细胞间粘附分子-1和E-选择素在局部脑缺血中的作用 被引量：16

1

作者 郝延磊 蒲传强 +2 位作者 朱克 张凤英 刘洁晓 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2000年第1期54-57,共4页

目的　探讨细胞间粘附分子 1(ICAM 1)和E 选择素 (E selectin)在局部脑缺血炎性反应过程中的作用。方法　采用尼龙线栓堵大鼠大脑中动脉 ,造成局部持续脑缺血模型 ,用RT PCR方法检测缺血侧脑组织持续缺血后不同时间点ICAM 1和E selecti... 目的　探讨细胞间粘附分子 1(ICAM 1)和E 选择素 (E selectin)在局部脑缺血炎性反应过程中的作用。方法　采用尼龙线栓堵大鼠大脑中动脉 ,造成局部持续脑缺血模型 ,用RT PCR方法检测缺血侧脑组织持续缺血后不同时间点ICAM 1和E selectinmRNA的表达。结果　假手术组及手术组非缺血侧大脑皮层未见ICAM 1和E selectinmRNA的表达。持续脑缺血后 1h ,手术组缺血侧大脑皮层ICAM 1和E selectinmRNA的表达量开始升高 ;缺血后 6h ,ICAM 1mRNA的上调达高峰 ,且持续至缺血后 48h。而E selectinmRNA的上调在缺血后 12h达高峰。结论　ICAM 1和E selectin参与了持续局部脑缺血后脑组织损伤的病理过程。两者协同发挥作用 ,在白细胞进入缺血区脑组织的病理过程中起重要作用。 展开更多

关键词 脑缺血 细胞间粘附分子-1 E-选择素 反转录多聚酶链反应 内皮细胞

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PDGF-D和VEGF在胃癌中的表达及其意义 被引量：11

2

作者 赵林 张才全 +2 位作者 廖刚 龙结根 汤为学 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2009年第12期1305-1309,共5页

目的探讨血小板源性生长因子D(PDGF-D)和血管内皮生长因子(VEGF)在胃癌中的表达及其与胃癌临床病理特征的关系。方法用免疫组织化学(SP法)检测胃组织中PDGF-D和VEGF蛋白的表达,用反转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测部分胃癌组织标本PDGF-D... 目的探讨血小板源性生长因子D(PDGF-D)和血管内皮生长因子(VEGF)在胃癌中的表达及其与胃癌临床病理特征的关系。方法用免疫组织化学(SP法)检测胃组织中PDGF-D和VEGF蛋白的表达,用反转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测部分胃癌组织标本PDGF-D和VEGFmRNA,分析两者之间的相关性及其与临床病理特征之间的关系。结果胃癌组织中PDGF-D和VEGF蛋白的表达显著高于癌旁组织和正常胃组织(P<0.05);PDGF-D和VEGF的表达与胃癌的TNM分期、侵袭深度及淋巴结转移有关(P<0.05),PDGF-D的表达还与胃癌的分化程度有关(P<0.05);PDGF-D和VEGF在mRNA水平和蛋白水平的表达均呈正相关(均P<0.05)。结论PDGF-D和VEGF在胃癌组织中特异性高表达,可能在胃癌的发生、发展与转移中起着重要作用。 展开更多

关键词 胃癌 血小板源性生长因子D 血管内皮生长因子 免疫组织化学 反转录多聚酶链反应

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丙肝病毒核心抗原检测临床应用研究 被引量：8

3

作者 李军 《甘肃科技》 2012年第18期155-156,共2页

应用酶联免疫法分别检测丙肝病毒核心抗原(HCV-cAg)和抗体(HCV-Ab),了解丙肝病毒核心抗原检测的意义。采用湖南康润公司生产的HCV游离核心抗原试剂盒,对来自门诊或手术前筛查的850例临床样本进行了HCV-cAg和HCV-Ab检测,阳性者用反转录... 应用酶联免疫法分别检测丙肝病毒核心抗原(HCV-cAg)和抗体(HCV-Ab),了解丙肝病毒核心抗原检测的意义。采用湖南康润公司生产的HCV游离核心抗原试剂盒,对来自门诊或手术前筛查的850例临床样本进行了HCV-cAg和HCV-Ab检测,阳性者用反转录多聚酶链反应(RT-RNA)证实。850例筛查样本HCV-Ab阳性22例,其中HCV-cAg阳性14例,RT-RNA阳性16例;828例HCV-Ab阴性的样本检出HCV-cAg阳性4例,其中RT-RNA阳性3例。HCV-cAg与RT-RNA符合率为83.33%(15/18)。HCV核心抗原检出时间早于抗体,HCV-cAg检测试剂盒可作为HCV抗体检测的补充试剂,敏感性高、特异性好、费用低廉。 展开更多

关键词 丙肝病毒抗体 丙肝病毒核心抗原 反转录多聚酶链反应

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丙型肝炎病毒核心抗原检测对临床诊断的价值 被引量：5

4

作者 王丽娜 《中国医药指南》 2010年第30期66-67,共2页

目的应用酶联免疫吸附法分别检测丙型肝炎病毒核心抗原和抗体,以了解丙型肝炎病毒核心抗原检测的临床价值。方法应用丙型肝炎病毒游离核心抗原试剂盒、HCV-AbELISA试剂盒和丙型肝炎病毒PCR检测试剂盒,对来自笔者所在医院输血前及门诊筛... 目的应用酶联免疫吸附法分别检测丙型肝炎病毒核心抗原和抗体,以了解丙型肝炎病毒核心抗原检测的临床价值。方法应用丙型肝炎病毒游离核心抗原试剂盒、HCV-AbELISA试剂盒和丙型肝炎病毒PCR检测试剂盒,对来自笔者所在医院输血前及门诊筛查的260例样本和80例丙型肝炎或疑似丙型肝炎患者的血清标本进行HCV-cAg、HCV-Ab和HCV-RNA检测。结果 260例筛查样本HCV-Ab均为阴性,HCV-cAg阳性5例,HCV-cAg阳性率1.9%;其中HCV-RNA4例。80例HCV-Ab阳性的样本检出HCV-cAg阳性33例,HCV-cAg阳性率为41.25%;HCV-RNA47例。结论 HCV核心抗原检出时间早于抗体,HCV-cAg检测试剂盒可作为HCV抗体检测的补充试剂,尤其对术前HCV筛查的患者联合应用更具有临床价值。 展开更多

关键词 丙型肝炎 丙型肝炎病毒抗体 丙型肝炎病毒核心抗原 反转录多聚酶链反应

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脑缺血/再灌流脑微血管内皮细胞ELAM-1和ICAM-1 mRNA表达的研究 被引量：2

5

作者 王中孝 蔡竖平 徐洁 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期236-239,共4页

目的 :探讨ELAM 1和ICAM 1在局部脑缺血 /再灌流炎性反应过程中的作用。方法 :采用尼龙线栓堵大脑中动脉造成局部脑缺血 /再灌流模型 ,用RT PCR方法检测缺血侧脑组织缺血 /再灌流不同时间点ELAM 1和ICAM 1mRNA的表达。结果 :假手术组脑... 目的 :探讨ELAM 1和ICAM 1在局部脑缺血 /再灌流炎性反应过程中的作用。方法 :采用尼龙线栓堵大脑中动脉造成局部脑缺血 /再灌流模型 ,用RT PCR方法检测缺血侧脑组织缺血 /再灌流不同时间点ELAM 1和ICAM 1mRNA的表达。结果 :假手术组脑组织未见ELAM 1和ICAM 1mRNA的表达 ,手术组非缺血侧脑组织仅见少量表达。脑缺血 /再灌流后 1h ,缺血侧脑组织ELAM 1和ICAM 1mRNA的表达量已开始升高 ;再灌流后 3h ,ICAM 1mR NA的上调达高峰 ,而ELAM 1mRNA的上调在缺血 /再灌流后 6h达高峰。且持续至缺血 /再灌流后 48h。结论 :EL AM 1和ICAM 1参与了局部缺血再灌流脑组织损伤的病理过程。二者在白细胞进入缺血区脑组织的病理过程中发挥着重要作用。 展开更多

关键词 脑缺血 再灌流 内皮细胞白细胞粘附分子1 细胞间粘附分子1 反转录多聚酶链反应

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反转录多聚酶链反应联合间接免疫荧光法对儿童下呼吸道非典型病原体感染早期诊断的意义 被引量：4

6

作者 刘国英 樊冒 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期269-270,共2页

目的评价实时反转录多聚酶链反应(RT-PCR)联合间接免疫荧光(IIF)法(联检法)对提高儿童下呼吸道非典型病原体感染检出率的效果。方法临床可疑非典型肺炎患儿152例采用联检法检测肺炎支原体(MP)、嗜肺军团菌(LP)、肺炎衣原体(CP)和Q热立... 目的评价实时反转录多聚酶链反应(RT-PCR)联合间接免疫荧光(IIF)法(联检法)对提高儿童下呼吸道非典型病原体感染检出率的效果。方法临床可疑非典型肺炎患儿152例采用联检法检测肺炎支原体(MP)、嗜肺军团菌(LP)、肺炎衣原体(CP)和Q热立克次体(QP)感染情况,同时采用间接血凝法、免疫荧光法或微量凝聚试验等多种方法进行验证。对比分析各种检测方法对MP、LP、CP和QP的检出率。并以此检验结果为依据,对所有检出的非典型病原菌感染病例使用敏感抗生素,观察治疗后患儿心率、呼吸、体温和WBC变化及临床症状改善情况。采用SPSS 13.0软件进行统计学分析。结果单独采用IIF法与RT-PCR法检测比较,对MP、LP、CP和QP的检出率差异均无统计学意义(Pa>0.05);采用联检法时,对MP和LP感染的检出率和总检出率均明显高于其余3种检测方法(Pa<0.05)。根据联检法结果选用敏感抗生素治疗,临床疗效较好。结论使用联检法可明显提高MP和LP感染的检出率和总的检出率,有效避免漏诊,但对能否提高CP和QP感染的检出率,仍有待进一步研究。 展开更多

关键词 反转录多聚酶链反应 间接免疫荧光 下呼吸道 非典型感染 儿童

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丙肝病毒核心抗原与丙肝病毒抗体检测的比较研究 被引量：4

7

作者 索凤霜 李萍燕 康熙雄 《中国卫生检验杂志》 CAS 2007年第4期624-625,共2页

目的:应用酶联免疫法分别检测丙肝病毒核心抗原(HCV-cAg)和抗体(HCV-Ab),了解丙肝病毒核心抗原检测的意义。方法:采用军事医学科学院基础医学研究所研发并由湖南景达基因公司推出的商业化的HCV游离核心抗原试剂盒,对来自入院前或手术前... 目的:应用酶联免疫法分别检测丙肝病毒核心抗原(HCV-cAg)和抗体(HCV-Ab),了解丙肝病毒核心抗原检测的意义。方法:采用军事医学科学院基础医学研究所研发并由湖南景达基因公司推出的商业化的HCV游离核心抗原试剂盒,对来自入院前或手术前筛查的180例临床样本和24例丙肝或疑似丙肝患者的血清样本进行HCV-cAg和HCV-Ab检测,阳性者用反转录多聚酶链反应(RT-RNA)证实。结果:180例筛查样本HCV-Ab均为阴性,HCV-cAg阳性2例,其中RT-RNA阳性1例;24例HCV-Ab阳性的样本检出HCV-cAg阳性12例,RT-RNA阳性14例。HCV-cAg与RT-RNA符合率为85.71%(12/14)。结论:HCV核心抗原检出时间早于抗体,HCV-cAg检测试剂盒可作为HCV抗体检测的补充试剂,尤其对术前HCV筛查的患者联合应用更具有临床价值。 展开更多

关键词 丙肝病毒抗体 丙肝病毒核心抗原 反转录多聚酶链反应

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丙肝病毒核心抗原与丙肝病毒抗体检测的比较 被引量：3

8

作者 赵晓薇 张利 丁喜玉 《赤峰学院学报（自然科学版）》 2009年第1期61-62,共2页

目的:了解丙肝病毒核心抗原检测的意义.方法:采用HCV游离核心抗原试剂盒,对来自入院前或手术前筛查的180例临床样本和24例丙肝或疑似丙肝患者的血清样本进行HCV-cAg和HCV-Ab检测,阳性者用反转录多聚酶链反应(RT-RNA)证实.结果:180例筛... 目的:了解丙肝病毒核心抗原检测的意义.方法:采用HCV游离核心抗原试剂盒,对来自入院前或手术前筛查的180例临床样本和24例丙肝或疑似丙肝患者的血清样本进行HCV-cAg和HCV-Ab检测,阳性者用反转录多聚酶链反应(RT-RNA)证实.结果:180例筛查样本HCV-Ab均为阴性,HCV-cAg阳性2例,其中RT-RNA阳性1例;24例HCV-Ab阳性的样本检出HCV-cAg阳性12例,RT-RNA阳性14例.HCV-cAg与RT-RNA符合率为85.71%(12/14).结论:HCV核心抗原检出时间早于抗体,HCV-cAg检测试剂盒可作为HCV抗体检测的补充试剂. 展开更多

关键词 丙肝病毒抗体 丙肝病毒核心抗原 反转录多聚酶链反应

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胃癌Runx3 mRNA表达与幽门螺杆菌感染的相关性 被引量：2

9

作者 赵永勋 赵鹏 +4 位作者 张兴旺 关泉林 袁文臻 汪晓炜 曹农 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第20期2917-2919,共3页

目的研究胃癌Runx3基因mRNA表达与幽门螺杆菌感染及临床病理特征的关系。方法采用反转录PCR(RT-PCR)技术检测Runx3基因mRNA表达,快速尿素酶诊断法和Warthin-starry染色法检测H.pylori感染状况。结果 (1)胃癌Runx3基因mRNA表达量分别和... 目的研究胃癌Runx3基因mRNA表达与幽门螺杆菌感染及临床病理特征的关系。方法采用反转录PCR(RT-PCR)技术检测Runx3基因mRNA表达,快速尿素酶诊断法和Warthin-starry染色法检测H.pylori感染状况。结果 (1)胃癌Runx3基因mRNA表达量分别和癌旁、正常对照相比,差异有统计学意义(t分别为12.653和8.015,P<0.001);(2)胃癌中Runx3基因mRNA表达与分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关,差异有显著性(P<0.001),而与性别、年龄无关(P>0.05);(3)胃癌组H.pylori感染率67.4%(58/86)高于健康对照组40%(8/20),差异有显著性(χ2=5.201,P=0.023)。(4)胃癌Runx3基因mRNA表达在H.pylori感染组和无H.pylori感染组差异有统计学意义(t=2.570,P=0.012)。结论 H.pylori感染影响胃癌Runx3基因mRNA表达。 展开更多

关键词 胃癌 RUNX3基因 幽门螺杆菌 反转录多聚酶链反应

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SOX10基因在先天性巨结肠患儿肠壁中的表达 被引量：2

10

作者 李新宁 曾甜 +3 位作者 莫丹 石群峰 罗树友 苏乃伟 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第23期1810-1812,共3页

目的研究先天性巨结肠(HD)肠壁中性别决定区Y基因相关高可变区基因10(SOX10)的表达,了解HD在分子基础上的发病机制。方法分别取50例HD病例的手术标本狭窄段、移行段及扩张段为病例组,另随机取50例非HD手术病例标本作为对照组,提取其平... 目的研究先天性巨结肠(HD)肠壁中性别决定区Y基因相关高可变区基因10(SOX10)的表达,了解HD在分子基础上的发病机制。方法分别取50例HD病例的手术标本狭窄段、移行段及扩张段为病例组,另随机取50例非HD手术病例标本作为对照组,提取其平滑肌组织总RNA,应用反转录(RT)-PCR扩增目的基因和看家基因片段,观察其病变段和正常段SOX10 mRNA的表达,并与看家基因在病变段和正常段的表达进行比较,并进行统计学分析。结果 SOX10 mRNA在HD患儿痉挛段(0.186 19±0.007 84)呈低表达,在扩张段(0.506 94±0.006 31)及对照组(0.594 35±0.006 29)呈高表达,痉挛段SOX10 mRNA的表达量与移行段(0.314 71±0.016 57)、扩张段及对照组比较,差异有统计学意义(F=16 384.220,P=0.000);而移行段、扩张段与对照组比较,差异亦有统计学意义(F=8 666.046,P=0.000)。结论 HD患儿结肠SOX10 mRNA的异常分布显示SOX10基因是出生后肠神经系统维持正常功能所必需的,SOX10 mRNA表达减少可引起肠管痉挛、狭窄,造成肠功能障碍。 展开更多

关键词 先天性巨结肠 Y基因相关高可变区基因10 反转录多聚酶链反应

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高表达p73基因抑制肺腺癌细胞VEGF、bFGF mRNA表达 被引量：1

11

作者 元东 范士志 何勇 《中国肺癌杂志》 CAS 2004年第5期392-395,共4页

目的　观察高表达的p73基因对肺腺癌细胞生长曲线以及血管内皮生长因子 (VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)mRNA表达水平的影响 ,探讨高表达 p73基因在肺腺癌血管生成中的作用。 方法　将 p73α、p73 β以脂质体法转染A5 49细胞、H1... 目的　观察高表达的p73基因对肺腺癌细胞生长曲线以及血管内皮生长因子 (VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)mRNA表达水平的影响 ,探讨高表达 p73基因在肺腺癌血管生成中的作用。 方法　将 p73α、p73 β以脂质体法转染A5 49细胞、H12 99细胞 ,采用细胞计数法绘制转染前后两种细胞生长曲线 ,RT PCR法半定量分析转染前后两种细胞中VEGF、bFGFmRNA的表达水平的变化。结果　转染p73基因后 ,A5 49细胞、H12 99细胞生长受到抑制 ,VEGF、bFGFmRNA表达水平下降 ,较未转染 p73基因的细胞有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,其中 p73 β对VEGFmRNA表达的抑制作用更为显著 (P <0 .0 1)。 结论　高表达的 p73基因能够抑制肺腺癌细胞生长 ,降低肺腺癌细胞中VEGF、bFGFmRNA表达水平 ,提示高表达的 p73基因可能参与调控人肺腺癌VEGF和bFGF基因表达 。 展开更多

关键词 肺腺癌 P73基因 反转录多聚酶链反应 血管内皮生长因子 碱性成纤维细胞生长因子

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Yes相关蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义 被引量：2

12

作者 班媛媛 张伟 李道胜 《中华临床医师杂志（电子版）》 CAS 2016年第24期-,共5页

目的：探讨 Yes 相关蛋白（YAP）在非小细胞肺癌组织中的表达与临床病理特征的关系及其在非小细胞肺癌发生发展中的作用。方法采用实时定量反转录多聚酶链反应（RT-PCR）、免疫组织化学及 Western blot 方法，分别检测非小细胞肺癌患者... 目的：探讨 Yes 相关蛋白（YAP）在非小细胞肺癌组织中的表达与临床病理特征的关系及其在非小细胞肺癌发生发展中的作用。方法采用实时定量反转录多聚酶链反应（RT-PCR）、免疫组织化学及 Western blot 方法，分别检测非小细胞肺癌患者的癌组织、正常肺组织中 YAP 蛋白的表达情况，采用 SPSS 17.0统计软件包进行统计学分析，计数资料比较采用卡方检验，应用非配对 t 检验检测非小细胞肺癌组织和正常肺组织中 YAP mRNA 表达差异，以 P＜0.05为差异有统计学意义。结果非小细胞肺癌组 YAP 阳性率（65%）高于正常肺组织组（5%）（χ2=43.2，P=0.000）。YAP 阳性率与非小细胞肺癌的病理分级（高、中、低分化阳性率分别为35.9%、67.6%和87.2%）密切相关（χ2=24.837，P=0.000）；淋巴结转移者 YAP 的表达率（76.1%）与无淋巴结转移者（58.1%）相比差异也有统计学意义（χ2=4.03，P=0.045）。YAP mRNA 在非小细胞肺癌组织中的相对表达量（0.4013±0.0783）是正常肺组织（0.0499±0.0084）的8.04倍，差异具有统计学意义（t=3.21，P＜0.001）。结论 YAP 可能参与了非小细胞肺癌的发生和发展的过程；可能成为判断非小细胞肺癌发生发展和评价预后的有效参考指标之一，对于非小细胞肺癌的早期预测可能具有重要的临床意义。 展开更多

关键词 癌 非小细胞肺 YES 相关蛋白 反转录多聚酶链反应 免疫组织化学

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Cyclin G2基因在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义 被引量：1

13

作者 崔晓峰 徐振明 +3 位作者 张萍 孙晓慧 汪雅婷 吴楠 《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期277-279,共3页

关键词 喉肿瘤 细胞周期蛋白G2 反转录多聚酶链反应

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内皮素-1及其受体拮抗剂对HSC-T6细胞Ⅰ型胶原mRNA表达的作用

14

作者 张军 张忠涛 +3 位作者 王宇 王萍 李建设 周延忠 《首都医科大学学报》 CAS 2007年第1期68-70,共3页

目的检测与探讨内皮素-1及其受体拮抗剂对肝星状细胞(HSC-T6)细胞Ⅰ型胶原mRNA表达的作用和影响机制。方法采用反转录聚合酶链反应法(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR),进行半定量分析。结果与空白对照组相比,E... 目的检测与探讨内皮素-1及其受体拮抗剂对肝星状细胞(HSC-T6)细胞Ⅰ型胶原mRNA表达的作用和影响机制。方法采用反转录聚合酶链反应法(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR),进行半定量分析。结果与空白对照组相比,ET-1组和ET-1+BQ-123组Ⅰ型胶原mRNA的表达显著升高(0.706±0.027、0.724±0.059比0.400±0.047,P<0.05);与ET-1组相比,ET-1+BQ-788组和ET-1+BQ-123+BQ-788组Ⅰ型胶原mRNA的表达显著降低(0.427±0.131、0.382±0.022比0.706±0.027,P<0.05)。结论ET-1使HSC-T6细胞Ⅰ型胶原mRNA的表达明显升高,选择性ETB受体拮抗剂BQ-788能抑制ET-1引起的Ⅰ型胶原mRNA的高表达,而选择性ETA受体拮抗剂BQ-123则对其无明显作用。 展开更多

关键词 内皮素-1 肝星状细胞 Ⅰ型胶原 反转录多聚酶链反应

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游离HCV核心抗原检测对丙型肝炎早期筛选价值的研究

15

作者 张力 张文娟 《中国实用医药》 2011年第8期8-9,共2页

目的分别检测游离丙肝病毒核心抗原(HCV-cAg)、抗体(HCV-Ab)及HCV RNA,研究游离丙肝病毒核心抗原检测早期筛选HCV感染的价值。方法采用ELISA法测定丙肝病毒核心抗原和抗体,FQ-RT-PCR方法测定HCV RNA,对比300例HCV RNA阴性正常查体人群结... 目的分别检测游离丙肝病毒核心抗原(HCV-cAg)、抗体(HCV-Ab)及HCV RNA,研究游离丙肝病毒核心抗原检测早期筛选HCV感染的价值。方法采用ELISA法测定丙肝病毒核心抗原和抗体,FQ-RT-PCR方法测定HCV RNA,对比300例HCV RNA阴性正常查体人群结果,筛选有危险因素人群HCV阳性者35例,研究丙肝病毒核心抗原测定的特异性和敏感性及缩短检测窗口期的价值。结果体检人群300例HCV-Ab、HCV RNA均为阴性,HCV-cAg阴性299例(99.67%);35例随访确诊HCV感染者初次HCV RNA阳性标本,HCV-cAg阳性33例(94.29%),HCV-cAg检测可有效缩短窗口期。结论游离HCV核心抗原ELISA测定法具高度敏感性及特异性,可以明显缩短HCV窗口期,可作为HCV抗体检测的补充试验。 展开更多

关键词 游离丙肝病毒核心抗原 丙肝病毒抗体 反转录多聚酶链反应

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反转录多聚酶链反应核心抗原和抗体检测丙肝的方法比较

16

作者 焦扬 《医药论坛杂志》 2008年第24期47-48,50,共3页

目的通过应用酶联免疫法(ELISA)分别检测丙肝病毒核心抗原(HCV-cAg)和抗体(HCV-Ab),和反转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测丙肝RNA,来了解三种方法对丙肝病毒(HCV)感染检测的优点和缺点。方法采用HCV游离核心抗原试剂盒、HCV-AbELISA试剂盒... 目的通过应用酶联免疫法(ELISA)分别检测丙肝病毒核心抗原(HCV-cAg)和抗体(HCV-Ab),和反转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测丙肝RNA,来了解三种方法对丙肝病毒(HCV)感染检测的优点和缺点。方法采用HCV游离核心抗原试剂盒、HCV-AbELISA试剂盒和丙肝病毒PCR检测试剂盒,对来自入院前或手术前筛查的180例临床样本和24例丙肝或疑似丙肝患者的血清样本进行HCV-cAg,HCV-Ab和HCV-RNA检测。结果200例筛查样本HCV-Ab均为阴性,HCV-cAg阳性3例,其中RT-RNA阳性1例;25例HCV-Ab阳性的样本检出HCV-cAg阳性13例,RT-RNA阳性15例。HCV-cAg与RT-RNA符合率为86.67%(13/15)。结论HCV核心抗原检出时间早于抗体,HCV-cAg检测试剂盒可作为HCV抗体检测的补充试剂,反转录多聚酶链反应(RT-PCR)是一个很敏感的方法,但其技术复杂,环境、条件要求较高,不易被多数实验室接受和推广,可用来对HCV感染作确证实验。 展开更多

关键词 丙肝病毒抗体 丙肝病毒核心抗原 反转录多聚酶链反应

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丙肝患者HCV病毒载量、HCV抗体与ALT、AST、前白蛋白的相关性分析 被引量：5

17

作者 周文俊 马韫佳 +2 位作者 袁红萍 郦雯 夏慧珠 《标记免疫分析与临床》 CAS 2014年第4期432-434,共3页

目的探讨丙肝患者HCV抗体和HCV病毒核酸定量与ALT、AST、前白蛋白水平的相关性。方法分别采用ELISA、RT-PCR法、速率法和免疫比浊法检测133例丙型肝炎患者血清抗HCV、HCV-RNA定量、ALT、AST和PA。数据处理采用Spss 13.0统计软件。结果 ... 目的探讨丙肝患者HCV抗体和HCV病毒核酸定量与ALT、AST、前白蛋白水平的相关性。方法分别采用ELISA、RT-PCR法、速率法和免疫比浊法检测133例丙型肝炎患者血清抗HCV、HCV-RNA定量、ALT、AST和PA。数据处理采用Spss 13.0统计软件。结果 ALT、AST阳性率分别为69.9%和70.7%,组间比较χ2=18.05,P<0.01。PA浓度在HCV-RNA不同含量组别方差分析F=129.92,P<0.001。前白蛋白水平随HCV核酸含量增高而逐渐降低,而ALT、AST阳性率则增高,组间PA比较,除1.0×105组和≥1.0×106组无差异外,其它各组差异均有统计学意义。结论同时检测HCV抗体和HCV病毒核酸定量有助于丙型肝炎诊断;与转氨酶相比,血清PA水平的变化能更加灵敏、快速地反映肝脏损害程度。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 反转录多聚酶链反应技术 丙氨酸氨基转移酶 门冬酸氨基转移酶 前白蛋白

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324份新冠病毒感染者咽拭子标本qRT-PCR检测结果分析 被引量：3

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作者 陈晓玲 郑友限 +5 位作者 刘建忠 陈志扬 郑丹凤 龚彩婷 吴小凤 黄晓伟 《海峡预防医学杂志》 CAS 2021年第2期57-59,共3页

目的探讨新型冠状病毒(新冠病毒)感染后病毒载量变化规律,比较感染者不同种类标本核酸检测结果一致性。方法以2020年1月21日至2020年3月18日泉州市报告的48例新冠病毒感染者为对象,依据实时荧光定量反转录多聚酶链反应(qRT-PCR)咽拭子... 目的探讨新型冠状病毒(新冠病毒)感染后病毒载量变化规律,比较感染者不同种类标本核酸检测结果一致性。方法以2020年1月21日至2020年3月18日泉州市报告的48例新冠病毒感染者为对象,依据实时荧光定量反转录多聚酶链反应(qRT-PCR)咽拭子核酸检测结果,分为未复阳组29例和复阳组19例,回顾性分析所采集的324份咽拭子标本、55份深咳痰标本及36份肛拭子标本的核酸检测结果。结果未复阳组和复阳组发病到核酸检测CT值达峰值时间间隔分别为(7.1±4.8) d、(6.4±4.8) d,差异无统计学意义;未复阳组在CT值达峰值后病毒载量下降,发病后(20.7±5.7) d连续两次核酸检测阴性;复阳组病毒载量在CT值达峰值后病载下降中反跳出现第二峰,发病后(29.9±6.1) d连续两次核酸检测阴性,时间间隔比未复阳组长(t=-3.84,P<0.01);不同种类标本(采集时间、对象相同)核酸检测结果比较显示,咽拭子标本与深咳痰标本检测结果Orf1ab基因一致性差、N基因一致性一般(Kappa值<0.00、Kappa值=0.30);咽拭子标本与肛拭子标本检测结果Orf1ab基因一致性较差、N基因一致性一般(Kappa值=0.15、0.29);深咳痰标本两种基因检出率均高于咽拭子标本(配对χ^(2)值=6.50、15.43,P<0.01)。结论新冠病毒感染者中未复阳组与复阳组病程中病毒载量变化峰型不同,且复阳组发病至连续两次核酸检测阴性时间间隔较长,原因有待探究;不同种类标本的核酸检测结果,以N基因结果一致性均略好,深咳痰、咽试子标本基因检出率前者高于后者。 展开更多

关键词 新型冠状病毒 核酸检测 实时反转录多聚酶链反应 循环阈值(CT值) KAPPA值

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小鼠衰老相关新基因Arzc的克隆 被引量：1

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作者 陈等 张俊武 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期194-198,共5页

目的鉴别和克隆与小鼠衰老相关的新基因。方法采用改进的差异显示反转录聚合酶链反应(D DR T-PCR)技术分析正常老化和年轻BA LB/C小鼠大脑皮层m R NA的差异表达,差异显示的新表达序列标签(EST)经N orthern杂交验证后,作为出发序列,利用... 目的鉴别和克隆与小鼠衰老相关的新基因。方法采用改进的差异显示反转录聚合酶链反应(D DR T-PCR)技术分析正常老化和年轻BA LB/C小鼠大脑皮层m R NA的差异表达,差异显示的新表达序列标签(EST)经N orthern杂交验证后,作为出发序列,利用生物信息学方法设计引物,以小鼠大脑皮层总R NA的反转录产物为模板通过PCR克隆全长cD NA。结果差异显示分析共获得表达差异明显的EST42条,序列同源性分析显示其中29条为已知基因cD NA片段,13条可能为新EST。对新EST进行N orthern杂交验证后,对确证在正常老化鼠皮层表达明显下调的1个EST,通过生物信息学方法克隆全长cDN A,得到1个新的1382bp的cD NA序列,命名为Arzc,获得G enBank注册号A Y344585。该序列含有1个261bp的开放阅读框,推测的编码多肽包含86个氨基酸残基,与噬菌体编码的重组酶/整合酶的一段氨基酸序列有较高同源性。结论鉴别并克隆到一个可能与小鼠衰老相关的新基因A rzc。 展开更多

关键词 差异显示反转录多聚酶链反应 小鼠 衰老 表达序列标签 基因

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实时荧光定量反转录多聚酶链反应技术检测TEL-AML1融合基因阳性急性淋巴细胞白血病 被引量：1

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作者 张熔 廖静 +3 位作者 李戈 孙怀强 石毓君 杨季云 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第23期1798-1800,1822,共4页

目的建立实时荧光定量反转录(qRT)-PCR方法检测小儿急性淋巴细胞白血病TEL-AML1融合基因的表达水平,探讨其临床意义。方法采用TaqMan探针qRT-PCR技术,2-△△ct相对定量法动态检测20例TEL-AML1融合基因阳性急性淋巴细胞白血病患儿初诊期... 目的建立实时荧光定量反转录(qRT)-PCR方法检测小儿急性淋巴细胞白血病TEL-AML1融合基因的表达水平,探讨其临床意义。方法采用TaqMan探针qRT-PCR技术,2-△△ct相对定量法动态检测20例TEL-AML1融合基因阳性急性淋巴细胞白血病患儿初诊期(20例)、缓解期(20例)、复发期(2例),及15例骨髓形态学正常的非肿瘤非血液病儿童作为对照组的TEL-AML1融合基因表达水平。结果初诊期、缓解期、复发期及对照组的TEL-AML1中位数表达水平分别为0.62、0.31、0.76、0.23,初诊期和复发期基因表达水平均显著高于缓解期及对照组(Pa<0.05),初诊期和复发期的表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。诱导缓解第33天TEL-AML1水平高表达(>对照组的P75)患儿的复发率、无病生存率期间显著高于和低于低表达患儿(Pa<0.05)。20例患儿首次诱导治疗第33天骨髓均达完全缓解,高表达8例均在强化治疗、维持治疗后TEL-AML1水平下降,但其中1例患儿在维持治疗期间TEL-AML1水平又异常升高后复发,另1例患儿在停药后2个月TEL-AML1水平再上升后复发。诱导缓解第33天qRT-PCR检测8例微小残留病阳性,骨髓形态学、染色体核型分析均阴性,实时反转录-PCR检测5例阳性。结论 qRT-PCR是一种快速、灵敏度高、特异性好的方法,诱导缓解第33天TEL-AML1融合基因水平可用于早期判断预后,TEL-AML1水平的变化可用于监测微小残留病、预测复发,指导个体化治疗。 展开更多

关键词 TEL-AML1 实时荧光定量反转录多聚酶链反应 微小残留病 白血病 儿童

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