的影响 被引量：2

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作者 孙飞 唐江琼 +3 位作者 郑元斌 秦又发 陈临溪 秦旭平 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期209-215,共7页

目的探索受体活性修饰蛋白1(RAMP1)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和(或)降钙素基因相关肽(CGRP)诱导的降钙素受体样受体(CRLR)在血管平滑肌细胞(VSMC)的表达和分布的影响,进一步揭示CGRP抑制VSMC增殖的机制。方法 通过酶切、连接、转化等方法... 目的探索受体活性修饰蛋白1(RAMP1)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和(或)降钙素基因相关肽(CGRP)诱导的降钙素受体样受体(CRLR)在血管平滑肌细胞(VSMC)的表达和分布的影响,进一步揭示CGRP抑制VSMC增殖的机制。方法 通过酶切、连接、转化等方法构建pCDNA3.1(+)-RAMP1真核表达载体并稳定转染至鼠源性血管平滑肌细胞株A10中,获得稳定高表达RAMP1的细胞系。无转染细胞、转染空载体〔pCDNA3.1(+)〕细胞和RAMP1高表达组细胞〔pCDNA3.1(+)-RAMP1〕分别用AngⅡ100 nmo.l L-1、CGRP 100 nmo.l L-1和CGRP+AngⅡ处理24 h,用MTT法检测细胞存活;逆转录PCR、Western印迹和免疫荧光法分别检测CRLR mRNA含量、蛋白表达及细胞膜分布。结果 单纯转染空质粒或RAMP1对细胞增殖无明显影响。AngⅡ处理对3种细胞存活的影响无显著差异。pCDNA3.1(+)-RAMP1细胞经CGRP处理24 h后,细胞存活明显高于其他两组细胞(P<0.05);经CGRP+AngⅡ处理,细胞存活明显低于其他两组(P<0.05)。AngⅡ,CGRP和CGRP+AngⅡ处理对3种细胞CRLR mRNA表达无明显影响,但CGRP处理使pCDNA3.1(+)-RAMP1细胞中CRLR蛋白明显高于其他两种细胞(P<0.05),而CGRP+AngⅡ处理使pCDNA3.1(+)-RAMP1细胞中CRLR蛋白明显低于其他两种细胞(P<0.05)。免疫荧光结果显示,经无血清或CGRP处理后,无转染细胞和pCDNA3.1(+)细胞中的RAMP1和CRLR主要分布在胞浆区域;经AngⅡ或CGPR+AngⅡ处理后,pCDNA3.1(+)-RAMP1细胞中RAMP1和CRLR在细胞膜上的分布多于无转染细胞和pCDNA3.1(+)细胞。结论 高表达RAMP1能增强CGRP抑制AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞增殖,其机制可能是通过RAMP1增加CRLR的膜分布,从而增强CGRP受体对CGRP的敏感性有关。 展开更多

关键词 血管紧张素Ⅱ 降钙素基因相关肽 降钙素受体样受体 受体活性修饰蛋白1

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人受体活性修饰蛋白1基因修饰间充质干细胞对兔心肌梗死后心室重构的作用 被引量：2

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作者 赵然尊 龙仙萍 +3 位作者 刘志江 王冬梅 喻田 石蓓 《中华高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期648-653,共6页

目的探讨腺病毒介导人受体活性修饰蛋白1(hRAMP1)基因转染间充质干细胞(MSC)移植对心肌梗死后心肌纤维化和心室重构的影响及可能机制。方法建立心肌梗死再灌注兔模型,随机分为hRAMP1组(高表达hRAMP1基因的MSC移植,n=10)、MSC组(无基因... 目的探讨腺病毒介导人受体活性修饰蛋白1(hRAMP1)基因转染间充质干细胞(MSC)移植对心肌梗死后心肌纤维化和心室重构的影响及可能机制。方法建立心肌梗死再灌注兔模型,随机分为hRAMP1组(高表达hRAMP1基因的MSC移植,n=10)、MSC组(无基因修饰的单纯MSC移植,n=10)和对照组(生理盐水注射,n=10)。Western blot检测心肌梗死后1、3、7和28d心肌梗死局部基质金属蛋白酶9(MMP-9)和hRAMP1蛋白表达水平;同时行2,3,5三苯基氯化四氮唑染色检测心肌梗死面积,心肌组织Masson染色评价心肌梗死后胶原沉积和纤维化程度;超声心动图评价28d时左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室射血分数(LVEF)及短轴缩短率(FS)。结果细胞移植后,与对照和MSC组相比,hRAMP1组的LVEF[(57.2±6.3)%比(36.2±2.2)%、(45.3±5.4)%]和FS[(29.2±2.4)%比(13.5±1.4)%、(19.4±2.4)%]均升高(均P<0.05),而LVESD[(7.9±0.8)比(12.7±0.9)、(10.4±0.9)mm]和LVEDD[(12.7±1.2)比(17.3±2.4)、(16.3±1.1)mm]、心肌梗死面积、胶原容积分数均明显降低,胶原沉积减少。免疫印迹结果显示,hRAMP1组MMP-9蛋白表达较对照、MSC组明显增高。结论 hRAMP1移植通过促进梗死区心肌组织MMP-9表达,降低梗死区胶原沉积,抑制心肌纤维化,进而改善心室重构,提高心功能。 展开更多

关键词 受体活性修饰蛋白1 间充质干细胞 心肌梗死 心室重构 基质金属蛋白酶9

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人受体活性修饰蛋白1基因修饰间充质干细胞调节兔心肌梗死后炎症及对其心脏修复的作用 被引量：2

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作者 赵然尊 龙仙萍 +2 位作者 刘志江 王冬梅 石蓓 《中华心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期736-741,共6页

目的探讨腺病毒介导人受体活性修饰蛋白1（hRAMPl）基因转染间充质干细胞（MSC）移植对心肌梗死后炎症反应及心脏修复的影响及可能机制。方法建立心肌梗死再灌注兔模型，分为高表达hRAMPl基因的MSC移植（MSC^hRAMP1）组（n=10）、无基... 目的探讨腺病毒介导人受体活性修饰蛋白1（hRAMPl）基因转染间充质干细胞（MSC）移植对心肌梗死后炎症反应及心脏修复的影响及可能机制。方法建立心肌梗死再灌注兔模型，分为高表达hRAMPl基因的MSC移植（MSC^hRAMP1）组（n=10）、无基因修饰的单纯MSC移植（MSC^null）组（n=10）和生理盐水注射组（对照组，n=10）。分别于细胞移植前和梗死后1、3、7、14和28d取静脉血标本，用ELISA法检测血浆肿瘤坏死因子（TNF）-α和白细胞介素（IL）-10水平，用Westernblot检测I、3、7和28d时心肌梗死局部NF-KB和hRAMPl蛋白表达水平，TTC染色检测心肌梗死面积，同时行心肌组织HE染色和Masson染色评价梗死后胶原沉积和纤维化程度以及心脏修复情况。结果细胞移植后MSC“““组的心肌梗死面积明显低于对照组和MSC^null组[（10．1±2．9）％比（30．6±2．7）％和（22．5±3．2）％，P〈0．05]，免疫组化染色也显示MSC^hRAMP1组的胶原容积分数较低，差异有统计学意义。与对照组和MSC”“组比较，MSC“““组梗死心肌组织中炎症调控因子NF-κB蛋白表达较低，且血浆中TNF-α水平较低[细胞移植后7d：（97．2±6．7）pg／ml比（207．6±12．7）pg／ml和（153．2±9．9）pg／ml，P〈0．05]，而IL-10水平较高[细胞移植后7d：（238．5±17．5）pg／ml比（177．3±19．8）pg／ml和（244．6±27．3）pg／ml，P〈0．05]。结论MSC^hRAMP1移植通过抑制梗死后NF-κB蛋白表达降低血浆TNF-仅水平、升高IL-10水平，从而有效地调控心肌梗死后炎症反应，降低心肌梗死面积和胶原纤维化形成，促进心脏修复。 展开更多

关键词 心肌梗死 间质干细胞 炎症 受体活性修饰蛋白1

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受体活性修饰蛋白1过表达对降钙素基因相关肽促MG-63增殖作用的影响 被引量：1

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作者 赵智亮 张纲 +1 位作者 李焰 谭颖徽 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期495-500,共6页

目的探讨受体活性修饰蛋白1（receptor activity modifying protein 1，RAMP-1）过表达对降钙素基因相关肽（caleitonin gene—related peptide，CGRP）促进MG-63细胞增殖作用的影响，以期阐明神经多肽系统在口腔颌面部创伤修复中的机... 目的探讨受体活性修饰蛋白1（receptor activity modifying protein 1，RAMP-1）过表达对降钙素基因相关肽（caleitonin gene—related peptide，CGRP）促进MG-63细胞增殖作用的影响，以期阐明神经多肽系统在口腔颌面部创伤修复中的机制。方法传代培养MG-63细胞并按完全随机法分为3组：RAMP．1过表达组、空载体组、空白对照组。构建人RAMP-1真核表达载体并稳定转染至MG-63细胞中。实时聚合酶链反应、蛋白质印迹法和免疫荧光法分别检测降钙素受体样受体（calcitonin receptor—like Yeeeptor，CRLR）在细胞中的表达及在膜上的分布；在0、24、48、72、96h时使用细胞计数试剂盒8（cell counting kit-8，CCK-8）分别检测3组细胞增殖情况；分别在0、8、16、24h时使用流式细胞仪收集并分析细胞周期。对蛋白质印迹法和实时聚合酶链反应结果进行单因素方差分析和多重比较检验，对细胞增殖和细胞s期百分率的结果采用双因素方差分析并对处理因素进行多重比较检验。结果RAMP—1过表达组MG．63细胞的CRLR蛋白及mRNA表达水平明显高于其他两组（P〈0．05）；RAMP-1过表达组在24、48、72及96h时的A值分别为0．628±0．175、0．896±0．592、1．055±0．004、1．179±0．618，均显著高于相同时间点其他两组A值（P〈0．05），在72h时与空白对照组（0．786±0．048）差距最明显。RAMP-1过表达组在0、8、16及24h时S期百分率分别为（1．25±0．13）％、（68．79±0．56）％、（64．49±1．59）％、（57．82±0．75）％，均显著高于其他两组（P〈0．01），在8h时与空白对照组[（41．235±1．773）％]差距最显著。结论RAMP-1过表达能促进MG-63细胞膜上的CRLR分布，增强CGRP对MG-63细胞的促增殖作用。 展开更多

关键词 受体活性修饰蛋白1 降钙素受体样蛋白 降钙素基因相关肽 过表达

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hRAMP1基因修饰BMSCs对心脏的保护作用及其机制

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作者 许官学 王正龙 +3 位作者 赵然尊 龙仙萍 陈文明 石蓓 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2018年第10期2442-2445,共4页

目的探讨人受体活性修饰蛋白(hRAMP)1基因修饰骨髓间充质干细胞(BMSCs)对心功能的影响及其机制。方法分离和培养兔BMSCs,流式检测细胞表面标记鉴定,建立兔心肌梗死再灌注模型,随机分为3组:Ad-EGFP-hRAMP1-BMSCs(hRAMP1-BMSCs组),Ad-EGFP... 目的探讨人受体活性修饰蛋白(hRAMP)1基因修饰骨髓间充质干细胞(BMSCs)对心功能的影响及其机制。方法分离和培养兔BMSCs,流式检测细胞表面标记鉴定,建立兔心肌梗死再灌注模型,随机分为3组:Ad-EGFP-hRAMP1-BMSCs(hRAMP1-BMSCs组),Ad-EGFP-BMSCs(BMSCs组)和对照组,检测血管腔面CD31表达情况及血管内皮生长因子(VEGF)和核因子(NF)-κB表达水平,并比较超声心动图指标。结果骨髓细胞分离24 h后开始贴壁,后呈鱼群状、漩涡状排列生长,经传代后细胞逐渐呈长梭形,呈现成纤维细胞样外观。CD29阳性率95.79%,CD45阳性率12.49%和CD90阳性率98.58%。BMSCs移植后损伤侧血管腔面可见被EGFP标记呈绿色荧光的BMSCs,而对侧(未损伤血管)未检测到EGFP荧光信号。经TRITC标记的CD31在BMSCs表达处发出红色荧光,阳性转染组出现CD31和EGFP表达。细胞移植后28 d,BMSCs组及hRAMP1-BMSCs组VEGF表达显著高于对照组,NF-κB水平显著低于对照组(均P<0.01);hRAMP1-BMSCs组VEGF表达显著高于BMSCs组,NF-κB水平显著低于BMSCs组(均P<0.01)。hRAMP1-BMSCs组LVDd和LVDs均明显降低,LVFS和LVEF均明显增加(均P<0.01)。结论 hRAMP1修饰BMSCs具有延缓及改善左室重构作用;其机制是通过hRAMP1修饰BMSCs可分化为血管内皮细胞,参与血管生成。 展开更多

关键词 人受体活性修饰蛋白1 骨髓间充质干细胞 腺病毒载体 急性心肌梗死 血管内皮细胞

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