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塞内卡谷病毒荧光RT-RPA快速检测方法的建立 被引量：17
1
作者 林彦星 曹琛福 +6 位作者 花群俊 黄超华 杨俊兴 徐铮 史卫军 阮周曦 花群义 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1497-1502,共6页
本研究利用重组酶聚合酶扩增（RPA）技术建立快速检测塞内卡谷病毒（SVV）的实时荧光RT-RPA方法。试验结果表明,该方法特异性强,能准确检测SVV核酸,与水泡性口炎病毒（VSV-IND和VSV-NJ）、猪水泡病病毒（SVDV）、口蹄疫病毒（FMDV）、... 本研究利用重组酶聚合酶扩增（RPA）技术建立快速检测塞内卡谷病毒（SVV）的实时荧光RT-RPA方法。试验结果表明,该方法特异性强,能准确检测SVV核酸,与水泡性口炎病毒（VSV-IND和VSV-NJ）、猪水泡病病毒（SVDV）、口蹄疫病毒（FMDV）、猪瘟病毒（CSFV）和猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）等灭活抗原核酸无交叉反应;灵敏度高,本试验中最低可检测SVV核酸浓度为1.35×10^（-3）g/mL;简便快速,反应时间小于20 min;重复性好。利用所建立方法对116份临床样品进行检测,结果与实时荧光RT-PCR一致。本研究为SVV防控提供了一种快速检测的新方法,可用于基层实验室对SVV的快速检测。 展开更多
关键词 塞内卡病毒病 塞内卡谷病毒 反转录重组酶聚合酶扩增(rt-rpa) 检测
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非洲马瘟病毒实时荧光RT-RPA快速检测方法的建立 被引量：8
2
作者 史卫军 林彦星 +7 位作者 黄超华 曹琛福 曾少灵 吴江 刘建利 陈兵 阮周曦 花群义 《中国动物检疫》 CAS 2022年第7期119-123,共5页
本研究根据非洲马瘟病毒(AHSV)S7基因保守序列设计特异性引物和探针,建立了检测AHSV的实时荧光反转录重组酶聚合酶扩增(RT-RPA)方法。该方法特异性强,仅AHSV检测为阳性,蓝舌病病毒(BTV)、马流感病毒(EIV)、马动脉炎病毒(EAV)等病原检测... 本研究根据非洲马瘟病毒(AHSV)S7基因保守序列设计特异性引物和探针,建立了检测AHSV的实时荧光反转录重组酶聚合酶扩增(RT-RPA)方法。该方法特异性强,仅AHSV检测为阳性,蓝舌病病毒(BTV)、马流感病毒(EIV)、马动脉炎病毒(EAV)等病原检测均为阴性;灵敏性高,最低检出限为2.36×10^(1)copies/μL;反应快速,检测时间为20 min,同时具有良好的重复性。利用该方法和实时荧光RT-PCR平行检测60份临床样品,符合率为100%。结果表明,本研究建立的AHSV RT-RPA检测方法特异、敏感、快速且结果可靠,适用于AHSV的高通量、快速检测。 展开更多
关键词 非洲马瘟病毒 反转录重组酶聚合酶扩增(rt-rpa) 检测
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寨卡病毒实时荧光RT-RPA快速检测方法的建立
3
作者 何芳 杨鹏飞 +1 位作者 李峰 陈国清 《江苏预防医学》 CAS 2023年第6期668-671,共4页
目的建立1种适用于现场的快速、高效实时荧光反转录重组酶聚合酶扩增(RT-RPA)检测寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)的方法。方法利用ZIKV膜蛋白基因保守序列设计特异性引物及探针,构建膜蛋白基因重组质粒并作为参考品,建立ZIKV的实时荧光反转... 目的建立1种适用于现场的快速、高效实时荧光反转录重组酶聚合酶扩增(RT-RPA)检测寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)的方法。方法利用ZIKV膜蛋白基因保守序列设计特异性引物及探针,构建膜蛋白基因重组质粒并作为参考品,建立ZIKV的实时荧光反转录重组酶聚合酶扩增(RT-RPA)检测方法,并与实时荧光定量RT-PCR法进行灵敏度比较。利用建立的方法对三带喙库蚊进行模拟添加ZIKV检测。结果成功构建ZIKV膜蛋白重组阳性质粒,与ZIKV核苷酸同源性为100%。建立的RT-RPA法扩增产物起飞时间与质粒拷贝数标准曲线为y=-1.0319x+15.146,R^(2)为0.9947,最低检出限为2.91 copies/μL,高于荧光定量PCR法(29.1 copies/μL),检测时间为30 min。结论建立的ZIKV RT-RPA检测方法,简便、灵敏、特异性强,反应快速,适用于ZIKV现场应急、基层实验室或出入境口岸的快速检测。 展开更多
关键词 寨卡病毒 反转录重组酶聚合酶扩增(rt-rpa) 核酸检测
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