乙肝病毒基因上一个新的维甲素受体反应元件的发现

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作者 陆晔 靳嘉瑞 +1 位作者 王耀发 李载平 《首都师范大学学报（自然科学版）》 1999年第2期77-82,共6页

用构建好的乙肝病毒基因亚克隆ｐＢａｍＨＩＨｉｎｃｌＣＡＴ２转染人特异性肝癌细胞ＨｅｐＧ２及人非特异性肝癌细胞Ｈｅｌａ，通过相应配体的刺激，使细胞内氯霉素乙酰基转移酶活力明显增强．进一步的体外蛋白阻滞分析，确定在该... 用构建好的乙肝病毒基因亚克隆ｐＢａｍＨＩＨｉｎｃｌＣＡＴ２转染人特异性肝癌细胞ＨｅｐＧ２及人非特异性肝癌细胞Ｈｅｌａ，通过相应配体的刺激，使细胞内氯霉素乙酰基转移酶活力明显增强．进一步的体外蛋白阻滞分析，确定在该亚克隆上含有一新的维甲素受体反应元件．此元件序列极端保守。 展开更多

关键词 维甲素 受体反应元件 基因调控 乙型肝炎病毒

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4-(3-(4-羟基苯基)-3-氧代-1-芳基丙氨基)-N-(5-甲基异唑-3-基)苯磺酰胺的合成及其抗糖尿病活性 被引量：9

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作者 张映霞 晏菊芳 +6 位作者 范莉 张蔚瑜 苏小燕 陈欣 唐雪梅 周祖文 杨大成 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1026-1031,共6页

由磺胺甲唑、对羟基苯乙酮和芳香醛反应直接合成了13个未见报道的β-氨基酮,反应选择性发生在羰基α位。产物结构通过1HNMR、13CNMR、MS进行了表征。生物活性试验显示,低浓度范围,所得化合物不仅对蛋白质酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)和α-... 由磺胺甲唑、对羟基苯乙酮和芳香醛反应直接合成了13个未见报道的β-氨基酮,反应选择性发生在羰基α位。产物结构通过1HNMR、13CNMR、MS进行了表征。生物活性试验显示,低浓度范围,所得化合物不仅对蛋白质酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)和α-葡萄糖苷酶有一定抑制活性,而且对过氧化物酶体增殖物激活受体反应元件(PPRE)具有中等强度的激动活性,8个化合物的激动活性超过40%,其中化合物11的活性达到72.7%。 展开更多

关键词 Α-葡萄糖苷酶 蛋白质酪氨酸磷酸酶1B 过氧化物酶体增殖物激活受体反应元件 对羟基苯乙酮 磺胺甲唑 β-氨基酮 MANNICH反应

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4-(3-(4-溴苯基)-3-氧代-1-芳基丙氨基)-N-(5-甲基异噁唑-3-基)苯磺酰胺的合成与抗糖尿病活性的初步研究 被引量：6

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作者 张映霞 晏菊芳 +6 位作者 范莉 张蔚瑜 周祖文 陈欣 苏小燕 唐雪梅 杨大成 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1244-1251,共8页

由磺胺甲噁唑、对溴苯乙酮和芳香醛反应合成了17个未见报道的β-氨基酮化合物,制备方法简便、反应条件温和,产物收率32%～90%。通过1HNMR、13CNMR、MS和HR-MS对目标分子进行了结构表征。生物活性试验显示,在低浓度范围,所得化合物不仅... 由磺胺甲噁唑、对溴苯乙酮和芳香醛反应合成了17个未见报道的β-氨基酮化合物,制备方法简便、反应条件温和,产物收率32%～90%。通过1HNMR、13CNMR、MS和HR-MS对目标分子进行了结构表征。生物活性试验显示,在低浓度范围,所得化合物不仅显示一定的蛋白质酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)和α-葡萄糖苷酶抑制活性,而且具有中等强度的过氧化物酶体增殖物激活受体反应元件(PPRE)的激动活性,7个化合物的激动活性超过40%,化合物12活性达到了66.35%,值得进一步研究。 展开更多

关键词 蛋白质酪氨酸磷酸酶1B Α-葡萄糖苷酶 过氧化物酶体增殖物激活受体反应元件 磺胺甲噁唑 β-氨基酮

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对氨基苯甲酸拟二肽酯的简易合成及其抗糖尿病活性初步研究 被引量：6

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作者 唐雪梅 范莉 +2 位作者 于红霞 廖玉华 杨大成 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第4期595-600,共6页

以未保护的对氨基苯甲酸和氨基酸酯直接反应,一步法合成了9个未见报道的氨基酸修饰的对氨基苯甲酸衍生物(对氨基苯甲酸拟二肽酯),合成方法简捷,产物收率较高(78%～91%).产物的结构经IR,1HNMR,13CNMR,MS,HRMS表征和证实.初步的生物活性... 以未保护的对氨基苯甲酸和氨基酸酯直接反应,一步法合成了9个未见报道的氨基酸修饰的对氨基苯甲酸衍生物(对氨基苯甲酸拟二肽酯),合成方法简捷,产物收率较高(78%～91%).产物的结构经IR,1HNMR,13CNMR,MS,HRMS表征和证实.初步的生物活性筛选结果表明,这些化合物抗糖尿病活性较弱. 展开更多

关键词 对氨基苯甲酸 拟二肽 氨基酸衍生物 过氧化物酶体增殖物激活受体反应元件 糖尿病

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含萘丁美酮结构单元的β-氨基醇的合成及其抗糖尿病活性研究 被引量：5

5

作者 张坤 晏菊芳 +4 位作者 唐雪梅 刘红萍 范莉 周光明 杨大成 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期412-421,共10页

以本课题组合成的含萘丁美酮结构单元的β-氨基酮为原料,采用硼氢化钾还原,简洁高效地合成了25个新型β-氨基醇化合物,其结构经IR、MS、1H NMR、13C NMR和HR-MS证实。体外抗糖尿病活性研究结果表明,多数β-氨基醇的抗糖尿病活性好于对... 以本课题组合成的含萘丁美酮结构单元的β-氨基酮为原料,采用硼氢化钾还原,简洁高效地合成了25个新型β-氨基醇化合物,其结构经IR、MS、1H NMR、13C NMR和HR-MS证实。体外抗糖尿病活性研究结果表明,多数β-氨基醇的抗糖尿病活性好于对应的β-氨基酮;化合物5hd1和5id2的α-葡萄糖苷酶抑制活性超过阳性对照物,分别达到74.37%和90.15%;5个化合物的过氧化物酶体增殖物激活受体反应元件(PPRE)相对激动活性超过60%,其中化合物5ca的相对激动活性高达112.59%。化合物5hd1、5id2和5ca作为抗糖尿病先导分子值得进一步研究。 展开更多

关键词 糖尿病 Β-氨基醇 还原反应 Α-葡萄糖苷酶 过氧化物酶体增殖物激活受体反应元件

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雌激素及类雌激素测评系统的建立 被引量：3

6

作者 冯帼 周问渠 +2 位作者 邹冬霆 付欣 陈耀勇 《现代临床医学生物工程学杂志》 2006年第4期338-341,共4页

目的采用重组报道基因的方法开发一套可筛选环境雌激素和检测青春期前儿童体内雌激素水平的雌激素受体介导的转录激活测评系统。方法构建含有雌激素受体反应元件的报道载体pGL3-ERE-LUC和pGL3-overERE-LUC以及人类雌激素受体表达载体pSG... 目的采用重组报道基因的方法开发一套可筛选环境雌激素和检测青春期前儿童体内雌激素水平的雌激素受体介导的转录激活测评系统。方法构建含有雌激素受体反应元件的报道载体pGL3-ERE-LUC和pGL3-overERE-LUC以及人类雌激素受体表达载体pSG5-ER。将两种报道载体分别转染入MCF-7细胞中,加入不同浓度雌激素受体配体,观察其对该系统的影响。将两种报道载体分别与雌激素受体表达载体共转染,加入不同浓度雌激素受体配体,观察其对该系统的影响。结果酶切结果证实pSG5-ER表达载体及报告载体构建成功。转染了pGL3-ERE-LUC或pGL3-overERE-LUC的MCF-7细胞,当加入一定浓度雌二醇(E2)及异黄酮(isoflavone)时,荧光素酶活性均增加;加雌激素受体拮抗剂他莫惜芬(TAM)后,荧光素酶活性下降。结论将pGL3-ERE-LUC或pGL3-overERE-LUC分别与pSG5-ER共转染入MCF-7细胞,可建立较敏感的环境雌激素测评系统。 展开更多

关键词 雌激素 性早熟 雌激素受体 雌激素受体反应元件

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快速筛选雌激素类环境激素的方法探讨 被引量：3

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作者 桂黎明 任宏伟 杨功名 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期25-26,共2页

目的　开发快速筛选环境激素的检测方法。方法　将构建的表达人α雌激素受体的载体pcDNA 3 1-ER和含雌激素受体反应元件的荧光素酶报告基因载体pGL3 -tk -ERE共转染到HeLa细胞中 ,以雌二醇或被检样品双酚A诱导雌激素受体表达后检测荧... 目的　开发快速筛选环境激素的检测方法。方法　将构建的表达人α雌激素受体的载体pcDNA 3 1-ER和含雌激素受体反应元件的荧光素酶报告基因载体pGL3 -tk -ERE共转染到HeLa细胞中 ,以雌二醇或被检样品双酚A诱导雌激素受体表达后检测荧光素酶活性。结果　报告基因载体中的荧光素酶的表达受雌激素受体反应元件的调控 ,且在一定浓度范围内荧光素酶的活性与雌二醇的加入量成线性关系 ;疑为有雌激素样作用的双酚A也显著诱导荧光素酶基因的表达。结论　本方法经济、简便、快速 。 展开更多

关键词 环境激素 雌激素受体 雌激素受体反应元件 雌二醇 双酚A

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表达Cys548雌激素受体突变型cDNA的真核载体构建及其促转录活性分析 被引量：1

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作者 周问渠 付欣 李冰 《中华生物医学工程杂志》 CAS 2007年第6期383-386,共4页

目的考察一个548位点C→T单核苷酸突变的雌激素受体（ER）在体外条件下，对乳腺癌细胞株（MCF-7）信号通路的影响，以探讨ER单核苷酸突变引起非雌激素依赖性性早熟的可能机制。方法用重叠延伸PCR定点诱变技术对548位点的碱基进行定点突... 目的考察一个548位点C→T单核苷酸突变的雌激素受体（ER）在体外条件下，对乳腺癌细胞株（MCF-7）信号通路的影响，以探讨ER单核苷酸突变引起非雌激素依赖性性早熟的可能机制。方法用重叠延伸PCR定点诱变技术对548位点的碱基进行定点突变，构建定点突变表达载体pSG5-MuER。构建含雌激素受体反应元件（ERE）的萤光素酶报告基因载体pGL3-ERE—Luc。将野生和突变ER质粒分别和pGL3-ERE—Luc共转染MCF-7细胞，观察萤光素酶的变化，以检测突变ER反应活性的变化。结果成功构建ER突变质粒pSG5-MuER和ER报告质粒pGL3-ERE—Luc，pSG5-MuER较pSG5-ER能够增加萤光素酶的产生。结论该突变雌激素受体在体外具有高促转录活性特征，构建的载体可用于进行进一步的相关研究。 展开更多

关键词 突变 雌激素受体 雌激素受体反应元件 转录活性

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含尿嘧啶结构单元二肽衍生物的设计、合成及生物活性研究 被引量：1

9

作者 唐雪梅 范莉 +1 位作者 张泽朝 杨大成 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1460-1468,共9页

为探索新型抗糖尿病分子,设计了含有尿嘧啶结构单元的二肽衍生物.以尿嘧啶、多聚甲醛和半胱氨酸为原料,经过两步反应获得关键中间体S-胸腺嘧啶-L-半胱氨酸(IM-2),再经氨基保护、羧基酯化和氨基酸偶联,顺利合成了16个二肽衍生物.所得目... 为探索新型抗糖尿病分子,设计了含有尿嘧啶结构单元的二肽衍生物.以尿嘧啶、多聚甲醛和半胱氨酸为原料,经过两步反应获得关键中间体S-胸腺嘧啶-L-半胱氨酸(IM-2),再经氨基保护、羧基酯化和氨基酸偶联,顺利合成了16个二肽衍生物.所得目标化合物均经1H NMR、13C NMR和HRMS进行结构确认,并开展了过氧化物酶体增殖物受体反应元件(PPRE)激动活性、α-葡萄糖苷酶-rat抑制活性、二肽基肽酶-4(DPP-4)抑制活性筛选.生物活性结果显示,这些二肽衍生物的PPRE相对激动活性、α-葡萄糖苷酶和DPP-4抑制活性都很弱;同时发现,该类分子的α-葡萄糖苷酶抑制活性变化趋势与PPRE激动活性、DPP-4抑制活性变化趋势相反,这为新型多肽多靶点药物的设计提供了新思路. 展开更多

关键词 糖尿病 尿嘧啶 二肽衍生物 过氧化物酶体增殖物激活受体反应元件(PPRE) α-葡萄糖苷酶抑制活性 二肽基肽酶-4抑制活性

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乙肝病毒基因上一个新的维甲素受体反应元件的发现

10

作者 陆晔 靳嘉瑞 +1 位作者 王耀发 李载平 《华东师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期97-103,共7页

在对人乙肝病毒ADR - 1进行计算机序列检索时 ,发现在BamHI和HincII酶切位点内存在一保守的维甲素受体反应元件序列。用构建好的包含这一片段的乙肝病毒基因亚克隆 pBamHI -HincII -CAT2 与人维甲素A受体hRARα或人维甲素X受体hRXRα共... 在对人乙肝病毒ADR - 1进行计算机序列检索时 ,发现在BamHI和HincII酶切位点内存在一保守的维甲素受体反应元件序列。用构建好的包含这一片段的乙肝病毒基因亚克隆 pBamHI -HincII -CAT2 与人维甲素A受体hRARα或人维甲素X受体hRXRα共转染人特异性肝癌细胞HepG2 ,通过相应配体ATRA或 9-cisRA的刺激 ,使细胞内氯霉素乙酰基转移酶活力较不加配体刺激的对照细胞明显增强。为了排除HepG2细胞染色体上整合的乙肝病毒的影响 ,将上述实验在人非特异性肝癌细胞Hela中重复 ,所得结果一致。进一步的体外蛋白阻滞分析 ,发现转染pBamHI -HincII -CAT2 及hRARα并加以ATRA刺激的Hela细胞核抽提物与含已知RARE的DNA结合最强。这一结合在有竟争结合物存在时条带消失。从而确证在该亚克隆上含有一新的维甲素受体反应元件。此元件序列极端保守 ,由重复序列 5’ -AGGTCT - 3’相隔 6个基构成。 展开更多

关键词 维甲素受体反应元件 基因调控 乙肝病毒基因

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含磺胺嘧啶结构单元β-氨基酮的合成及其生物活性

11

作者 唐雪梅 范莉 +1 位作者 赵琴 杨大成 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1231-1239,共9页

通过原子经济的Mannich反应实现了磺胺嘧啶、1-萘乙酮与芳香醛三组分的连接,直接合成了16个含有磺胺嘧啶结构单元的未见报道的β-氨基酮;所得化合物经1H NMR、13C NMR、HRMS和MS等技术手段确证其结构。生物活性测试结果显示,在17.04~19.... 通过原子经济的Mannich反应实现了磺胺嘧啶、1-萘乙酮与芳香醛三组分的连接,直接合成了16个含有磺胺嘧啶结构单元的未见报道的β-氨基酮;所得化合物经1H NMR、13C NMR、HRMS和MS等技术手段确证其结构。生物活性测试结果显示,在17.04~19.69 nmol/L浓度范围内,所有目标分子的α-葡萄糖苷酶抑制活性很弱,但部分目标分子的过氧化物酶体增殖物激活受体反应元件（PPRE）激动活性较好,最高达到了52%。 展开更多

关键词 糖尿病 过氧化物酶体增殖物激活受体反应元件(PPRE) Α-葡萄糖苷酶 MANNICH反应 β-氨基酮 磺胺嘧啶

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过氧化体增殖物激活型受体反应元件类似序列对细胞胆固醇外流的影响

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作者 易光辉 米五平 杨永宗 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2004年第2期214-214,共1页

目的　过氧化体增殖物激活型受体是调节脂质代谢的关键固醇类核内受体家族 ,过氧化体增殖物激活型受体反应元件调控多种与脂质代谢相关的蛋白和酶类 ,包括细胞胆固醇转运相关蛋白。探讨过氧化体增殖物激活型受体反应元件掩蔽物对细胞大... 目的　过氧化体增殖物激活型受体是调节脂质代谢的关键固醇类核内受体家族 ,过氧化体增殖物激活型受体反应元件调控多种与脂质代谢相关的蛋白和酶类 ,包括细胞胆固醇转运相关蛋白。探讨过氧化体增殖物激活型受体反应元件掩蔽物对细胞大胆固醇流出的影响。方法　设计的掩蔽物序列以过氧化体增殖物激活型受体α对过氧化体增殖物激活型受体的结合为基础。掩蔽物Scrambled寡核苷酸序列为ACTTGATCCCGTTTCAACTC ,寡核苷酸为TAAGGGAATCAGCAAGAGGT。培养U937细胞通过 5mg Llipofectin处理 4h ,用 0 .1～ 1μmol L掩蔽物或 1μmol L随机寡核苷酸转染。换培养基后加HDL或过氧化体增殖物激活型受体γ激动剂ciglitizone处理 2 4h。结果　过氧化体增殖物激活型受体反应元件掩蔽物寡核苷酸经质脂体介导转染细胞后可以抑制过氧化体增殖物激活型受体γ的促细胞胆固醇流出作用。由于所设计的过氧化体增殖物激活型受体反应元件掩蔽物无过氧化体增殖物激活型受体型特异性 ,因此 ,掩蔽物寡核苷酸产生的效应是各亚型过氧化体增殖物激活型受体在细胞内调控基因表达的综合效应。过氧化体增殖物激活型受体反应元件掩蔽物寡核苷酸的净效应是使细胞胆固醇流出效率降低。结论　三种过氧化体增殖物激活型受体亚型可能都参与细胞胆固? 展开更多

关键词 病理生理学 过氧化体增殖物 激活型 受体反应元件 掩蔽物 寡核苷酸 胆固醇 序列

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替米沙坦上调肝细胞生长因子表达的分子机制研究

13

作者 邹荣 熊飞 +5 位作者 何泳 江晶晶 熊艳 黄倩 徐钢 姚颖 《临床肾脏病杂志》 2013年第5期230-233,共4页

目的探讨替米沙坦对肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor, HGF）表达的影响及其机制研究。方法选取体外培养大鼠肾系膜细胞，观察不同浓度（0．1μmol／L、1．0μmol／L、10．0μmol／L）替米沙坦干预24h对HGF表达的影响；采用双... 目的探讨替米沙坦对肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor, HGF）表达的影响及其机制研究。方法选取体外培养大鼠肾系膜细胞，观察不同浓度（0．1μmol／L、1．0μmol／L、10．0μmol／L）替米沙坦干预24h对HGF表达的影响；采用双荧光素酶报告基因分析系统检测HGF启动子活性和替米沙坦的PPAR7反应性。非放射性蛋白激酶检测系统及Westernblot检测PKA、CREB、pCREB蛋白表达。结果与正常对照组相比，替米沙坦能明显增加HGF蛋白表达，该作用呈浓度依赖性（P〈0．05）；荧光素酶检测证实HGF基因的-290／＋20序列存在潜在PPAR7反应元件，10μmol／L替米沙坦显著增强HGF启动子活性（P〈0．05）。同时蛋白检测提示替米沙坦抑制系膜细胞PKA活性，下调pCREB蛋白表达。结论替米沙坦上调HGF表达独立于PKA／CREB信号通路，可能通过结合HGF启动子PPAR7反应元件上调HGF表达。 展开更多

关键词 米沙坦 过氧化物酶增殖体活化受体γ 肝细胞生长因子 过氧化物酶增殖体活化受体γ反应元件

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