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题名发根农杆菌介导的杜梨毛状根遗传转化方法
被引量：3
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作者
郝紫微
戴雨沁
张绍铃
王鹏
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机构
南京农业大学梨工程技术研究中心
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出处
《湖北农业科学》
2021年第1期151-154,159,共5页
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基金
中央高校基本科研业务费基础前沿项目(JCQY201903)
国家现代农业(梨)产业技术体系项目(CARS-28)。
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文摘
以杜梨(Pyrus betulaefolia)为研究材料,利用发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)开发了一种简单、快速、高效的杜梨毛状根遗传转化方法。将含有mCherry基因的表达载体pROK2导入发根农杆菌K599,侵染杜梨幼苗,通过注射烟草叶片、常规PCR及体视显微镜观察,检测转化效率。结果表明,利用侵染烟草叶片瞬时表达的方法,证明mCherry可以正常表达;发根农杆菌侵染40株杜梨后,再生毛状根植株为34株,再生率达85%,通过PCR鉴定,转基因毛状根长势良好且鉴定为阳性的植株有6株,阳性率达到17.6%;经体视显微镜观察,可以在转基因根中直接观察到mCherry的红色荧光。通过发根农杆菌直接侵染杜梨苗的方法,成功实现了外源基因在杜梨新生不定根中的表达,操作简便,转化率高,周期较短,为梨树基因功能研究和遗传改良提供了新型工具,为提高梨树遗传转化成功率奠定了基础。
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关键词
杜梨(Pyrus
betulaefolia)
发根农杆菌(agrobacterium
rhizogenes)
毛状根
遗传转化
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Keywords
Pyrus betulaefolia
agrobacterium rhizogenes
hairy roots
genetic transformation
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分类号
Q785
[生物学—分子生物学]
S661.2
[农业科学—果树学]
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