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反基因策略及其靶序列的选择 被引量：6
1
作者 刘定燮 王昌才 黄建生 《生命的化学》 CAS CSCD 1996年第4期6-8,共3页
反基因策略及其靶序列的选择刘定燮，王昌才，黄建生（第一军医大学分子生物学研究所，广州５１０５１５）关键词三链ＤＮＡ，反基因策略合成的脱氧寡核苷酸在一定条件下可缠绕于ＤＮＡ双螺旋的大沟内并以氢键与其相互作用形成三链ＤＮ... 反基因策略及其靶序列的选择刘定燮，王昌才，黄建生（第一军医大学分子生物学研究所，广州５１０５１５）关键词三链ＤＮＡ，反基因策略合成的脱氧寡核苷酸在一定条件下可缠绕于ＤＮＡ双螺旋的大沟内并以氢键与其相互作用形成三链ＤＮＡ结构。一般把这类能形成三链结构的... 展开更多
关键词 DNA 三链DNA 反基因策略 靶序列
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雄激素受体三螺旋形成寡核苷酸抗前列腺癌细胞增殖的研究 被引量：3
2
作者 张勇 陈维真 +1 位作者 谢瑶 高锦辉 《中华核医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期97-99,共3页
目的　探讨反基因策略对雄激素受体(AR)表达和前列腺癌细胞增殖的影响。方法　针对AR基因2 4 4 7～2 4 6 1核苷酸序列设计并合成三螺旋形成寡核苷酸(TFO) ,经脂质体介导转染LN CaP前列腺癌细胞株,于转染后2 4、4 8、72h分别采用3H 胸腺... 目的　探讨反基因策略对雄激素受体(AR)表达和前列腺癌细胞增殖的影响。方法　针对AR基因2 4 4 7～2 4 6 1核苷酸序列设计并合成三螺旋形成寡核苷酸(TFO) ,经脂质体介导转染LN CaP前列腺癌细胞株,于转染后2 4、4 8、72h分别采用3H 胸腺嘧啶核苷(TdR)参入实验测定癌细胞增殖活性,用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)方法检测ARmRNA表达,用放射配基结合分析法(RBA)单点法检测AR蛋白质表达,并与反义寡核苷酸(ASON)相比较。结果　2 4、4 8、72hTFO组LNCaP细胞的AR表达水平明显低于ASON组(P <0 0 5 ) ,TFO对LNCaP细胞增殖的抑制率显著高于ASON(P <0 0 5 )。结论　该TFO能有效抑制AR表达和前列腺癌细胞增殖。 展开更多
关键词 前列腺癌细胞增殖 三螺旋形成寡核苷酸 雄激素受体 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) 放射配基结合分析法 前列腺癌细胞株 LNCAP细胞 细胞增殖活性 胸腺嘧啶核苷 mRNA表达 反义寡核苷酸 反基因策略 脂质体介导 蛋白质表达 序列设计
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反基因策略——基因治疗的新方向 被引量：1
3
作者 刘定燮 王昌才 《生物技术通讯》 CAS 1996年第4期175-177,共3页
自1980年Cline用重组β珠蛋白基因治疗两名β地中海贫血患者以来,基因治疗在取得众多成就的同时也暴露出一些问题。安全方面的风险及转移基因表达的不稳定性使基因替代疗法还远达不到人们最初所预想的效果。基因原位修复虽是基因治疗最... 自1980年Cline用重组β珠蛋白基因治疗两名β地中海贫血患者以来,基因治疗在取得众多成就的同时也暴露出一些问题。安全方面的风险及转移基因表达的不稳定性使基因替代疗法还远达不到人们最初所预想的效果。基因原位修复虽是基因治疗最理想的途径,但目前在技术上还很难做到。相比之下,反义治疗在现阶段可能是较好的方向,因为反义核酸具有传统药物的使用方便和容易大量生产等优点。 展开更多
关键词 反基因策略 基因治疗 三链DNA 三链结构 反义治疗 RNA聚合酶 靶序列 启动子 蛋白质间的相互作用 体外转录
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反基因策略: 基因治疗的新方向
4
作者 刘定燮 王昌才 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期214-218,共5页
合成的富含嘌呤或嘧啶的脱氧寡核苷酸可与双链ＤＮＡ内特定的同聚嘌呤、同聚嘧啶序列结合形成稳定的三螺旋结构（三链ＤＮＡ）。已在体外及体内证实了在靶基因内形成的局部三链ＤＮＡ可抑制其转录，这给肿瘤和病毒感染性疾病的治疗提示... 合成的富含嘌呤或嘧啶的脱氧寡核苷酸可与双链ＤＮＡ内特定的同聚嘌呤、同聚嘧啶序列结合形成稳定的三螺旋结构（三链ＤＮＡ）。已在体外及体内证实了在靶基因内形成的局部三链ＤＮＡ可抑制其转录，这给肿瘤和病毒感染性疾病的治疗提示了新的方向，人们称之为反基因策略。然而，三链ＤＮＡ的稳定性不够理想和靶序列的选择范围较窄等问题的存在，在一定程度上限制了反基因策略的应用。 展开更多
关键词 基因治疗 三链DNA 反基因策略
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抑制启动子的三链DNA的结构模建及稳定性研究 被引量：1
5
作者 杨洁 刘次全 public.km.yn.cn 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第3期283-286,共4页
在IRISIndigo2 (SGI公司 )工作站上 ,利用InsightⅡ /MSI软件包 ,以TAT三链DNA为模板 ,采用同源模建的方法 ,分别建立起两个含 2 1nt的脱氧寡核苷酸CP1(G3TG2TGT2G5TG2TGT )和CP3(TGTG2TG5T2GTG2TG3)的三维结构 .采用分子力学方法进行... 在IRISIndigo2 (SGI公司 )工作站上 ,利用InsightⅡ /MSI软件包 ,以TAT三链DNA为模板 ,采用同源模建的方法 ,分别建立起两个含 2 1nt的脱氧寡核苷酸CP1(G3TG2TGT2G5TG2TGT )和CP3(TGTG2TG5T2GTG2TG3)的三维结构 .采用分子力学方法进行能量优化 ,将得到的能量最低结构作为分子的优势构象 .研究结果显示 ,CP1的能量低于CP3的能量 ,即前者的结构较后者稳定 .从而证明了CP1与乙肝病毒 (HBV)的核心启动子 (Cp)片段之间能稳定地形成三链DNA ,并能特异性地抑制DNA结合蛋白与Cp片段的结合 .这些结果表明 。 展开更多
关键词 三链DNA 反基因策略 同源模建 结构稳定性 HBV
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K^+对三链DNA形成的影响
6
作者 刘定燮 王昌才 《第一军医大学学报》 CSCD 1997年第4期307-310,共4页
用电泳迁移分析方法及DNaseⅠ足迹实验研究了脱氧寡核苷酸与乙肝病毒（HBV）核衣壳启动子（Cp）片段形成三链DNA中的K~＋效应。K~＋对三链DNA形成的抑制作用大小取决于不同的脱氧寡核苷酸。碱基的错配可使K~＋的抑制作用显著增强，提示K... 用电泳迁移分析方法及DNaseⅠ足迹实验研究了脱氧寡核苷酸与乙肝病毒（HBV）核衣壳启动子（Cp）片段形成三链DNA中的K~＋效应。K~＋对三链DNA形成的抑制作用大小取决于不同的脱氧寡核苷酸。碱基的错配可使K~＋的抑制作用显著增强，提示K~＋的效应强弱可能与三链结构中碱基准积的连续程度有关。因此反应体系中K~＋的存在能提高三链DNA形成的特异性。 展开更多
关键词 三链DNA 脱氧寡核苷酸 钾离子 反基因策略
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三链DNA的形成抑制转录因子与乙肝病毒核衣壳启动子的结合
7
作者 刘定燮 王昌才 钟雄林 《生物技术通讯》 CAS 1997年第Z1期118-118,共1页
合成的寡核苷酸可缠绕于DNA双螺旋大沟内并以氢键与其相互作用形成三链DNA结构,这类寡核苷酸常简称为TFO(triplex-form-ing oligonucleotide)。通过TFO与靶基因结合形成局部的三链结构来抑制基因转录的技术被称为反基因策略(antigene st... 合成的寡核苷酸可缠绕于DNA双螺旋大沟内并以氢键与其相互作用形成三链DNA结构,这类寡核苷酸常简称为TFO(triplex-form-ing oligonucleotide)。通过TFO与靶基因结合形成局部的三链结构来抑制基因转录的技术被称为反基因策略(antigene strategy)。我们选择乙肝病毒(HBV)核衣壳启动子(Cp)内一近似同聚嘌呤·同聚嘧啶序列(1734～1754,ayw亚型,以EcoR Ⅰ切点为+1)为靶序列。 展开更多
关键词 乙肝病毒 三链DNA 转录因子 启动子 核衣壳 脱氧寡核苷酸 反基因策略 分子生物学研究 DNA双螺旋 基因转录
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