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抗VEGF发卡状核酶抑制肝癌VEGF表达和移植瘤生长 被引量:2
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作者 郭子健 严玲玲 +5 位作者 杨吉成 谢宇锋 盛伟华 黄朝晖 王学浩 李莉华 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期763-767,共5页
目的:采用抗人血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)发卡状核酶基因转染肝癌细胞,观察核酶对VEGF表达及肿瘤生长的影响。方法:采用脂质体介导的方法,将人工合成的抗VEGF发卡状核酶基因转染肝癌细胞SMMC-7721,同... 目的:采用抗人血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)发卡状核酶基因转染肝癌细胞,观察核酶对VEGF表达及肿瘤生长的影响。方法:采用脂质体介导的方法,将人工合成的抗VEGF发卡状核酶基因转染肝癌细胞SMMC-7721,同时制备空载体和细胞对照,经G418筛选获得阳性克隆,基因组水平鉴定核酶在细胞中的表达,半定量RT-PCR法和免疫组化法观察核酶对SMMC-7721细胞VEGF表达的影响。接种各组细胞于裸鼠皮下,观察瘤体体积大小和质量,免疫组化法观测各组肿瘤微血管变化和VEGF的表达。结果:核酶基因成功导入到肿瘤细胞中,转基因细胞的增殖速率明显下降(P<0.01),转染核酶组细胞VEGF水平明显下降(P<0.01)。移植瘤成瘤率和生长速度减慢(P<0.01),肿瘤组织VEGF表达和血管形成减少(P<0.01)。结论:抗人VEGF发卡状核酶基因在体内、体外均可抑制肝癌VEGF表达,通过减少血管形成抑制肿瘤生长,为进一步开展肝癌血管靶向基因治疗提供实验依据。 展开更多
关键词 肝肿瘤 血管内皮生长因子类 发卡核酶 SMMC-7721细胞
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抗人VEGF发卡状核酶基因的构建及其对肝癌细胞VEGF蛋白表达的影响
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作者 郭子健 李莉华 +2 位作者 严玲玲 杨吉成 王学浩 《山东医药》 CAS 北大核心 2006年第21期23-24,共2页
利用计算机辅助设计合成针对人VEGF的发卡状核酶(RZ),定向亚克隆于真核表达载体pcDNA 3.1+中,转染肝癌细胞SMM C-7721,RT-PCR鉴定。EL ISA法和M TT法检测SMM C-7721细胞对照组、SMM C-7721/pcDNA 3.1+空载体对照组和SMM C-7721/RZ基因... 利用计算机辅助设计合成针对人VEGF的发卡状核酶(RZ),定向亚克隆于真核表达载体pcDNA 3.1+中,转染肝癌细胞SMM C-7721,RT-PCR鉴定。EL ISA法和M TT法检测SMM C-7721细胞对照组、SMM C-7721/pcDNA 3.1+空载体对照组和SMM C-7721/RZ基因转染组细胞VEGF表达和增殖情况,流式细胞术检测各组细胞周期和凋亡情况。结果为SMM C-7721/RZ基因转染组细胞VEGF表达水平和细胞增殖速率显著低于SMM C-7721细胞对照组和SMM C-7721/pcDNA 3.1+空载体对照组。M C-7721/RZ基因转染组细胞出现凋亡峰,其凋亡率达11.0%,而细胞对照和空载体细胞对照均末出现。认为SMM C-7721/RZ转基因细胞株的成功构建和生物学特性的初步研究为进一步建立裸鼠人肝癌模型及评价RZ对体内肝癌生长的抑制作用奠定了一定的基础。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 发卡核酶 肝肿瘤 细胞增殖 细胞凋亡
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抗血管内皮生长因子发卡状核酶基因抑制卵巢癌细胞SKOV3增殖 被引量:1
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作者 严瑞兰 钱新华 +4 位作者 辛晓燕 金明 惠宏襄 王健 王德堂 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2002年第3期168-169,172,共3页
目的 观察抗VEGF发卡状核酶基因对卵巢癌细胞增殖的影响。方法 采用脂质体介导的方法将自行设计和构建的抗VEGF发卡状核酶基因真核表达载体转染人卵巢癌细胞 ,通过MTT、细胞贴壁克隆形成试验、软琼脂克隆形成试验及细胞周期分析观察... 目的 观察抗VEGF发卡状核酶基因对卵巢癌细胞增殖的影响。方法 采用脂质体介导的方法将自行设计和构建的抗VEGF发卡状核酶基因真核表达载体转染人卵巢癌细胞 ,通过MTT、细胞贴壁克隆形成试验、软琼脂克隆形成试验及细胞周期分析观察其对卵巢癌细胞增殖的影响。结果 转染后的SKOV3 RZ细胞生长减慢 ,细胞贴壁克隆形成及软琼脂克隆形成率明显降低 (P <0 .0 0 1)。G1期细胞显著增多 (P <0 .0 1) ,S期细胞显著减少 (P <0 .0 1)。结论 抗VEGF发卡状核酶基因可显著抑制卵巢癌细胞SKOV3增殖 。 展开更多
关键词 抗血管内皮生长因子 SKOV3增殖 发卡核酶基因 卵巢癌 细胞增殖
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