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低分子肝素生物活性测定方法的比较研究 被引量：5
1
作者 李湛军 徐康森 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期1111-1114,共4页
目的:对低分子肝素(low molecular weight heparin,LMWH)生物活性即抗活化10因子(抗-FXa)和抗活化2因子(抗-FⅡa)测定的不同方法进行比较与研究,建立国家标准。方法:(1)比较量反应平行线与标准曲线2种分析方法在发色底物的分光光度法即... 目的:对低分子肝素(low molecular weight heparin,LMWH)生物活性即抗活化10因子(抗-FXa)和抗活化2因子(抗-FⅡa)测定的不同方法进行比较与研究,建立国家标准。方法:(1)比较量反应平行线与标准曲线2种分析方法在发色底物的分光光度法即利用发色底物对 FXa 或 FⅡa特异的405 nm 显色反应测定抗-FXa 或抗-FⅡa效价的差异。(2)比较发色底物的分光光度法与血液凝固法(观察兔全血或兔血浆的凝结时间)测定 LMWH 的抗凝血酶(抗-FⅡa)效价的异同。结果:量反应平行线法比标准曲线法测定结果可靠、准确、精确;发色底物分光光度法与血液凝固法的实验结果相似,其差异无统计学意义(P>0.05),并且具有良好相关性(r=0.997 P<0.01和 r=0.976 P<0.01)。结论:对 LMWH 的抗-FXa 和抗-FⅡa效价测定采用发色底物的分光光度法;并以量反应平行线法进行分析。 展开更多
关键词 低分子肝素 效价 测定 量反应平行线 生物活性 测定方 MOLECULAR 分光光度法 HEPARIN 发色底物
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发色底物法测定注射用降纤酶中类凝血酶的含量 被引量：5
2
作者 雷丹青 刘绵林 周先丽 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期482-483,共2页
目的建立发色底物法测定注射用降纤酶类凝血酶的方法.方法以Be-Phe-Val-Arg-PNA为发色底物,检测波长405nm.结果降纤酶在2～10单位/mL范围内呈良好的线性关系,r=0.9993(n=5).结论本法简便,准确,专属性强,适用于产品的质量控制.
关键词 降纤酶 类凝血酶 发色底物 含量测定
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比伐芦定及其制剂生物活性的测定
3
作者 穆娇 李勇 +1 位作者 张睿懿 张伟 《西北药学杂志》 CAS 2023年第4期34-38,共5页
目的建立一种专属性、准确性、重复性好的测定比伐芦定及其制剂生物活性的方法。方法用生色底物法和酶标仪,以对照品和供试品系列溶液质量浓度的自然对数为横坐标、凝血酶抑制率(TI)为纵坐标,分别绘制线性回归曲线。根据对照品回归方程... 目的建立一种专属性、准确性、重复性好的测定比伐芦定及其制剂生物活性的方法。方法用生色底物法和酶标仪,以对照品和供试品系列溶液质量浓度的自然对数为横坐标、凝血酶抑制率(TI)为纵坐标,分别绘制线性回归曲线。根据对照品回归方程,计算TI为45%时的对照品质量浓度,将该质量浓度代入供试品回归方程,计算得比伐芦定的TI。结果比伐芦定对照品及供试品回归方程线性显著,相关系数≥0.950,对照品、样品回归方程的回归系数(斜率)无显著差异,即要求对照品、供试品的线性斜率具有95%置信度(t<t(4),0.05=2.78),且TI在42%~52%的范围内。结论所建立的方法专属性、准确性、重复性好,能有效控制比伐芦定及其制剂产品的质量。 展开更多
关键词 比伐芦定 制剂 生物活性测定 发色底物 凝血酶 凝血酶抑制率
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发色底物测定血浆凝血酶的方法及其临床应用 被引量：3
4
作者 张凤春 张秀梅 +3 位作者 林玉梅 王鸿利 苏雪梅 王春柳 《白求恩医科大学学报》 CSCD 1996年第5期495-497,共3页
发色底物测定血浆凝血酶的方法及其临床应用第三临床学院血液科张凤春，张秀梅，林玉梅，王鸿利吉林省人民医院苏雪梅，王春柳关键词发色底物，凝血酶中图号Ｒ３４凝血酶（Ｔｈｒｏｍｂｉｎ）是一种丝氨酸蛋白水解酶，在凝血系统中起至... 发色底物测定血浆凝血酶的方法及其临床应用第三临床学院血液科张凤春，张秀梅，林玉梅，王鸿利吉林省人民医院苏雪梅，王春柳关键词发色底物，凝血酶中图号Ｒ３４凝血酶（Ｔｈｒｏｍｂｉｎ）是一种丝氨酸蛋白水解酶，在凝血系统中起至关重要的作用。它的血浆浓度升高表明... 展开更多
关键词 发色底物 凝血酶 血浆
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血浆纤溶酶原活性发色底物测定法 被引量：3
5
作者 孙东风 徐光 +3 位作者 蔡旭 王羽雄 宋后燕 诸骏仁 《上海医科大学学报》 CSCD 1997年第1期52-53,共2页
关键词 血浆 纤溶酶原活性 发色底物 重组链激酶
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分光光度法测定盐源山蛭素对凝血酶的抑制活性 被引量：1
6
作者 赵荣乐 郑光宇 《北京师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期238-241,共4页
报告了一实用的凝血酶抑制剂抑制活性的测定方法———发色底物分光光度法 ;以发色底物S 2 2 38与标准凝血酶反应 ,测定未抑制的吸光度A0 ,同时以发色底物S 2 2 38与凝血酶抑制剂盐源山蛭素和标准凝血酶反应测定抑制吸光度As,然后以As/... 报告了一实用的凝血酶抑制剂抑制活性的测定方法———发色底物分光光度法 ;以发色底物S 2 2 38与标准凝血酶反应 ,测定未抑制的吸光度A0 ,同时以发色底物S 2 2 38与凝血酶抑制剂盐源山蛭素和标准凝血酶反应测定抑制吸光度As,然后以As/A0 计算盐源山蛭素的抑制活性aI.实验证明 ,这种对盐源山蛭素抑制活性的测定方法简便易行、重复性高、偶然误差小、可信度高 . 展开更多
关键词 凝血酶抑制剂 抑制活性 盐源山蛭素 分光光度法 发色底物 抑制吸光度 抗凝血多肽
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低分子量肝素的监测——抗Xa测定方法 被引量：2
7
作者 曾淑燕 《血栓与止血学》 1997年第1期28-29,共2页
众所周知,普通肝素主要抑制止Ⅱa,而低分子量肝素(LMWH)主要抑制Xa故普通肝素用于临床时,实验室监测常用APTT或ACT;而低分子肝素的实验室监测需采取抗Xa的测定。当肾功能受损时,正常肝素与LMWH的半存期均增加,且年老的病人倾向于蓄积肝... 众所周知,普通肝素主要抑制止Ⅱa,而低分子量肝素(LMWH)主要抑制Xa故普通肝素用于临床时,实验室监测常用APTT或ACT;而低分子肝素的实验室监测需采取抗Xa的测定。当肾功能受损时,正常肝素与LMWH的半存期均增加,且年老的病人倾向于蓄积肝素。故应监测其抗凝作用。 抗Xa测定方法主要有两种:凝固法和二氨酚显影法。两种方法的原理是相同的:用一定量的牛的因子Xa,加入人的含有肝素或LMWH的血浆, 展开更多
关键词 低分子量肝素 测定方法 低分子肝素 普通肝素 凝固法 发色底物 实验室监测 因子Xa 正常对照血浆 血浆样本
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二期发色底物法外周血单核细胞促凝活性测定 被引量：2
8
作者 林果为 魏影非 +3 位作者 倪赞明 王晓明 张万忠 许小风 《上海医学检验杂志》 1998年第4期197-199,共3页
以国产标化组织凝血活酶为代标准液，依据外源凝血途径建立反应系统。FXa水解发色底物释放硝基苯胺，于405um测定所得的吸光度与标准液中组织凝血活酶含量呈良好的观对数线性关系（r一0．998）。此方法测定范围在1～10°凝血活酶单... 以国产标化组织凝血活酶为代标准液，依据外源凝血途径建立反应系统。FXa水解发色底物释放硝基苯胺，于405um测定所得的吸光度与标准液中组织凝血活酶含量呈良好的观对数线性关系（r一0．998）。此方法测定范围在1～10°凝血活酶单位之间；标准曲线的重复性好（CV-5％）。经PBMC标本测定显示，应用本方法检测PBMCPCA符合实验要求。 展开更多
关键词 外周血单核细胞 促凝活性 发色底物 PCA
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肝素抗Xa因子和抗Ⅱa因子效价测定用标准试剂的研制 被引量：2
9
作者 王悦 李京 +2 位作者 王鑫钰 刘莉莎 范慧红 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期73-79,共7页
目的:研制我国首批肝素、低分子肝素抗Xa因子和抗Ⅱa因子效价测定用标准化试剂。方法:Ⅱa因子试剂使用纤维蛋白原凝固法对效价进行赋值,效价溯源至凝血酶国家标准品;抗凝血酶Ⅲ采用生色底物法对效价进行赋值,效价溯源至WHO国际对照品;X... 目的:研制我国首批肝素、低分子肝素抗Xa因子和抗Ⅱa因子效价测定用标准化试剂。方法:Ⅱa因子试剂使用纤维蛋白原凝固法对效价进行赋值,效价溯源至凝血酶国家标准品;抗凝血酶Ⅲ采用生色底物法对效价进行赋值,效价溯源至WHO国际对照品;Xa因子效价采用全自动血凝仪进行测定,溯源至国家人凝血因子国家标准品;S-2765,S-2238生色底物和游离p NA含量采用反相色谱进行分离,色谱柱为Agela Technologies Venusil XBP RP C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相A为20%乙腈与0.1%三氟醋酸溶液,流动相B为60%乙腈与0.1%三氟醋酸溶液;检测波长:313 nm;梯度洗脱;酶和底物亲和力通过米氏常数进行评价。结果:Ⅱa因子、Xa因子、抗凝血酶每支效价结果分别为40 IU、76.3 n Kat和10 IU;p NA的定量限与检出限分别为7.6和2.3 ng·m L^(-1);线性范围为0.005~100μg·m L^(-1),r=1.0;加样回收率在98.5%~102.3%范围内;S-2765,S-2238发色底物含量分别为96.2%和97.3%;进口试剂与标准试剂米氏常数无统计学差异。结论:通过本研究对标准试剂较为全面的质量考察结果来看,标准试剂可完全替代进口试剂,且标准试剂效价赋值更为准确。 展开更多
关键词 肝素 低分子肝素 XA因子 Ⅱa因子 抗凝血酶 发色底物
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发色底物法及酶联凝固法测定肝素辅因子Ⅱ活性 被引量：1
10
作者 王学锋 林建著 +1 位作者 王鸿利 邵慧珍 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1994年第3期321-323,共3页
70年代初,Briginshaw发现一种有别于抗凝血酶Ⅲ（antithrombin Ⅲ,AT-Ⅲ）的肝素依赖性凝血酶抑制蛋白。1981年由Tollefsen首次将其分离提纯并命名为肝素辅因子Ⅱ（heparin cofactor cofactor Ⅱ,HC-Ⅱ）。目前,国外已应用火箭电泳及发... 70年代初,Briginshaw发现一种有别于抗凝血酶Ⅲ（antithrombin Ⅲ,AT-Ⅲ）的肝素依赖性凝血酶抑制蛋白。1981年由Tollefsen首次将其分离提纯并命名为肝素辅因子Ⅱ（heparin cofactor cofactor Ⅱ,HC-Ⅱ）。目前,国外已应用火箭电泳及发色底物法（chromogenic peptide substrate assay,CPSA）对其检测。本文应用国产发色底物S<sub>2238</sub>及酶联凝固法（enzyme-linked coagula-tion assay,ELCA）对肝素辅因子Ⅱ活性（HC-Ⅱ:a）进行了检测。 展开更多
关键词 肝素辅因子Ⅱ 底物法 凝固法 纤维蛋白原 纤维蛋白单体 发色底物 标准曲线 血液学 上海第二医科大学 凝血酶原时间
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发色底物在凝血因子测定中的应用原理和临床意义 被引量：1
11
作者 王鸿利 王振义 《上海医学检验杂志》 1989年第1期43-47,共5页
关键词 发色底物 凝血因子 激肽释放酶原
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微量发色底物法测定纤溶酶原活性及其临床意义
12
作者 易正山 周淑芸 +5 位作者 王时书 卫苏生 凌光鑫 周克元 龚道元 黄进明 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第S1期68-69,共2页
微量发色底物法测定纤溶酶原活性及其临床意义易正山，周淑芸，王时书，卫苏生（广州南方医院血液科，广州５１０５１５）凌光鑫，周克元，龚道元，黄进明（广东医学院生化教研室，广州５２４０２３）发色底物法测定纤溶酶原（Ｐｌａｍ... 微量发色底物法测定纤溶酶原活性及其临床意义易正山，周淑芸，王时书，卫苏生（广州南方医院血液科，广州５１０５１５）凌光鑫，周克元，龚道元，黄进明（广东医学院生化教研室，广州５２４０２３）发色底物法测定纤溶酶原（Ｐｌａｍｉｎｏｇｅｎ，Ｐｌｇ）活性具有测定... 展开更多
关键词 纤溶酶原 底物法 原活性 临床意义 发色底物 常量法 白血病 正常人 广州南方医院 尿激酶
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国产发色底物S-2238检测肝素辅因子Ⅱ活性及其初步临床应用
13
作者 王学锋 朱寅 +2 位作者 王鸿利 邵慧珍 林建著 《上海医学检验杂志》 1993年第2期86-88,共3页
本文应用国产发色底物S-2238建立了肝素辅因子Ⅱ(Heparin cofactor Ⅱ,HC-Ⅱ)的检测方法,并测定了正常人及肝硬化、肝癌、慢活肝、急黄肝、尿毒症、DVT、AMI患者的HC-Ⅱ活性,结果除DVT外,其余各组HC-Ⅱ活性均显著低于正常人组(p<0.0... 本文应用国产发色底物S-2238建立了肝素辅因子Ⅱ(Heparin cofactor Ⅱ,HC-Ⅱ)的检测方法,并测定了正常人及肝硬化、肝癌、慢活肝、急黄肝、尿毒症、DVT、AMI患者的HC-Ⅱ活性,结果除DVT外,其余各组HC-Ⅱ活性均显著低于正常人组(p<0.001)。本文尚对测定的方法及临床意义作了初步探讨。 展开更多
关键词 发色底物 肝素 辅因子Ⅱ 检测
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微量发色底物法测定血浆肝素浓度及临床应用
14
作者 龚道元 李子萍 +2 位作者 凌光鑫 周克元 易正山 《陕西医学检验》 2001年第1期14-16,共3页
目的　建立测定血浆肝素 (Hp)浓度方法 ,探讨其临床应用可行性。方法　用微量发色底物法测定血浆 Hp浓度 ,监测了 1 8例肾病病人血透期间和 2例 DIC病人在用肝素治疗期间血浆肝素浓度。结果　标准曲线在 0 .1～ 0 .8u/ml范围内成线性关... 目的　建立测定血浆肝素 (Hp)浓度方法 ,探讨其临床应用可行性。方法　用微量发色底物法测定血浆 Hp浓度 ,监测了 1 8例肾病病人血透期间和 2例 DIC病人在用肝素治疗期间血浆肝素浓度。结果　标准曲线在 0 .1～ 0 .8u/ml范围内成线性关系。高、中、低三种浓度回收率分别为 90 .1 %、93.2 %和91 .4%。批内 CV=5.2 % ,批间 CV=7.1 % ,与 TCT法有良好的相关性 (r=0 .91 89,P<0 .0 1 )。肾病病人血透期间血液 Hp浓度为 0 .2 7～ 0 .61 u/ml,2例 DIC病人在皮下注射 Hp后 2 h和 3h分别达到 0 .36u/ml和 0 .33u/ml的峰值浓度。结论　此法简便、快速、特异、稳定、准确性好 ,成本低 ,可用于临床。 展开更多
关键词 发色底物 微量法 肝素测定 血液透析 DIC
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纤维蛋白溶解活性动力图形分析及意义
15
作者 魏文宁 胡豫 +3 位作者 郭涛 杨焰 杨锐 熊丽丽 《检验医学》 CAS 北大核心 2006年第6期613-617,共5页
目的建立动态检测人纤维蛋白溶解功能的方法。方法采用血凝-溶解法和发色底物法，应用Unico-20000分光光度计连接微机，动态监测血浆或优球蛋白凝溶或显色情况。结果利用发色底物法测得20名正常人在显色180s时的纤溶酶活性为（86．8... 目的建立动态检测人纤维蛋白溶解功能的方法。方法采用血凝-溶解法和发色底物法，应用Unico-20000分光光度计连接微机，动态监测血浆或优球蛋白凝溶或显色情况。结果利用发色底物法测得20名正常人在显色180s时的纤溶酶活性为（86．8±37．2）％，标准曲线有良好的线性相关（活性为3．9％～125％时r=0．978，7．8％-125％时r=0．997），22例糖尿病患者会出现各种纤维蛋白溶解活性生成异常图形，而大多数病例表现为纤维蛋白溶解活性增强。结论应用血凝-溶解和发色底物法，以血浆或优球蛋白为检测标本，其结果更有利判断人体纤维蛋白溶解功能改变的性质，而且利用发色底物法以优球蛋白为检测标本较血浆更为敏感，上述方法可作为传统检测方法的补充。 展开更多
关键词 纤维蛋白溶解 动力学图形 发色底物
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用国产发色底物测定血浆激肽释放酶原的临床应用
16
作者 王波 王鸿利 《医学检验杂志》 1991年第2期81-83,共3页
关键词 发色底物 血浆 激肽释放酶
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发色底物法测定人血浆α_2抗纤溶酶活性及其临床意义
17
作者 易正山 周淑芸 +3 位作者 凌光鑫 黄进明 周克元 龚道元 《血栓与止血学》 1994年第4期152-153,190,共3页
自制纤溶酶,用发色底物法测定人血浆α_2-AP活性:24例正常人血浆α_2-AP活性为97.2±13.3;肝癌、肝硬化、白血病、DIC病人的α_2-AP活性较正常组显著减低;心肌梗塞、血栓性静脉炎的α_2-AP活性显著增高;而正常孕妇的α_2-AP活性与... 自制纤溶酶,用发色底物法测定人血浆α_2-AP活性:24例正常人血浆α_2-AP活性为97.2±13.3;肝癌、肝硬化、白血病、DIC病人的α_2-AP活性较正常组显著减低;心肌梗塞、血栓性静脉炎的α_2-AP活性显著增高;而正常孕妇的α_2-AP活性与正常人无显著差异。同时监测了1例用尿激酶作溶栓治疗的心肌梗塞病人的α_2-AP活性并对结果进行了讨论。 展开更多
关键词 发色底物 α2抗纤溶酶
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人血凝结因子Xa发色底物的合成研究
18
作者 蒋昌盛 缪谦 +1 位作者 柯玉萍 尤田耙 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期55-58,共4页
利用混合酸酐法和活泼酯法及廉价的试剂较方便地合成了人血凝结因子 Xa的一种发色底物。
关键词 合成 发色底物 混合酸酐法 活泼酯法 血液凝结因子Xa
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血管内皮生长因子对口腔鳞癌细胞系尿激酶型纤溶酶原激活剂及其抑制剂活性的影响
19
作者 金晓明 李雅馨 +2 位作者 李宁毅 李金荣 贾暮云 《现代口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期281-283,共3页
目的　探讨血管内皮生长因子(VascularEndothelialGrowthFactor,VEGF)和口腔鳞癌侵袭转移的关系。方法　采用发色底物反应法测量不同浓度VEGF作用于口腔鳞癌TSCCa细胞系及颈淋巴转移癌GNM细胞系后u -PA和PAI- 1的活性,同时用BoydenCham... 目的　探讨血管内皮生长因子(VascularEndothelialGrowthFactor,VEGF)和口腔鳞癌侵袭转移的关系。方法　采用发色底物反应法测量不同浓度VEGF作用于口腔鳞癌TSCCa细胞系及颈淋巴转移癌GNM细胞系后u -PA和PAI- 1的活性,同时用BoydenChamber观察VEGF诱导口腔鳞癌TSCCa细胞转移作用。结果　不同浓度的VEGF (1ng/ml、5ng/ml、1 0ng/ml)作用于GNM细胞2小时后,u -PA和PAI - 1活性与对照组相比,无明显差异;而不同浓度的VEGF作用于TSCCa细胞2小时后,u -PA和PAI- 1活性与对照组相比,有显著性差异,u-PA和PAI- 1活性与VEGF有剂量依赖关系,用VEGF 1ng/ml、5ng/ml、1 0ng/ml培养口腔鳞癌TSCCa细胞系2小时,BoydenChamber小室下室浸润的口腔鳞癌细胞数分别为6 .6 7±1 .78、1 7.1 7±2 .38、2 2 .33±2 .5 4×1 0 4/ml,分别高于对照组2 .4 8±1 .0 2×1 0 4/ml(P <0 .0 5或0 .0 1 )。结论　VEGF可促进口腔鳞癌细胞侵袭转移。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 尿激酶型纤溶酶原激活剂 鳞癌细胞系 PAI-1活性 抑制剂 TSCCa细胞 口腔鳞癌 VEGF Factor 颈淋巴转移癌 不同浓度 剂量依赖关系 侵袭转移 GNM细胞 显著性差异 对照组 发色底物 细胞转移 0.05 ml 反应法
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蛋白C基因C5498T致Ⅰ型遗传性蛋白质C缺陷症 被引量：10
20
作者 周荣富 王鸿利 +7 位作者 傅启华 王文斌 武文漫 丁秋兰 谢爽 胡翊群 王学锋 王振义 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第19期1694-1697,共4页
目的　对一个遗传性I型蛋白C(PC)缺陷症家系进行基因突变的检测。方法　分别用ELISA和发色底物法测定血浆蛋白C活性和抗原。用PCR法对先证者PC基因的 9个外显子及其侧翼、内含子 2序列进行扩增 ,PCR产物纯化后直接测序 ,检测其基因突变... 目的　对一个遗传性I型蛋白C(PC)缺陷症家系进行基因突变的检测。方法　分别用ELISA和发色底物法测定血浆蛋白C活性和抗原。用PCR法对先证者PC基因的 9个外显子及其侧翼、内含子 2序列进行扩增 ,PCR产物纯化后直接测序 ,检测其基因突变。突变位点经限制性内切酶分析证实。结果　先证者的蛋白C活性和抗原分别为 2 6 %和 1 4 3g/L。先证者表现为PC基因外显子 3区杂合错义突变C5 4 98T ,引起Arg15→Trp。在基因启动子区存在 2 4 0 5C/T、2 4 18A/G、2 5 83A/T多态性。 展开更多
关键词 遗传性Ⅰ型蛋白C缺陷症 基因突变 ELISA法 发色底物法 基因多态性 抗凝血因子
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